荧光原位杂交技术在尿路上皮细胞癌诊断中的应用

目的应用荧光原位杂交技术（fluorescenceinsituhybridization,FISH）检测分析3、7、17号染色体及9p21位点异常与尿路上皮细胞癌发生、发展的关系,评估其用于尿路上皮细胞癌诊断的可行性和临床应用前景。方法选取2011年7月至2013年8月在青海红十字医院泌尿外科经膀胱镜活检确诊为尿路上皮细胞癌的患者116例作为实验组,另外选取正常体检者92例作为对照组,分别行尿脱落细胞学检查和FISH检测,比较两种方法诊断的特异性和灵敏性,统计分析3、7和17号染色体及9p21位点的畸变率与尿路上皮肿瘤分级的相关性。结果①尿路上皮细胞癌患者中,FISH和细胞学诊断尿路上皮细胞癌的灵敏度分别为81．0％和37．9％;对照组中,FISH和细胞学诊断尿路上皮细胞癌的特异度分别为90．2％和93．4％。②各染色体及区带呈较高的畸变发生率,3、7、17号染色体畸变阳性率分别为94．3％、95．6％和88．5％;9号染色体p21位点畸变阳性率为63．2％。③FISH的灵敏性随着肿瘤分级分期的升高而增高。结论FISH技术能明显改进尿路上皮细胞癌的诊断,对于尿路上皮细胞癌的诊断及复发监测具有重要意义。     

Urovysion FISH检测尿液泌尿道肿瘤相关基因的异常及在老年科体检中的应用

目的了解基于Urovysion荧光原位杂交技术(FISH)检测尿液脱落细胞中泌尿系统恶性肿瘤相关性染色体异常在老年科体检中的应用价值。方法收集1 350例老年科患者的晨尿,采用Urovysion FISH检测尿液细胞中第3、7、17号染色体的非整数倍,以及第9号染色体长臂21区域的缺失。结果 1 350例患者中共检测出3号染色体异常55例(4.07%),7号染色体异常68例(5.04%),17号染色体异常41例(3.04%),9号染色体异常36例(2.67%)。经病理证实为膀胱癌22例(1.63%),其他泌尿系统恶性肿瘤16例(1.19%)。结论 Urovysion FISH对于泌尿系统恶性肿瘤的早期诊断有较高的应用价值,可以作为老年科泌尿系肿瘤筛查的一线方法。     

FISH技术在诊断膀胱移行上皮细胞癌中的应用

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术在膀胱移行上皮细胞癌诊断中的价值和意义。方法用随机引物法标记3、7、17号染色体着丝粒及p16基因探针,对该院103例膀胱移行上皮细胞癌患者尿液或膀胱冲洗液中脱落细胞FISH进行检测,分析染色体畸变或数目异常情况及与临床分期、病理分级的关系。结果 3、7、17号染色体和p16基因的畸变率分别为41.7%(43/103)、45.6%(47/103)、31.1%(32/103)和55.3%(57/103),畸变与临床分期无相关性,除p16基因外其余染色体畸变与病理分级相关,其中17号染色体畸变与病理分级显著相关(P<0.01)。4个探针组合诊断膀胱移行上皮细胞癌的总阳性率为46.6%,与临床分期无相关性(P>0.05),但与病理分级显著相关(P<0.01)。结论 FISH技术检测有助于膀胱移行上皮细胞癌的诊断,并可用于探索染色体畸变与病理分级的关系。     

骨髓染色体联合FISH技术在恶性血液病诊断中的应用价值

目的 探究联合改良骨髓染色体制备方法和荧光原位杂交(FISH)技术,分析其在恶性血液病特别是在慢性粒细胞白血病(CML)中的临床应用价值。方法 收集2019年1月至2022年6月来清远市人民医院就诊的355例恶性血液病患者作为研究对象,首先抽取16例患者的骨髓细胞对骨髓染色体制备的接种浓度、秋水仙碱浓度、时间和低渗等进行改良,优化后对培养时间进行单因素方差分析,按照不同培育时间(16 h、20 h、24 h和28 h)将每例平均分成A、B、C和D 4组;最后用改良方法对所有患者进行骨髓染色体核型分析,同时利用FISH技术对CML患者进行BCR-ABL融合基因检测,并对异常染色体统计分析。结果 单因素方差分析发现4组染色体分裂相均值差异有统计学意义(P<0.05),且B组(20 h)显著高于D组(P<0.05);B组的培养成功率同样显著高于D组(P<0.05)。355例恶性血液病患者均一性培养成功率为96.6%(343/355),异常染色体检出率为40.3%(143/355)。CML患者骨髓染色体和FISH阳性检出率一致,在加速期和急变期检出额外异常染色体。结论 改良后...     

