肝移植病人术后他克莫司剂量的个体化调整

目的了解肝移植后肝脏功能和血药浓度的共同检测对指导个体化抗排异减量的意义。方法动态随访检测15例肝移植病人肝功能与他克莫司（FK506）血药浓度,根据检测结果进行FK506剂量的个体化调整。结果15例病人在联合检测行FK506个体化的减量过程中均获得成功。结论肝移植病人术后,通过肝脏功能和FK506血药浓度的共同检测,可以指导抗排异药物达到合理、有效、个体化的调整使用,值得临床推广。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的检测和意义

目的检测系统性红斑狼疮（SEE）患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞（Treg）的百分比，并分析其与疾病活动的相关性。方法采用流式细胞仪检测28例SLE患者（其中活动组18例）及22名正常对照组的外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比，同时评估SLE疾病活动指数（SLEDAI）及检测血抗dsDNA水平，分析相关性。结果SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的百分比较对照组降低（P〈0．05），以活动组尤为明显，CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比与SLEDAI呈明显的负相关（P〈0．01），同时显示血抗dsDNA阳性组较阴性组患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比显著下降（P〈0．01）。结论SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg的百分比在活动期下降为明显，其在SLE的发病机制中可能起到重要的作用。     

穿孔素及颗粒酶B在肝移植排斥反应中的表达及意义

目的检测穿孔素和颗粒酶B在肝移植术后排斥反应中的表达情况，以评价其作为肝移植术后排斥反应的早期诊断指标价值。方法收集35个肝移植术后肝穿刺标本，应用免疫组织化学方法检测穿孔素和颗粒酶B表达，并与病理组织学结果相比较，研究其表达与急性排斥反应的关系。结果在35个标本中，19个经病理组织学诊断为排斥反应，其中急性排斥17例次，慢性排斥2例次。其中穿孔素和颗粒酶B在排斥反应者中的表达阳性率分别为100％(19／19)和94．7％(18／19)。而在未发生排斥反应者中，其表达阳性率分别为25．0％(4／16)和12．5％(2／16)。穿孔素及颗粒酶B多呈同步表达，仅3个标本为仅有穿孔素表达而无颗粒酶B表达，未观察到仅有颗粒酶B表达而无穿孔素表达。穿孔素和颗粒酶B的阳性表达与移植肝急性排斥反应的发生密切相关。结论穿孔素和颗粒酶B参与了肝移植后排斥反应的发生，其表达可作为术后急性排斥反应的辅助诊断指标。     

调节性T细胞在不同品系小鼠心脏移植后的变化及意义

目的探讨不同品系小鼠颈部心脏移植后调节性T细胞的变化及意义。方法建立小鼠颈部心脏异位移植模型,实验分2组,受体小鼠均为C57BL／6,供体分别为BALB／c和C57BL／6小鼠。比较两组供心存活时间、排斥反应程度,流式细胞仪测定CD4＋CD25＋调节性T细胞（Tregs）及CD3＋CD8＋T细胞水平。结果术后第7天,异基因组Tregs水平明显低于同基因组（P〈0．05）,而CD8＋T细胞却明显高于同基因组（P〈0．05）。结论Tregs水平高低与心脏移植后免疫耐受的发生、发展密切相关,可作为心脏移植后免疫耐受的监测指标,对移植物的预后估计和急性排斥反应的早期诊断具有重要的临床意义。     

他克莫司联合霉酚酸酯治疗肾移植术后早期难治性急性体液性排斥的疗效

目的:前瞻性观察他克莫司(FK506)联合霉酚酸酯(MMF)作为肾移植术后急性体液性排斥(AHR)的挽救治疗的有效性,为中国肾移植受者AHR的救治寻找一个可行的方案。方法:160例肾移植受者,根据临床表现、组织学特征、移植肾组织C4d染色符合AHR诊断标准者11例,所有患者在排斥发生时均立即应用FK506联合MMF治疗,除激素冲击外,所有患者均不接受免疫吸附、血浆置换等其他治疗方案,需要透析的患者给予连续性血液净化(CBP)治疗。结果:11例符合AHR的诊断,均表现为急剧的移植肾功能下降,治疗上无一例对冲击治疗有反应,所有患者移植肾组织肾小管周围毛细血管(PTC)部位均有弥漫的C4d沉积,接受FK506联合MMF治疗初期,所有患者仍表现为移植肾功能的进行性减退,其中10例接受了CBP治疗,在治疗4～26(16.19±6.16)天后,11例患者均出现尿量增多,移植肾功能逐渐恢复正常,平均随访12.8个月,移植肾功能均保持稳定。结论:在中国人中,FK506联合MMF能够有效逆转肾移植术后早期发生的难治性AHR,并且副作用少,经济安全,是适合中国人特点的一种治疗方案。     

肝移植术后高尿酸血症发病率及危险因素分析：单中心回顾性研究

目的 探讨肝移植术后高尿酸血症发病率及危险因素。方法 对2018年1月至2019年5月于南京大学医学院附属鼓楼医院行肝脏移植的164例肝移植受者进行回顾性分析。收集的人口统计学和生物化学数据包括性别、年龄、体重指数、术前血尿酸、肝移植手术时间、术中出血量、术中尿量、血尿酸、术后第1周平均他克莫司全血谷浓度、他克莫司全血谷浓度变异度,移植后1周、1个月、3个月、6个月肌酐清除率(creatinine clearance rate,CCr)。根据肝移植术后6个月血尿酸水平将患者分为正常组和高尿酸血症组,比较各组患者上述指标的差异。采用Logistic多因素回归分析肝移植受者高尿酸血症的影响因素。结果 最终共纳入81例患者,术后6个月高尿酸血症发生率为48.15%(39/81),高尿酸血症组男性比例显著高于正常组[84.62%(33/39)vs 64.28%(27/42);χ²=4.35,P=0.04]。高尿酸组患者的肾脏滤过功能显著低于正常组患者[术后1周CCr:93.67 ml/min vs135.05 ml/min,术后1个月CCr1:(105.39±40.86)...     

