KISS1在胃癌的表达及临床意义

目的 探讨肿瘤转移抑制基因KISS1mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法 用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测52例胃癌、52例癌旁组织及12例正常胃组织中KISS1mRNA的表达,半定量分析RT-PCR产物电泳条带密度。结果 在52例胃癌及其相应癌旁组织中KISS1mRNA表达水平分别为（0.425±0.046）和（0.825±0.028）;12例正常胃组织表达水平分别为（0.856±0.044）;胃癌组织KISS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织、和正常胃组织（P〈0.01）。KISS1mRNA的表达水平与患者肿瘤病理类型及临床分期无关（P〉0.05）,而淋巴结有转移者其表达水平低于无淋巴结转移（P〈0.05）。结论 KISS1mRNA在胃癌组织中表达水平下降;其表达与胃癌淋巴结转移有关,可能成为胃癌转移和预后的指标之一。     

胃癌及癌旁组织中Runx3基因甲基化研究及临床意义

目的:探讨Runx3基因启动子区域甲基化及表达在胃癌发生和发展过程中的意义。方法:采用DNA甲基化特异性PCR(MSP)技术对35例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织Runx3基因启动子区域甲基化进行检测,同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Runx3 mRNA的表达情况。结果:Runx3基因在35例胃癌及其癌旁组织中甲基化率分别为40.0%(14/35)和8.5%(3/35);胃癌组织标本中Runx3基因表达(0.593 8±0.100 7)较癌旁正常组织表达(0.831 1±0.287 2)明显下调,差异有统计学意义(P﹤0.05)。Runx3 mRNA在胃癌标本的表达与其病理临床特征密切相关,在伴有淋巴结转移和低分化的胃癌组织标本中Runx3 mRNA的表达显著下调(P﹤0.05)。结论:Runx3基因启动子区域甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一,与胃癌的发生发展密切相关,可作为胃癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。     

Runx3和Smad4在胃癌中的表达及其临床意义

目的：研究Runx3、Smad4蛋白在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达差异及其与胃癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组织化学法检测Runx3、Smad4蛋白在56例胃癌组织及40例癌旁组织中Runx3、Smad4的表达。结果（：1）胃癌组织中Runx3和Smad4阳性表达率分别为37.5%和44.6%,在癌旁组织分别为92.5%和87.5%。两种蛋白在胃癌组织表达差异具有显著性（P〈0.05）。Smad4的表达与胃癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期相关（P〈0.05）;Runx3的表达与胃癌不同分化程度、浸润深度、淋巴结转移（P〈0.05）相关,与临床分期无关（P〉0.05）。（2）Runx3与Smad4在胃癌组织中的表达呈正相关（P〈0.05,r=0.4264）。结论：Runx3、Smad4的低表达与胃癌的浸润和转移有密切的关系,在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用。     

抑癌基因 Runx3表达下调与胃癌的关系

目的研究抑癌基因 Runx3在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法采用 RT-PCR 技术检测40例胃癌组织中 Runx3基因 mRNA 的表达;用免疫组化 SP 法检测 Runx3蛋白的表达.结果(1)Runx3在胃癌组织中阳性表达率为35.0%,明显低于癌旁正常胃黏膜组织的97.5%,两者间的差异有统计学意义(P<0.05);(2)胃癌组织中 Runx3 mRNA 的表达量明显低于其配对的癌旁正常胃黏膜组织(P<0.01);(3) Runx3 mRNA 的表达与胃癌的肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期有关(均 P<0.05);而与患者的年龄、性别、远处转移、浸润深度无关(均 P >0.05).结论 Runx3基因功能的下调与胃癌的预后密切相关.     

Runx3基因启动子甲基化及其蛋白表达与喉癌的关系

目的探讨Runx3基因启动子甲基化状态及其蛋白表达与喉癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测55例喉癌组织及癌旁正常黏膜组织中Runx3DNA的表达,并用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Runx3基因启动子甲基化情况。结果55例喉癌组织标本中Runx3基因蛋白的表达较癌旁正常组织中表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;癌旁正常黏膜组织中无Runx3基因启动子的甲基化,喉癌组织中有32例（58.2%）检测到Runx3基因启动子的甲基化,2者比较差异有统计学意义（P〈0.05）;喉癌组织中Runx3基因启动子甲基化及Runx3蛋白的表达与性别、临床分型及分级、有无淋巴结转移均无关（均P〉0.05）;喉癌组织中Runx3基因启动子甲基化与Runx3蛋白表达呈负相关（r=-0.7092,P〈0.01）。结论Runx3基因启动子甲基化是其基因失活的可能机制之一,在喉癌的发生中起重要作用。     