荧光原位杂交技术与染色体核型分析在产前诊断中的应用

目的探索荧光原位杂交技术(FISH)在产前诊断中的临床应用价值及相对于羊水细胞染色体核型分析的优缺点。方法对2012年4月至2013年11月在梅州市人民医院进行唐氏综合征筛查并诊断为高危的183例孕妇进行羊水细胞核型分析及FISH诊断,并对结果进行分析。结果核型分析结果显示,183例孕妇中有核型异常者9例,其中3例18-三体,3例21-三体,1例XXY和2例XO;FISH诊断结果显示8例异常,其中2例18-三体,3例21-三体,1例XXY和2例XO。结论 FISH技术用于产前诊断效率和成功率高,但单纯FISH诊断会出现小概率的漏诊,可与核型分析互补缺陷,使产前诊断效能最大化。     

双色荧光原位杂交技术在检测t(8;21)白血病中的应用

目的 探讨双色荧光原位杂交（FISH）技术在t（8；21）白血病诊断和治疗监测中的应用。方法 将2001年以来应用双色双融合AML1／ETO基因探针进行FISH检测的70例白血病患者，分为未治疗组和治疗组，回顾性分析核型、FISH及部分RT-PCR结果，对核型结果有疑问的患者再应用显带后连续进行中期FISH方法予以确定。结果 未治疗组共42例，经FISH补充检测确诊30例为t（8；21）患者，其中2例患者核型分析未检出t（8；21）和1例RT-PCR结果阴性患者FISH检测结果均为阳性；6例复杂易位患者通过显带后连续中期FISH检测不仅确定AML1／ETO融合基因的存在，同时精确定位。治疗组共28例，为已确诊的t（8；21）白血病患者。3例患者核型分析结果正常或非t（8；21），FISH检测结果阳性。2例通过FISH监测到复发。结论 双色FISH技术是一种敏感、精确的t（8；21）白血病的诊断和治疗监测工具，可精确定位复杂核型，因而是常规细胞遗传学检测的必要补充。     

常用染色体分析技术在产前诊断中的应用

经典的细胞培养和细胞染色体分析是染色体病诊断的金标准,但该方法有实验周期长,对部分复杂、微小异常诊断困难等缺点;随着分子遗传学技术的不断发展,在传统染色体核型分析的基础上衍生发展了多项染色体分析诊断技术,如荧光原位杂交技术、比较基因组分析、光谱核型分析等不断应用于产前诊断染色体病中。这些新技术具备实验周期短,特异性强,分辨率高等优点。本文将就常用染色体分析技术原理、特点作一综述,并探讨将这些新技术与传统的细胞染色体核型分析技术相结合,合理运用,使得产前诊断中更多复杂的染色体异常核型的明确诊断成为可能。     

多靶位荧光原位杂交技术与尿脱落细胞学在上尿路尿路上皮细胞癌评估中的效果对比

目的 探讨多靶位荧光原位杂交技术(M-FISH)与尿脱落细胞学在上尿路尿路上皮细胞癌(UUT-UC)评估中的效果对比.方法 选取2018年5月～2020年5月收治的52例疑似UUT-UC患者,所有患者均行M-FISH及尿脱落细胞学检测,后采用输尿管镜病理活检,以病理活检结果为金标准,分析行M-FISH及尿脱落细胞学...     

