藿香正气口服液治疗大鼠湿困脾胃证尿液代谢组学研究

摘要：目的 从代谢网路层面阐明大鼠湿困脾胃证本质及藿香正气口服液的治疗效果。方法 采用综合物理造模方法造成湿困脾胃证大鼠。观察大鼠脏器系数变化和结肠组织病理改变,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清免疫球蛋白G（IgG）水平,并利用核磁共振氢谱（1H-NMR）技术建立大鼠尿液的代谢物谱图,分析藿香正气口服液治疗湿困脾胃证大鼠后相关潜在生物标志物的变化。结果 与正常对照组动物比较,湿困脾胃证大鼠胸腺、脾脏系数降低及IgG水平减少,尿液代谢物组发生显著改变。藿香正气口服液能提升湿困脾胃证大鼠胸腺、脾脏系数及IgG水平。同时,藿香正气口服液能对湿困脾胃证大鼠尿液代谢紊乱产生有效的干预,并对尿液中与湿困脾胃证相关的5个潜在生物标志物产生显著的回调。结论 本研究表明藿香正气口服液治疗大鼠湿困脾胃证的机制可能与调节IgG水平和机体三羧酸循环、肠道菌群改变有关。     

藿香正气散对湿困脾胃型亚健康大鼠胃肠功能的影响

目的：研究藿香正气散对湿困脾胃型亚健康模型大鼠胃肠功能的影响。方法：给予湿困脾胃型亚健康模型大鼠藿香正气散,通过对胃残留率、小肠推动率、胃泌素、胃动素、血清葡萄糖、总蛋白、甘油三酯等指标的检测,研究其调节模型动物胃肠功能的机理。结果：藿香正气散能改善湿困脾胃型亚健康大鼠的一般状态,显著提高模型动物小肠推进率,减少胃残留率,改善其胃肠激素和物质能量代谢水平。结论：藿香正气散能改善模型动物的胃肠功能,这可能是其防治湿困脾胃型亚健康的作用机制之一。     

藿香正气口服液对湿困脾胃证大鼠尿液代谢组学的影响北大核心CSCD

目的从代谢网路层面阐明大鼠湿困脾胃证本质及藿香正气口服液的治疗效果。方法采用综合物理造模方法造成湿困脾胃证大鼠。观察大鼠脏器系数变化和结肠组织病理改变,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清免疫球蛋白G(IgG)水平,并利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)技术建立大鼠尿液的代谢物谱图,分析藿香正气口服液治疗湿困脾胃证大鼠后相关潜在生物标志物的变化。结果与对照组比较,湿困脾胃证大鼠(模型组)脾脏、胸腺系数及血清IgG水平显著降低(P<0.05),尿液代谢物组发生显著改变(P<0.05)。与模型组比较,藿香正气口服液能提高湿困脾胃证大鼠胸腺、脾脏系数及IgG水平,差异有统计学意义(P<0.05)。藿香正气口服液能对湿困脾胃证大鼠尿液代谢紊乱产生有效的干预,并对尿液中与湿困脾胃证相关的5个潜在生物标志物产生显著的回调,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论藿香正气口服液治疗大鼠湿困脾胃证的机制可能与调节IgG水平以及机体三羧酸循环、肠道菌群改变有关。     

藿香正气散对湿困脾胃型亚健康动物免疫及代谢功能的影响

目的 探讨藿香正气散对湿困脾胃型亚健康模型大鼠免疫及代谢功能的影响.方法 给予湿困脾胃型亚健康模型大鼠藿香正气散,通过对一般体征、血清电解质、脏器系数、血清葡萄糖、总蛋白、甘油三酯、血清白介素-6(IL-6)、免疫球蛋白G(IgG)含量等相关指标检测,研究其对湿困脾胃动物免疫及代谢功能的调节作用.结果 藿香正气散能改善模型大鼠一般体征,增加自发活动次数,增加脾脏、胸腺脏器系数,增加血清糖、蛋白、脂类含量,降低血清K<'+>,Na<'+>,Cl<'->含量,降低血清IL-6的含量,增加血清IgG含量.结论 藿香正气散能改善模型动物的免疫及代谢功能,这可能是防治湿困脾胃型亚健康的作用机制之一.     

