固相萃取-高效液相色谱法测定人血清中头孢吡肟浓度

目的:建立高效液相色谱法检测人血清中头孢吡肟浓度。方法:血清经固相萃取后,在WatersSymmetryshieldRP18色谱柱上,以甲醇-20mmol·L-1醋酸铵溶液(13∶87)为流动相,流速1.0mL·min-1,波长检测254nm。结果:头孢吡肟的保留时间为6.82min,最低定量限为0.5mg·L-1,线性范围0.5~100.0mg·L-1,萃取回收率82.95%~86.25%,方法回收率98.05%~101.03%,日内RSD4.29%~9.83%,日间RSD5.21%~10.57%。结论:该法准确可靠,可用于头孢吡肟的临床药动学研究及临床特殊人群的血药浓度测定。     

HPLC法测定人血浆中头孢吡肟的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中头孢吡肟浓度的方法。方法:色谱柱为DiamonsilC18,流动相为20mmol.L-1醋酸铵溶液(冰醋酸调节pH值至5.00)-乙腈(90:10),流速为1.0mL.min-1,检测波长为254nm,进样量为20μL,柱温为室温。结果:头孢吡肟血药浓度在0.2～50.0μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9996),定量下限为0.2μg.mL-1;平均方法回收率为99.16%(RSD=1.29%),平均提取回收率为85.43%(RSD=2.37%),日内、日间RSD均<10%。结论:本方法简便、灵敏、快速、准确,可用于人血浆中头孢吡肟的药动学和生物利用度研究。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中头孢泊肟浓度

目的建立测定人血浆中头孢泊肟的反相高效液相色谱检测法.方法血浆样品用高氯酸溶液沉淀后上清液直接进样.色谱柱为C18柱,150mm×4.6mm,5μm ,流动相为1.50mmol·L-1高氯酸溶液-乙腈 (85∶15), 流速为1.20 mL·min-1,紫外检测波长:254nm. 外标法峰面积定量.结果测定方法在0.10 ～ 6.00 mg·L-1内具良好的线性关系,回收率为98.0%～110.0%,日内、日间RSD小于13%,最低检测浓度为0.10 mg·L-1.结论本测定方法具灵敏、准确、快速的优点,适用于头孢泊肟酯片剂的药代动力学和生物利用度研究.     

HPLC法测定人血浆中头孢泊肟的浓度

目的建立测定人血浆中头孢泊肟酯的活性代谢产物头孢泊肟浓度的高效液相色谱法,并应用于头孢泊肟酯干混悬剂在健康人体内的药动学研究。方法采用沉淀蛋白法进行样品预处理,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-20 mmol.L-1磷酸二氢铵缓冲液(体积比为9∶91,含6.6 mmol.L-1三乙胺,磷酸调pH值至2.0),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm,内标为头孢克洛。结果头孢泊肟浓度线性范围为0.102～6.528 mg.L-1,低、中、高3个质量浓度的提取回收率分别为92.0%、93.3%和92.1%,日内和日间精密度RSD(n=6)分别为3.3%、3.8%、2.0%和14.2%、2.9%、6.3%。头孢泊肟血浆样品室温放置2 h、预处理后室温放置24 h、经历1次及3次冷冻-解冻循环和-20℃冷冻情况下保存40 d均可保持稳定。结论此法适用于头孢泊肟酯药动学研究。     

HPLC法检测大鼠血浆中吡非尼酮的浓度及其药动学研究

目的:建立大鼠血浆吡非尼酮检测的高效液相色谱方法,研究吡非尼酮的药代动力学。方法:血浆经乙酸乙酯,采用ZORBAX SB-C18色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1%TFA(三氟乙酸),流速为1.0 mL·min-1;检测波长为318(0～8 min)、246nm(8～10 min)。6只雄性大鼠单剂量灌胃给予15 mg.kg-1吡非尼酮,分别在给药后多点尾静脉采血;用该方法检测血浆中吡非尼酮的浓度。用DAS(数据采集系统)计算药代动力学参数。结果:吡非尼酮浓度在0.025～4.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 9);定量下限为0.025 mg·L-1;低、中、高3个浓度的相对回收率分别为(100.40±4.66)%、(102.17±4.02)%和(101.12±2.89)%;日内RSD分别为4.6%,3.9%,2.9%,日间RSD分别为5.5%,4.8%,3.7%。大鼠吡非尼酮灌胃后,血浆吡非尼酮在0.39 h达到1.69 mg·L-1的峰值浓度,血浆半衰期为2.21 h。吡非尼酮在大鼠体内符合一级吸收的二室模型。结论:本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆吡非尼酮浓度的测定及其药代动力学研究。     