多色荧光原位杂交技术在急性白血病研究中的应用

染色体核型与急性白血病的预后、诊断及治疗关系密切。目前各实验室常规应用的方法是传统染色体核型分析与荧光原位杂交技术,但这两种技术各有不足之处。新近发展起来的多色荧光原位杂交技术有效地弥补了这些不足。本文就多色荧光原位杂交技术的原理、种类、特点及其在急性白血病研究中的应用作一综述。     

荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的应用

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)检测尿脱落细胞染色体畸变在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法 采用3、7及17号染色体着丝粒特异性探针及9号染色体p16位点特异性探针对20名健康人(正常组)新鲜晨尿进行FISH检测,建立阈值。留取75例膀胱癌(膀胱癌组)患者和25例非膀胱癌对照(非膀胱癌对照组)患者晨尿分别进行FISH检测及尿脱落细胞学检查。以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为诊断阳性。结果 四种探针单一应用诊断膀胱癌的灵敏度分别为73.3％ (55/75)、76.0％ (57/75)、62.7％ (47/75)和62.7％ (47/75),联合应用的灵敏度为85.3％ (64/75),特异度为96.0％ (24/25)。尿脱落细胞学检查的灵敏度和特异度则分别为9.3％(7/75)和100.0％ (25/25)。FISH检测诊断膀胱癌的灵敏度明显高于尿脱落细胞学检查(85.3％与9.3％,x2= 57.00,P＜0.001)。FISH检测诊断膀胱癌的灵敏度与膀胱癌病理分级(低级别为84.2％,高级别为86.5％,x2=0.08,P＞0.05)及临床分期(Ta～T1为82.9％,T2～T4为87.5％,x2=0.32,P＞0.05)均无关。结论 荧光原位杂交技术检测尿脱落细胞染色体畸变诊断膀胱癌灵敏度高、特异性强、无创伤性,可作为膀胱癌早期诊断的一项重要方法,并可在预测肿瘤生物学行为及预后方面具有重要的临床意义。     

探讨FISH技术在TCT收集宫颈脱落细胞中的应用

荧光原位杂交(fluorescence in hybridization,FISH)是一种快速、有效的分子细胞遗传学技术.采用荧光标记的特异核酸序列,根据探针与被检测样本中核酸序列的互补性,探针与样本核酸杂交后,在荧光显微镜下检测荧光信号,从而对样本中待测核酸进行定性、定位与定量分析[1].本研究应用FISH技术探讨hTERC(即人染色体末端酶)基因在宫颈脱落细胞的表达.     

间期荧光原位杂交技术在慢性粒细胞白血病诊断中的应用价值

目的探讨间期荧光原位杂交技术（I—FISH）在慢性粒细胞白血病（CML）诊断中的应用价值。方法同时采用核型分析、逆转录-巢式聚合酶链反应（PCR）以及I—FISH3种检测方法，对3例临床表现、细胞形态学和细胞化学提示CML可能的患者进行检测。结果核型分析均未发现Ph染色体和其他异常，PCR也均为阴性结果，而I—FISH测得3名患者骨髓中含融合基因的细胞百分率分别为59.0％、71.8％、33.7％，远高于阳性判断值。结论对于仅发生小片断易位或不产生主要bcr／abl融合基因型的慢性粒细胞白血病患者，I—FISH是一种很有价值的确诊手段。     

荧光原位杂交在细胞学诊断中的应用

荧光原位杂交(FISH)是一种可以识别染色体畸变的有效技术,近年来逐渐在细胞学诊断中得到应用.本文通过分别阐述FISH如何从尿液、胆道刷液、支气管刷液和痰液、食管刷液以及妇科脱落细胞学中检测肿瘤细胞,从而证明FISH能够提高细胞学诊断的敏感性,而且该方法 几乎适用于任何细胞学样本类型.但是因为FISH技术费时且昂贵,所以对于大多数细胞学样本来说,FISH技术是对传统细胞学的补充而不是替代.     

