雌激素对海水淹溺型肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白表达影响的研究

目的 观察雌激素对海水淹溺型肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白表达的影响.方法 90只健康雄性SD大鼠随机分为三组,即对照组、海水淹溺组及雌激素治疗组.海水淹溺组用气管吸入海水法建立模型;对照组除不吸入海水外,其他处理同海水淹溺组;雌激素治疗组在海水吸入后30 min给予腹腔注射17β-雌二醇5 mg/kg.分别于海水致肺损伤后1、2、4 h时间点取大鼠颈动脉血做血气分析观察动脉血氧分压(PaO2)的变化,测肺组织湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察肺组织病理变化情况,采用RT - PCR方法检测AQPs mRNA的表达.结果 成功复制了大鼠海水淹溺型肺损伤模型:海水淹溺组在吸入海水后PaO2显著下降,各时间点PaO2显著低于对照组.雌激素治疗组PaO2显著上升,各时间点均高于海水淹溺组.海水淹溺组W/D比值显著高于正常对照组及雌激素治疗组.光镜下可见海水淹溺组肺组织有灶性出血,肺泡腔内渗出增多、少量中性粒细胞浸润和肺泡间质稍有增厚;对照组未见明显病理变化;雌激素治疗组肺组织充血、水肿有所减轻.海水淹溺组肺组织AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达高于对照组,AQP3 mRNA及AQP4 mRNA无明显变化;雌激素治疗组AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达减少.结论 吸入海水可引起大鼠肺组织AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达增加,但对AQP3 mRNA及AQP4 mRNA表达无明显影响.雌激素通过抑制海水吸入引起的大鼠肺组织AQP1 mRNA及AQP5 mRNA表达上调,影响大鼠海水淹溺型肺损伤时肺组织水的转运.     

海水淹溺急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5表达变化的研究

目的 观测海水淹溺急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达变化.方法 100只健康雄性Wistar大鼠随机分为两组,即海水淹溺组和对照组.海水淹溺组用气管吸入海水法建立模型,对照组除不吸入海水外,其他处理同海水淹溺组.分别于致伤后0.5、1、2、4及8 h时点,取大鼠颈动脉血做血气分析,观察动脉血氧分压(PaO2)的变化;光镜下观察肺组织病理变化情况;采用免疫组织化学法检测肺组织表达与分布;采用RT-PCR方法检测AQP5 mRNA表达.结果 成功复制了大鼠海水淹溺ALI模型:海水淹溺组在吸入海水后血PaO2明显下降,海水淹溺组各时点血PaO2显著低于对应时点对照组(P<0.01).光镜下可见海水淹溺组各时点肺组织有毛细血管充血、肺间质、肺泡水肿和灶性出血;对照组未见明显病理变化.免疫组化显示,海水淹溺组肺间质的毛细血管内皮AQP5的阳性表达,积分光密度值显著高于对照组的表达(P<0.05);海水淹溺组大鼠肺组织AQP5 mRNA表达也显著高于对照组(P<0.01).结论 海水淹溺ALI时肺组织AQP5蛋白及mRNA表达增加,AQP5在ALI/ARDS海水的转运中可能起着重要作用.     

