银杏叶提取物对培养的海马神经元内谷氨酸诱导钙信号的影响

目的：检测银杏叶提取物（ginkgo biloba extract,GBE)对谷氨酸升高培养的海马神经元内游离钙离子浓度（[Ca^2+]i)的影响和特征。方法：实验设计分3组（n=26)，向细胞吹药各20s；①组1&;#215;10^-5mol/L谷氨酸，②组同时1&;#215;10^-5mol/L谷氨酸。25μg/mlGBE,③组即在②组回到基线后给1&;#215;10^-5mol/L谷氨酸。结果：①组[(Ca^2+]i明显升高，②组[Ca^2+]i的变化明显变小，其峰值明显下降，且Phase1上升速度减慢，Phase2的时间了有所缩短，二相之间的平台期相对延长，③组出现①组中相似的钙震荡表现，但Phase1和Phase2的时间均缩短，[Ca^2+]i的变化销低。结论：GBE通过影响NMDA受体的活动。快速抑制谷氨酸诱导大鼠海马神经元内游离钙浓度升高。     

银杏叶提取物对糖尿病性脑病大鼠的保护作用

目的：研究糖尿病性脑病与海马区神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达及一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量的关系及应用银杏叶提取物（EGb）治疗的效果和机制。方法：雄性Wistar大鼠30只随机分为3组各10只，A组为正常对照大鼠，B、C组按链脲佐菌索（STZ）制成糖尿病大鼠模型，C组应用EGb治疗。1个月后水迷宫试验观察3组大鼠行为学改变，免疫组化检测海马nNOS表达，脑组织匀浆检测NO、MDA水平。结果：①水迷宫试验，B组大鼠出现学习、记忆功能障碍，C组则明显减轻（P〈0．01）。②nNOS表达，A组无显示，B组海马区呈强阳性表达，C组表达低于B组（P〈O．01）。③NO、MDA水平，B组均明显升高，C组显著低于B组（P〈0．01）。结论：海马区nNOS表达升高是糖尿病性脑病发生的重要因索，EGb可下调nNOS表达，对糖尿病性脑病有较好的治疗作用。     

银杏叶提取物对幼年期大鼠惊厥后海马caspase-3 FasL表达的影响

目的研究幼年大鼠反复惊厥后海马组织caspase-3、FasL表达的变化及银杏叶提取物干预对其的影响。方法108只加日龄健康SD大鼠随机分为三组：正常对照组、惊厥组及银杏叶提取物干预组，通过三氟乙醚反复吸入（每天1次，连续6d），制作幼年大鼠惊厥动物模型。用免疫组化（sP）法检测各组动物反复惊厥结束后1、3、7d海马组织中caspase-3和Fa8L蛋白的表达，RT—PCR方法检测各时相点海马组织中caspase-3mRNA的表达。结果反复惊厥结束后1、3、7d海马组织均有caspase-3、FasL的表达，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。银杏叶提取物干预组海马各时间点ca8pase-3mRNA及caspa8e-3、FasL蛋白的表达均较惊厥组显著下调（P〈0．05）。结论caspase-3、FasL参与了幼年期惊厥性脑损伤。银杏叶提取物对幼年期惊厥性脑损伤的保护机制，可能与抑制海马caspase-3、FasL的异常表达有关。     

山莨菪碱对体外培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用

目的:研究山莨菪对培养神经细胞谷氨酶兴奋毒性的作用.方法:体外培养新生SD大鼠皮层神经细胞,在谷氨酸处理神经细胞前后分别加入10-6、10-4mol/L的山莨菪碱,观察山莨菪碱对谷氨酸所致神经细胞损伤的作用及对乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和超氧化歧化酶(SOD)含量与活性的影响.结果:山莨菪碱能显著改善神经细胞受损的形态结构,减少细胞死亡数,降低LDH和NO含量,抑制MDA生成,提高SOD活性,且效应与药物浓度成正比.结论:山莨菪碱对体外培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性具有明显的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化有关.     

