8—MOP、ATRA以及二者联合应用对Mc3细胞nm—23表达的影响

目的 研究8—MOP、ATRA以及二联合应用对Mc3细胞mm-23基因蛋白表达的影响．方法 采用免疫组织化学染色法。结果 对照组( )．8—MOP组( ),ATRA组( ),8—MOP ATRA组( )。结论 8—MOP、ATRA及二联合应用使Mc3细胞nm—23的阳性表达下降,可能对Mc3细胞的转移特性有影响。     

8—MOP、ATRA以及二者联合应用对Mc3细胞nm-23表达的影响

目的 研究8-MOP、ATRA以及二者联合应用对Mc3细胞um-23基因蛋白表达的影响。方法 采用免疫组织化学染色法。结果 对照组(++),8-MOP组(+),ATRA组(+),8-MOP+ATRA组(+)。结论 8-MOP、ATRA及二者联合应用使Mc3细胞um-23的阳性表达下降,可能对Mc3细胞的转移特性有影响。     

8—MOP联合ATRA对腺样囊性癌细胞系SAcc83细胞的抑制作用

为研究8—MOP联合ATRA对人涎腺腺样囊性癌细胞系SAcc83细胞的抑制作用特点,应用MTT法测试并绘制药物抑制曲线,用倒置显微镜观察细胞形态变化。30％细胞生长抑制时,最佳联合用药合并指数(CI_(30))为0.66;50％细胞生长抑制时,最佳联合用药合并指数(CI_(50))为0.37,表明适当浓度的8—MOP与ATRA联合应用对SAcc83细胞可以呈现协同效应。单独应用8-MOP、ATRA或二者联合应用,SAcc83细胞出现退行性病变改变及类似凋亡小体样结构。合适浓度的8—MOP与A-TRA联合应用的临床价值有待进一步研究。     

辛基酚对MDA-MB-231细胞中bcl2和caspase3表达的影响

目的:观察辛基酚(OP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法:以流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察OP对MDA-MB-231细胞凋亡、bcl2、bax和caspase3表达的影响。结果:4μmol/L、8μmol/L-OP作用MDA-MB-231细胞48 h,其凋亡率分别为26.93±6.76、42.48±8.21(对照4.05±1.14);bcl2表达量荧光值分别为78.05±9.47、42.74±6.49(对照103.12±11.26)。OP降低细胞中bcl2 mRNA表达,增加caspase3 mRNA及其蛋白的表达。结论:OP能诱导MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能是通过上调细胞中caspase3的表达,下调bcl2的表达来诱导细胞凋亡。     

C—myc和P~(53)与子宫平滑肌肿瘤的关系

应用地高辛精标记C—myc和P~(53)基因探针原位杂交技术检测18例子宫肌瘤,48例交界性子宫平滑肌瘤和6例子宫平滑肌肉瘤中C—myc和P~(53)的定位及表达,探讨肿瘤基因与子宫平滑肌肿瘤的发生和发展有无相关性,以及交界性子宫平滑肌瘤与子宫肌瘤和平滑肌肉瘤间的内在联系。结果显示C—myc和P~(53)的表达产物均定位于细胞核中,在三型肿瘤中C—myc的表达率分别为5.6％、33.3％、50％;P~(53)的表达率分别为11.1％、39.8％、66.7％(P<0.05)。在肿瘤中的表达强度与细胞增殖程度成正比。推测C—myc和P~(53)突变及过量表达可能是子宫平滑肌肿瘤发生和发展的一个因素,交界性子宫平滑肌瘤可能为平滑肌肉瘤的前驱病变,具有特殊的生物学行为,经手术治疗,预后良好。     

全反式维A酸对胃癌干细胞相关基因CD133、Sox2及GSK3B表达的影响

 目的 探讨全反式维A酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对胃癌干细胞相关基因CD133、Sox2及GSK3B表达的影响,为胃癌治疗提供新的切入点。方法 建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组,采用ATRA腹腔注射,观察裸鼠一般状况,取出肿瘤组织,HE染色,检测各组胃癌细胞坏死情况;采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量PCR方法,分析检测CD133mRNA、Sox2mRNA及GSK3BmRNA基因表达,并通过免疫组化法检测CD133、Sox2及GSK3B蛋白表达。结果 与对照组相比较,氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组肿瘤体积缩小,差异有统计学意义(P<0.05);氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组高表达CD133、Sox2干细胞相关因子;ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组高表达GSK3B,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ATRA作用后胃癌干细胞标志物CD133、Sox2、GSK3B表达增加;CD133、Sox2、GSK3B表达增加可以抑制肿瘤细胞生长;ATRA老药新用对胃癌的治疗预后有一定的作用。     

