可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞的表达

目的 探讨可诱导共刺激分子(ICOS)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞的表达。方法 应用双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测了33例SLE患者和16例正常人对照者外周血中T淋巴细胞表面ICOS的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定SLE患者疾病活动程度,比较分析不同组别SLE患者ICOS表达水平与SLEDAI的相关性。结果 活动期SLE组T淋巴细胞ICOS表达水平明显高于正常人对照组(P<0.01)和非活动期SLE组(P<0.01),非活动期SLE组与正常人对照组T淋巴细胞ICOS表达水平则差异无统计学意义(P>0.05)。活动期组与非活动期组SLE患者T淋巴细胞ICOS表达水平均与SLEDAI呈显著正相关(r=0.71,P=0.001、r=0.56,P=0.03)。结论 活动期SLE患者T淋巴细胞ICOS表达增高,ICOS可能与SLE的发病机制有关。     

结缔组织疾病

20072978 DNA甲基转移酶与CD11a基因在SLE患者中的表达/施伟民(上海交大附属瑞金医院皮肤科),伍洲炜,施若非…∥中华皮肤科杂志.-2007,40(7).-431~433以半定量RT-PCR方法检测了SLE缓解期、活动期及正常人外周血单核细胞(PBMC)中DNA甲基转移酶(DNMT)及CD11a基因表达水平,并进行相关性分析。结果SLE缓解期患者PBMC中DNMT1的表达水平显著低于正常人对照组(P<0.0001);活动期的表达水平也显著低于对照组(P=0.0001);缓解期与活动期比较差异无统计学意义(P=0.089)。SLE缓解期、活动期及对照组PBMC中DNMT3A的表达水平差异无统…     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞白介素6受体水平的研究

目的 探讨白介素6(IL-6)及其受体(IL-6R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法 应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中IL-6RmRNA的表达水平,用ELISA法检测血清中IL-6水平。结果 ①活动期SLE患者和非活动期SLE患者及正常人IL-6R阳性表达率为100%。②PBMC中,IL-6RmRNA表达水平:活动期SLE患者为0.902±0.273,非活动期SLE患者为0.519±0.11,正常人为0.573±0.24。活动期组和非活动期组和对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.00),非活动期组和对照组比较差异无统计学意义(P=0.289)。③血清中IL-6水平:活动期组为71.89±20.02pg/mL,非活动期组为17.96±6.93pg/mL,对照组为0.035±0.035pg/mL。活动组显著高于非活动组和对照组(P=0.00),非活动组显著高于对照组(P=0.00)。活动期SLE患者和非活动期SLE患者血清中的IL-6水平与PBMC上的IL-6R的表达水平呈正相关(r=0.887和r=0.615,P<0.05)。结论 IL-6及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。检测SLE患者PBMC中IL-6受体的表达水平可作为评估疾病活动性的参考指标之一。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD80/CD86和CTLA-4mRNA的表达

目的 探讨CD80/CD86和CTLA-4在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及临床意义。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测32例SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)中CD80、CD86、CTLA-4mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中CD86的阳性表达率为90.63%,正常人对照组为60%,两组差异有非常显著性(P<0.01)。CD86的mRNA表达的平均水平(0.6410±0.0174)亦明显高于正常人对照组(0.4510±0.0402),差异有非常显著性(P<0.001);活动期SLE患者PBMC中CTLA-4的阳性表达率为81.25%,其mRNA表达的平均水平为1.0020±0.0624,均明显高于正常人对照组,差异有显著性(P<0.01);活动期SLE患者PBMC中CD80的阳性表达率和CD80mRNA的表达水平与正常人对照组差异均无显著性(P>0.05)。结论 CD86和CTLA-4的异常表达可能在SLE疾病活动和发展过程中起重要作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3的表达水平及其与淋巴细胞凋亡的关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例活动期SLE患者和30例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中Caspase-1和Caspase-3mRNA的表达水平。结果 活动期SLE患者PBMC中Caspase-1mRNA的平均表达水平(1.20±0.33)明显高于正常人对照组(0.79±0.25),差异有非常显着性(P<0.01);Caspase-3mRNA的平均表达水平(0.87±0.16)高于正常人对照组(0.66±0.10),差异有显着性(P<0.05).活动期SLE患者PBMC中Caspase-1和Cas-pase-3的阳性表达率与正常人对照组相比差异无显着性(P>0.05).结论 活动期SLE患者外周血淋巴细胞Caspase-1和Caspase-3mRNA表达水平增高,Caspase级联反应可能参与了SLE患者淋巴细胞的凋亡过程。     

