地塞米松对哮喘大鼠Th1/Th2失衡及嗜酸性粒细胞凋亡的作用

目的　观察地塞米松对哮喘大鼠Th1/Th2 (T辅助细胞 1/T辅助细胞 2 )平衡、嗜酸性粒细胞 (EOS)凋亡率的影响作用 ,探讨糖皮质激素治疗哮喘的机制。方法　清洁级雄性SD大鼠 30只 ,随机分为 3组 :正常对照组 (C)、哮喘组 (A)、地塞米松治疗组 (T)。卵清白蛋白复制大鼠哮喘模型 ,检测大鼠血、支气管肺泡灌洗液 (BALF)中IL 4、IFN γ水平及气道壁EOS凋亡率。结果　A组大鼠BALF中IFN γ水平明显低于C组 (P <0 0 1) ,血中及BALF中的IL 4水平则明显高于C组 (均为P<0 0 1) ,表现出明显的Th1/Th2失衡。T组大鼠IL 4的表达明显低于A组而IFN γ的表达则明显高于A组 (均为P <0 0 1)。在A组 ,大鼠气道壁EOS的浸润明显增多 ,但凋亡细胞却很少看到 ,EOS凋亡率明显低于C组 (P <0 0 1) ,T组EOS凋亡率则明显高于A组 (P <0 0 1)。结论　纠正哮喘Th1/Th2失衡和促进气道壁EOS凋亡可能是糖皮质激素减轻哮喘气道炎症的重要机制之一。     

树突细胞与哮喘Th1/Th2失衡

特应性哮喘患者以Th2免疫反应为主,导致气道炎症,Th1／Th2失衡是特庆性哮喘重要的免疫病理机制,树突细胞（DCs）中肺部主要抗原递呈细胞,不但可以介志对吸入抗原初始的免疫反应,活化辅助性T细胞,而且在可以决定T细胞的分化方向,维持哮喘Th2免疫反应和Th1／Th2失衡机制中发挥重要作用而日益受到重视。本文就近年来对特应性哮喘免疫病理机制中DCs对Th1／Th2失衡影响认识作一综述。     

锌通过调节Th1/Th2平衡及抗氧化降低哮喘大鼠气道炎症

目的 探讨锌对哮喘大鼠气道炎症的影响及机制。方法 建立哮喘大鼠模型,SD大鼠32只,按体重随机分为4组,A组为缺锌饲料+卵清蛋白（OVA）激发组;B组为补锌饲料+ OVA激发组;C组为正常锌饲料+ OVA激发组;D组为正常锌饲料+生理盐水激发组。诱喘后24 h取右肺HE染色,观察气道壁细胞成分;取左肺制备肺组织匀浆检测γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）水平。结果 与C组相比,A组大鼠支气管壁中嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞数及肺组织匀浆中MDA均明显增加（P<0.05）,而IFN-γ、IFN-γ/IL-4、SOD及GPX均明显减少（P<0.05）;B组大鼠上述炎性细胞及MDA均明显减少（P<0.05）,而IFN-γ、IFN-γ/IL-4、SOD及GPX均明显增加（P<0.05）;IL-4含量两组无明显变化。结论 锌可能通过调节Th1/Th2平衡及抗氧化降低哮喘大鼠气道炎症。     

TLSFJM对Th1/Th2样细胞亚群比率的影响

目的 :探讨TLSFJM 对同种异体抗原活化的Th1/Th2样细胞亚群变化的影响。方法 :在混合淋巴细胞反应 (MLR)体系中加入TLSFJM 或IL 4 ,用细胞内免疫荧光染色结合流式细胞术分析TLSFJM 对Th1/Th2样细胞亚群比率的影响。结果 :在TLSFJM实验组中 ,活化淋巴母细胞分化为IFN γ 细胞的比率略有降低 (49.8%→ 4 3.1% ) ,IL 4 、IL 6 细胞的比率有明显降低 ,IL 4 细胞的比率由 75 .4 %降至 4 3.7% ,IL 6 细胞的比率由6 7.8%降至 5 2 .6 %。在未活化小淋巴细胞中 ,也观察到同样的趋势。结论 :TLSFJM 对Th1、Th2样细胞亚群都有抑制 ,但似乎主要作用于Th2样细胞亚群 ,从而使其在Th1/Th2样细胞的比例降低     

