精脒和腐胺对人胎儿脾LAK活性的影响

本研究表明,精脒、腐胺本身均不能使人胎脾单个核细胞(FSMC)转化为LAK细胞,但与5u/ml重组白细胞介素2(rIL-2)伍用,可以增强人胎脾LAK细胞活性;精脒,腐胺不能直接刺激细胞增殖,但能协同亚适剂量Con A诱导淋巴细胞增殖;精脒或腐胺本身可刺激FSMC的IL-2受体(IL-2R)的表达,并能协同rIL-2进一步提高人胎脾LAK细胞IL-2R的表达;精脒、腐胺均可使FSMC及胎脾LAK细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性增强,而以腐胺的作用尤为显著。     

人胎脾抗癌效应细胞及相关细胞因子的胚胎发育动力学研究

对不同胎龄胎脾抗癌效应细胞及相关细胞因子的胚胎发育动力学进行了系统观测。结果显示：２０周龄前基本无ＮＫ活性和Ｍ杀伤功能，但可随胎龄增长而逐渐加强，至出生前后已接近成人水平，ＬＡＫ活性在１６周龄即与成人基本相同。ＩＬ－２，ｒＦＮ－α和ＩＬ－６能分别促进ＮＫ和ＬＡＫ活性。胎脾Ｍ２０周龄即合成高水平ＩＬ－６，出生前已显著高于成人，３２周龄时分泌ＩＬ－１的能力达成人水平，ＴＮＦ活性达高峰。ＦＳＭＣ合成ＩＬ－２的能力在３６周龄才达成人水平，合成的ＩＬ－６至出生前仍低于成人。ＦＳＭＣ的ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达显著低于成人。因此以胎脾细胞作为抗癌效应细胞来源是安全、有效、可行的。     

丝裂霉素C对人胎脾LAK细胞活性的影响

本文对人胎脾LAK细胞活性及丝裂霉素C(MMC)对LAK活性的影响作了初步研究。结果显示,人胎脾淋巴细胞可诱导产生明显的LAK活性,对K562和Raji瘤细胞的杀伤活性分别为74.4％和69.4％(E:T=50:1)。诱生的LAK细胞经不同浓度MMC处理后,DNA合成受到显著抑制(p<0.O1),但仍可保持较高水平的LAK活性。提示细胞增殖对MMC的抑制作用更为敏感,LAK细胞在效应阶段并非绝对有赖于细胞增殖。     

人胎肝提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

本实验采用不同浓度的饱和硫酸铵分段沉淀入胎儿肝浸液,获得一组可溶性蛋白,称为人胎肝提取物(Fetal liver extract,FLE)。对其免疫学活性的研究发现,FLE没有种属限制性,能抑制C_(57)BL/6小鼠脾细胞对ConA的增殖反应。31～50%硫酸铵饱和度沉淀的FLE具有较高的抑制活性。FLE对小鼠脾细胞无明显细胞毒活性,较高浓度时对脾细胞的生长呈现抑制作用。FLE作用2小时即可明显抑制脾细胞的增殖反应,洗去FLE后,其抑制作用不能逆转。其抑制活性可被L-精氨酸解除。     

MTT法检测人胎脾巨噬细胞细胞毒效应的建立

本文将ＭＴＴ法用于人胎脾巨噬细胞（Ｍφ）毒效应检测，分别以Ｌ９２９、Ｋ５６２、Ｕ９３７为靶细胞。结果认为本法简便、敏感、经济、可靠，是检测Ｍφ毒效应的好方法。     

细胞因子对人绒毛膜组织hCG分泌的影响

综合前人经验建立一个接近于体内生理状态的体外分泌ｈＣＧ的模型，并在此基础上研究ＩＬ－１ａ，、ＴＮＦａ、ＩＦＮａ单独或两两协同对ｈＣＧ的调节作用，旨在为阐明免疫细胞因子对内分泌激素ｈＣＧ的调节作用，尤其是在生理状态下的调节作用提供一些实验依据。     