二期梅毒患者外周血淋巴细胞凋亡及其Fas、Bcl-2表达的研究

目的 检测二期梅毒患者外周血淋巴细胞(PBLC)凋亡及其Fas、Bcl-2的表达,探讨二期梅毒患者免疫功能异常与淋巴细胞凋亡的关系。方法 采用流式细胞仪检测33例二期梅毒患者和30例正常人PBLC细胞凋亡及其Fas、Bcl-2的表达。结果 梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞Fas表达明显高于对照组(P<0.01),而Bcl-2表达明显低于对照组(P<0.01)。CD8⁺、CD19⁺细胞Fas、Bcl-2表达两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01),CD8⁺及CD19⁺细胞凋亡率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞凋亡率分别与其Fas表达呈显著正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.71,P<0.01),但与Bcl-2表达呈显著负相关(r=-0.82,P<0.01;r=-0.74,P<0.01)。结论 二期梅毒患者细胞免疫功能异常可能与淋巴细胞凋亡过度有关,而淋巴细胞凋亡过度与Fas、Bcl-2表达异常有关。     

系统性红斑狼疮患者白介素13和神经生长因子的测定及其临床意义

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中白介素13和神经生长因子的水平变化.方法 应用酶联免疫吸附法检测35例SLE患者和15例正常人血清白介素13和神经生长因子水平.结果 SLE活动期患者血清白介素13水平为(92.69±9.87)pg/mL及神经生长因子水平为(339.69±25.60)pg/mL,SLE稳定期患者分别为(54.22±9.31)pg/mL和(300.89±33.51)pg/mL,正常人对照组分别为(35.20±12.70)pg/mL和(111.40±32.54)pg/mL.SLE活动期、稳定期患者血清白介素13和神经生长因子水平均显著高于正常人对照组(P<0.05或<0.01),SLE活动期显著高于稳定期(P值均<0.01).SLE患者血清白介素13水平与SLEDAI积分、血沉、C3均呈显著相关(r值分别为0.813、0.504、-0.605),神经生长因子水平与上述指标也呈显著相关(r值分别为0.442、0.338、-0.463),同时白介素13和神经生长因子水平呈显著正相关(r=0.506,P<0.01).结论 白介素13和神经生长因子在SLE的发病中可能发挥一定的作用.     

IFI 16及其信号转导途径在系统性红斑狼疮发病中的作用

目的 探讨干扰素诱导蛋白IFI 16及其Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK-STAT)信号转导途径在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测35例SLE患者和16例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中IFI 16的表达水平。体外培养PBMC,用JAK2抑制剂AG490抑制JAK-STAT信号转导途径,再用RT-PCR检测PBMC中IFI 16的表达水平。结果 与对照组比较,活动期、非活动期组IFI 16 mRNA的表达水平明显增高,差异均有统计学意义(P<0.001)。而活动期与非活动期组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在用AG490抑制JAK-STAT信号转导途径后,活动期与非活动期组PBMC中IFI 16 mRNA的表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.001),而正常组用药前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IFI 16在SLE患者的异常高表达提示IFI 16基因可能为SLE的致病基因之一。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞CD80和CD86的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞(PBLC)CD80和CD86的表达及其意义。方法 采用流式细胞仪检测了30例SLE患者PBLC的CD80和CD86抗原,并以25例正常人作为对照。结果 SLE患者PBLC上CD86的表达显著低于正常对照组(P<0.05);CD80表达与正常对照组差异无显著性;SLE患者活动期和非活动期、有肾病组和无肾病组的CD80和CD86的表达差异均无显著性;CD80和CD86水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、ANA滴度、IgG、和C3水平无相关关系。结论 SLE患者PBLC上CD86的表达降低,可能与SLE发病机制有关。     