原代海马神经元兴奋毒性模型的建立及存活率的检测与意义

目的探讨和观察药物对神经元的损伤及保护作用。方法在体外进行海马神经元原代培养并建立谷氨酸兴奋毒作用模型；采用台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶检测和程序性细胞死检测技术进行原代培养海马神经元存活率检测。结果神经元的损伤程度与谷氨酸浓度相关，NMDA受体拮抗剂MK-801对谷氨酸引起神经元死亡有明显的保护作用。结论谷氨酸通过NMDA受体引起细胞损伤，该神经元培养模型可用于谷氨酸兴奋毒作用的研究。     

银杏叶提取物抗老年痴呆及衰老的作用机制

探讨银杏叶提取物对老年痴呆及衰老的改善作用机理，证明银杏叶提取物对老年痴呆及衰老的改善作用的有效性。     

银杏叶提取物对糖尿病学习记忆功能障碍大鼠脑内载脂蛋白E mRNA表达的影响

目的：以旷场分析法和Morris水迷宫法，结合反转录-聚合酶链反应方法，探讨银杏叶提取物对糖尿病学习记忆功能障碍大鼠大脑皮质和海马载脂蛋白EmRNA表达的影响。 方法：实验于2003—09／2005—08在广西医科大学实验中心完成。①56只大鼠随机分为5组，分别为正常对照组、糖尿病模型对照组、糖尿病模型＋胰岛素10u／kg组、糖尿病模型＋银杏叶提取物100mg／kg组、糖尿病模型＋银杏叶提取物50mg／kg组，除正常对照组为12只，其余各组为11只。②腹腔注射佐链霉素55mg／kg建立糖尿病模型，以旷场分析法和Morris水迷宫法考察各组大鼠学习记忆能力，用反转录-聚合酶链反应方法检测糖尿病学习记忆功能障碍大鼠脑内皮层和海马载脂蛋白EmRNA的表达。 结果：参加实验大鼠56只，进入旷场分析及Morris水迷宫实验53只大鼠，饲养过程中糖尿病模型对照组、糖尿病模型＋胰岛素10u／kg组、糖尿病模型＋银杏叶提取物50mg／kg组各有1只死亡。正常对照组取lO只，其余各组取8只大鼠进入目的基因反转录-聚合酶链反应分析。①旷场分析示，糖尿病组较正常对照组中央格停留时间延长、探洞次数减少，银杏叶提取物组较糖尿病组中央格停留时间缩短，探洞次数显著增加。②Morris水迷宫示糖尿病组逃避潜伏期延长．搜寻平台策略成绩较正常对照组降低。银杏叶提取物组逃避潜伏期较糖尿病组缩短，搜寻平台策略成绩较糖尿病组升高。③目的基因反转录-聚合酶链反应示糖尿病组海马的载脂蛋白EmRNA表达水平较正常对照组明显增加，而糖尿病组皮层的载脂蛋白EmRNA表达水平较正常对照组未见明显影响（P〉0．05），银杏叶提取物100，50mg／kg治疗组海马的载脂蛋白EmRNA的表达水平较糖尿病组均明显降低，而银杏叶提取物100，50mg／kg治疗组皮层的载脂蛋白EmRNA表达水平较糖尿病组未见明显影响（P〉0．05）。 结论：银杏叶提取物可明显抑制糖尿病学习记忆功能障碍大鼠脑内海马载脂蛋白EmRNA的表达水平，提示银杏叶提取物对糖尿病大鼠学习记忆功能障碍有明显的保护作用。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠海马胆碱能纤维的影响

