应用电喷雾质谱技术分析鉴定防风中色原酮类化合物

文章利用电喷雾多级串联质谱技术研究了防风中色原酮类化合物,根据其在正离子条件下表现出的特征质谱行为,提出了防风中色原酮类化合物可能的电喷雾质谱碎裂规律,建立了防风中色原酮类化合物的快速分析、鉴定方法。     

防风色原酮类化学成分的UPLC-Q-TOF/MS分析

目的:采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)对防风中色原酮类成分进行分析。方法:采用ACQUITYTM BEHC_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)和0.1%甲酸乙腈(B)进行梯度洗脱。采用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下采集数据,依据精确质量数和同位素峰度比确定离子分子式,与对照品及数据库的二级谱图对比,结合已有文献报道,确定化合物结构。结果:正离子模式下鉴定出17种色原酮类成分,负离子模式下鉴定出2个色原酮类成分。结论:UPLC-Q-TOF/MS技术可以快速有效地分析防风中的色原酮类成分,是防风成分鉴定的准确有效方法。     

防风中色原酮类化学成分的分离及鉴定

目的采用高速逆流色谱技术(HSCCC)及超高压液相色谱-高分辨线性离子阱-轨道阱杂交串联质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap-MSn)快速分离鉴定防风中四种色原酮类化合物,建立快速分离制备色原酮类化合物的方法。方法采用甲醇加热回流提取得防风提取物,再用正丁醇萃取富集色原酮类成分;采用高速逆流色谱分离纯化,以乙酸乙酯:正丁醇:水(1:1:3,V/V/V)组成二元溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,仪器转速为800 r/min,流动相流速为1.5 ml/min,检测波长254 nm。结果从100 mg防风正丁醇提取物中一次性分离制备得到3.58 mg升麻素苷,3.72 mg 5-O-甲基维斯阿米醇苷,0.96 mg亥茅酚苷,7.8 mg升麻素,经高效液相色谱法(HPLC)分析,其纯度分别为95.28%,97.89%,59.88%和92.33%,超高压液相色谱-高分辨线性离子阱-轨道阱杂交串联质谱技术鉴定化合物1为升麻素苷,化合物2为5-O-甲基维斯阿米醇苷,化合物3为亥茅酚苷,化合物4为升麻素。结论该联用方法操作简便、灵敏度高、重现性好,为色原酮类化合物的开发提供了理论基础和技术平台。     

氯化钠诱导白木香悬浮细胞合成苯乙基色酮类成分的LC-MS分析

采用超高效液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)结合超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)对氯化钠诱导的白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性和定量分析。UPLC-Q-Exactive-MS和UPLC-QQQ-MS/MS均采用Waters T3色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相分别进行梯度洗脱色谱分离,质谱分析均采用电喷雾正离子模式采集。利用UPLC-Q-Exactive-MS从氯化钠诱导的白木香悬浮细胞样品中鉴定出苯乙基色酮类化合物47个,其中简单苯乙基色酮及其苷22个、四羟基四氢苯乙基色酮10个、三元氧环四氢苯乙基色酮15个。通过UPLC-QQQ-MS/MS技术对氯化钠诱导处理后白木香悬浮细胞中25个苯乙基色酮进行了定量。通过2种液质联用技术快速、高效地对氯化钠诱导白木香悬浮细胞中苯乙基色酮类成分进行定性、定量分析,为利用体外培养等生物技术制备沉香中主要的药效和香味物质苯乙基色酮提供重要参考。     

大豆皂苷的高效液相色谱-电喷雾串联质谱研究

利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱联用技术分析经大孔树脂柱层析分离得到大豆皂苷SSⅡ-。在线的高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术能够准确快速的提供糖苷类化合物的分子量和糖链部分的有益信息,通过分析确定SSⅡ-中含有A2、Ba和Bb等六种大豆皂苷,并探讨了其电喷雾串联质谱可能的裂解规律。     

UPLC-MS分析侧柏叶中黄酮类化合物

目的:采用超高效液相色谱-质谱仪联用技术(UPLC-MS)对侧柏叶中黄酮类成分进行分析和鉴别.方法:用Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm).流动相为0.2%甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,使用ESI离子源,在负离子模式下采集数据.结果:推断出侧柏叶中11个黄酮类化合物,并探讨了黄酮类化合物的电喷雾/串联质谱(ESI-MS-MS)的裂解方式.结论:经过超高效液相色谱的分离,利用质谱测定提供的准确质量数,结合紫外光谱的信息可以鉴定侧柏叶中主要的黄酮类成分.探讨了黄酮类化合物的电喷雾/串联质谱(ESI-MS/MS)的裂解方式,为其成分鉴定提供了准确有效的方法.     