地龙提取物对小鼠腹腔MФ和脾细胞NO及TNF-α产生的影响

目的 :探讨地龙提取物 (AL)对小鼠腹腔MΦ 和脾细胞分泌NO和TNF α的影响。方法 :将不同剂量的AL与小鼠腹腔MΦ 或脾细胞孵育 2 4h ,收集上清液分别采用重氮化反应和MTT比色法 ,检测NO和TNF α的水平。结果 :0 .1g/L的AL组与正常对照相比较 ,可明显提高MΦ 和脾细胞分泌NO的水平 ,并可以拮抗地塞米松 (Dex)对MΦ 和脾细胞分泌NO的抑制作用。 1× 10 -4,1× 10 -3 g /L的AL组可促进MΦ 和脾细胞分泌TNF α ,并可拮抗Dex的抑制作用。结论 :AL可以激活ΜΦ 和脾细胞 ,使其分泌NO和TNF α的水平增加 ,并可拮抗Dex对ΜΦ 和脾细胞的抑制作用。     

IL-6、IL-1β、TNFα对人胎大脑神经细胞体外生长的影响1

目的研究IL-6、IL-1β、TNFα在人胎大脑神经细胞体外发育过程中的作用,为临床防治提供实验依据.方法应用10～13周龄人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型,观察活细胞形态,MTT法测定细胞存活率.结果IL-6促进细胞贴壁、突起生长与伸展,IL-1β、TNFα对形态学影响不大.IL-6、IL-1β单独作用时,细胞存活率呈一过性下降,后又出现升高,但IL-6升高出现较早,作用较强,作用强度与实验浓度无关;TNFα(10～1000U/ml)作用下细胞存活率持续低于对照组,仅10U/ml组体外16d(16DIV)时高于对照组108.26%;IL-1β与TNFα联合作用时仅于16DIV时为对照组109.90%(P＜0.01),呈轻度协同效应.结论人胎大脑神经细胞体外发育过程中,IL-6、IL-1β具有神经营养作用,促进细胞存活,IL-6还可促进细胞生长、分化;TNFα体外主要为神经毒性作用;IL-1β与TNFα联合作用于培养后期可显轻度协同效应.作用机理可能与局部自分泌与旁分泌有关.     

胎龄对人小肠黏膜内促性腺激素释放激素免疫反应细胞的影响

目的:探讨人胚胎小肠黏膜内促性腺激素释放激素免疫反应(GnRH-IR)细胞的分布与数量变化.方法:用免疫组织化学 SABC 法,对44例胎龄在第9～38周新鲜人胚胎小肠的 GnRH-IR 细胞的出现时间、分布部位及其形态进行观察;用体视学方法测量十二指肠、空肠、回肠上皮和固有层内 GnRH-IR 细胞的数密度.结果:GnRH-IR 细胞最早出现在人胎第11周的十二指肠上皮内,12周以后开始出现在十二指肠、空肠的固有层;从十二指肠、空肠到同肠的上皮和同有层内 GnRH-IR 细胞的数密度依次减小;在第21～24周以前,上皮内的 GnRH-IR 细胞的数密度随胎龄的增加而增大,而后则随胎龄的增加而减小;固有层其数密度随胎龄增加而增大,但在21～24周前增长较明显,以后增长缓慢.各段小肠上皮与固有层 GnRH-IR 细胞数密度比较,21周以前上皮内其数密度比固有层大,以后逐渐比固有层小.结论:人胚胎小肠内的 GnRH-IR 细胞形态多样,在人胚胎第11周开始出现,并广泛分布于小肠黏膜上皮和固有层,其数密度从十二指肠、空肠到回肠依次减少,在上皮和同有层内 GnRH-IR 细胞的数密度随胎龄增加而出现不同的变化.     

脂多糖预处理对人外周血单核细胞分泌TNFα和PGE2的影响

探讨不同剂量脂多糖预处理对健康人外周血单核细胞分泌细胞因子TNFα和PGE2的影响。分离健康志愿者外周血单核细胞，以不同剂量脂多糖(0、10、100、1000μg/L)预处理24h，然后测定其再次受到不同剂量脂多糖(0,10、100、1000μg/L)刺激后分泌TNFα和PGE2水平。采用ELISA方法测定TNFα，EIA方法测定PGE2。脂多糖可刺激人外周血单核细胞分泌TNFα和PGE2。脂多糖预处理导致外周血单核细胞分泌。TNFα减少，而明显增加PGE2的生成。脂多糖预处理可以引起人单核细胞产生耐受。     