FISH技术及细胞学技术检测尿脱落细胞对膀胱尿路上皮肿瘤诊断价值研究

目的：比较荧光原位杂交（FISH）技术及细胞学技术检测尿脱落细胞对膀胱尿路上皮肿瘤诊断价值。方法采用CSP3/CSP7组合探针和GLPp16/CSP17组合探针对膀胱尿路上皮肿瘤疑似患者的尿脱落细胞进行FISH检测,同时采用细胞学技术检测尿脱落细胞,比较2种方法的灵敏度和特异度。结果FISH技术筛查膀胱尿路上皮肿瘤的灵敏度和特异度分别为92．5％和85．0％,细胞学技术的灵敏度和特异度分别为27．5％和90．0％。FISH技术的灵敏度显著高于细胞学技术（P＜0．05）,但2种方法的特异度差异无统计学意义（P＞0．05）。结论FISH技术有望成为筛查膀胱尿路上皮肿瘤的新方法。     

荧光原位杂交技术在血尿患者膀胱尿路上皮癌筛查中的应用

目的评价荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization,FISH）技术在血尿患者膀胱尿路上皮癌筛查中的临床应用价值,为从尿液脱落细胞中早期诊断膀胱癌提供新的途径。方法选择20例健康正常人,通过FISH技术检测9号染色体p16位点、3号染色体、7号染色体及17号染色体变异情况,建立阈值。100例血尿患者留取晨尿,分别进行尿脱落细胞学检查和FISH技术检查。统计分析FISH方法的敏感度和特异度。结果探针检测p16基因完全缺失阈值为3．9％,部分缺失为5．4％,扩增为3．2％;3号染色体缺失阈值为4．0％,扩增为3．5％;7号染色体缺失阈值为4。0％,扩增为2．8％;17号染色体缺失阈值为5．8％,扩增为3．4％。以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果至少存在两种异常为诊断阳性。FISH技术在血尿患者膀胱尿路上皮癌筛查中的敏感度和特异度分别为93．6％和i00％,尿脱落细胞学检测分别为46．8％和100％。结论FISH技术无创快速,对血尿患者膀胱尿路上皮癌筛查的敏感度优于尿脱落细胞学检查方法。     

UroVysion荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的应用价值

目的 应用UroVysion荧光原位杂交技术检测膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中染色体异常,探讨UroVysion荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮癌诊断中的应用价值.方法 随机留取2010年6月至2012年2月期间107例疑似膀胱尿路移行上皮肿瘤患者的肉眼血尿,行UroVysion荧光原位杂交和尿液脱落细胞学分析,结合活检病理结果,比较UroVysion荧光原位杂交和尿液脱落细胞诊断膀胱癌的效能.结果 通过膀胱镜活检或手术后病理检查明确诊断为膀胱癌患者92例,其中UroVysion荧光原位杂交技术阳性患者70例,其敏感度为76.1%,特异度为92.8%,G1、G2、G3分级敏感性分别为61.2%、81.2%、92.3%,非肌层浸润性肿瘤、肌层浸润性肿瘤的敏感度分别为73.6%及85.0%,尿脱落细胞学总的敏感度为33.7%,特异度为93.3%.结论 UroVysion荧光原位杂交的检测为膀胱尿路上皮癌的早期诊断提供了快速、安全、灵敏度高的无创伤性检测方法.     

分子细胞遗传学技术在血液病中的应用

染色体异常是导致先天性缺陷和肿瘤等疾病的主要原因，传统的细胞遗传学显带技术的染色体核型分析费时、费力，敏感性和特异性差，特别是对复杂染色体异常的分析尤为困难。荧光原位杂交（FISH）、比较基因组杂交（CGH）和多色荧光原位杂交技术包括多重FISH（M—FISH）、光谱核型分析（SKY）等分予细胞遗传学技术克服了传统细胞遗传学缺陷，是对传统核型分析的有力补充。本文对上述分子细胞遗传学技术在血液病中的应用作一综述。     

FICTION技术在检测多发性骨髓瘤遗传学异常中的应用

目的 探讨联合免疫荧光和荧光原位杂交(FISH)的FICTION技术在多发性骨髓瘤(MM)遗传学异常检测中的应用价值.方法 采集18例MM患者和2例浆细胞白血病患者的骨髓标本,分离单个核细胞制作滴片.从细菌人工染色体文库中选取覆盖IgH、MMSET待测基因位点的质粒,用缺口平移法制备带有半抗原检测标签的核酸探针.在经CD138标记和酪胺信号放大的细胞滴片标本上,使用上述自制探针[t(4;14)、t(11;14)和t(14;16)]和商品化直标缺失探针(13q和p53)进行FISH检测.结果 20例患者标本均使用上述5种探针进行检测,其中检出t(4;14)4例,t(11;14)6例,t(14;16)1例,p53缺失3例,13q缺失8例;另有4例未检测出此5种异常.结论 应用FICTION技术原位分析骨髓中特定瘤细胞亚群的特征性遗传学异常,能够提高FISH检测的效率和敏感性,并可作为对MM患者遗传学分层诊断的初筛实验,指导治疗并判断预后.

