寻常型银屑病患者血管内皮生长因子及单核细胞趋化因子-1表达的研究

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在银屑病患者皮肤中的表达及其意义。方法 用免疫组化法检测银屑病患者皮损、非皮损及正常人皮肤中VEGF、MCP-1的表达与分布。用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者血清中VEGF、MCP-1水平。结果 ①银屑病患者皮损及非皮损中VEGF表达较正常人皮肤明显增强(P<0.05).皮损中MCP-1表达较非皮损及正常人皮肤明显增强(P<0.05).②患者血清中VEGF水平明显高于正常人(P<0.05),MCP-1水平与正常人比较差异无显着性(P>0.05).③皮损角质形成细胞中VEGF、MCP-1的表达与PASI评分无显着相关性(P>0.05)。结论 VEGF、MCP-1的表达增强在银屑病的发病机制中可能起重要作用。     

尖锐湿疣患者皮损中SOCS1和PIAS1的表达及意义

目的 探讨尖锐湿疣(CA)皮损角质形成细胞中细胞因子信号转导JAK/STAT通路负调控蛋白细胞因子信号抑制剂-1(SOCS1)和活化STAT的蛋白抑制剂-1(PIAS1)的表达。方法 采用SP免疫组化染色技术检测40例CA患者皮损、20例宫颈癌和20例正常人皮肤(包皮)中SOCS1和PIAS1的表达及分布。结果 ①CA患者皮损中SOCS1和PIAS1的表达阳性细胞分布主要位于棘细胞层,为棕黄着色,阳性反应定位胞质;宫颈鳞状细胞癌亦为胞质阳性表达,棕黄着色,呈弥漫性分布;而正常包皮少数阳性着色主要定位于基底层细胞的胞质,呈浅黄着色。②CA皮损中SOCS1和PIAS1的表达阳性率分别为85%和80%,高于在正常人上皮中的表达(阳性率分别为30%和35%),两组比较差异均有统计学意义(前者χ²=18.15,P<0.01;后者χ²=11.87,P<0.01);宫颈癌中SOCS1和PIAS1的表达阳性率分别为90%和85%,虽较CA有升高,但两者比较差异均无统计学意义(两者均P>0.05)。③CA中SOCS1与PIAS1的表达无显著相关性(r_s=0.14,P>0.05)。结论 CA皮损中可能通过细胞因子信号转导负调控蛋白SOCS1和PIAS1在角质形成细胞过度增殖或恶性转化过程中起调控作用。     

骨桥蛋白及基质金属蛋白酶—9在恶性黑素瘤中的表达

目的 探讨骨桥蛋白及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人恶性黑素瘤中的表达及意义。方法 采用免疫组化SP法检测23例原发性恶性黑素瘤、17例转移性恶性黑素瘤及20例色素痣中骨桥蛋白和MMP-9的表达。结果 40例恶性黑素瘤中骨桥蛋白及MMP-9表达的阳性率分别为87.5%、75.0%;20例色素痣中的阳性表达率分别为15.0%、10.0%。骨桥蛋白及MMP-9在恶性黑素瘤中阳性表达率明显高于色素痣,差异具有统计学意义(P<0.05)。骨桥蛋白和MMP-9的表达与年龄、性别、发病部位、是否淋巴结转移等因素均无关(P>0.05)。40例恶性黑素瘤中,骨桥蛋白与MMP-9均表达29例,均不表达4例。结论 骨桥蛋白及MMP-9在人恶性黑素瘤中高表达,但与淋巴结转移无相关性。     

环氧合酶-2和血管内皮生长因子mRNA在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA在皮肤鳞状细胞癌(SCC)和正常人皮肤组织中的表达以及它们之间相互关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测24例SCC和10例正常人皮肤组织中COX-2和VEGF mRNA的表达。结果 RT-PCR结果显示,在正常人皮肤组织中COX-2和VEGF mRNA呈较弱表达或无表达,吸光度平均值分别为(0.01±0.01)和(0.02±0.02);有79.2%(19/24)SCC组织中COX-2 mRNA表达水平增高,平均值为(0.56±0.48),与正常皮肤组织比较差异有统计学意义(P<0.05);VEGF mRNA在SCC组织中全部高表达(24/ 24,100%),平均值为(0.66±0.35),与正常人皮肤组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。经相关性分析两者之间的表达呈明显正相关(r=0.86)。结论 COX-2可能与SCC血管形成有关,且其作用可能通过上调VEGF通道来发挥作用。     