背景：银杏叶提取物对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠的记忆功能及海马胆碱能纤维的影响，是目前国内外研究的热点，具有重大理论意义。目的：研究银杏叶提取物对VD的治疗作用及其机制。设计：随机对照实验研究。地点和对象：实验在华中科技大学同济医学院神经生物学教研室完成。实验动物采用纯种雄性Wistar大白鼠49只，体质量220～280g(华中科技大学实验动物中心供给)。干预：成年Wistar雄性大鼠49只随机分为假手术组(n=9)、VD模型组(n=40)。用避暗试验测定假手术组和VD模型组手术7d后的学习、记忆功能。将出现明显学习、记忆功能障碍的36只VD模型大鼠随机分为4组：模型对照组及银杏叶提取物低、中、高剂量组，每组9只动物，各组分别给予生理盐水1mL／100g、银杏叶提取物100，150，200mg／ks灌胃10d后，再用明、暗箱装置测定各组大鼠的学习、记忆功能。用胆碱酯酶染色观察了各组大鼠海马胆碱能纤维的密度。主要观察指标：①GBE对VD大鼠避暗试验的影响。②CA1区胆碱能纤维染色的结果。结果：与假手术组比较，模型组大鼠学习训练中错误次数明显增多，遭受电击的累积刺激时间(cumulated stimulation time，CST)明显延长；记忆测试中小鼠从放人明室到进入暗室遭受电击的步人潜伏期(step throush latency，STL)明显缩短，错误次数明显增多，CST明显延长(P&;lt;0．01)。与模型对照组比较，银杏叶提取物中、高剂量组学习训练中小鼠首次遭受电击后从暗室逃人明室的逃避潜伏期(escape latency，EL)明显缩短，银杏叶提取物低、中、高剂量组错误次数明显减少(P&;lt;0．01)；记忆测验中银杏叶提取物低、中、高剂量组STL明显延长，EL明显缩短，CST明显缩短，错误次数明显减少。在光镜下可以观察到：模型组与假手术对照组比较大鼠海马CA1区胆碱能纤维密度明显稀疏，吸光度明显降低(P&;lt;0．01)。银杏叶提取物低、中、高剂量治疗组与模型对照组比较大鼠海马CA1区胆碱能纤维密度明显变密，吸光度明显升高(P&;lt;0．01)，表明GBE可以增加VD大鼠海马CA1区乙酰胆碱的含量。结论：GBE对VD大鼠有显著的治疗作用，其机制可能与增加海马胆碱能纤维的密度有关。     

KA1表达再分布对神经元兴奋毒性的影响

背景：特异的兴奋性神经递质受体过度活化时便发生细胞的兴奋性中毒,有关NMDA受体和AMPA受体活化致细胞兴奋性中毒死亡通路较为明确,但关于红藻氨酸（Kainate,KA）受体的功能到目前为止仍未明了。目的：探究小鼠海马内注射KA之后KA1受体的再分布状况对中枢神经元兴奋性中毒的影响。方法：成年雄性C57BL6小鼠海马内注射KA或PBS,2h后进行Bederson体征评分、全脑切片免疫组化分析和死亡神经元检测。结果与结论：海马内注射KA2h后,Bederson体征评分表明中枢神经功能出现明显损伤;KA1受体表达的变化主要出现在海马CA1和CA3区,在CA1区的表达上调明显,并开始出现神经元死亡,4~6h后可见大量神经元死亡。结果表明KA促使KA1受体亚单位在海马神经元CA区重新分布,增加神经元对兴奋性氨基酸毒性的敏感性,导致神经细胞死亡,中枢神经功能缺失。     

银杏叶提取物对培养的海马神经元内谷氨酸诱导钙信号的影响

目的检测银杏叶提取物(ginkgobilobaextract,GBE)对谷氨酸升高培养的海马神经元内游离钙离子浓度(犤Ca2+犦i)的影响和特征。方法实验设计分3组(n=26),向细胞吹药各20s:①组1×10-5mol/L谷氨酸,②组同时1×10-5mol/L谷氨酸。25μg/mlGBE,③组即在②组回到基线后给1×10-5mol/L谷氨酸。结果①组犤Ca2+犦i明显升高,②组犤Ca2+犦i的变化明显变小,其峰值明显下降,且Phase1上升速度减慢,Phase2的时间也有所缩短,二相之间的平台期相对延长,③组出现与①组中相似的钙震荡表现,但Phase1和Phase2的时间均缩短,犤Ca2+犦i的变化稍低。结论GBE通过影响NMDA受体的活动。快速抑制谷氨酸诱导大鼠海马神经元内游离钙浓度升高。     

银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注后自由基损伤的保护作用

目的 :研究银杏叶提取物 (GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后SOD、MDA及NO含量的影响 ,探讨GBE的脑保护作用的机制。方法 :4 0只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组 (A)、缺血组 (B)、小剂量GBE组 (C)、大剂量GBE组 (D)。制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。C、D组于术前 30min及术后 1h分别给予银杏叶提取物2 0mg/Kg、4 0mg/Kg腹腔内注射。应用TTC染色观察梗死体积、检测脑缺血组织SOD活性、MDA和NO含量。结果 :①SOD活性C、D组明显高于B组 (P <0 .0 1) ,D组高于C组 (P <0 .0 5 )。②MDA和NO含量C、D组明显低于B组(P <0 .0 1) ,D组低于C组 (P <0 .0 5 )。③梗死体积C、D组明显小于B组 (P <0 .0 1) ,D组小于C组 (P <0 .0 5 )。结论 :银杏叶提取物可减少脑缺血再灌注后自由基生成及梗死体积 ,疗效与剂量有关。     