IL-6、IL-1β、TNFα对人胎大脑神经细胞体外生长的影响

目的 :研究IL 6、IL 1β、TNFα在人胎大脑神经细胞体外发育过程中的作用 ,为临床防治提供实验依据。 方法 :应用 10～ 13周龄人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型 ,观察活细胞形态 ,MTT法测定细胞存活率。结果 :IL 6促进细胞贴壁、突起生长与伸展 ,IL 1β、TNFα对形态学影响不大。IL 6、IL 1β单独作用时 ,细胞存活率呈一过性下降 ,后又出现升高 ,但IL 6升高出现较早 ,作用较强 ,作用强度与实验浓度无关 ;TNFα( 10～ 10 0 0U/ml)作用下细胞存活率持续低于对照组 ,仅 10U/ml组体外 16d( 16DIV)时高于对照组 10 8 2 6% ;IL 1β与TNFα联合作用时仅于 16DIV时为对照组 10 9 90 % ( P <0 0 1) ,呈轻度协同效应。结论 :人胎大脑神经细胞体外发育过程中 ,IL 6、IL 1β具有神经营养作用 ,促进细胞存活 ,IL 6还可促进细胞生长、分化 ;TNFα体外主要为神经毒性作用 ;IL 1β与TNFα联合作用于培养后期可显轻度协同效应。作用机理可能与局部自分泌与旁分泌有关。     

人胎胸腺素对T细胞增殖及IL—2分泌的影响

胸腺素具有广泛的免疫调节作用。本文观察了人胎胸腺素（ＨＦＴ）在体外对人周围血Ｔ细胞的增殖及对周围血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－２的影响，实验结果表明：ＨＦＴ能刺激Ｔ细胞增殖，１％ＨＦＴ的作用最强，但未见ＨＦＴ与ＰＨＡ对Ｔ细胞增殖的协同促进作用；而ＨＦＴ对ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的影响不明显，ＨＦＴ与ＰＨＡ共同作用的效应约有提高，亦仅相当于ＩＬ－２在１．９￣７．９ｕ／ｍｌ时的效应。     

杂色曲霉素对小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ分泌和表达的影响

目的：探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ mRNA表达及其蛋白分泌的影响。方法：分别采用半定量RT-PCR及ELISA方法，研究5种不同剂量ST(0．125mg／L，0．25mg／L，0．5mg／L，1mg/L，2mg／L)预处理对小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ mRNA表达及其蛋白分泌的影响。结果：不同剂量ST预处理2h均可引起小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ表达的改变，但不同剂量影响不同，小剂量ST处理组(0．125、0．25mg/L)在ST处理后2h，可诱导脾细胞IL-2及IFN-γmRNA的表达；而大剂量ST处理组(1mg／L、2mg／L)可明显抑制脾细胞IL-2及IFN-γmPuNA表达及其相应蛋白的分泌，尤以ST 1mg/L的抑制作用最明显。结论：ST可影响小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ表达和分泌的改变，较小剂量组(0．12．5、0．25mg／L)表现为诱导作用，而较大剂量组(1mg/L、2mg／L)则表现为明显抑制作用。     

成年大鼠星形细胞经LPS、前炎症因子和免疫调节因子刺激后β-趋化因子的分泌

目的研究在中枢神经系统（ＣＮＳ）的炎症性疾病中,作为构成血脑屏障结构的组成部分之一,可引起白细胞浸润的星形细胞分泌趋化因子的影响因素。方法通过星形细胞体外培养,经不同细胞因子刺激,用原位杂交检测成年大鼠星形细胞β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。结果ＩＦＮ－γ可引起ＭＣＰ－１,ＲＡＮＴＥＳ,ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＴＮＦ－α可引起ＲＡＮＴＥＳ和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＬＰＳ可引起ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０下调由ＬＰＳ引起的ＭＣＰ－１和ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＴＮＦ－α引起的ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳ的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－１０还可下调由ＴＮＦ－α引起的ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。结论成年大鼠体外试验中的星形细胞可由ＬＰＳ和前炎症因子刺激,产生β－家系趋化因子ｍＲＮＡ的表达。而调节因子如ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＬＰＳ引起的β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。     