SLE患者T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域甲基化状态的探索

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域DNA甲基化状态及其在发病机制中的作用.方法 分离9例活动期SLE患者和7例正常人对照外周血CD4⁺与CD8⁺T细胞,并分别提取DNA.采用亚硫酸氢钠-测序法对CD4⁺与CD8⁺T细胞穿孔素基因启动子区域DNA甲基化水平进行检测.结果 在穿孔素基因启动子区域,正常对照组CD4⁺T细胞平均甲基化水平显著高于CD8⁺T细胞(P<0.05).活动期SLE患者CD4⁺T细胞平均甲基化水平显著低于正常对照组(P<0.05),而CD8⁺T细胞与正常对照组的差异则无统计学意义(P>0.05).结论 活动期SLE患者的CD4⁺T淋巴细胞的穿孔素基因启动子区域处于低甲基化状态.     

甲基结合蛋白MeCP2与mbd2在SLE患者中的表达

目的　探讨甲基结合蛋白MeCP2及去甲基化酶mbd2基因的表达异常在SLE发病中的作用。方法　以RT-PCR方法检测SLE缓解期、活动期患者与正常人外周血单一核细胞（PBMC）中MeCP2及mbd2基因的表达水平,并进行相关性分析。结果　SLE活动期、缓解期及正常人对照组PBMC中MeCP2的表达差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。SLE缓解期患者PBMC中mbd2的表达水平显著高于正常人对照组（t = 12.8,P ＜ 0.01）;SLE活动期患者PBMC中mbd2表达显著高于SLE缓解期（t = 20.0,P ＜ 0.01）。SLE患者PBMC中mbd2的表达与SLEDAI评分呈正相关（r = 0.737,P = 0.0001）。正常人对照组PBMC中mbd2的表达与MeCP2的表达呈正相关（r = 0.550,P = 0.0222）。结论　在正常情况下,MeCP2和mbd2的表达相互制约,在SLE患者中这种关系被破坏。     

系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞激活状态及OX40、OX40L mRNA表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T淋巴细胞激活状态及OX40、OX40L mRNA表达水平。方法 采用双色流式细胞仪测定SLE患者和健康人外周血CD38CD3分子表达,采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定外周血单一核细胞（PBMC）中OX40、OX40L mRNA表达水平。结果 SLE患者外周血CD38CD3分子表达水平显著高于健康人（t = 3.12,P < 0.05）。活动期SLE患者PBMC OX40、OX40L mRNA水平显著高于非活动期患者和健康人（F = 4.13,3.12,P值均 < 0.01）。OX40 mRNA水平与SLE疾病活动指数呈正相关（r = 0.35,P < 0.05）。结论 T淋巴细胞异常活化及OX40、OX40L mRNA表达水平上调在SLE的发生、发展中可能起一定作用。     

辅助性T17细胞功能异常在系统性红斑狼疮中的意义

目的 探讨辅助性T（Th）17细胞介导的炎症损伤与系统性红斑狼疮（SLE）的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测102例SLE患者及68例健康对照血清白介素17A（IL-17A）水平;实时荧光定量聚合酶链反应方法相对定量分析27例SLE患者及13例健康对照外周血单一核细胞（PBMC）中孤核受体γt（RORγt）基因表达水平;分析血清IL-17A水平与RORγt基因表达之间及其分别与SLE疾病活动度（SLEDAI）、SLE是否合并肾脏病变的关系。结果 102例SLE患者血清IL-17A 水平 ［14.75 （5.12 ～ 69.76） ng/L］较68例健康对照组 ［5.77 （2.22 ～ 9.60） ng/L］显著升高（P ＜ 0.01）。102例SLE患者血清IL-17A与血清C反应蛋白、血浆肌酐、尿管型呈正相关（分别为r = 0.33、P ＜ 0.01,r = 0.26、P ＜ 0.05,r = 0.27、P ＜ 0.05）;与SLEDAI无显著相关（P ＞ 0.05）。27例SLE患者RORγt基因表达水平较13例健康对照组显著升高 ［1 （0.40 ～ 2.62） 和0.19 （0.15 ～ 0.75）,P ＜ 0.01］。27例SLE患者RORγt基因表达水平与血清IL-17A水平呈正相关（r = 0.47,P ＜ 0.01）,与血清补体3之间呈负相关（r = －0.46,P ＜ 0.05）。SLE病情高活动组与低活动组、SLE合并肾脏病变与SLE无合并肾脏病变组间血清IL-17A、RORγt基因表达水平差异均无统计学意义（P值均 ＞ 0.05）。结论 Th17细胞介导的炎症损伤可能参与了SLE的发病,与SLE肾脏病变可能有关,但其可能不是SLE病情活动惟一的影响因素,在SLE及SLE肾脏受累中可能均不是主导因素。     