细粒棘球蚴感染对哮喘大鼠血清白介素-17水平及Th1/Th2平衡的影响

目的建立细粒棘球蚴感染并发过敏性哮喘实验动物模型及探讨细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的作用。方法 24只健康Wistar大鼠,随机分为3组,A组为正常对照组,B组为单纯哮喘组,C组为细粒棘球蚴感染并发哮喘组。C组大鼠经腹腔注射感染细粒棘球蚴,70 d后,以卵白蛋白(OVA)分别对B组、C组大鼠进行致敏及激发,建立过敏性哮喘模型。取大鼠肺组织作病理切片,观察大鼠肺组织的炎症变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白介素-17(IL-17)、白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的水平。结果与B组比较,C组大鼠血清IL-17和IL-4的水平明显下降(P<0.05),而血清IFN-γ的水平明显上升(P<0.05)。各组大鼠血清IL-4与IFN-γ水平呈密切负相关(r=-0.915),IL-4和IFN-γ水平与IL-17呈负相关关系(r=-0.406,-0.603),P<0.05。结论细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的发生有抑制作用。     

外周血Th1/Th2细胞在大鼠肝移植早期的变化

目的观察外周血Th1/Th2细胞在大鼠肝移植早期不同免疫状态下的变化趋势是否和免疫状态有关。方法大鼠分3组：A组：同基因移植组（BN→BN）;B组：异基因移植（Lewis→BN）＋环孢素A（CsA）组;C组：异基因移植组。均36只,另外各设观察组观察生存期。于移植后1、3、5、7和14d应用流式细胞分析外周血CD4^＋CD45RC^&#177;的百分数,观察移植肝排斥反应病理分级及受体存活时间。结果（1）A组和B组的生存期平均大于100d,明显长于C组（34.3&#177;3.6）d。（2）除第1天外,C组和B组各时间段的排斥分级明显高于A组（P〈0.05或〈0.01）;C组亦明显高于B组（P〈0.05或〈0.01）。（3）移植后3d起CD4^＋CD45RC^＋%/CD4^＋CD45RC^-%在C组明显高于A组和B组（P〈0.05或〈0.01）。（4）CD4^＋CD45RC^＋%/CD4^＋CD45RC^-%在B组和排斥分级存在负相关（r=-0.565,P〈0.01）,而在C组CD4^＋CD45RC^＋%/CD4^＋CD45RC^-%和排斥分级存在正相关（r=0.745,P〈0.01）。结论外周血Th1/Th2细胞的变化趋势和大鼠肝移植早期不同免疫状态有关。     

Graves’病患者Th1/Th2免疫应答及性激素对Th1/Th2的影响（文献综述）

Graves’病（GD）是最常见的自身免疫性甲状腺疾病（AITD），其发病机理以体液免疫异常为大家所熟知，但细胞因子在GD中的发病作用越来越受到国内外学者的重视，研究的焦点主要侧重于Th1／Th2细胞平衡紊乱。GD及其他自身免疫性疾病女性显著高发，提示性激素是影响机体免疫功能的重要因素。本文就近年来国内外对GD患者Th1／Th2免疫应答的研究及性激素对Thl／Th2平衡的影响作一综述。     

Th1/Th2、Tc1/Tc2亚群在乙肝肝硬化患者中的作用

目的 :探讨乙肝肝硬化患者外周血 (PBMC)中CD4 和CD8 T细胞内Th1和Th2类细胞的平衡状态 ,探明Th1、Th2类细胞在乙肝肝硬化中的作用。方法 :乙肝肝硬化患者CD4 T细胞和CD8 T细胞中IFN γ 和IL 4 细胞的百分率 ,观察乙肝肝硬化患者Th1 Th2、Tc1 Tc2比例的变化。结果 :乙肝肝硬化患者PBMC中CD4 ,CD8细胞 ,CD4 CD8比值与健康对照者相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,Th1细胞及Tc1细胞百分率为 8 8% ,9 0 % ,较健康对照者 7 5 % ,7 7%升高 (P <0 0 5 )。结论 :乙肝肝硬化患者外周血T细胞亚群发生Th1类偏移 ,在乙肝肝硬化的发生和发展中可能起重要作用     