盐酸头孢吡肟的HPLC测定及有关物质检测

目的:建立盐酸头孢吡肟的HPLC测定及有关物质检测方法.方法:采用C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.015mol·L-1戊烷磺酸钠(9:91,pH 4.0),检测波长为258nm,流速0.8mL·min-1.结果:盐酸头孢吡肟在9.4～1 202μg·mL-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性关系(r=1.000 0),平均回收率为(100.87±1.69)%,最低检测限为3.55ng.结论:本法简便、专属和重现性好,可用于测定盐酸头孢吡肟含量及有关物质.     

高效液相色谱法测定盐酸吡格列酮的血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中盐酸吡格列酮浓度的方法.方法:以卡马西平为内标,血浆样品用醋酸乙酯萃取,采用Diamonsil(TM)C18柱(250 mm×4.6mm,5μm)分析.流动相为乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(pH 6.5)(42:58),流速1.2 mL·min-1,检测波长229 nm,柱温35℃.结果:本法在0.025～4.0 mg·L-1间线性关系良好,γ=0.999 9,RSD为2.08%,(n=6),最低检测质量浓度为0.02 mg·L-1.日内、日间精密度RSD均小于10%,低、中、高浓度的提取回收率均大于99%(n=5).结论:此方法灵敏度高、重复性好,尤其适用于临床治疗合并用药时的药物浓度监测.     

高效液相色谱法测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸含量

目的 改进中国药典2010年版中注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸的含量测定方法.方法 采用Agilent Extend-C18柱（5μm,4.6×250mm）,含0.015mol·L-1辛烷磺酸钠的0.1mol·L-1的磷酸二氢钠 （用氢氧化钠试液调节pH值至5.0）-甲醇（94：6）为流动相,流速：1.0mL·L-1,检测波长206nm,精氨酸浓度为0.1mg·mL-1,柱温控制在40℃.结果 克服了原方法中精氨酸峰形严重拖尾问题;本方法中精氨酸在0.3μg～1.4μg范围内,线性关系较好（r=0.9977）,平均回收率为99.17%,RSD为1.8%.结论 方法可用于注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸的含量测定,结果准确可靠.     

高效液相色谱法测定注射用头孢西酮在健康人血浆和尿中的浓度

目的 建立测定注射用头孢西酮(头孢类抗生素)在人血浆和尿中浓度的高效液相色谱法.方法 血浆样品经10%三氯醋酸沉淀蛋白,以塞克硝唑为内标,用乙腈-0.02 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(13:87)为流动相,尿液直接稀释,经Capcell Pak MG C18柱分离,278 nm波长检测.结果 头孢西酮血浆样品和尿样线性范围分别为0.4～640.0和2～3 200 mg·L-1;提取回收率分别为38.9%～41.5%和100.8%～107.4%;日内、日间RSD均低于15%.结论 本方法准确性好、操作简单,可满足药代动力学研究的要求.     

高效液相色谱法测定人血浆中头孢吡肟浓度及其药动学

目的建立人血浆中头盐酸孢吡肟浓度的HPLC-UV测定方法,研究静脉注射盐酸头孢吡肟在健康人体中药动学行为。方法血浆经高氯酸沉淀蛋白后进行HPLC-UV分析,色谱柱为岛津Sh im-pack ODS,5μm,250 mm×4.6 mm I.D,流动相为0.025 mol/L的NaH2PO4∶乙腈(89∶11),磷酸调pH=3.0,流速1.0 mL/m in,紫外检测波长270 nm.测定健康志愿者30 m in内静滴盐酸头孢吡肟500 mg及停药后12 h的血药浓度-时间过程。结果头孢吡肟在血浆中的线性范围为0.2~50.0μg/mL,LLOQ为0.2μg/mL,批内和批间的精密度(RSD)均小于10%,准确度(Relative error,R.E)为-3.48%~0.06%.血浆中回收率大于85%.健康志愿者单次静滴500mg盐酸头孢吡肟30 m in后,实测得tm ax和Cm ax分别为(0.51±0.02)h和(24.96±3.50)μg/mL,估算的t1/2β和MRT分别为(2.03±0.18)h和(2.65±0.29)h,V1和CL分别为(0.168±0.068)L/kg和(0.207±0.026)L/(kg.h),AUC0-∞为(50.88±6.10)μg.h/mL。结论该方法经考察符合生物样品的测定要求,可应用于人血浆中头孢吡肟血药浓度的测定和药代动力学研究,盐酸头孢吡肟在中国人和美国人中的动力学行为相近。     