生存素在恶性黑素瘤中的表达及与VEGF和PCNA的关系

目的 探讨人恶性黑素瘤组织中凋亡抑制蛋白生存素的表达,及其与恶性黑素瘤临床特征、血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的关系.方法 免疫组化方法检测36例人恶性黑素瘤和30例色素痣组织中生存素、VEGF和PCNA蛋白表达.结果 ①生存素在恶性黑素瘤和色素痣中均有表达,但在恶性黑素瘤中表达明显高于色素痣(P<0.01).②在恶性黑素瘤组织中有30例表达VEGF(阳性率83.3%),36例表达PCNA(阳性率100%),而色素痣组织不表达VEGF和PCNA.③生存素的阳性表达与恶性黑素瘤患者的发病年龄、性别、淋巴结转移均无相关性(P>0.05),但其表达与VEGF和PCNA的表达密切相关(P<0.01).结论 生存素可能参与恶性黑素瘤的增殖和与VEGF相关的肿瘤血管生成.     

血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在尖锐湿疣中的表达及其意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在尖锐湿疣皮损中的表达及其意义。方法 链霉亲和素-过氧化物酶法检测VEGF、bFGF在35例尖锐湿疣皮损、10例正常人皮肤组织(包皮)中的表达与分布。结果 VEGF、bFGF在尖锐湿疣皮损中的表达水平均明显高于正常人皮肤组织(P<0.001)。尖锐湿疣皮损中VEGF、bFGF阳性细胞遍及表皮全层,但VEGF呈现以基底层、棘层细胞显著表达,到颗粒层表达减弱的模式,而bFGF呈现基底层低表达,从棘层到颗粒层表达逐渐增强,空泡细胞表达最为显著的模式。结论 尖锐湿疣皮损中VEGF、bFGF的过量表达在促进真皮微血管生成中可能发挥重要作用。     

外阴鳞状细胞癌中人乳头状瘤病毒感染与基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶抑制剂1的关系

目的 探讨人乳头状瘤病毒(HPV)6/11、16/18在外阴鳞状细胞癌(简称外阴鳞癌)组织中的感染情况及与基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)蛋白表达的关系.方法 用原位杂交法检测HPV6/11、16/18在26例外阴鳞癌、21例外阴上皮内瘤病变(VIN)及10例外阴正常皮肤组织中的感染情况.同时用免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1蛋白的表达.结果 HPV6/11、16/18在外阴鳞癌、VIN中的感染率分别为69.23%(18/26)和38.46%(10/26),42.86%(9/21)和28.57%(6/21),正常对照组没有感染.MMP-9、TIMP-1蛋白在外阴鳞癌、VIN、正常对照组中的阳性表达率分别为92.31%(24/26)和76.92%(20/26),90.48%(19/21)和80.95%(17/21),80.00%(8/10)和50.00%(5/10).HPV6/11的外阴鳞癌组、VIN组与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05),HPV16/18的外阴鳞癌组与正常对照组比较差异有显著性.外阴病变各组MMP-9、TIMP-1阳性表达率与正常对照组比较差异均有显著性.在外阴鳞癌中MMP-9蛋白表达较TIMP-1蛋白表达强(P<0.05).MMP-9在有HPV6/11和HPV16/18感染患者中的表达较无感染者强,而TIMP-1蛋白的表达差异无显著性.结论 在外阴鳞癌的发生发展中HPV的感染起一定作用,当MMP-9的表达强于TIMP-1表达时可能是外阴鳞癌侵袭的一个指标,HPV感染可能会进     