丝胶对Ⅱ型糖尿病模型大鼠脾干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α、白介素-4、白介素-10水平的影响

目的:观察丝胶对Ⅱ型糖尿病模型大鼠脾干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-4、IL-10水平的影响,以探讨其对免疫功能调节的可能机制。方法:小剂量链脲佐菌素连续腹腔注射建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型。SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组。丝胶治疗组和二甲双胍组分别给予丝胶和二甲双胍灌胃治疗35 d。4组均采用葡萄糖氧化酶法检测Ⅱ型糖尿病模型大鼠血糖,免疫印迹和RT-PCR法分别检测脾IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10蛋白及mRNA的表达,并比较。结果:与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠血糖、脾IFN-γ和TNF-α的水平均明显升高,脾IL-4和IL-10的水平均明显降低。与模型组大鼠相比,丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠血糖、脾IFN-γ和TNF-α的水平均明显降低,脾IL-4和IL-10的水平均明显升高。结论:丝胶可通过下调脾IFN-γ和TNF-α的表达,上调IL-4和IL-10的表达,发挥免疫调节作用。     

胆管癌脾酪氨酸激酶表达增高对肿瘤微环境巨噬细胞M2型极化的影响

目的:研究脾酪氨酸激酶(SYK)在大鼠和小鼠胆管癌演变进程和人胆管癌组织中的表达情况,并探讨其表达对肿瘤巨噬细胞M2型极化的影响。方法:分别构建大鼠和小鼠的胆管癌模型(SD大鼠:日常饮用水中加入硫代乙酰胺;BALB/c小鼠:左中位胆管结扎联合二乙基亚硝胺给药),采用免疫组织化学法检测胆管癌演变进程中肝脏胆管病变组织和人胆管癌标本的SYK表达及M2型巨噬细胞(CD163)的浸润情况,并分析相关性;将10只持续24周饮用含硫代乙酰胺饮用水的SD大鼠随机分为对照组(n=5)和SYK抑制剂组(n=5),治疗4周后处死大鼠,观察SYK抑制剂对肿瘤生长及巨噬细胞极化的影响。结果:大鼠和小鼠发生肝脏胆管增生、胆管异型增生(或胆管瘤)和胆管癌病变的时间窗不同(大鼠分别于第9、12和24周时出现;小鼠分别于第12、16和28周时出现)。在大鼠和小鼠的肝脏胆管病变组织中,均随着胆管癌的演变进展,SYK表达逐渐升高(P<0. 01),伴有M2型巨噬细胞浸润数量增多,而M1型巨噬细胞数量减少(P<0. 01);在人胆管癌组织中,SYK表达与CD163阳性细胞数(M2型巨噬细胞浸润数量)均显著升高(...     

LPS对人胚胎胰岛分泌IL6的调控效应

目的：为了探讨免疫介质ＬＰＳ对胚胎胰岛分泌ＩＬ６以及对胰岛功能的影响,以便为研究免疫系统与内分泌系统的内在联系提供依据。方法：采用常规消化方法分离人胚胎胰岛并对其进行原代培养,加入浓度为１０ｍｇ／ＬＬＰＳ,经不同时相收获上清,测定ＩＬ６、胰岛素、胰高血糖素含量和ＩＬ６ＭｃＡｂ中和试验,对ＬＰＳ刺激和对照组胰岛ＲＮＡ进行ＩＬ６ＲＮＡ斑点杂交。结果：①人胚胎胰岛经ＬＰＳ刺激分泌ＩＬ６的能力明显加强,在体外培养８ｄ,ＩＬ６含量达高峰,为对照组的１４５倍;②人胚胎胰岛在换新鲜培养液后用ＬＰＳ二次刺激,仍可继续分泌高效价的ＩＬ６,高峰时相为对照组的２５倍;③ＩＬ６ＭｃＡｂ对胰岛培养上清中ＩＬ６有很强的中和效应;④斑点杂交结果显示ＬＰＳ刺激后胰岛ＲＮＡ中ＩＬ６ｍＲＮＡ含量明显高于对照组;⑤人胚胎胰岛受ＬＰＳ刺激后胰岛素分泌能力加强,胰高血糖素分泌能力明显降低。结论：免疫介质ＬＰＳ可能影响胰岛的分泌功能及产生ＩＬ６的能力