急性MCMV感染对小鼠脾Th1/Th2/Th17细胞亚群分化的影响

目的:在整体水平观察小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠脾Th1/Th2/Th17细胞亚群分化及其主要的效应性细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17A)表达的影响.方法:建立MCMV感染模型,8只BALB/c小鼠分别于接种MCMV Smith株后3天和14天各处死4只;另设8只接种唾液腺匀浆的模拟感染小鼠作为对照.用空斑形成试验测定肝、脾和唾液腺组织病毒滴度;流式细胞术检测脾T淋巴细胞中Th1(CD4+ IFN-γ+)、Th2(CD4+ IL-4+)、Th17(CD4+IL-17A+)细胞比例,双抗体夹心ELISA法检测脾细胞培养上清中病毒特异性IFN-γ、IL-4、IL-17A水平.结果:MCMV感染早期肝、脾和唾液腺组织中病毒呈低水平复制,而感染后14天仅在唾液腺组织呈高水平复制;Th1细胞比例及病毒特异性IFN-γ主要在MCMV感染早期呈显著升高(P ＜0.01);Th2细胞及IL-4均无明显表达及改变;Th17细胞及病毒特异性IL-17A则主要在感染后14天升高(P＜0.05).结论:MCMV感染早期,机体通过上调Th1细胞分化比例及IFN-γ的表达发挥抗病毒效应,而MCMV诱导Th17细胞分化及IL-17A的高表达可能是MCMV感染致宿主特异性细胞免疫功能失调并逃避机体特异性细胞免疫攻击的原因之一.     

SARS患者淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子的检测与意义

为了解SARS患者糖皮质激素治疗后细胞免疫状况 ,系列观察我院 7例SARS确诊者 (5男 2女 ,2 8～ 6 8岁 )淋巴细胞亚群及细胞因子变化 ,病程 0～ 6 1d。另选 31例HIV感染者作疾病对照 ,2 4例健康献血员作正常对照。用流式细胞术检测外周血CD3、CD4和CD8细胞 ,以ELISA法检测血清Th1/Th2类细胞因子 (IFN γ/IL 4 )含量。结果是SARS组CD3、CD4、CD8均值 (5 2 9 80、 313 0 9、 195 94 /μl)都低于正常组均值 (14 2 0 95、 80 9 80、 5 30 95 /μl) ,P均 <0 0 0 1;与HIV组均值(813 2 3、 176 81、 6 0 3 10 /μl)比较 ,CD4、CD8偏低 (P <0 0 0 6、P <0 0 0 1)。SARS组CD4 /CD8比值与正常组相比 ,差异不显著。淋巴细胞亚群数目与病程密切相关。SARS组Th1/Th2类细胞因子水平 (A均值 0 0 5 8/0 0 31)均低于HIV组 (A均值0 0 79/0 0 33)和正常组 (A均值 0 111/0 0 35 ) ,细胞因子含量与病程无关。提示我们所观察的SARS患者细胞免疫功能低下。     

T-bet重组腺病毒对哮喘小鼠Thl/Th2免疫平衡的调节

目的探讨静脉应用T-bet重组腺病毒（AdT-bet）对哮喘模型小鼠过敏性气道炎症及Th1／Th2免疫失衡的影响。方法36只C57BL/6小鼠随机分为AdT-bet治疗组（A组）、模型对照组（B组）、正常组（C组）。以卵蛋白（OVA）、氢氧化铝免疫建立哮喘模型，A组激发前尾静脉注射100μL的AdT-bet（1×10^8 PFU/μL），各组激发后肺泡灌洗分析细胞组份，分离肺淋巴细胞测定细胞因子分泌水平，以流式细胞仪检测CD3^＋、CD4^＋ T细胞比例及表达IFNγ和IL-4的比例，比较各组肺组织学改变。结果静脉应用AdT-bet组与对照组相比：①可明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润（P〈0．01）；②明显抑制肺淋巴细胞产生IL-4、IL-5，增加了IFNγ的产生；③肺脏淋巴细胞CD4^＋ IFNγ百分比及IFNγ^＋/IL-4^＋明显升高（P〈0．01），而CD4^＋ IL-4^＋百分比则明显下降；④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用，其机制可能与表达的T-bet上调Th1／Th2比值，从而调整了免疫平衡有关。     

T-bet重组腺病毒对哮喘小鼠Thl/Th2免疫平衡的调节

目的 探讨静脉应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘模型小鼠过敏性气道炎症及Th1/Th2免疫失衡的影响.方法 36只C57BL/6小鼠随机分为AdT-bet治疗组(A组)、模型对照组(B组)、正常组(C组).以卵蛋白(OVA)、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射100 μL的AdT-bet(1×108PFU/μL),各组激发后肺泡灌洗分析细胞组份,分离肺淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3 、CD4 T细胞比例及表达IFNγ和IL-4的比例,比较各组肺组织学改变.结果 静脉应用AdT-bet组与对照组相比:①可明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(P＜0.01);②明显抑制肺淋巴细胞产生IL-4、IL-5,增加了IFNγ的产生;③肺脏淋巴细胞CD4 IFNγ 百分比及IFNγ /IL-4 明显升高(P＜0.01),而CD4 IL-4 百分比则明显下降;④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应.结论 激发前静脉用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Thl/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关.     