肝再生磷酸酶3基因与胃癌恶性进展相关性研究

目的：检测肝再生磷酸酶3（PRL-3）mRNA在胃癌、癌旁正常组织及其转移灶中的表达,探讨其与胃癌发生发展以及侵袭转移的生物学行为之间的关系。方法：半定量PCR测定22例胃癌组织及其相对应的癌旁正常组织、6例远处转移灶PRL-3 mRNA相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。结果：22例胃癌组织中PRL-3基因表达量较相应癌旁正常组织中高,但差异无统计学意义（0.95±0.24 vs 0.85±0.27,P〉0.05）。6例转移灶PRL-3基因表达量（2.04±0.44）显著高于原发肿瘤（1.26±0.26）（P〈0.05）。PRL-3基因表达水平与肿瘤远处转移有相关性（P〈0.05）,而与肿瘤大小、分化程度、浸润深度及性别无关（P〉0.05）。结论：PRL-3基因在胃癌恶性进展中起重要作用,PRL-3可能成为判断胃癌转移高危因素的一个生物学标志物。     

大肠癌组织Runx3基因启动子甲基化的研究

目的:检测大肠癌患者肿瘤组织及其相应的癌旁组织中Runx3基因表达和启动子区域甲基化状态,探讨甲基转移酶抑制剂5-aza-dc对结肠癌细胞系中Runx3表达的作用。方法:将手术切除的37例大肠癌组织和对应癌旁组织提取RNA和基因组DNA,采用RT-PCR检测Runx3基因的表达,甲基化特异PCR方法(MSP)检测Runx3基因启动子区域甲基化状态,用5-aza-dC处理结肠癌细胞系后,RT-PCR方法检测Runx3基因的表达。结果:37例大肠癌和对应癌旁组织中Runx3基因表达阳性率分别为100%(37/37),2.7%(1/37)。癌组织中Runx3基因表达明显降低(P<0.01)。MSP检测发现11例(30%)大肠癌标本及1例(3%)癌旁正常组织中Runx3基因呈甲基化状态。癌组织中Runx3基因甲基化明显高于癌旁组织(P<0.05)。结肠癌细胞系HT29 5-aza-dC处理后Runx3基因表达水平增加。结论:Runx3基因启动子甲基化和Runx3基因表达在大肠癌的癌旁组织和原发癌灶间存在显著性差异,可能与结肠癌的发生发展有关。     

miR-17在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨miR-17在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法提取30例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织标本的总RNA,采用茎环逆转录实时定量聚合酶链反应（ RT-PCR）方法检测miR-17的表达量,并分析其与分化程度、淋巴结转移、胃癌pTNM分期等临床病理特征的关系。结果与癌旁正常胃黏膜组织比较,miR-17在癌组织中高表达（胃癌及癌组织中表达值分别为12.7779±0.9067和10.3079±0.4446,P＜0.05）,其中miR-17的表达与肿瘤的大小、胃癌的pTNM分期及Lauren分型相关（P＜0.05）和患者的性别、年龄、有无淋巴结转移及组织分化程度无关（P＞0.05）。结论 miR-17在胃癌中的高表达可能对胃癌的发生发展起重要作用,为胃癌靶向治疗提供依据。     

胃癌组织中CD133 mRNA表达及与临床病理特征的关系

目的探讨CD133 mRNA在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取31例手术切除的胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织标本,半定量RT—PCR检测CD133 mRNA的表达,分析胃癌组织CD133 mRNA表达与性别、年龄、肿瘤直径、浸润深度、TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移和Ki-67增殖指数等临床病理特征的关系。结果胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织CD133 mRNA的相对灰度值分别为0．3783±0．1411和0．0381±0．0919（P=0．000）;肿瘤直径〉5cm者胃癌组织CD133 mRNA相对灰度值显著高于肿瘤直径≤5cm者[（0．4393±0．1484）w（0．3343±0．1212）]（P=0．041）;有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者[（0．4266±0．1320）／35（0．2395±0．0309）]（P=0．004）,淋巴结转移率和转移淋巴结数与CD133 mRNA相对灰度值呈正相关（r=0．466,P=0．008;r=0．464,P=0．009）;Ki-67低表达者CD133 mRNA相对灰度值显著高于Ki-67高表达者[（0．4364±0．1398）vs（0．3164±0．1174）]（P=0．02）,Ki-67表达与CD133 mRNA相对灰度值呈负相关（r=-0．461,P=0．009）。结论 胃癌组织CD133 mRNA的表达与反映淋巴转移的淋巴结转移率和转移淋巴结数及反映肿瘤增殖状态的Ki-67表达相关。     