SLE患者外周血白细胞B7-H1分子的表达

目的 探讨B7-H1分子在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞的表达.方法 心用荧光抗体染色技术,经流式细胞仪检测30例SLE患者和20例正常人对照者外周血白细胞表面B7-H1的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定患者疾病活动程度.结果 活动期SLE组单核细胞、淋巴细胞和粒细胞上B7-H1表达水平均明显高于正常人对照组(P<0.01);SLE患者单核细胞和淋巴细胞B7-H1表达水平与SLEDAI呈正相关(r₁=0.42,P₁<0.05;r₂=0.52,P₂<0.05);抗dsDNA抗体阳性患者组淋巴细胞表面B7-H1分子数较抗dsDNA抗体阴性组明显增高(t=3.20,P<0.01).治疗后SLE患者外周血单核细胞、淋巴细胞和粒细胞B7-H1表达均明显下降,t值分别为10.00、6.75和4.33,P<0.01.结论 活动期SLE患者外周血白细胞B7-H1表达增加,且与SLEDAI成正相关,B7-H1可能与SLE的发病机制有关.     

凋亡调控分子BclGL表达与系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞凋亡的研究

【摘要】 目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）中凋亡调控分子BclGL的表达及其意义。 方法 流式细胞仪检测20例活动期SLE患者（A-SLE）、18例非活动期SLE患者（I-SLE）以及30例健康对照者PBMC的细胞绝对数;用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）细胞凋亡双染试剂盒检测各组PBMC早期凋亡率;荧光定量PCR技术检测各组PBMC中BclGL mRNA的表达量;Western 印迹检测BclGL蛋白表达量;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血清中干扰素（IFN）-α水平;采用SPSS13.0统计软件进行组间非参数Mann-Whitney或Kruskal-Wallis检验,并使用Pearson相关分析法分析SLE患者PBMC中BclGL表达量与细胞凋亡率及临床指标间的相关性。 结果 A-SLE患者外周血中PBMC细胞绝对数［（0.16 ± 0.06） × 109/L］低于I-SLE［（0.27 ± 0.14） × 109/L］及健康对照［（0.34 ± 0.23） × 109/L］（均P < 0.01）;A-SLE患者PBMC凋亡率（22.6% ± 1.1%）较I-SLE（16.4% ± 0.9%）及健康对照（10.1% ± 0.4%）升高,I-SLE患者也高于健康对照（均P < 0.01）;A-SLE患者PBMC中BclGL表达量高于I-SLE及健康对照（均P < 0.01）;SLE患者外周血血清IFN-α含量［（32.5 ± 2.2） μg/L］较健康对照［（15.5 ± 1.3） μg/L］增高（均P < 0.01）;SLE患者PBMC中上调的BclGL表达与PBMC凋亡率（r = 0.486,P < 0.01）及SLE疾病活动指数（SLEDAI）、抗核抗体（ANA）滴度、IFN-α水平呈正相关（r = 0.496,0.516,0.535,均P < 0.01）,与患者补体C3水平呈负相关（r = －0.515,P < 0.01）。结论 SLE患者PBMC中BclGL分子表达上调可能参与SLE患者PBMC的凋亡异常,从而在SLE发病中起作用。 【关键词】 红斑狼疮,系统性; 外周血单一核细胞; BclGL; 细胞凋亡     