水通道蛋白1、5在肺出血新生大鼠肺组织中的表达

目的研究新生大鼠肺出血发生的过程中水通道蛋白1、5在肺中表达的变化和意义。方法将80只4～5 d龄新生SD大鼠分为4组,对照组1组和实验组3组,对照组为常温常氧6 h;实验组分别为低温缺氧1 h复温供氧2 h、低温缺氧2 h复温供氧2 h和低温缺氧4 h复温供氧2 h,用断头法处死大鼠后开胸取肺做病理切片和免疫组化染色。结果观察到随着低温缺氧时间的延长病理改变可从正常肺组织向着肺水肿、点状肺出血、局灶性肺出血至弥漫性肺出血的方向发展。水通道蛋白1(AQP 1)主要表达于胸膜脏层周围毛细血管内皮细胞腔膜面和基侧膜面以及脏层胸膜的间皮细胞,肺泡Ⅱ型上皮细胞顶膜面也有少量表达,AQP 1还存在于气管腔上皮细胞顶膜面和支气管黏膜下腺上皮细胞。水通道蛋白5(AQP 5)表达于Ⅰ型上皮细胞的顶膜。随着低温缺氧时间的延长,复温供氧后AQP 1在肺毛细血管内皮细胞表达明显下降,这种减少全肺均能观察到,肺泡Ⅰ型上皮细胞AQP 5的表达也一致减少。对应的病理改变为细胞炎症反应,肺水肿、肺泡腔及间质出血。结论 AQP 1、AQP 5与新生大鼠肺出血关系密切,AQP 1、AQP 5可能与肺水肿、肺出血的形成有关。通过调节AQP 1及AQP 5的表达可能预防新生儿肺出血的发生。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对海水浸泡人肺上皮A549细胞水通道蛋白5的影响

目的 探讨水通道蛋白5(AQP5)在海水浸泡致细胞损伤中的变化,同时了解丹参酮Ⅱ A可能的作用机制.方法 体外传代培养肺腺癌细胞株A549细胞,接种于培养皿中,按不同海水含量分为空白对照组及15%、25%、50%、75%、100%海水组;以25%海水浸泡不同时间分为空白对照组及海水1、4、8 h组;按给予不同剂量丹参酮ⅡA干预分为空白对照组、25%海水组及25、50、75、100μg/ml丹参酮ⅡA干预4 h组.用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测AQP5蛋白表达;用免疫组化法检测AQP5阳性表达.结果 Western blotting结果显示,25%与50%海水组8 h时A549细胞AQP5蛋白表达均较空白对照组明显增高(1.053±0.231、1.116±0.316比0.101±0.081,均P＜0.05);海水1 h组AQP5表达较空白对照组稍有增加(0.306±0.125比0.288±0.098,P＞0.05),4 h组(1.423±0.377)明显增加(P＜0.01),8 h组AQP5表达(1.507±0.461)较4 h组略有增加,但差异无统计学意义;25μg/ml与50 μg/ml丹参酮Ⅱ A组4 h时AQP5蛋白表达较25%海水组明显减少(0.580±0.186、0.499±0.172比1.013±0.287,均P＜0.05).免疫组化显示,25%海水4 h组AQP5阳性表达较空白对照组明显增多(7.21±0.78比0.41±0.07,P＜0.01),染色变深;25μg/ml丹参酮ⅡA干预4 h组AQP5阳性表达(3.02±0.23)较25%海水4 h组明显减少(P＜0.05).结论 丹参酮Ⅱ A在25μg/ml浓度时毒副作用最小,对海水浸泡A549细胞的保护作用最佳,其机制可能与抑制AQP5的过度表达有关.

Abstract：

Objective To explore the effects of tanshinone Ⅱ A on the activity of aquaporin-5 (AQP5)in human alveolar epithelial cells (A549) after seawater exposure and its possible mechanism. Methods Routinely cultured A549 cells were divided into different groups according to different content of seawater:blank control group, 15%, 25%, 50%, 75%, 100% seawater groups; they were divided into different groups according to the duration of exposure to 25 % seawater : blank control group, 1, 4, 8 hours groups ;they were also divided into different groups according to concentration of tanshinone ⅡA and exposed to seawater for 4 hours: blank control group, 25% seawater group, 25, 50, 75, 100 μg/ml tanshinone ⅡA intervention groups. The expressions of AQP5 were respectively assayed by Western blotting and immunohistochemistry. Results The results of Western blotting showed that the expressions of AQP5 were remarkably higher at 8 hours of exposure to seawater in 25% and 50% seawater groups than those in blank control group (1. 053±0. 231, 1. 116±0. 316 vs. 0. 101±0. 081, both P＜0. 05); the expression of AQP5 in 1-hour group showed a slight increase compared with blank control group (0. 306±0. 125 vs. 0. 288±0. 098,P＞0. 05), that in 4-hour group was increased significantly (1. 423±0. 377, P＜0. 01), and in 8-hour group (1. 507± 0. 461 ) it was slightly higher than that in 4-hour group without statistical significance. The AQP5 expression was significantly lower in tanshinone ⅡA 25 μg/ml and 50μg/ml intervention groups than that in 25% seawater group (0. 580 ± 0. 186, 0. 499 ± 0. 172 vs. 1.013 ± 0. 287, both P ＜ 0. 05). Immunohistochemistry showed that the expression of AQP5 was markedly up-regulated after A549 cells were stimulated with 25% seawater for 4 hours as compared with blank control group (7.21±0. 78 vs. 0. 41 ±0.07, P＜0.01), but intervention of tanshinone ⅡA significantly inhibited the up-regulation of AQP5 expression (3.02±0.23) induced by 25% seawater (P＜0.05). Conclusion The experimental results showed that tanshinone ⅡA is innocuous to A549 at a dosage of 25 μg/ml, and it can decrease the overexpression of AQP5 induced by seawater.     