续断的色谱指纹及LC-ESI-MS分析

目的:建立中药续断高效液相指纹图谱,分析色谱峰的化合物类型和质谱特征,提高续断的质量控制水平.方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD),Zorbax Extend Cl8(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,以川续断皂苷VI为参照物,建立续断色谱指纹.通过二极管阵列检测分析色谱指纹峰的化合物类型,采用液相色谱与电喷雾质谱联用技术首次分析了续断化学成分的质谱特征.结果:确定24批续断药材的17个共有峰,该指纹图谱具有良好的精密度、稳定性和重复性,成功用于24批续断药材的质量评价.二极管阵列检测区分了续断皂苷和非皂苷类化合物的指纹峰,液相色谱与质谱联用技术鉴定了30多个化合物的相对分子质量,通过与对照品或文献对照对其中10个特征成分进行了推测、确认.结论:采用高效液相色谱与质谱联用技术对续断指纹图谱中的特征峰进行结构确认,结束了续断色谱指纹盲分析的现状,可使其色谱指纹图谱的特征性更强,能更有效、全面的控制续断药材质量.     

川芎化学成分的高效液相色谱-电喷雾质谱研究

目的 采用高效液相色相色谱—电喷雾质谱联用技术( LC-ESI-MS)对川芎药材的乙醇提取物的化学成分进行分析鉴定.方法 选用反相C18色谱柱,以乙腈-0.5％醋酸溶剂梯度洗脱,二级管阵列(PDA)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)在线同时检测.结果 共鉴定出13个化学成分,主要为酚酸类成分和内酯类分.结论 该方法可以快速分析鉴定川芎中的化合物并提供结构信息.     

液质联用技术快速识别广东土牛膝中的两种黄酮类成分

运用高效液相色谱/ 电喷雾串联质谱联用技术（HPLC/ESI-MSn）对药用植物广东土牛膝中的黄酮类成分进行研究与探讨,建立了一种快速识别广东土牛膝中泽兰素和12,13- 二羟基泽兰素的液质联用方法.     

钩藤化学成分的高效液相色谱-电喷雾质谱研究

目的采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(LC/ESI/MS)对钩藤药材的乙醇提取物的化学成分进行分析鉴定。方法选用反相C18色谱柱,以甲醇-0.5%醋酸作为溶剂,进行梯度洗脱(过程:流速0.8ml/min,时间120min,溶剂系统:甲醇-水∶13%-100%),二级管阵列(PDA)检测器和电喷雾质谱(ESI/MS)在线同时检测。结果共分离鉴定出6个化学成分,主要为生物碱类成分,分别为:乌索酸,钩藤碱,柯诺辛碱B,异钩藤碱,柯诺辛碱和二氢柯楠因碱。结论液相色谱和质谱联用技术可以快速分析鉴定钩藤中的化合物并提供结构数据。     

HPLC法测定青川柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的:建立青川柴胡中柴胡皂苷a、d的含量测定方法。方法:采用HPLC,色谱条件:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相∶甲醇-水(72∶28);流速:0.8 mL/min;检测波长:210nm;柱温:40℃。结果:柴胡皂苷a、d的线性回归方程分别为:柴胡皂苷a:y=316.57x-85.656,r=0.9992,柴胡皂苷a在2.8725～22.98μg之间具有良好的线性关系;柴胡皂苷d:y=309.83 x-8.7877,r=0.9999,柴胡皂苷d在2.21～17.68μg间具有良好的线性关系。柴胡皂苷a的平均加样回收率为97.95%,柴胡皂苷d的平均加样回收率为98.48%。结论:此方法简便、快捷、准确,可用于柴胡药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定鱼腥草中金丝桃苷与槲皮苷的含量

目的用高效液相色谱法测定鱼腥草中金丝桃苷与槲皮苷的含量。方法采用ShimadzuC18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%H3PO4水溶液(45:55),流速1.0mL.min-1,检测波长350nm,柱温室温,用外标法定量,测定鱼腥草中金丝桃苷与槲皮苷的含量。结果金丝桃苷的线性范围0.50-2.50μg,r=0.9998,回收率102.47%,RSD1.04%;槲皮苷的线性范围0.40-2.00μg,r=0.9996,回收率97.92%,RSD2.13%。结论该方法简便,快速,线性关系良好。     

HPLC．DAD法测定银屑优化颗粒中芍药苷、甘草苷、落新妇苷、迷迭香酸和甘草酸

目的建立同时测定银屑优化颗粒中芍药苷、甘草苷、落新妇苷、迷迭香酸和甘草酸5种成分的HPLC-DAD测定方法。方法采用高效液相色谱波长切换法。Lichrospher C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长在230、254、290nm切换;体积流量为1mL／min;柱温为30℃;进样体积10μL。结果5种成分的线性关系良好。芍药苷在69．12~691．20ng线性关系良好,平均加样回收率为97．45％,RSD值为1．54％;甘草苷在39．02~390．20ng线性关系良好,平均加样回收率为97．10％,RSD值为1．90％;落新妇苷在30．03~300．30ng线性关系良好,平均加样回收率为99．98％,RSD值为1．22％;迷迭香酸在7．82~78．20ng线性关系良好,平均加样回收率为100．83％,RSD值为1．36％;甘草酸在31．09～310．90ng线性关系良好,平均加样回收率为97．52％,RSD值为1．49％。结论本方法具有方法简便、快速、准确等特点,可同时测定银屑优化颗粒中5种活性成分。     

病毒清口服液的质量标准研究

目的:建立病毒清口服液的质量标准研究.方法:采用TLC法对病毒清口服液中的佛手、甘草、金银花等进行定性鉴别;以HPLC法对其连翘中的连翘苷进行含量测定.色谱柱:依利特C18ODS柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(25:75),检测波长:277 nm;流速:1mL·min-1,柱温:25℃.结果:病毒清口服液中的佛手、甘草、金银花薄层色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;连翘苷对照品在0.0082-0.082μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均加样回收率为99.63％,RSD％为0.96％.结论:本方法准确可行,可作为本品的质量控制.     