BLyS及其受体BAFF-R在SLE患者中的表达及与SLEDAI和血清IgG的相关性研究

目的:通过在基因和蛋白水平上检测系统性红斑狼疮(SLE)患者BLyS及其受体BAFF-R的表达水平,探讨BLyS及BAFF-R与SLE发病机制的相关性。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime PCR)检测60例SLE患者(其中病情活动期34例,稳定期26例)、50例健康人群外周血单个核细胞(PBMC)的BLyS mRNA、BAFF-R mRNA的表达水平,ELISA方法检测其血清BLyS的表达,并分析其与SLE活动指数(SLEDAI)、血清免疫球蛋白IgG的相关性。结果:SLE患者PBMC中BLyS、BAFF-R mRNA及血清中BLyS蛋白表达水平均明显高于健康对照组(t值分别为14.02、14.6、9.56,P值均0.01);活动期BLyS mRNA及BLyS蛋白表达水平明显高于稳定期(t值分别为2.26、3.96,P值均0.05),BAFF-R mRNA表达在活动期和稳定期之间没有差别(t=1.49,P0.05)。SLE患者BLyS mRNA及BLyS蛋白水平均与SLEDAI积分和血清IgG水平呈正相关(P值均0.01),BAFF-R mRNA水平则与SLEDAI、IgG均无相关性(P值均0.05)。结论:SLE患者BLyS mRNA、BAFF-R mRNA、BLyS蛋白表达水平升高,BLyS在一定程度上反映了病情的活动,表明BLyS及其受体可能参与SLE的发生和发展,并为监控SLE的病情和治疗效果提供了新的辅助方法。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞刺激因子及其受体BAFF-R的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）中B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体BAFF—R（属于肿瘤坏死因子家族的B细胞活化因子受体）的表达情况。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）以及免疫印迹法（westem blot）分别检测28例SLE活动期患者及24例SLE稳定期患者PBMC中BLyS与BAFF—RmRNA及蛋白的表达水平，并以21例健康志愿者作对照；同时将两者mRNA及蛋白的表达水平与SLE疾病活动程度进行相关分析。结果 SLE活动期、稳定期患者PBMC中BLyS与BAFF—R mRNA及蛋白的表达水平均明显高于正常人（P〈0．01），活动期患者的表达高于稳定期患者（P〈0．01）；BLyS mRNA及蛋白的表达与狼疮活动指数（SLEDAI）呈显著正相关（P〈0．01），BAFF—R mRNA及蛋白的表达与SLEDAI无明显相关性（P〉0．05）。结论 BLyS及其受体BAFF—R可能参与了SLE的发病机制。     

雌激素、肼苯哒嗪和紫外线对SLE患者甲基转移酶活性的影响

目的 探讨雌激素、肼苯哒嗪、紫外线（UVB）照射诱导SLE发病的作用机制。方法 分离、培养10例SLE患者和9例正常人外周血单核细胞（PBMC）,分别进行雌激素、肼苯哒嗪和UVB照射等干预。采用甲基转移酶（DNMT）激活/抑制法检测PBMC的DNMT1活性。 结果 SLE患者DNMT1活性（0.36 ± 0.24）较正常人对照（0.46 ± 0.17）差异无统计学意义（P > 0.05）,雌激素干预后SLE患者DNMT1活性显著低于正常人对照（0.32 ± 0.18比0.46 ± 0.17,t = 1.725,P < 0.05）,肼苯达嗪干预后SLE患者DNMT1活性显著低于正常人对照（0.33 ± 0.13比0.46 ± 0.17,t = 1.739,P < 0.05）,UVB干预后SLE患者DNMT1活性显著低于正常人对照（0.30 ± 0.14比0.46 ± 0.17,t = 1.739,P < 0.05）。另外,肼苯达嗪干预的正常人 DNMT1活性（0.38 ± 0.12）也显著低于正常人（0.46 ± 0.17）对照（P < 0.05）。结论 雌激素、肼苯哒嗪和UVB照射等因素具有抑制SLE患者DNMT1活性的作用,提示三个诱发因素可能通过改变DNMT活性来诱导SLE发病。     