银杏叶提取物联合尼莫地平治疗血管性眩晕患者的临床效果及对椎基底动脉血流量的影响

目的观察银杏叶提取物联合尼莫地平治疗血管性眩晕患者的临床效果及对椎基底动脉血流量的影响。方法选取血管性眩晕94例,依据治疗方法不同将其分为观察组和对照组两组各47例。观察组采用银杏叶提取物联合尼莫地平治疗,对照组采用尼莫地平治疗。比较两组治疗后临床效果、治疗前后椎基底动脉血流量、治疗后生活满意度和治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,观察组总有效率为95.74%高于对照组总有效率78.72%,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后,两组左椎动脉、右椎动脉和基底动脉血流量均较治疗前增加;观察组左椎动脉、右椎动脉和基底动脉血流量均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。治疗后3、6、9和12个月,观察组生活满意度量表评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗期间,观察组不良反应总发生率为21.28%高于对照组不良反应总发生率12.77%,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论银杏叶提取物联合尼莫地平治疗血管性眩晕患者能提高临床效果,改善椎基底动脉血流量,且患者生活满意高,安全性好。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠体内氧化应激的影响

目的观察银杏叶提取物对糖尿病(DM)大鼠体内氧化应激水平的影响。方法利用Wistar大鼠建立糖尿病模型,将糖尿病大鼠分为糖尿病组(DM)和银杏叶治疗组(GBE),另设正常组动物为对照。DM组和正常对照组大鼠每日通过腹腔注射给予生理盐水0.83ml.kg-1,GBE组大鼠每日通过腹腔注射给予GBE0.83ml.kg-1,连续注射30天后取血测定各组大鼠血清中丙二醛(MDA)含量和超氧阴离子(O2-)水平,然后取出胰腺、肾脏测定MDA含量并采用免疫组化S-P法(链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶)检测肾脏蛋白激酶C(PKC)的表达。结果与正常对照组相比,DM组和GBE组大鼠血清、肾脏和胰腺中MDA的含量及血清中超氧阴离子(O2-)的水平显著升高(P0.05);GBE组大鼠血清、肾脏和胰腺中MDA的含量及超氧阴离子(O2-)的水平显著低于DM组(P0.05)。免疫组织化学染色结果表明,DM组PKC表达显著强于GBE组。结论银杏叶提取物可减轻糖尿病大鼠体内的氧化应激水平,具有抗氧化作用,对糖尿病并发症的发生发展具有一定的预防作用。     

Egb761对大鼠海马神经细胞缺血再灌注损伤保护作用的形态学研究

目的：从形态学探讨Egb761对大鼠海马神经细胞缺血再灌注损伤保护作用。方法：用四血管法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。24只大鼠随机分为3组（分别为假手术组,缺血再灌注组和Egb761治疗组）。观察海马神经元缺血再灌注后HE染色、TUNEL染色及透射电子显微镜下改变。结果：海马神经原水肿、凋亡等改变在缺血再灌注组明显高于假手术组,Egb761组介于上述两组之间。结论：缺血再灌注后神经细胞发生水肿、凋亡、坏死等形态学改变,Egb761对大鼠海马神经细胞缺血再灌注损伤具有保护作用。     