针刺治疗偏头痛的疗效观察

目的 观察针刺治疗偏头痛的疗效。方法 针刺配合穴位注射野木瓜注射液治疗偏头痛，并与对照组相比较。结果与结论 治疗组总有效率92．6％，对照组总有效率76．9％，两组疗效具有显著性差异（P＜0．05），治疗组疗效明显高于对照组。     

液相色谱-质谱联用测定大鼠血浆中芍药内酯苷及其药动学研究

 目的建立大鼠血浆中芍药内酯苷的HPLC-MS/MS定量分析方法,并用于大鼠体内芍药内酯苷药动学研究。方法血浆样品采用固相萃取预处理。色谱柱为Symmetry C₁₈(4.6mm×50mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸溶液(25∶75)。采用三重四极杆质谱仪进行多反应监测方式(MRM),电喷雾离子源。对所建方法进行了较全面的验证。考察了3种剂量芍药内酯苷给与大鼠后的药动学特征。结果所建方法灵敏、重现性良好。芍药内酯苷在体内吸收迅速,消除也较快。经统计学检验表明,在给定的3个剂量范围内,芍药内酯苷具有线性动力学特征。结论建立的方法可用于芍药内酯苷的药动学研究。     

HPLC—ELSD法测定复方消经痛胶囊中黄芪甲苷的含量

目的建立复方消经痛胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法。方法采高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）法定量分析复方消经痛胶囊中黄芪甲苷的含量,色谱柱为AglientZORBAXSB-C18（250mm×4．6mm,5μm）,以乙腈-水（38：62）为流动相,流速0．85mL／min,柱温30℃;蒸发光散射（ELSD）检测器,漂移管的温度103℃,载气流速2．6L/min。进样量为10斗L。结果黄芪甲苷在1．33～4．522斗g范围内呈良好的线性关系,r=0．9990;平均回收率为100．13％,相对标准偏差（RSD）=1．024％,在常温下8h内稳定性良好。结论HPLC—ELSD法简便快速,准确,重现性好,结果可靠,可作为复方消经痛胶囊的质量控制方法。     

用细胞膜色谱法筛选研究红毛七中的有效成分

 目的筛选天然植物红毛七中对主动脉血管有舒张作用的有效成分。方法采用兔血管细胞膜色谱(cell membrane chromatography,CMC)模型筛选，液 固柱层色谱法分离，并结合离体药理实验确定红毛七中的有效成分。结果红毛七正丁醇部位(HMQ-4)是红毛七中对血管有舒张作用的有效部位，而由红毛七正丁醇部位中分离得到的成分(HMQ-44)则是其有效成分。结论血管CMC模型基本可以反映活性成分与细胞膜及膜受体的相互作用，而且活性成分在CMC体系中的保留特性与其离体药理作用有显著的相关性。     

甲苯磺丁脲主要代谢物的高效液相色谱分离纯化

 目的研究从生物体液(尿液)中分离纯化甲苯磺丁脲的两个主要代谢物羟基甲苯磺丁脲(OTOL)和羧基甲苯磺丁脲(CTOL)的方法,并对所得的产物进行鉴定和含量测定。方法收集健康人口服甲苯磺丁脲后12h尿液,酸化后用乙醚萃取,45℃水浴中氮气挥干,加体积分数50%甲醇水溶液溶解,过滤后注入制备液相色谱仪分离,分别收集两种代谢产物的色谱峰流分。将所得流分酸化后再用乙醚提取,吹干,得白色结晶,即产物。取少量产物用甲醇水溶液溶解后进行定性定量分析。结果制备得到纯度为97.7%的CTOL白色结晶。结论本制备方法经济简便、成功有效。所获得的CTOL纯度达到预期目的。     

HPLC测定布渣叶中牡荆苷的含量

目的:建立测定布渣叶中牡荆苷含量的高效液相色谱法.方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)柱分离,以甲醇-0.4％磷酸溶液(30∶70)为流动相,柱温为35℃,在339 nm处检测.结果:牡荆苷在88.96～2 224μg质量与峰面积呈良好的线性关系;牡荆苷的平均回收率为98.61％( RSD 1.32％).广东的布渣叶其牡荆苷含量要比广西的普遍要高,均符合现行版药典规定.结论:本法操作简便,准确度高,重复性好,可作为布渣叶质量控制方法之一.