Abstract：

Objective To investigate the diagnostic value of FICTION (Fluorescence Immunophenotyping and Interphase Cytogenetics as a Tool for the Investigation of Neoplasms) technique, combining immunofluorescence and fluorescence in situ hybridization (FISH), to detect genetic aberrations in multiple myeloma (MM). Methods Bone marrow samples were collected from 18 MM and 2 plasma cell leukemia (PCL)patients. Probes targeting IgH and MMSET were prepared using a Nick Translation Kit from Bacterial artificial chromosome (BAC) clones. The immunophenotyping was achieved via the CD138 tyramide signal amplification (TSA)-mediated immunofluorescence, followed by FISH with the prepared probes [t (4;14), t (11;14), t(14;16)] and the commercial deletion probes (13q and p53) to detect common genetic aberrations in MM. Results All the 20 samples were assayed with the probes mentioned above, and revealed 4 cases with t(4;14) ,6 with t(11 ;14), 1 with t(14;16), 3 with p53 deletion; and 8 with 13q deletion. The remaining 4 cases had none of the 5 aberrations. Conclusion FICTION technique facilitates the detection of genetic abnormalities of MM in situ; enhances both efficiency and sensitivity of positive det~tion, thus, could be used as the screening test of molecular diagnosis of MM to guide coming-up risk-adapted therapy and evaluate prognosis.     

PAX2基因在梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞重新表达的意义

【目的】探讨PAX2基因在梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞的重新表达对肾间质纤维化的意义。【方法】80只大鼠随机分为：假手术组（sham组）和模型组（UUO组）各40只。于术后3d、5d、7d、14d（每组10只）处死取肾组织。光镜观察肾脏病理形态改变,免疫组化、Westernblot及realtimePCR检测肾组织PAX2蛋白和mRNA的表达。【结果】①HE和Masson染色观察到UUO组肾间质呈现明显的纤维化。②免疫组化发现sham组肾小管上皮细胞无PAX2表达;UUO组肾小管上皮细胞表达较多;③Westernblot显示PAX2蛋白水平在UU0组术后3d相比sham组明显的增加（P〈0．05）,随着梗阻时间延长PAX2蛋白表达更加明显;④realtimePCR显示,PAX2mRNA与PAX2蛋白的,矗达趋势相同。⑤相关分析：PAX2蛋白水平与肾小管损伤程度呈正相关（r=0．991,P〈0．05）,与肾间质纤维化程度呈正相关（r=0．985,P〈0．05）。【结论】胚胎发育基因PAX2在梗阻性肾病大鼠肾小管存在重新表达;并参与了梗阻性肾病肾小管损伤和肾间质纤维化的过程。     

荧光原位杂交技术结合常规细胞遗传学方法检测多发性骨髓瘤患者的染色体异常

摘要:目的：探讨荧光原位杂交技术（FISH）结合常规细胞遗传学（CC）方法检测多发性骨髓瘤（MM）患者染色体异常情况的意义。 方法：用CC法和FISH对26例MM患者进行染色体异常分析。 结果：26例MM患者中,CC法检测出染色体异常有9例（34.6%）;FISH检测出染色体异常有22例（84.6%）,其中IGH基因重排占38.5%(10例);P53缺失5例（19.2%）;1q21扩增9例,缺失1例;13q14缺失13例（50.0%）。13例伴有13q14缺失MM患者中8例出现1q21异常,13例未检测到13q14缺失患者中2例发现1q21异常,差异有统计学意义(χ²=5.85,P<0.05)。MM患者13q14缺失和1q21异常之间存在正相关关系（r=0.474,P＜0.05）。 结论:FISH结合CC法可提高MM患者染色体异常的检出率。