恶性黑素瘤血管内皮细胞生长因子和nm23抑癌基因蛋白表达及微血管密度的研究

目的 探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)、nm23抑癌基因和微血管密度(MVD)与恶性黑素瘤发病的关系。方法 采用免疫组化法检测47例恶性黑素瘤和10例黑素细胞痣组织中VEGF、nm23和CD34的表达并计算其MVD。结果 恶性黑素瘤VEGF阳性表达率和MVD值均明显高于黑素细胞痣(P均<0.01),有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P值分别<0.05和<0.01);随着浸润深度增加,Ⅰ级与Ⅳ、Ⅴ级恶性黑素瘤比较,VEGF阳性表达率和MVD值差异均有统计学意义(P值分别<0.05和<0.01)。恶性黑素瘤中nm23阳性表达率明显低于黑素细胞痣(P<0.01),有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(P<0.01),与临床分型和浸润深度无明显关系。结论 VEGF和nm23表达在恶性黑素瘤的发展和转移中起重要作用。     

系统性红斑狼疮患者血清基质金属蛋白酶-9的检测

目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)水平并探讨其临床意义。方法 MMP-9和TIMP-1检测采用ELISA方法。结果 ①SLE患者血清MMP-9平均中位数水平为65.00ng/mL显著低于正常人对照组267.50ng/mL(P<0.001)。②SLE患者中,血清MMP-9水平活动组低于非活动组(P<0.05),肾损组低于非肾损组(P<0.01),低补体C3血症者低于无低补体C3血症者(P<0.05),低血清白蛋白血症者低于非低白蛋白血症者(P<0.05),外周血白细胞计数降低者低于无白细胞降低者(P<0.01)。③糖皮质激素治疗后患者MMP-9水平高于治疗前(P<0.05)。④患者MMP-9水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈负相关(P<0.01),与C3(P<0.05)、白细胞(P<0.01)、白蛋白/球蛋白比值(P<0.05)呈正相关。⑤血清TIMP-1水平在SLE组与对照组、SLE各相关组之间差异均无显著性。结论 MMP-9可能参与SLE发病机制。     

血管内皮生长因子及其受体在银屑病发病中的作用及意义

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体在银屑病皮损中的表达。方法 采用原位杂交和免疫组化SABC法,检测42例寻常性银屑病患者皮损和15例正常人皮肤组织VEGFmRNA和其蛋白、VEGF受体2(KDR蛋白)、微血管密度(MVD),分析其表达情况。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者和正常人血清中VEGF水平。结果 ①寻常性银屑病患者皮损处的VEGFmRNA及其蛋白、KDR和MVD表达明显强于正常人对照组(P<0.001);皮损处与非皮损组相比,VEGFmRNA和其蛋白的表达差异无统计学意义,但KDR、MVD的表达差异有统计学意义;进行期与静止期比较四者差异均有统计学意义。②高密度组(MVD≥17.88)与低密度组(MVD<17.88)的VEGFmRNA及其蛋白表达差异无统计学意义,但KDR表达差异有统计学意义(P<0.01),且PASI评分差异也有统计学意义(P<0.001)。③患者血清中VEGF水平明显高于正常人对照组。结论 ①VEGF及其受体在银屑病新生血管形成中起重要作用。②MVD值可反映寻常性银屑病的严重程度,可作为判断病情和预后的指标。     

银屑病患者皮损中转化生长因子-β1及受体基因表达的研究

目的 研究银屑病患者皮损及非皮损处转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体(TGF-βRⅡ)及CD105的基因(mRNA)表达,并初步探讨其临床意义。方法 采用异硫氰酸胍法抽提皮肤组织中的RNA;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮肤组织中mRNA的表达。结果 银屑病患者皮损组织TGF-β1及TGF-βRⅡmRNA的表达均低于非皮损组织及正常人(P<0.05);非皮损组织及正常人皮肤组织中mRNA的表达量差异无显著性(P>0.05)。而银屑病皮损组织CD105的mRNA表达量高于非皮损组及正常人(P<0.05);非皮损组织和正常人皮肤组织比较P>0.05。结论 银屑病皮损中TGF-β1及TGF-βRⅡ表达降低和CD105的表达上调可能与银屑病的表皮过度增殖及真皮炎症细胞浸润有关。     