血管紧张素Ⅱ对急性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1表达的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺水通道蛋白1(AQP1)表达的影响及在肺水肿形成中的作用.方法 按随机数字表法将40只SD大鼠分为假手术组、模型组、AngⅡ受体阻滞剂预处理组及治疗组,每组10只.采用失血性休克-内毒素二次打击建立大鼠ALI模型.预处理组静脉注射脂多糖(LPS)前30 min注射AngⅡ受体阻滞剂30 μg/kg,注射LPS后30 min注射30 μg/kg生理盐水;治疗组注射LPS前30 min注射30 μg/kg生理盐水,注射LPS后30 min再注射AngⅡ受体阻滞剂30 μg/kg;模型组注射LPS前、后均给予30 μg/kg生理盐水.制模后6 h处死大鼠,取下腔静脉血,用放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;取肺组织,计算湿/干重(W/D)比值,用放射免疫法测定肺组织AngⅡ表达,用逆转录-聚合酶链反应测定AQP1 mRNA表达.结果 与假手术组相比,ALI大鼠血清TNF-α水平及肺组织W/D比值、AngⅡ表达明显增加,AQP1 mRNA表达明显减少.预处理组及治疗组血清TNF-α水平(μg/L)较模型组明显减少(4.79±0.24、5.55±0.36比6.34±0.31,均P<0.05),肺组织W/D比值减小(4.34±0.23、4.85±0.20比5.41±0.26,均P<0.05),AQP1 mRNA表达明显增加(0.854±0.067、0.727±0.081比0.358±0.071,均P<0.05);而AngⅡ表达(ng/g)有所降低(172.19±15.82、202.82±20.47比245.88±26.31),但差异无统计学意义(均P>0.05).AQP1 mRNA表达与AngⅡ表达和肺组织W/D比值均呈负相关(r1=-0.782,r2=-0.726,均P<0.05).结论 ALI时AngⅡ可能直接或通过炎症介质下调肺脏AQP1 mRNA表达,为肺水肿形成的机制之一.     

溺海肺损伤的发病机制和治疗的研究进展

溺海肺损伤的发病机制包括低氧血症和酸碱失衡、电解质紊乱、肺泡上皮细胞和肺微血管内皮细胞的直接损伤及水通道和离子通道改变、血流动力学和心功能改变、肺组织中内皮素、降钙素和血红素氧合酶改变、肺泡巨噬细胞和表面活性物质改变、血浆氧自由基、肿瘤坏死因子和白细胞介素-8等细胞因子改变.溺海肺损伤的治疗包括机械通气、糖皮质激素、高压氧治疗、NO吸入、肺灌洗和药物治疗.     