胃癌乙酰肝素酶表达和DNA含量流式细胞定量研究

目的 探讨胃癌中乙酰肝素酶(heparanase)的表达及DNA含量与胃癌临床病理特征的关系.方法 应用流式细胞术检测50例胃癌组织、25例癌旁组织和10例正常组织中乙酰肝素酶的表达和DNA含量.结果 heparanase在胃癌组、癌旁组、正常组中表达量(FI值)分别为1.86±0.44,1.22±0.45,1.00±0.21,3组间差别有显著性(P＜0.05),heparanase在胃癌中的阳性表达率为96%,明显高于癌旁和正常胃黏膜(P＜0.01),且与胃癌的浸润深度(P＜0.05)、TNM分期(P＜0.01)和淋巴结转移相关(P＜0.01).3组的DI值分别为1.26±0.14,1.05±0.14,1.00±0.11,3组间差别有显著性(p＜0.05),且与肿瘤的分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.01).Heparanase表达的FI值与DI值呈正相关关系(r=0.536,P＜0.01).结论 Heparanase在肿瘤的浸润和转移中扮演重要的角色,DNA含量与肿瘤的恶性程度密切相关.heparanase和DNA含量可能是评价胃癌恶性程度和预后预测的重要指标.     

候选抑癌基因Syk启动子甲基化与胃癌转移相关

目的：探讨Syk（spleen tyrosine kinase）基因启动子甲基化在胃癌发生、转移过程中的作用及其临床意义。方法：采用RT-PCR检测61例胃癌组织、癌旁组织中SykmRNA的表达．并用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Syk基因启动子甲基化情况。结果：61例癌旁组织均检测到Syk基因的表达,胃癌组织有14例检测到Syk基因的表达,Syk基因在胃癌组织中表达率显著降低（P〈0．05）。61例胃癌旁组织未发现有Syk基因启动于的甲基化。而61例癌组织中有21例检测到Syk基因启动子的甲基化。癌组织Syk基因启动于甲基化率显著高于癌旁组织（P〈0．05）。有淋巴结转移的31例胃癌组织中,有17例Syk基因启动子甲基化,有淋巴结转移的Syk基因启动于甲基化姓著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论：Syk基因启动于甲基化是导致Syk基因失活的原因之一。Syk基因启动子的甲基化可能与胃癌的发生、转移有关。     

胃癌组织及转移组织中DNA甲基化差异的研究

目的 研究胃癌原发灶和转移淋巴结组织问基因组DNA甲基化程度的差异以及寻找胃癌淋巴转移抑制基因。方法应用甲基化CpG岛扩增（MCA）方法富集甲基化的基因组DNA序列,以转移淋巴结MCA产物为检测子,原发灶MCA产物为驱赶子,进行代表性差异显示分析（RDA）。将获得的甲基化差异片段克隆、测序,获得碱基序列,用生物信息学进行分析。结果获得19个差异序列,分布于5端,外显子,内含子及3’端。其中KL59位于9p21,为p16基因的第一外显子内;KL22位于PTPRG基因启动子区。以KL22作探针与驱赶子、检测子及3轮RDA产物杂交,除驱赶子外都有杂交信号。结论胃癌原发灶与转移淋巴结组织问DNA甲基化存在差异,MCA-RDA方法为一种较好的分析方法。     

miR-143和miR-520d-5p在胃癌组织中的异常表达

目的 应用MicroRNAs （miRNAs）芯片技术筛选胃癌组织中差异表达的miRNAs,研究与胃癌相关的miRNAs.方法 从3对手术切除的胃和相配对的正常胃组织中提取总RNA,miRNA芯片检测miRNA表达情况,然后在47例配对的胃癌和正常胃组织中,用Real-time RT-PCR（Taqman）对部分差异表达miRNA进行验证.结果 芯片结果显示：与配对的正常胃组织相比,有62个miRNAs在胃癌中异常表达,其中42个miRNA高表达,20个miRNA低表达.用Real-time RT-PCR（Taqman）验证显示：miR-143在胃癌组织中表达显著降低（JP=0.002 9）;miR-520d-5p在胃癌组织中表达显著提高（P =0.032）.结论 miR-143和miR-520d-5p可能参与了胃癌的发生过程.     