藿香正气口服液干预湿困脾胃证大鼠的血清和粪便代谢组学研究

目的从代谢通路角度阐明湿困脾胃证的本质及藿香正气口服液的干预作用。方法采用综合物理造模方法制备湿困脾胃证大鼠模型。测量体质量、体长、尾长、腹围指数等宏观体征指标和自主活动次数。利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)技术建立大鼠血清和粪便的代谢物谱图,分析藿香正气口服液给药后湿困脾胃证大鼠相关潜在生物标志物的变化。结果与对照组比较,模型组大鼠体质量降低,体长增长缓慢,腹围指数增加,自主活动次数减少;血清和粪便代谢物组发生显著改变。藿香正气口服液能改善模型大鼠宏观体征和行为学指标。同时,藿香正气口服液能对湿困脾胃证大鼠血清和粪便代谢紊乱产生有效的干预,并分别使血清和粪便中与湿困脾胃证相关的6个和8个潜在生物标志物产生显著地回调。结论藿香正气口服液通过调节肠道菌群及逆转机体能量代谢和氨基酸代谢紊乱来干预大鼠湿困脾胃证。     

基于 GC-TOF/MS 代谢组学技术探讨藿香正气滴丸干预湿困脾胃型大鼠的作用机制

目的 通过基于气相色谱-飞行时间质谱联用 （GC-TOF/MS）技术的代谢组学方法探讨藿香正气滴丸干 预湿困脾胃型大鼠的作用机制。方法 将雄性 SD 大鼠随机分为正常组、模型组和藿香正气滴丸组 （1 g·kg-1 ）。 采用综合物理模型复制方法结合饮食失节制备湿困脾胃大鼠模型。灌胃给药,每日 1 次,连续给药 10 d。观察 大鼠宏观体征和行为学指标 （体质量、体长、尾长、腹围指数与自主活动次数）。利用 GC-TOF/MS 方法对大鼠 血清和尿液代谢组进行分析,鉴定与湿困脾胃相关的潜在生物标志物,分析藿香正气滴丸干预湿困脾胃型大鼠 的代谢通路。结果 与正常组比较,模型组大鼠的体质量、体长、尾长、自主活动次数明显减少 （P＜0.05）, 腹围指数明显升高 （P＜0.05）。与模型组比较,藿香正气滴丸组大鼠的体质量、体长、自主活动次数明显增加 （P＜0.05）,腹围指数明显降低 （P＜0.05）。在大鼠血清、尿液中分别鉴定了 38、44 个与湿困脾胃相关的潜在 生物标志物。藿香正气滴丸对模型大鼠的血清和尿液代谢表型能产生有效的干预,并能使血清、尿液中的 17、13 个潜在生物标志物水平显著回调,共涉及 7 条代谢通路。结论 藿香正气滴丸对湿困脾胃型大鼠的干 预机制可能与调节色氨酸代谢、组氨酸代谢、谷氨酸-谷氨酰胺代谢、能量代谢及肠道菌群等有关。     

香薷挥发油对湿困脾胃证模型大鼠的作用

目的探讨香薷挥发油对湿困脾胃证模型大鼠的治疗作用,为香薷化湿和中传统功效提供现代药理学依据。方法以饮食不节、潮湿环境、强迫游泳方法建立湿困脾胃证大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组,挥发油低、中、高剂量组,吐温-80组,阳性药组,每组10只。造模后,灌胃给药治疗15 d,测量大鼠体质量、进食量、饮水量、排尿量、大便量、脾脏及胸腺的脏器系数及胃排空、小肠推进率和肠管含水量等指标,并检测大鼠血清胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、Na+-K+-ATP酶、淀粉酶(AMS)、白细胞介素-6(IL-6)、免疫球蛋白G(Ig G)、水通道蛋白2(AQP2)和组织病理改变等指标。结果与模型组比较,各给药组大鼠体质量、摄食量、饮水量、小便量、脾脏及胸腺的脏器系数、胃排空和小肠推进率、大便湿重和肠管含水量、大鼠血清Na+-K+-ATP酶、AMS活性、GAS、Ig G水平、IL-6、MTL、AQP2水平均有所改善,差异有统计学意义。结论香薷是通过梳理胃肠气机、调节水液代谢和机体免疫,提高中焦脾胃健运发挥治疗作用,从而具有化湿和中的功效。     

藿香正气液对湿阻证大鼠回肠黏膜ZO-1表达的影响

目的:研究藿香正气液对湿阻证大鼠回肠黏膜紧密连接蛋白(ZO-1)表达的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常组、模型组、藿香正气液组,每组8只。正常组常规喂养,其余各组采用改进的环境加疲劳法制造湿阻证模型,连续造模6 d。造模成功后正常组和模型组予生理盐水ig(20 mL.kg-1),治疗组予藿香正气液ig(20 mL.kg-1),1次/d,连续8 d。采用RT PCR方法观察回肠黏膜ZO-1的表达情况。结果:与正常组相比,模型组大鼠脾虚症状明显,胃肠黏膜有明显充血水肿,且胃黏膜有明显出血点及血块,且回肠黏膜ZO-1表达减少(P<0.01),而藿香正气液组表达增加(P<0.01)。结论:藿香正气液可明显改善湿阻证大鼠脾虚腹泻等症状,其机制可能与提高回肠黏膜ZO-1的表达量有关。     