固相萃取结合高效液相色谱测定人血浆中万古霉素的浓度

目的建立固相萃取结合高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素的浓度。方法以去甲万古霉素为内标,用Cleanert PEP固相萃取柱预处理样品,水洗涤杂质,60%甲醇溶液洗脱药物;采用SHIMADZUVP-ODS C18（150mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液（8.5∶91.5,pH=3.2）,流速1mL.min-1,柱温为35℃,二极管阵列检测器检测波长230 nm。结果人血浆中万古霉素在1.080.0 mg.L-1线性关系良好,平均萃取回收率〉78%,方法回收率为88%109%,日内RSD〈6.9%（n=5）,日间RSD〈7.5%（n=15）。结论本法简便、灵敏、准确,适用于人体内万古霉素的血药浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中伊马替尼的浓度

目的：建立简单而灵敏的人血浆中伊马替尼浓度的HPLC测定方法。方法：采用利奈唑胺为内标,用10%高氯酸甲醇溶液沉淀蛋白,色谱柱为Xbrige C18（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-5 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液（pH 3.0）（20：80）;流速为1.0 ml·min-1,柱温为40℃;检测波长为268 nm。结果：伊马替尼在0.120 mg·L-1范围内线性关系良好,r=0.999 6,定量下限为0.1 mg·L-1,平均绝对回收率84.60%,方法回收率在97.51%103.97%之间。高、中、低3种浓度的日内、日间RSD均小于10%。采用此法测定6名服用伊马替尼的患者,结果血药浓度范围为0.351.69 mg·L-1,均在标准曲线的定量范围内。结论：本方法简单、快捷、灵敏、准确,适用于伊马替尼临床血药浓度的监测。     

在线SPE-HPLC系统在补骨脂二氢黄酮甲醚药代动力学研究中的应用

目的:探讨在线固相萃取(SPE)-高效液相色谱(HPLC)系统在小鼠血浆中补骨脂二氢黄酮甲醚药代动力学研究的应用。方法:基于在线SPE-HPLC技术的Ultimate 3000系统测定补骨脂二氢黄酮甲醚血药浓度。色谱条件:采用Venusil MPC18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-5 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.5),流速1.0 mL·min-1,梯度洗脱;使用Capcell MF Ph-1在线SPE柱(10 mm×4 mm,5μm),洗脱剂为5 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.5);检测波长238 nm。WinNonlin 5.2软件计算药动学参数。结果:补骨脂二氢黄酮甲醚线性范围为20.0～4000 ng·mL-1,最低定量限为20.0 ng·mL-1,提取回收率为90.5%～94.6%,日内、日间精密度试验的RSD均小于10%,短期稳定性、冻融稳定性及长期稳定性准确度为92.38%～101.7%。结论:该方法工作流程简化,样品分析快速,提高了工作效能,其结果可信且重复性好。     

HPLC法测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的含量

目的建立高效液相色谱法测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的方法。方法采用Kromasil C18色谱柱,流动相A为20mL.L-1乙腈的甲醇溶液,流动相B为0.02mol.L-1 KH2PO4-三乙胺(100∶0.2),用磷酸调pH为3.0,用梯度洗脱方式,检测波长210nm,流速1.0mL.min-1,柱温35℃。结果盐酸麻黄碱质量浓度在0.049 4～0.247 0mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.4%,RSD为1.1%(n=9);盐酸苯海拉明质量浓度在0.020 6～0.102 8mg.mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为101.6%,RSD为1.3%(n=9)。结论用HPLC测定复方鼻炎膏中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的方法准确,能有效控制该制剂的质量。     

HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度

目的建立HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度。方法血浆样品经超滤离心法提取后,采用XB-C18柱分离,流动相:乙腈-0.1 mol.L-1醋酸铵缓冲液(pH 4.6)=3∶97(v/v),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:300 nm,柱温:40℃,进样量:30μL;尿样处理方法同血样,但以甲醇代替乙腈,进样量20μL。结果比阿培南与血浆、尿液中内源性物质分离度好,血药、尿药浓度分别在0.1~50、0.5~300 mg.L-1与峰面积线性关系良好,定量下限分别为0.1、0.5 mg.L-1,绝对回收率分别在90.9%~97.3%、99.1%~102.5%,相对回收率分别为102.1%~110.1%、100.3%~104.4%,日内精密度(RSD)分别<3.4%、2.1%,日间精密度(RSD)分别<5.7%、2.8%。均满足生物样本测定要求。结论所建立方法高效、灵敏、简捷快速、专属性好、重现性高,可用于比阿培南药动学研究。     