银杏叶提取物对阿尔茨海默病大鼠认知功能的影响及其作用机制

目的:研究银杏叶提取物(EGB)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠认知功能的影响及其作用机制。方法:SD大鼠48只随机分为6组,各组8只:假手术组,腹腔注射等量生理盐水;对照组,腹腔注射半乳糖60mg/kg,1次/天,连续8周;银杏叶低、中、高剂量组(EGB-L,M,H组),分别腹腔注射半乳糖60mg/kg+EGB 0.4375mg/kg、0.875mg/kg及1.75mg/kg,1次/天,连续8周;治疗组,腹腔注射半乳糖60 mg/kg,1次/天,连续8周,然后注射EGB0.875mg/kg,1次/天,连续2周。Y迷宫测定大鼠认知能力;TUNEL法检测海马CA1区细胞凋亡;免疫组织化学法和Western Blotting检测p-PI3K、p-AKt、PI3K、AKt、Caspase-9p35的表达。结果:与假手术组相比,对照组大鼠达到学会标准的平均时明显延长,海马CA1区可见到较多TUNEL阳性细胞,p-PI3K及p-AKt的活性明显降低,Caspase-9p35的表达明显增加(均P<0.05);银杏叶各剂量组的上述指标较对照组均有不同程度改善(均P<0.05);治疗组与对照组相比,TUNEL阳性细胞数和Caspase-9p35表达的改善不明显,大鼠达到学会标准的平均时及p-PI3K、p-AKt的活性均有显著改善(均P<0.05)。结论:AD大鼠有认知障碍,海马CA1区存在细胞凋亡及PI3K-AKt-caspase-9转导通路的障碍,EGB能激活这一通路并能改善其海马CA1区细胞凋亡和大鼠认知障碍,预防效果比治疗效果更优。     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :探讨银杏叶提取物 (GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。 40只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组 (A组 )、缺血组 (B组 )、小剂量GBE组 (C组 )、大剂量GBE组 (D组 )。C、D 2组于术前 3 0min及术后 1h分别给予银杏叶提取物 2 0mg/kg、40mg/kg腹腔内注射。应用TTC染色及HE染色观察梗死体积及缺血坏死程度 ,应用TUNEL法检测凋亡细胞数。结果 :①C、D 2组梗死体积明显小于B组 (P <0 .0 1) ,D组小于C组 (P <0 .0 5)。②C、D 2组凋亡细胞数明显少于B组 (P <0 .0 1) ,D组少于C组 (P <0 .0 5)。结论 :银杏叶提取物可减少脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和梗死体积 ,疗效与剂量有关     

银杏叶制剂在治疗脑血管疾病中的临床应用

简要总结了近年来银杏叶制剂治疗脑出血、脑缺血和血管性痴呆的方法、疗效及其副作用。     

EGb761对氧化应激诱发的小鼠TIA样发作及相应血管内皮功能的干预作用

目的：探讨银杏叶提取物EGb761对氧化应激诱发的小鼠短暂性脑缺血（TIA）样发作及相应血管内皮功能的影响。方法：通过尾静脉注射t-BHP加低氧制备昆明小鼠TIA样发作模型,EGb761于造模前30 min腹腔注射,93只昆明小鼠随机分为2大组：①A组45只,其中A1组（模型组）、A2组（EGb761 10 mg/kg组）、A3组（EGb761 20 mg/kg组）各15只,比较各组小鼠症状出现率、卒中指数、神经系统症状评分;②B组48只,其中B1组（对照组）、B2组（模型组）、B3组（EGb761 10 mg/kg组）、B4组（EGb761 20 mg/kg组）各12只,比较各组小鼠血总NOS（tNOS）、诱导型NOS（iNOS）活力和NO、ET-1含量。结果：与B1组相比,B2组TIA样发作前血NO含量、tNOS活力降低,ET-1含量升高（P0.05）,而iNOS活力无明显变化;EGb761可升高小鼠血清NO含量和tNOS活力,降低ET-1含量,降低症状出现率,延迟症状出现时间,降低症状评分（P0.05）。结论：氧化应激损伤血管内皮功能,造成血管痉挛,诱发小鼠TIA样发作;EGb761可部分对抗这一过程并可能呈剂量依赖性。     

银杏叶制剂联合星状神经节阻滞治疗偏头痛疗效观察

目的:观察银杏叶制剂复合星状神经节阻滞治疗偏头痛的近期疗效。方法:偏头痛患者75例,随机分为3组:银杏叶制剂组(A组)、星状神经节阻滞组(B组)和C组为联合组(A+B组),每组25例。观察疼痛强度、头痛持续时间及治疗的总有效率。结果:3组病例治疗后偏头痛均有改善,疼痛强度减轻,头痛持续时间缩短(P <0.01);与A、B组相比较,C组疼痛强度减轻更明显(P <0.05),头痛持续时间更短(P <0.05),总有效率显著提高(P <0.05)。结论:银杏叶制剂复合星状神经节阻滞治疗偏头痛,可以缩短病程,改善头痛症状,近期效果令人满意。