平胃散水煎液对湿困脾胃证大鼠疲劳状态的改善作用

目的:探讨平胃散对湿困脾胃证大鼠疲劳状态的改善作用及其机制。方法:将大鼠随机分为空白对照组,模型组,平胃散高、中、低剂量组。造模第8天平胃散各剂量组分别灌胃平胃散水提液1.5,3,6 g.kg-1。空白对照组、模型组灌胃等量生理盐水,给药7 d后观测大鼠力竭游泳时间;检测血浆乳酸(LA)、血清乳酸脱氢酶(SLDH)、血清尿素氮(SUN)、肝糖原含量、血红蛋白(Hb)的含量。结果:平胃散高、中、低剂量组均能不同程度地改善模型大鼠的行为学表现,提高大鼠力竭游泳时间。与模型组比较,高剂量组肝糖原含量显著增高(P<0.01),高、中剂量组SUN含量显著降低(P<0.05)。各组大鼠Hb,LA,SLDH水平未见明显差异。结论:平胃散改善湿困脾胃证疲劳状态的作用可能与减少在运动负荷下的蛋白质与氨基酸的分解,提高肝糖原的含量有关。     

藿香正气液对湿阻证大鼠抗氧化作用及对胃黏膜EGFR表达的影响

目的:研究藿香正气液对湿阻证大鼠抗氧化作用及对胃黏膜表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为正常组、模型组、藿香正气液组,每组8只.正常组常规喂养,其余各组采用改进的环境加疲劳法制造湿阻证模型,连续造模6d.造模成功后,正常组和模型组予生理盐水ig(20 mL·kg-1),治疗组予藿香正气液ig (20 mL·kg-1),1次/d,连续8d.采用比色法检测血清中褪黑素(MT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)的含量变化,并用免疫组化方法观察胃黏膜EGFR表达的情况.结果:与正常组相比,模型组大鼠脾虚症状明显,胃黏膜有明显充血水肿,并有出血点及血块,血清MT及GSH-Px含量降低(P＜0.05),MDA含量增高(P＜0.05);经藿香正气液治疗后,与模型组比较,血清MT及GSH-Px含量增高(P＜0.05),而MDA(P ＜0.05)含量降低;免疫组化结果显示模型组大鼠胃黏膜EGFR表达减少(P＜0.05),藿香正气液组则明显增加(P＜0.05).结论:藿香正气液可明显改善湿阻证大鼠脾虚症状并对胃黏膜损伤有保护作用,其机制可能与增强机体抗氧化应激能力及提高胃黏膜EGFR的表达量有关.     

藿香正气液灌肠联合抗生素治疗小儿腹泻的临床疗效

目的:研究分析腹泻患儿的治疗过程中使用藿香正气液联合抗生素与单纯使用抗生素治疗的差异,总结其临床疗效。方法:对实习单位的128例腹泻患儿进行治疗,分为治疗组与对照组,治疗组使用藿香正气液灌肠,对照组使用阿莫西林克拉维酸钾针100g·kg-1·d-1+利巴韦林10g·kg-1·d-1进行治疗。结果:治疗组患者在使用藿香正气液进行灌肠治疗后效果显著,与对照组患者的治疗效果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在对小儿腹泻的治疗过程中,使用藿香正气液灌肠治疗可以安全、有效地提高患儿的治疗有效性,值得在临床上进行推广使用。     

藿香正气水质量控制研究概况

综述了国内近１０年来，有关藿香正气水的含醇量测定、产品澄明度、成分鉴别、含量测定等方面的研究进展。     

藿香正气微乳与藿香正气水的急性毒性与药效比较研究

目的:比较藿香正气微乳与藿香正气水2种剂型的急性毒性反应及主要药效学指标。方法:以最大给药量试验比较藿香正气微乳与藿香正气水对小鼠的急性毒性反应;采用番泻叶诱导小鼠腹泻模型,以腹泻指数、胃泌素、胃动素为指标,以ED50值为标准,比较2种剂型的止泻作用强度。结果:藿香正气水对小鼠的急性毒性明显高于藿香正气微乳;藿香正气微乳与藿香正气水的ED50值相近。结论:藿香正气微乳的安全性明显高于藿香正气水;藿香正气微乳对番泻叶腹泻模型小鼠的止泻作用与藿香正气水基本相当。     

藿香正气水含量测定方法的改进

目的改进藿香正气水的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,C18柱;流动相:乙腈-水-磷酸(55∶50∶0.1);以厚朴酚、和厚朴酚为对照品,外标法定量;检测波长294nm。结果和厚朴酚在0.054～2.172μg、厚朴酚在0.051～2.052μg(r=0.9999,n=5)范围内线性关系良好;和厚朴酚平均回收率为100.1%,RSD=1.64%;厚朴酚平均回收率为99.97%,RSD=1.25%。结论该方法简便、快速、准确,可作为该制剂的质量控制方法。     