酪氨酸激酶受体RON在胃癌中的表达及意义

目的探讨酪氨酸激酶受体RON在胃癌组织中的表达及与预后的关系。方法采用免疫组化Envision法检测98例胃癌组织、29例癌旁组织和10例正常胃黏膜的RON表达及用Western-blot方法检测19例新鲜胃癌组织、癌旁组织、转移的淋巴结和10例正常胃黏膜中RON的表达情况,检测正常胃黏膜上皮细胞GES-1、胃癌细胞株HGC．27、SGC-7901、BGC．803和BGC。823的RON蛋白表达。对所有胃癌术后患者进行随访,随访期为3—89（中位时间22）个月,生存率的比较用Kaplan—Meier法估计生存曲线。结果（1）98例胃癌组织RON阳性表达率为56．1％（55／98）,29例癌旁组织RON阳性表达率为27．6％（8／29）,两者比较差异有统计学意义（P=0．007）;正常胃黏膜不表达RON;（2）RON表达与胃癌细胞浸润深度、有否伴淋巴结转移和临床病理分期有关（P〈0．05或P〈0．01）,而与Borrmann分型、组织学类型及是否伴远处转移无关（P〉0．05）;（3）RON阳性表达组与阴性组术后生存率差异无统计学意义（P=0．195）;（4）胃癌新鲜组织,相应癌旁组织和伴有胃癌转移的淋巴结中RON变异体（RONA165）均呈强表达,而正常胃黏膜和正常淋巴结未见RON变异体表达;（5）正常人胎儿胃黏膜上皮细胞GES-1、胃癌细胞株SGC-7901、BGC-803、BGC-823均有不同程度的RON蛋白表达,而未分化胃癌细胞株HGC-27未发现有RON蛋白表达。结论RON主要表达于胃癌组织而不表达于正常胃黏膜,并且与胃癌的浸润深度、是否伴有淋巴结转移和胃癌临床病理分期有关,提示RON在人胃癌发生、发展和浸润转移方面发挥重要作用。     

Runx3和Survivin及p27蛋白在胃癌中的表达及相关性研究

目的探讨胃癌组织中Runx3、Survivin和p27蛋白的表达情况,及其与各临床病理因素的关系,以及三者在胃癌组织中表达的相关性。方法采用免疫组化SABC方法 ,检测Runx3、Sur-vivin和p27蛋白在8例正常胃黏膜组织、15例异型增生胃黏膜、47例胃癌组织中的表达情况。结果胃癌组织中Runx3、Survivin和p27的表达阳性率分别为36.2%,70.2%和44.7%,与正常胃黏膜中的表达阳性率比较差异均有统计学意义（均P〈0.05）;Runx3的表达与胃癌的组织学分类、侵袭深度、淋巴结转移相关（P〈0.05）;胃癌组织中Runx3与Survivin的表达呈负相关（P〈0.05）,Runx3与p27呈正相关（P〈0.05）。结论本研究结果表明,胃癌组织中Runx3和p27的低表达,Survivin的高表达可能导致细胞的增殖和凋亡异常,三者共同参与了胃癌的发生发展。     

p16、c-erbB-2、E-cadherin在胃癌及转移淋巴结中的表达

目的探讨胃癌及淋巴结转移癌组织中p16、c-erbB-2和E-cadherin蛋白表达的差异,并结合肿瘤的病理学特征进行分析。方法123例胃腺癌及82例淋巴结转移癌组织构建组织芯片,免疫组织化学方法检测p16、c-erbB-2和E-cadherin蛋白的表达。结果①p16在伴有淋巴结转移的胃癌组织中的阳性表达明显高于不伴淋巴结转移的胃癌组织（P〈0.05）;②在伴淋巴结转移的病例中,p16在原发癌中的阳性表达率明显高于淋巴结转移癌（P〈0.05）;③p16和c-erbB-2在中高分化腺癌中的阳性表达明显高于低分化腺癌（P〈0.05）。结论p16高表达的胃腺癌组织易于发生淋巴结转移。p16的缺失可能是胃癌进展的晚期事件之一。p16和C-erbB-2也许可以作为判断胃腺癌分化程度的参考指标。     

转移抑制基因KAI1/CD82在胃癌的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82mRNA在胃癌组织中的转移表达及其临床意义。方法用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测62例胃癌患者胃癌组织、癌旁组织及远处淋巴结组织中KAI1/CD82mRNA的表达水平,通过测定所得KAI1/CD82基因表达率的中位数来界定,分为高表达组（31例）和低表达组（31例）,比较2组临床病理特征。结果 KAI1/CD82mRNA表达水平在TNMⅠ-Ⅱ、无肿瘤周围静脉侵袭以及无远处淋巴结转移的患者明显高于TNMⅢ-Ⅳ、有肿瘤周围静脉侵袭和有远处淋巴结转移者（P〈0.05）。结论 KAI1/CD82mRNA表达水平可能与胃癌的分化程度、浸润深度及淋巴结远处转移有关,检测KAI1/CD82mRNA表达水平可作为预测胃癌预后的指标之一。