大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠水通道蛋白1表达的影响

目的探讨大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠水通道蛋白1(AQP-1)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠120只,体质量200～230g。大鼠分为6组:空白对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量预处理组、大黄素中剂量预处理组、大黄素高剂量预处理组,每组各20只。采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症大鼠模型,假手术组探查取出盲肠后还纳腹腔。各组按取材时间不同又分为造模后3、6、12、24小时4个时相点,每个时相点5只大鼠。分别用实时荧光多聚酶链反应(PCR)和蛋白免疫电泳(western-blot)法检测肺组织水通道蛋白1信使RNA(AQP-1mRNA)和蛋白的表达。结果各组3小时AQP-1表达差异无统计学意义,造模后6小时AQP-1逐渐降低,12小时达最低。大黄素中、高剂量预处理组12小时AQP-1均显著高于同剂量其他时间点(P0.01),且两组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论脓毒症可造成大鼠AQP-1表达明显降低,早期预防性使用中高剂量大黄素可明显提高AQP-1的表达,从而有效减轻脓毒症大鼠肺水肿的程度。     

不同液体复苏对未控制失血性休克大鼠肺损伤及肺水通道蛋白表达的影响

目的 观察不同液体复苏对未控制失血性休克大鼠肺损伤和肺水通道蛋白l(AQP1)和AQP5表达的影响.方法 SD大鼠被随机分为假手术组(C组)、无液体复苏组(NF组)、乳酸林格液组(LRS组)、高渗盐水组(HS组)和羟乙基淀粉组(HES)5组,每组12只.建立未控制失血性休克大鼠模型,模拟临床分为4期;动态观察各期的平均动脉压(MAP)变化.①失血性休克期(时间为60 min):在15 min内将MAP降至40 mm Hg(1mm Hg=0.133 kPa)并维持60 min;然后向气管内注射内毒素2 mg/kg,并用断尾法造成大鼠未控制失血性休克.②液体复苏期(时间为30 min):LRS、HS、HES组分别用3倍放血量的LRs、4 ml/kg的7.5%NaCl和1倍放血量的6%HES 130/0.4进行复苏,C组和NF组不处理.③综合复苏期(时间为1 h):在1 h内回输全部失血及1:1失血量的生理盐水.④复苏后观察期:输血、输液结束后继续观察3.5 h. 实验结束后测定肺组织湿/干重(W/D)比值;用免疫组化测定肺组织AQPl和AQP5表达,用苏木素一伊红(HE)染色,光镜下观察肺损伤程度.结果 在C组和HES组,肺血管内皮细胞AQP1和肺泡上皮AQP5均呈阳性表达;HS组仅AQP1呈阳性表达,AQP5则呈微弱表达;NF组和LRS组AQP1、AQP5均呈微弱表达.各组MAP、肺W/D比值和肺组织损伤程度比较显示,HS组和HES组显著优于NF组和LRS组(P<0.05或P<0.01).结论 遭受"二次打击"失血性休克大鼠并发肺损伤时,肺AQP1和AQP5表达下调;采用6%HES 130/0.4进行休克复苏可有效抑制AQP1和AQP5下调,并使肺损伤明显减轻;采用7.5%NaCI复苏仅能抑制AQPl表达下调和在一定程度上减轻肺水肿;而采用LRS复苏既不能保持AQP1、AQP5的表达,也不能有效防止肺损伤的发生.     