藿香正气水中橙皮苷转移率优化

目的:考察影响藿香正气水中橙皮苷含量的因素,提高橙皮苷的转移率。方法:采用HPLC测定各因素下橙皮苷的转移率。结果:控制陈皮药材的粒径在10 mm以下,用70%乙醇60℃下浸泡,低于65℃浓缩,橙皮苷的转移率较高。结论:采用此方法能有效地提高橙皮苷的转移率,保证成品中橙皮苷的含量。     

藿香正气水气相色谱指纹图谱特性研究

目的:建立藿香正气水的GC指纹图谱。方法:采用水蒸气蒸馏和正己烷萃取藿香正气水,以正十七烷为参照物经毛细管气相色谱柱(含FID检测器)进行了分析。结果:对10批次藿香正气水供试品进行检测,建立了该药品的GC指纹图谱并标示了16个共有指纹峰。各共有峰相对保留时间变化的RSD均在0.5%以内。结论:该方法准确、重现性好,为进一步质量标准化研究和控制提供依据。     

UPLC同时测定藿香正气口服液中甘草苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、甘草酸铵、厚朴酚、和厚朴酚的含量

目的: 建立同时测定藿香正气口服液中甘草苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、甘草酸铵、厚朴酚以及和厚朴酚6个成分的UPLC分析方法。 方法: 采用Zorbax Eclipse C₁₈柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,17%~20%A,5~12 min,20%~50%A,12~18 min,50%~70%A,18~18.5 min,70%~95%A,18.5~23.5 min,95%A),流速0.42 mL·min^-1,检测波长220 nm,柱温30℃。 结果: 甘草苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、甘草酸铵、和厚朴酚以及厚朴酚进样量分别在0.001 7~0.034,0.003 4~0.068,0.006 4~0.128,0.012 8~0.256,0.003 2~0.064,0.006 4~0.128 μg线性关系良好,平均加样回收率分别为103.3%,98.39%,98.29%,102.1%,98.45%,102.2%,RSD分别为2.1%,1.0%,1.5%,2.3%,0.90%,2.0%。 结论: UPLC分离效果及重复性好,且快速简便,可作为藿香正气口服液的质量控制方法。     

藿香正气滴丸质量标准提高研究

目的:完善藿香正气滴丸的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法鉴别处方中的广藿香油、白芷、厚朴、苍术、陈皮、甘草、紫苏叶油及半夏;采用高效液相色谱法测定处方中厚朴及陈皮的含量.色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-冰醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长294 nm.结果:在选定的薄层色谱条件下,色谱斑点清楚,分离效果较好;HPLC方法学考查表明处方中橙皮苷在0.199 1 ～3.982 0 μg(r =0.999 9)、和厚朴酚在0.135 4 ～2.707 0μg(r =0.999 9)、厚朴酚在0.107 2～2.144 0 μg(r =0.999 9)峰面积与其进样量线性关系良好,橙皮苷平均回收率为98.36％,RSD为0.86％;和厚朴酚平均回收率为100.60％,RSD 1.04％;厚朴酚平均回收率为98.11％,RSD 0.70％.结论:该方法快捷、准确,能够更加确切地反应制剂质量的真实情况.     

藿香正气散加减治疗慢性腹泻临床观察

目的：观察藿香正气散加减治疗慢性腹泻的临床治疗效果。方法：抽取2012年1月-2013年1月在本院就诊的102例慢性腹泻患者,分成观察组和对照组,各51例,观察组结合患者实际情况采用藿香正气散加减治疗法,对照组采用肯特令（蒙脱石散剂）进行治疗。比较两组患者的治疗效果。结果：观察组总有效率为92.15%,对照组总有效率为75.47%,观察组明显高于对照组,两组数据差异明显（P〈0.05）。结论：藿香正气散加减治疗慢性腹泻具有较好的临床治疗效果,值得在临床医学上推广使用。     

减味藿香正气水指纹图谱分析方法研究

目的:减味藿香正气水的HPLC指纹图谱研究,为质量控制提供有效的方法。方法:采用均匀设计法,将减味藿香正气水5味药组成10个处方,运用高效液相色谱研究指纹图谱。Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相water-aceton itrile(0.01m in,78∶22;10m in,76∶24;35m in,65∶35;45m in,60∶40;65m in,50∶50;80m in,35∶65;85m in,78∶22),254处检测;water-aceton itrile-m ethanol(0.01m in,98∶1∶1;5m in,94∶5∶1;15m in,89/l10;1;25m in,87∶12∶1;40m in,87∶12∶1;55m in,74∶25∶1;60m in,98∶1∶1),294nm处检测,流速1.0mL/m in。结果:方法学考察表明,建立的HPLC指纹图谱有良好的重现性。结论:利用减味藿香正气水的指纹图谱可在一定程度上进行质量控制。