Bcl-2和Bax基因在人卵巢上皮性肿瘤中的表达

目的:研究抗凋零基因bcl—2和bax基因与卵巢上皮性肿瘤的发生及预后的关系。方法:通过免疫组化方法,用抗bcl—2及抗bax抗体检测76例卵巢上皮性肿瘤(良性27例,交界性24例,恶性25例)中bcl—2和bax基因的表达产物。结果:bcl—2和bax在良性、交界性及恶性肿瘤组织中的阳性检出率分别为7.4％(2/27)、16.7％(4/24)、36.0％(9/25)和22.2％(6/27)、45.8％(11/24)、56.0％(14/25)。在良性与恶性肿瘤(Ⅲ级)间存在显著差异(P<0.05),肿瘤组织中的相似文献   

高效液相色谱分析全反式维甲酸在HL-60细胞液中的含量变化

目的　分析HL - 6 0细胞培养液中全反式维甲酸 (ATRA)的含量变化 ,为临床治疗白血病提供实验依据。方法　急性早幼粒白血病细胞株HL - 6 0 ,经ATRA及联合用药处理。乙醚 -丙酮 (8∶1v/v)提取ATRA ,高效液相色谱法分析。结果　A TRA在 2 .5 0× 10 -2 ～ 1.0 0× 10 μmol·L-1的范围内 ,有良好的线性关系。平均回收率 94 .5 % ,相对标准差小于 4 .0 3%。联合用药各组、各时相点的ATRA的含量均高于ATRA单独处理组 ,其环比显示 :联合用药各组 ,各时相点ATRA的分解比ATRA单独处理组低。结论　联合用药治疗急性早幼粒白血病具有协同作用 ,适于临床应用     

103Pd支架对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的　研究10 3 Pd支架预防血管成形术后再狭窄的作用机理。方法　将雄性新西兰大白兔 50只随机分为普通支架组及10 3 Pd支架组 ,各组再分 5个亚组 ,设正常对照。分别于术后第 3、7、14、2 8、56天取材 ,进行病理形态学、细胞凋亡定量研究 ,用原位杂交法测定凋亡相关基因bcl 2mRNA及baxmRNA的表达。结果　光镜下发现 ,10 3Pd支架组管腔狭窄程度明显低于普通支架组 ,术后第 56天最显著 (P <0 0 1)。末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记 (TUNEL)法检测发现术后 3～ 2 8d ,10 3 Pd支架组的平滑肌细胞凋亡较普通支架组明显 ,术后第 7天达峰值 (P <0 0 1)。原位杂交显示术后 3～ 2 8d 10 3Pd支架组bcl 2mRNA的表达较普通支架组降低 ,术后第 2 8天达峰值 (P <0 0 1)。而baxmRNA的表达 ,术后 3～ 2 8d10 3 Pd支架组较普通支架组显著增加 ,术后第 7天达峰值 (P <0 0 1)。术后 3～ 2 8d ,10 3 Pd支架组的bcl 2mRNA与baxmRNA比值均小于普通支架组(P <0 0 5)。直线相关分析示 ,bcl 2mRNA与TUNEL法测定的凋亡阳性率呈明显负相关 ,而baxmRNA与之呈明显正相关 (P <0 0 1)。结论　10 3 Pd支架通过诱导凋亡相关基因的表达 ,导致明显的中膜平滑肌细胞凋亡 ,使凋亡细胞比例增加 ,血管再狭窄程度     

肝动脉栓塞化疗术对肝细胞癌bcl-2、fas和bcl-xl表达的影响

目的　探讨经导管肝动脉栓塞化疗术 (TACE)对肝细胞癌 (HCC)细胞凋亡相关蛋白bcl 2、fas和bcl xl表达的影响 ,评价TACE对HCC的疗效。资料与方法　经病理证实的HCC 6 3例 ,包括单纯手术组 4 2例 ,TACE组 2 1例(为TACE治疗 2次后有手术机会而行切除者 ) ;采用免疫组织化学SP法检测标本bcl 2、fas和bcl xl的表达情况 ,将两组结果进行对照分析。结果　TACE组fas表达阳性率为 4 7.6 2 % (10 /2 1) ,单纯手术组fas表达阳性率为 2 1.4 3%(9/4 2 ) ,二者之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TACE组明显高于单纯手术组 ;TACE组bcl xl表达阳性率为 2 3.81%(5 /2 1) ,单纯手术组阳性率为 5 4 .76 % (2 3/4 2 ) ,二者之间亦有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TACE组明显低于单纯手术组 ;bcl 2的表达阳性率在单纯手术组和TACE组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　TACE治疗可以促进肝癌细胞fas表达增高 ,使bcl xl表达降低 ,从而在总体上增加肝癌细胞凋亡率 ,促使肿瘤缩小。关于TACE治疗对bcl 2的影响有待进一步研究     

pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞移植对脊髓损伤c-fos、bcl-2基因表达的影响

目的探讨pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞(SC)移植对脊髓损伤(SCI)后c-fos,bcl-2基因表达的影响.方法用切割法制备大鼠SCI模型,将实验动物分为pSVPoMcat微基因修饰SC组(A组),SC移植组(B组),损伤组(C组),正常对照组(D组),不致伤.用地高辛(DIG)标记的c-fos、bcl-2探针行原位杂交.结果SCI后A、B、C、D四组脊髓c-fos基因表达顺序为C＞B＞A=D;bcl-2基因表达顺序为D=A＞B＞C.结论SCI后C-fos基因表达显著增多,而bcl-2基因表达显著减少,pSVPoMcat微基因修饰SC移植能部分抑制SCI后c-fos基因的表达和促进bcl-2基因的表达.     

辅酶NADH抑制人肝细胞株L02化疗凋亡损伤的作用

为研究辅酶NADH对顺铂（DDP）诱导的肝细胞凋亡的抑制作用及其分子机制，采用透射和扫描电镜检测肝细胞超微结构改变，碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞凋亡，RT－PCR检测p53和bcl-2基因表达变化，并用紫外分光光度法测定凋亡分子caspase-3和caspase－8活性水平的改变。结果显示，与DDP组比较，NADH／DDP组典型凋亡超微形态改变不明显，细胞凋亡明显下降，p53基因表达下降，bcl-2基因表达上升，caspase-3和caspase-8活性维持在低水平。提示NADH具有明显抑制DDP诱导肝细胞凋亡的作用。     

还原型辅酶Ⅰ(NADH)对PC12细胞鱼藤酮损伤的分子调控

为探讨NADH对PC12细胞线粒体鱼藤酮损伤的修复机制，采用细胞毒实验、免疫荧光和流式细胞仪检测细胞在鱼藤酮损伤前后细胞增殖基因（c-myc、c-erbB-2）、抗凋亡基因（bcl－2）、抑癌基因（p53）、细胞快反应基因（c-fos）相关蛋白和细胞增殖核抗原（PCNA）的表达。结果表明，鱼藤酮能明显抑制PC12细胞增殖，下调c-erbB-2、c-myc、bcl-2和p53基因的表达；NADH可以抑制鱼藤酮对PC12细胞线粒体的毒性作用，上调细胞bcl-2c、c-myc、c-erbB－2基因和PCR的表达，提示鱼藤酮可能通过控线粒体磷酸化过程和下调细胞增殖基因（c-rebB-2、c－myc）、抗凋亡基因（bcl-2），上调快反应基因(c-fos）表达致使细胞损伤，NADH抑制鱼藤酮对PC12细胞的损伤可能与bcl-2、c-myc、c-erbB-2和p53表达调控有关。     

影响内皮细胞凋亡的因素及其机制探讨

目的：观察亚砷酸钠（Ars),内毒素（LPS）、肿瘤坏死因子（TNF）、烧伤血清、创伤血清对内皮细胞凋亡的影响及其机制。方法：体外培养内皮细胞ECV－304,与上述物质孵育24小时后检测凋亡水平及ICAM－1.bcl-2,p53表达的变化,结果：Ars可使内皮细胞发生剂量依赖的凋亡增加（与对照相比,P＜O．01）,但是LPS、TNF烧伤血清和创伤血清对内皮细胞的作用有限,细胞凋亡率在15％以下。除10％烧伤血清外,所有处理因素都内皮细胞ICAM－1表达降低。体外诱导内皮细胞凋亡与bcl-2表达降低、p53表达增多有关,结论：Ars,LPS,TNF烧伤血清和创伤血清通过下调bcl-2表达,上调p53表达来影响内皮细胞凋亡,并且抑制内皮细胞功能。     

术前介入治疗对非小细胞性肺癌细胞凋亡的影响

目的：研究介入治疗对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响，探讨介入治疗术前应用的疗效。材料和方法：采用流式细胞仪与免疫组化方法检查介入治疗后行手术35例标本和单纯手术31例标本的细胞凋亡率、p53和bcl-2蛋白表达。结果：介入治疗组的细胞凋亡率明显高于单纯手术组（P＜0．05）；介入治疗组的p53蛋白阳性表达明显低于单纯手术组（P＜0．05）；介入治疗组的bcl-2蛋白阳性表达与单纯手术组相比略有升高，但无显著性差异（P＞0．05）。结论：介入治疗可促进细胞凋亡，近期疗效较好，同时术前介入治疗可诱导肿瘤细胞的多药耐药性产生，疗程不宜过长。     