特布他林影响水通道蛋白4在大鼠急性肺损伤肺水代谢的作用

目的 油酸造成急性肺损伤(ALI) 初期,特布他林气管滴入治疗,根据肺损伤程度及测定血管外肺水的大小,评估病理状态下特布他林对肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ) 水通道蛋白4(AQP-4 )转运水能力的影响.方法 血气分析、肺组织病理学评分、透射电镜检测肺损伤程度;重力法测定血管外肺水(EVLW)含量;免疫组化法分析肺组织AQP-4的表达,急性分离纯化ATⅡ细胞,电子显微镜观察超微结构;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 检测肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-4的mRNA 表达.结果 血气分析、光镜下肺损伤评分说明油酸致大鼠急性肺损伤,显微镜下ATⅡ细胞的数量较对照组无明显减少,但电镜下细胞的超微结构如板层小体排空,线粒体损伤等改变;特布他林治疗后血气分析、病理评分、电镜下细胞等损伤明显减轻(P<0.05);EVLW三组间有显著性差异(P<0.05),治疗组肺水下降明显;肺组织免疫组化观察到损伤后肺泡上皮细胞AQP-4表达增强,呈阳性,特布他林组表达呈强阳性;ATⅡ细胞AQP-4的mRNA 表达治疗组、油酸组较对照组有显著性差异(P<0.05),两者之间无显著性差异(P＞0.05).结论 特布他林可能通过上调肺泡上皮细胞和Ⅱ型细胞上AQP-4的表达,介导水转运减轻肺损伤时肺泡腔水肿.     

丹参与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白-1表达的影响

目的:观察联合应用丹参和甲基泼尼松龙对急性肺损伤(AII)大鼠肺组织水通道蛋白-l(AQP-1)表达的影响及其机制.方法:使用内毒素(LPS)3 mg/kg气管内滴入建立大鼠LPS吸入性ALI模型.50只大鼠随机分为:生理盐水对照组、LPS损伤组、甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙)、丹参组(LPS+丹参)、联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+丹参).观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织湿/干重(W/D)比、肺脏病理改变,免疫组化法测定AQP-1表达.结果:经气管滴入LPS可致大鼠发生ALI.与LPS损伤组相比,单用甲基泼尼松龙或丹参组BALF中蛋白含量、肺组织W/D比值均明显降低(P＜0.01),肺组织AQP-1表达则明显升高(P＜0.01),以联合用药组更为明显(P＜0.01).结论:联合应用甲基泼尼松龙和丹参对ALI大鼠具有良好的治疗作用,其机制可能与促进肺组织AQP-1高表达有关.     

激素对肺损伤大鼠肺内水通道蛋白-1及钠钾-ATP酶的影响

目的 观察不同剂量氢化可的松（hydrocortisone,HC）对急性肺损伤（ALI）大鼠肺内水通道蛋白-1（AQP-1）和钠钾-ATP酶的影响及机制.方法 间隔5 h分2次注射灭活大肠杆菌建立早期休克Wistar大鼠ALI模型.40只鼠随机分为5组：正常对照组、肺损伤组、大剂量HC组（150 mg/kg）、中剂量HC组（20 mg/kg）、小剂量HC组（6 mg/kg）.给药2 h后收集肺组织标本,观察肺组织病理形态和计算肺损伤病理评分,并采用免疫组化法观察肺内水通道蛋白-1、钠钾-ATP酶、糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的表达.结果 肺损伤组肺损伤病理评分显著高于正常对照组（P＜0.05）.使用HC干预后,各剂量组较肺损伤组明显降低（P＜0.05）,以小剂量组下降最明显（P＜0.05）.中剂量组肺损伤病理评分虽较大剂量组降低,但两组间差异无显著性;肺内AQP-1和钠钾-ATP酶表达,肺损伤组显著低于正常对照组（P＜0.05）,使用HC干预后,各剂量组肺内AQP-1和钠钾-ATP酶表达均较肺损伤组升高,以小剂量组最明显（P＜0.05）,中剂量组较大剂量组表达增强,但差异无显著性;肺内GR表达,肺损伤组显著低于正常对照组（P＜0.05）,使用HC干预后,各剂量组肺内GR表达均较肺损伤组升高,但仅小剂量组差异达显著性（P＜0.05）.大、中剂量组间差异无显著性.指标间相关性分析提示,GR与AQP-1和钠钾-ATP酶表达均存在明显直线正相关关系（r=0.43,P=0.007;r=0.31,P=0.015）.结论 不同剂量HC干预早期休克大鼠ALI显示,在改善肺泡液体转运、肺组织病理改变等方面,均以小剂量HC最佳,未发现剂量依赖效应.不同剂量HC干预效果差异的原因可能与GR表达水平有关.     