系统性红斑狼疮患者CD4+ T细胞中miR-17和miR-20a 的表达及与病情活动的相关性研究

【摘要】 目的 探讨miR-17和miR-20a在系统性红斑狼疮（SLE）患者CD4+ T细胞中的表达及与疾病活动的相关性。 方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测SLE患者活动组17例、缓解组13例及健康对照组18例外周血CD4+ T细胞中miR-17和miR-20a的表达水平,并与SLE患者临床指标进行相关性分析。 结果 SLE患者组30例miR-17的表达水平（0.24 ± 0.08）显著高于健康对照组（0.15 ± 0.06）,两组比较,P < 0.05;两组miR-20a的表达水平分别为0.19 ± 0.10和0.12 ± 0.09,两组比较,P < 0.05。SLE活动组、缓解组与健康对照组miR-17表达水平分别为0.27 ± 0.07、0.20 ± 0.05、0.16 ± 0.08,活动组高于缓解组（P < 0.05）和健康对照组（P < 0.05）;miR-20a表达水平三组分别为0.22 ± 0.10、0.15 ± 0.07、0.13 ± 0.09,活动组高于缓解组（P < 0.05）和健康对照组（P < 0.05）;缓解组miR-17和miR-20a的表达水平与健康对照组比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。SLE患者组miR-17、miR-20a的表达与SLE活动指数（SLEDAI）均呈正相关（r = 0.45,P < 0.05和r = 0.38,P < 0.05）,与抗dsDNA抗体滴度呈正相关（r = 0.54,P < 0.01和r = 0.46,P < 0.01）,而与C3水平呈负相关（r = -0.43,P < 0.05和r = -0.42,P < 0.05）。 结论 SLE患者外周血CD4+ T细胞中miR-17、miR-20a表达上调,且miR-17、miR-20a表达水平与SLE病情活动相关。     

系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞CD70基因表达及其启动子区域甲基化状态的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者T淋巴细胞CD70mRNA和蛋白的表达及CD70基因启动子DNA甲基化的状态。方法 分离15例活动期SLE患者、15例非活动期SLE患者和15例健康对照外周血CD4+与CD8+细胞,用实时定量逆转录PCR（RT-PCR）方法检测CD4+和CD8+细胞CD70 mRNA转录水平,流式细胞仪检测CD4+CD70+ 细胞和CD8+CD70+细胞百分率,亚硫酸氢钠基因测序法检测CD4+细胞和CD8+细胞CD70基因启动子区域甲基化水平。组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。 结果 ①活动期、非活动期SLE患者CD4+细胞CD70 mRNA转录水平分别为0.82 ± 0.12和0.73 ± 0.11,明显高于健康对照组（0.45 ± 0.09）,F = 53.017,P < 0.01,活动期SLE患者CD4+细胞的CD70 mRNA转录水平显著高于非活动期SLE患者（P < 0.05）。活动期、非活动期SLE患者外周血CD4+CD70+细胞百分率分别为80.30% ± 11.04% 和66.80% ± 3.98%,明显高于健康对照组（12.48% ± 3.45%）,F = 311.517,P < 0．01,活动期SLE患者CD4+CD70+细胞百分率显著高于非活动期SLE患者（P值 < 0.05）。SLE患者外周血CD70+CD4+细胞百分率与SLE疾病活动度呈显著正相关（r = 0.792,P = 0.000）。活动期、非活动期SLE患者组的CD4+细胞CD70基因启动子序列-600 ~ -300 bp 区域平均甲基化水平分别为0.32 ± 0.05和0.36 ± 0.05,明显低于健康对照组（0.62 ± 0.05）,F = 152.64,P < 0.01,活动期平均甲基化水平明显低于非活动期SLE患者组（P < 0.05）。结论 CD4+细胞CD70基因启动子区域处于低甲基化状态,这种低甲基化状态可能是CD70过度表达的直接原因。