凋亡相关基因与食管鳞状细胞癌放射敏感性相关关系的研究

目的 探讨凋亡相关基因ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３与食管鳞癌放疗敏感性的关系。方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ方法检测食管癌活检组织中ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３基因表达水平,病人接受放射治疗观察疗效,分析基因表达与放射敏感性的关系。结果 ｂｃｌ－２蛋白表达阳性者放射敏感性明显低于表达阴性者,ｐ５３蛋白表达阳性者略差于阴性者;ｃ－ｍｙｃ基因表达与放射敏感性无关。结论 ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３等凋亡相关基因表达产物的检测及综合分析有助于食管鳞癌放疗疗效的预测。     

Effect of bcl-2 deficiency on the radiation response of clonogenic cells in small and large intestine,bone marrow and testis

Purpose : Overexpression of bcl -2 protects against radiation induced apoptosis in lymphohaematopoietic cell types in vivo, whilst bcl -2 deficiency radiosensitizes murine T-lymphocytes in vitro. However, there are few data regarding the influence of bcl-2 deficiency on the radiosensitivity of non-lymphoid cell types. The purpose of this study was to investigate the role of bcl-2 in the clonogenic radiation response of intestinal crypts, bone marrow progenitor cells and testicular stem cells. Method : Survival curves were obtained for each cell type from bcl -2 null (-/-), heterozygote (+/-) and wild type (+/+) mice. Crypt survival in the small and large intestine was assessed using the crypt microcolony assay. Committed haemopoietic progenitors were assayed using in vitro colony-forming cell (CFC) assays and survival of clonogenic spermatogonia was assessed by scoring regenerative tubules at 35 days post-irradiation. Results : There was no difference in small intestine crypt survival between the three genotypes. In the colon, there was a tendency towards lower clonogen survival in the +/- and -/- animals. Haemopoietic in vitro CFC from -/- animals showed lower survival in comparison to +/+ mice, but spermatogonial stem cells were comparatively more radioresistant. Conclusions : Deficiencies in bcl -2 a ffect the radiation response of different cell populations in small but different ways. This may be due to variations between cells in their innate capacity for apoptosis, their dependence on different members of the bcl -2 family gene and their cell-cycle status and p53 expression.     

维甲酸联合曲古抑素诱导及治疗荷人甲状腺滤泡状癌裸鼠的实验研究

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）和曲古抑素（TSA）对人甲状腺滤泡状癌细胞株（FTC-133）和荷人甲状腺滤泡状癌裸鼠（NMB—hFTC）肿瘤模型摄碘能力的影响。方法不同量ATRA、TSA诱导VFC-133细胞：ARTA 1．0×10^-6mo／L（A低组）、1．0×10^-4mol／L（A高组）、TSA1．65×10^-7mol／L（T组）、A低＋T组、A高＋T组和无水乙醇（对照组）,96h后行HE染色,测定FTC-133细胞摄碘率;制备NMB—hFTC,成瘤后分组：ATRA组（2mg／kg灌胃）、TSA组（10mg／kg腹腔注射）、联合组（ATRA＋TSA,用量同前）、对照组（生理盐水灌胃＋腹腔注射,均为10ml／kg）,剂量均按鼠体质量给予。给药22d后,腹腔注射37MBq ^131I,分别于注射后4,6,12和24h行γ显像,测定体内生物分布;显像后取肿瘤组织行HE染色观察细胞形态。实验结果采用SPSS13．0软件进行单因素方差分析。结果FTC-133细胞摄碘率A低＋T组、A高＋T组分别为（23885±616．0）和（13849±728．2）计数·min^-1·10^-6细胞,其他各组在（985±84．2）～（17600±782．7）计数·min^-1·10^-6细胞范围内,各组间比较差异有统计学意义（F=600．879,P〈0．001）。^131I注射后6,12和24h联合组裸鼠种植瘤％ID／g分别为6．17±0．46,9．34±0．61,11．19±0．98,其余各组保持在（1．97±0．34）～（5．14±0．65）之间;肿瘤质量各组间比较差异有统计学意义（F=3．723,P〈0．05）。结论ATRA联合TSA,可增强FTC-133细胞和NMB—hFTC病灶的分化、摄碘能力,达到增强^131I杀死甲状腺癌病灶的协同作用。