PLGA为佐剂的OVA纳米疫苗皮下注射可预防小鼠过敏反应性气道炎症和调节Th1/Th2反应

目的 探讨聚乳酸.羟基乙酸共聚物[poly（D,L-lactic-co-glycolic）acid,PLGA]包裹的卵清蛋白（OVA）纳米癌苗（POM）对哮喘小鼠的免疫治疗效果.方法 包裹不同剂量（低、中、高）的OVA纳米粒子和对照（OVA、空白纳米粒子、PBS）通过皮下注射给予小鼠,再用OVA进行致敏和激发,通过肺组织学、支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数、测定BALF和脾细胞培养上清液中细胞因子的含量,观察小鼠呼吸道炎症和免疫学改变.结果 肺部组织学和BALF中细胞计数结果显示,与PBS对照组相比,OVA治疗组、中剂量和高剂量OVA纳米组的肺部嗜酸性浸润显著减轻,BALF中总细胞和嗜酸性细胞显著减少.卸胞因子测定结果显示,与PBS对照组相比,中、高剂量OVA纳米组的BALF和脾细胞培养上清液中IFN-γ显著升高,Ⅱ,4水平显著降低.OVA治疗组中IL-4水平显著下降,而IFN-γ水平无显著差异.结论 OVA纳米疫苗可预防哮喘嗜酸性气道炎症,其可能的机制之一是调节了过敏性哮喘的Th1/Th2失平衡反应.     

PLGA为佐剂的OVA纳米疫苗皮下注射可预防小鼠过敏反应性气道炎症和调节Thl/Th2反应

目的 探讨聚乳酸.羟基乙酸共聚物[poly(D,L-lactic-co-glycolic)acid,PLGA]包裹的卵清蛋白(OVA)纳米癌苗(POM)对哮喘小鼠的免疫治疗效果.方法 包裹不同剂量(低、中、高)的OVA纳米粒子和对照(OVA、空白纳米粒子、PBS)通过皮下注射给予小鼠,再用OVA进行致敏和激发,通过肺组织学、支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、测定BALF和脾细胞培养上清液中细胞因子的含量,观察小鼠呼吸道炎症和免疫学改变.结果 肺部组织学和BALF中细胞计数结果显示,与PBS对照组相比,OVA治疗组、中剂量和高剂量OVA纳米组的肺部嗜酸性浸润显著减轻,BALF中总细胞和嗜酸性细胞显著减少.卸胞因子测定结果显示,与PBS对照组相比,中、高剂量OVA纳米组的BALF和脾细胞培养上清液中IFN-γ显著升高,Ⅱ,4水平显著降低.OVA治疗组中IL-4水平显著下降,而IFN-γ水平无显著差异.结论 OVA纳米疫苗可预防哮喘嗜酸性气道炎症,其可能的机制之一是调节了过敏性哮喘的Th1/Th2失平衡反应.     

CTLA4-Ig基因修饰的树突状细胞体外对Th1/Th2平衡的影响

目的:探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4 Ig)基因修饰的树突状细胞(CTLA4 Ig-DCs)体外对Th1/Th2平衡的影响。方法:通过腺病毒载体将目的基因(CTLA4 Ig)转染至小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)。采用流式细胞术(FCM)检测DC表面分子和胞内CTLA4 Ig的表达;采用混合淋巴细胞反应检测DC刺激同种异体T细胞的能力,ELISA法检测DC抗原提呈反应中Th1和Th2类细胞因子IFN-γ和IL-4分泌水平。结果:CTLA4 Ig基因成功转染至DC,转染率约为80%,制备的CTLA4 Ig-DCs稳定表达CTLA4Ig,表面分子CD86呈现低表达;CTLA4 Ig-DCs可有效抑制T细胞增殖,降低抗原提呈反应上清中IFN-γ和IL-4的分泌,并增加IFN-γ/IL-4比值。结论:通过腺病毒将CTLA4 Ig转染DC并且高效表达,可有效降低DC表面CD86分子,抑制同种异体T细胞反应,并能影响体外Th1/Th2水平。