Glucocorticoid receptor expression on acute lung injury induced by endotoxin in rats

BACKGROUND:

In cases of severe sepsis and septic shock, a series of pathophysiological changes lead to multiple organ dysfunction syndrome. This study aimed to investigate the expression of glucocorticoid receptor mRNA in the rat lung following endotoxin (LPS) induced shock.

METHODS:

Totally 56 SD rats were randomly divided into 4 groups: LPS shock group (n=16), LPS+vasoactive intestinal peptide group(VIP) group, (n=16), LPS+VIP+ glucocorticoid (GC) group, (n=16),and control group (n=8). LPS shock was induced by intravenous injection of LPS (10 mg/kg) in rats. Within 15 minutes after LPS injection, rats in the treatment groups received VIP (5 nmol/kg) or VIP and methylprednisolone (3 mg/kg). The control group was given normal saline instead of LPS. The rats of the four groups were sacrificed at 6 hours,24 hours after injection respectively, and the lung tissues were collected. Pathological changes of the lungs were examined by light microscopy and electron microscopy. GRmRNA expression in the lung tissues was evaluated by RT-PCR.

RESULTS:

In the LPS shock group, lung histopathology demonstrated destruction of the alveolar space,widening of the inter-alveolar space, inflammatory cell infiltration and interstitial edema. However,pathological changes in the LPS+ VIP group and LPS+ VIP+GC group were milder than those in the LPS shock group. Six hours after LPS injection, GR mRNA expression was down-regulated in the LPS group (0.72± 0.24) and LPS+ VIP group (0.88±0.27) (P<0.05) as compared with the control group (1.17±0.22). The LPS shock group showed a more significant down-regualtion than the LPS+VIP group, but the difference was not statistically significant (P>0.05). In contrast, GRmRNA expression in the LPS+ VIP+GC group was significantly up-regulated at 6 hours and further at 24 hours (1.45±0.32 and 1.91±0.46 respectively) (P<0.05).

CONCLUSION:

GrmRNA expression decreased in LPS induced lung injury in rats. Combined treatment with VIP and GC mitigated lung injury ang inflammation. The mechanism may be related to up-regulation of GR mRNA expression.KEY WORDS: Glucocorticoid, GRmRNA, Vasoactive intestinal peptide, LPS, Shock, Inflammation, Lung injury, Rat     

"失血性休克-内毒素"二次打击所致肺损伤水通道蛋白的表达

目的 探讨水通道蛋白（AQP）-1和AQP-5在失血性休克一内毒素二次打击所致大鼠肺损伤中的表达。方法 30只SD大鼠随机分为两组：假手术对照组（C组）、二次打击组（HS组），每组15只。建立“未控制性失血性休克-内毒素”二次打击大鼠模型，并按院前期90min、院内复苏期60min、院内观察期三期进行实验。实验结束前采血测动脉血气并比较两组大鼠存活率。测定肺泡灌洗液蛋白（BALFpro）、肺通透指数（PPI）及肺组织湿／干质量比（W／D）；HE染色光镜下观察肺损伤程度；采用免疫组化法分别测定肺组织AQP-1和AQP-5的蛋白表达。结果 与C组比较，Hs组MAP、lac、PaO2、pH、BE、PPI、BALFpro、W／D等指标均明显恶化，肺组织损伤严重，大鼠存活率降低；与C组比较，HS组肺组织AQP-1和AQP-5的表达显著降低（P〈0．01）。结论 二次打击所致大鼠肺损伤时AQP-1和AQP-5表达均明显降低，这可能是失血性休克后肺损伤肺水肿形成的重要原因之一。     