阿维A治疗前后对银屑病患者血管内皮生长因子表达的影响

目的 研究阿维A对血管内皮生长因子(VEGF)促银屑病血管生成的调节作用,探讨阿维A治疗银屑病的机制。方法 免疫组化法检测32例银屑病患者经阿维A治疗前后皮损的微血管密度和VEGF蛋白的表达情况。应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测32例银屑病患者经阿维A治疗前后外周血清中VEGF水平。结果 ①银屑病患者经阿维A治疗前皮损VEGF蛋白的表达及微血管密度值显著高于治疗后(P<0.05)和正常人对照组(P<0.001)。②银屑病患者阿维A治疗前的血清VEGF水平高于治疗后(P<0.001)及正常人对照组(P<0.001)。结论 VEGF在银屑病新生血管生成中起重要作用。阿维A可能通过抗新生血管生成的作用来治疗银屑病。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD80/CD86和CTLA-4mRNA的表达

目的 探讨CD80/CD86和CTLA-4在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及临床意义。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测32例SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)中CD80、CD86、CTLA-4mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中CD86的阳性表达率为90.63%,正常人对照组为60%,两组差异有非常显著性(P<0.01)。CD86的mRNA表达的平均水平(0.6410±0.0174)亦明显高于正常人对照组(0.4510±0.0402),差异有非常显著性(P<0.001);活动期SLE患者PBMC中CTLA-4的阳性表达率为81.25%,其mRNA表达的平均水平为1.0020±0.0624,均明显高于正常人对照组,差异有显著性(P<0.01);活动期SLE患者PBMC中CD80的阳性表达率和CD80mRNA的表达水平与正常人对照组差异均无显著性(P>0.05)。结论 CD86和CTLA-4的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。     

皮肤鳞状细胞癌和基底细胞上皮瘤膜型基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶-2表达

目的 探讨皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)和基底细胞上皮瘤(简称BCE)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达及其与临床病理特征的关系。方法 应用原位杂交和ABC免疫组化技术检测48例皮肤鳞癌和41例BCE手术切除标本中MT1-MMP、MMP-2表达。结果 鳞癌中MT1-MMP、MMP-2表达明显高于BCE(P<0.05),且二者的表达呈显著正相关(r=0.370,P<0.05)。MT1-MMP表达在高分化或伴有淋巴结转移的鳞癌中明显上调(P<0.05),而MMP-2表达增加仅见于伴有淋巴结转移的鳞癌(P<0.05)。鳞癌和BCE中MT1-MMP、MMP-2表达与患者性别、年龄、病程、发病部位、原发/转移病灶及BCE侵袭性无关(P>0.05)。结论 MT1-MMP、MMP-2表达上调与皮肤鳞癌的淋巴结转移有关。MT1-MMP、MMP-2表达水平不能区别BCE是否具有侵袭性。     

寻常性银屑病患者皮损中维A酸受体αmRNA的表达

目的 探讨维A酸受体αmRNA在寻常性银屑病皮损中的表达状况。方法 应用RT-PCR方法检测20例寻常性银屑病患者皮损部位和10例正常人表皮中维A酸受体αmRNA的表达情况。结果 维A酸受体αmRNA的表达在寻常性银屑病表皮中较正常人低,且差异有显著性(P<0.01)。结论 维A酸受体αmRNA的表达降低可能和银屑病发病有关。     

系统性红斑狼疮患者血清肝细胞生长因子及基质金属蛋白酶9的研究

目的 探讨血清肝细胞生长因子(HGF)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动程度的关系和意义,并对相关机理进行探讨.方法 ①双抗体夹心法检测血清HGF及MMP-9水平;②绘制ECV304细胞株生长曲线;③明确重组人肝细胞生长因子(rhHGF)的作用浓度;④流式细胞仪检测MMP-9水平.结果 患者血清HGF明显升高(P<0.001),MMP-9明显降低(P<0.001);经糖皮质激素治疗后HGF浓度下降(P<0.05),MMP-9浓度升高(P<0.05);活动期HGF高于非活动期(P<0.05),MMP-9低于非活动期(P<0.05);肾损组HGF高于非肾损组(P<0.001),MMP-9则低于非肾损组(P<0.05);关节炎组HGF高于非关节炎组(P<0.01),MMP-9水平两组之间差异无显著性(P>0.05);以HGF水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.707,灵敏度为66.7%;以MMP-9水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.984,灵敏度为97.2%;同时检测HGF及MMP-9水平,灵敏度为66.7%(24/36);rhHGF的作用浓度为8ng/mL;正常ECV304细胞株MMP-9的表达量为39.74%,rhHGF刺激后MMP-9的表达量为40.32%.结论 HGF及MMP-9可能参与SLE的发病机制,其水平可作为反映疾病活动程度、肾脏损害以及疾病进展与改善的指标,且血清MMP-9水平诊断准确性更高;rhHGF可促进ECV304细胞株MMP-9的表达.     