RP-HPLC法测定人血清中茶碱与多索茶碱的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱、多索茶碱浓度的方法。方法:血清采用15%高氯酸进行沉淀后测定,其中色谱柱为InertsilODS-SP,流动相为甲醇-水(25∶75),检测波长为273nm,流速为1mL·min-1,柱温为30℃,内标为巴比妥钠。结果:茶碱、多索茶碱血清浓度分别在0.24～30.69mg·L-1、0.25～31.83mg·L-1范围内线性关系良好(r均为0.9999),最低定量限分别为0.24、0.25mg·L-1;平均相对回收率分别为99.62%～103.92%、96.26%～102.22%;日内RSD分别为0.44%～1.79%、0.54%～1.68%;日间RSD分别为1.68%～2.15%、0.83%～1.57%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床茶碱、多索茶碱血药浓度监测。     

HPLC法测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中硫酸胍生、磷酸氯喹、维生素B1和维生素B6的含量

目的：建立HPLC法测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊[1]中硫酸胍生[2]、磷酸氯喹[3]、维生素B1[4]和维生素B6[5]的含量。方法：色谱柱为Welch Materials C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为己烷磺酸钠溶液（取己烷磺酸钠1.35g,加水适量溶解,加冰醋酸10mL,并加水至1000mL,用三乙胺调节pH至3.5）-甲醇-乙腈（55∶24∶21）,流速为1.0mL·min-1,检测波长为275nm,柱温为40℃。结果：硫酸胍生在40～200mg·L-1（r=1.000）范围内线性关系良好,平均回收率为99.3%（n=9,RSD为0.4%）;磷酸氯喹在80～400mg·L-1（r=1.000）范围内线性关系良好,平均回收率为98.7%（n=9）,RSD为0.6%;维生素B1在32～160mg·L-1（r=0.9999）范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%（n=9,RSD为0.7%）;维生素B6在32～160mg·L-1（r=1.0000）范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%（n=9）,RSD为0.6%。结论：该方法简便、准确、快速,可同时测定四组分的含量。     

HPLC法测定自发性高血压大鼠血浆中去甲肾上腺素的含量

目的:建立高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法测定自发性高血压大鼠(SHR)血浆中去甲肾上腺素(NA)的含量。方法:色谱柱为C18,流动相为甲醇-0.15mo·lL-1磷酸二氢钾缓冲液(1∶9,V/V,pH6.0),检测波长为280nm,柱温为室温,流速为1.0mL·min-1。结果:NA检测浓度线性范围为0.5～40μg·L-1(r=0.9999),最低检测浓度为0.05μg·L-1,平均回收率为97.49%,RSD小于3.81%。结论:本方法线性、精密度、回收率良好,灵敏度高,操作简便,可用于NA的药动学及相关研究。     

反相高效液相梯度洗脱法测定人血浆中丙泊酚浓度

目的：建立高效液相色谱法测定人血浆中丙泊酚血药浓度的方法,为保证临床用药的有效性和安全性提供依据。方法以卡马西平为内标,色谱柱为Hanbon Science ＆．Technology C18（4．6 mm ×250 mm,5μm）,流动相以乙腈／甲醇混合液（乙腈—甲醇按80∶20（V／V）的比例配制,作为有机相）—水（水相加1％的三氟乙酸调pH值到4）进行二元梯度洗脱,0～7 min （50∶50,V／V）,7～9 min（50∶50～70∶30,V／V）,9～22 min（70∶30,V／V）;流流速为1．0 mL· min－1,检测波长为274 nm,进样量为20μL,柱温为40℃。结果丙泊酚的血药浓度在0．098～25 mg· L－1内线性良好（r＝0．9998）,定量限为0．098 mg· L－1;高（12．50 mg· L－1）、中（1．56 mg· L－1）、低（0．19 mg· L－1）3个浓度的平均方法回收率均在85％～115％之间,相对标准偏差（ RSD）均＜10％;日内、日间RSD均＜10％。结论该方法灵敏、准确、简单,可用于丙泊酚的血药浓度监测和临床药动学研究。