血必净对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织细胞间粘附分子-1表达的影响

目的观察血必净对脂多糖诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法将45只Wistar大鼠采用随机数字表分为三组:(1)健康对照(Control)组(15只)、(2)脂多糖(LPS)组(15只)、(3)血必净(XBJ)组(15只)。LPS组和XBJ组采用股静脉注射LPS(5 mg/kg)制备大鼠ALI模型。造模前半小时开始给药,XBJ组给予血必净4 m L/kg;Control组和LPS组则给予等容积0.9%氯化钠注射溶液。在造模后6 h、12 h、24 h各随机处死大鼠5只,分别作为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组,光镜下观察肺脏组织形态学变化,免疫组织化学法(IHC)检测肺组织中ICAM-1蛋白表达。结果造模后LPS组随着实验时间的延长,肺组织ICAM-1蛋白呈逐渐增加趋势,至24 h达到高峰。与LPS组相比,血必净组各时间点肺组织ICAM-1蛋白表达明显降低(PO.05)。光镜显示LPS组肺组织病理形态学改变明显,而血必净组则明显减轻。结论血必净可通过抑制脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织增强的ICAM-1表达减轻脂多糖诱导的大鼠肺损伤程度。     

地塞米松对大鼠光气急性肺损伤血管生成素-1、2的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠光气急性肺损伤(ALI)血管生成素-1、2(Ang-1,2)表达的影响.方法 采用大鼠光气吸入性肺损伤动物模型.36只SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:正常对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)、光气染毒组(吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5min)、地塞米松处理组(尾静脉注入2.5 mg/kg地塞米松1h后,吸入同等剂量的光气).染毒2h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞细胞数、蛋白含量和肺湿/干质量比(W/D).采用双抗体夹心酶标免疫分析法(ELISA法)测定各组血清和BALF中Ang-1,2水平.RT-PCR法对肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2mRNA的水平进行半定量研究.Western blot技术检测肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2蛋白含量.结果 与正常对照组比较,光气染毒组肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组的肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-1和Tie-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-1和Tie-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论 地塞米松可能通过抑制Ang-2表达并促进Ang-1和Tie-2表达来有效地保护大鼠光气吸入性急性肺损伤.     

黄芪对内毒素性急性肺损伤大鼠肝细胞生长因子表达的影响

目的：探讨黄芪在急性肺损伤（ALI）时对肝细胞生长因子（HGF）表达的影响，评价黄芪在ALI中的治疗机制。方法：制备内毒素（LPS）性ALI模型。设正常对照组（生理盐水1ml／kg）、模型组（LPS5mg／kg）、黄芪治疗组（黄芪8mg／kg）。用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组大鼠肺组织匀浆中HGFmRNA表达的变化；用免疫组化法检测各组大鼠肺组织中HGF阳性细胞数的变化。结果：RT—PCR检测结果显示，ALl时HGF mRNA表达明显增加（P〈0．05），黄芪能促使HGFmRNA表达进一步升高（P〈0．05）。免疫组化显示，ALI时HGF阳性细胞表达产物增加（P〈0．01），黄芪能促进HGF的表达（P〈0．05）。结论：黄芪通过促进HGF的表达来促进ALI的修复。     

呼吸机致大鼠急性肺损伤的实验研究

目的探讨不同潮气量机械通气在大鼠急性肺损伤发生中的作用。方法32只Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组、常规潮气量组和大潮气量组。分别在肉眼、光镜和电镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变,测定动脉血气和BALF中性粒细胞计数(PMN)、蛋白含量和髓过氧化物酶(MPO)活性。结果小潮气量组肺组织在肉眼、光镜和电镜下观察与对照组比较差异无显著性;常规潮气量和大潮气量组肺组织在光镜和电镜下可观察到具有不同程度损伤改变,其BALF中PMN、MPO活性和蛋白含量均明显高于对照组和小潮气量组,而动脉血氧分压(PaO_2)明显低于对照组和小潮气量组(P＜0．01,P＜0．05);大潮气量组BALF中MPO活性和蛋白含量与常规潮气量组比较差异也有显著性(P＜0．01);小潮气量组各项指标与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0．05)。结论小潮气量通气对正常肺组织无明显影响,但没有任何肺保护措施的常规潮气量通气对正常肺组织具有一定损伤作用,其损伤作用与中性粒细胞在肺内募集和活化有密切关系。