皮肤基底细胞癌T钙黏蛋白的表达及其DNA异常甲基化分析

目的 检测皮肤基底细胞癌(BCC)中T钙黏蛋白的表达以及异常甲基化.方法 采用免疫组化法和CpG岛甲基化特异性PCR方法,对29例BCC和19例正常人暴光部位皮肤的组织标本进行T钙黏蛋白的表达及甲基化检测.结果 正常皮肤皆表达T钙黏蛋白,29例BCC中8例(27.59%)检测到T钙黏蛋白表达(P<0.05),9例BCC(31.03%)和19例正常皮肤中的1例(5.26%)检测到T钙黏蛋白启动子区域的异常甲基化(P<0.05).结论 T钙黏蛋白表达降低与皮肤基底细胞癌的发病机制相关,T钙黏蛋白启动子区域的异常甲基化与蛋白低表达可能相关.     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3的表达水平及其与淋巴细胞凋亡的关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中Caspase-1mRNA的平均表达水平(1.20±0.33)明显高于正常人对照组(0.79±0.25),差异有非常显着性(P<0.01);Caspase-3mRNA的平均表达水平(0.87±0.16)高于正常人对照组(0.66±0.10),差异有显着性(P<0.05).活动期SLE患者PBMC中Caspase-1和Cas-pase-3的阳性表达率与正常人对照组相比差异无显着性(P>0.05).结论 活动期SLE患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA表达水平增高,Caspase级联反应可能参与了SLE患者淋巴细胞的凋亡过程。     

天疱疮患者外周血单一核细胞糖皮质激素受体mRNA的表达

目的 通过检测外周血单一核细胞(PBMC)糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达预测天疱疮患者对糖皮质激素(简称激素)治疗的疗效。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对30例天疱疮患者及30例健康对照者PBMCGRα及GRβ的mRNA进行检测。结果 所有天疱疮患者及健康对照者均可检测到GRαmRNA,且天疱疮患者中GRαmRNA的表达水平显著低于正常人对照组(P=0.044),但在激素治疗控制组及未控制组之间,GRαmRNA的表达水平差异无统计学意义。GRβmRNA的检出率:激素治疗未控制组为83%(10/12),激素治疗控制组为17%(3/18),正常人对照组为30%(9/30),GRβmRNA的阳性率在激素治疗控制组与未控制组之间差异有统计学意义(P<0.001)。结论 激素治疗未控制组天疱疮患者PBMC上GRβmRNA表达增加,GRβ在决定天疱疮患者对激素治疗疗效上有一定作用。     

甲氧沙林对黑素细胞粘附及基质金属蛋白酶-2的影响

目的 探讨甲氧沙林治疗白癜风的可能机制.方法 正常人黑素细胞来自包皮环切术切取的包皮,用包被纤维黏连蛋白的48孔培养板检测黑素细胞粘附,用带微孔膜的Transwell培养板研究黑素细胞迁移,用RT-PCR方法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达.结果 50nmol/L和100nmol/L甲氧沙林可促进黑素细胞粘附(P<0.05)和迁移(P<0.05),100nmol/L对黑素细胞促迁移作用最强(P<0.01),而且10nmol/L甲氧沙林即可明显促进MMP-2mRNA表达(P<0.01).在一定浓度下,甲氧沙林促黑素细胞粘附、迁移和MMP-2mRNA表达呈剂量依赖性,在不同浓度组间比较差异均有统计学意义(P<0.01、P<0.05和P<0.01).结论 甲氧沙林通过促进MMP-2的表达来促进黑素细胞粘附和迁移.