肝移植术后的免疫抑制治疗与丙型肝炎复发

丙型肝炎肝硬化是目前肝移植术的最常见适应证。术后丙型肝炎的复发很常见,并且可对患者以及移植物的存活产生重大影响。免疫抑制是加速丙型肝炎复发以及缩短复发性丙     

CD4+CD25+调节性T细胞回输对大鼠肝移植急性排斥反应的影响

目的:探讨回输CD4 CD25 调节性T细胞对大鼠肝移植急性排斥反应的影响．方法:免疫磁珠阴性加阳性分选Lewis大鼠脾脏、外周淋巴结内的CD4 CD25 调节性T细胞,分离后的细胞与丝裂霉素C处理过的DA 大鼠脾细胞混合培养3 d．淋巴细胞增殖实验评价新鲜分离和体外培养后的CD4 CD25 调节性T细胞对CD4 CD25-T细胞增殖的抑制作用．以DA大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立4组原位肝移植模型,每组12例,共48例．A 组术后不进行任何干预;B组术后0-6 d FK506 0．2 mg/(kg·d)灌胃;C组、D组术前1 d经阴茎背静脉分别向受体回输新鲜分离、体外培养后的1×106的CD4 CD25 T细胞．术后7 d每组随机处死6只,收集血标本作血清天冬氨酸氨基转移酶(asparate transaminase,AST)、总胆红素(bilirubin,BIL)检测,取肝脏标本作病理学检查,每组各留6只观察生存期．结果:分选后的CD4 CD25 T细胞纯度为 90．2％±1．8％(86％-93％,n=10),淋巴细胞混合培养实验中新鲜分离和体外培养后的 CD4 CD25 T细胞均可抑制CD4 CD25-T细胞的增殖(7 681．7±1 004．9,6 573．3±1 722．7 cpm vs 24 918．7±2 276．3 cpm;P=0．000,P =0．000)．术后7 d,新鲜细胞回输组以及体外培养细胞回输组AST低于对照组(8．1±2．0 μkat/L vs 17．9±3．8 μkat/L,P=0．000;8．4±1．4 μkat/L vs 17．9±3．8 μkat/L,P=0．000),BIL亦低于对照组(45．8±9．0 μmol/L vs 98．4±21．2 μmol/L,P=0．000;44．7±12．0 μmol/L vs 98．4 ±21．2 μmol/L,P=0．000)．四组的Banff评分比较,两组细胞回输组与对照组比较有统计学差异(P<0．05)．两组细胞回输组生存时间均大于对照组(21．7±1．7 d vs 12．8±0．5 d,P=0．0001; 30．3±1．7 vs 12．8±0．5 d,P=0．000 4),体外培养细胞回输组生存时间大于新鲜细胞回输组 (30．3±1．7 d vs 21．7±1．7 d,P=0．0017)．结论:回输新鲜分离/经供体抗原体外激活的受体CD4 CD25 调节性T细胞,可以明显减轻大鼠肝脏移植的急性排斥反应,延长生存期; 其中经供体抗原体外激活的CD4 CD25 调节性T细胞的作用更持久．     

CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取与心脏移植急性排斥反应的相关性研究

目的探讨CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取与心脏移植急性排斥反应的相关性。方法用流式细胞仪分选对照组T0（正常SD大鼠组）、假手术组T1（sD大鼠除不进行心脏移植外,其他操过程都相同）、实验组T2（同种心脏移植组,WISTAR--}SD大鼠）术后第1、3、5、7、9、11天外周血CD8＋CD28＋T淋巴细胞,并用液闪仪测量CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取量,分析CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取量与心脏移植急性排斥反应程度的相关性。结果移植组CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取率较假手术组、对照组明显升高,差异具有统计学意义（P〈0．05）。心脏移植后CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取水平显著升高,与急性排斥反应严重程度成显著正相关,Spearman相关系数为0．488（P〈0．001）。结论通过测量外周血CD8＋CD28＋T淋巴细胞胞外钙离子摄取量,有助于早期监测心脏移植术后排斥反应,指导相应治疗。     

扩张型心肌病患者外周血CD4＋CD25＋T细胞变化及临床意义

目的探讨扩张型心肌病（DCM）患者外周血CD4＋CD2＋5T细胞变化及临床意义。方法采用流式细胞分析法检测30例DCM患者（DCM组）及20例健康者（对照组）的外周血CD4＋CD2＋5T细胞。结果外周血CD4＋CD2＋5T细胞占CD4＋T细胞的比例DCM组为（8.53±1.64）%,对照组为（11.4±2.17）%,两组比较有统计学差异（P〈0.01）;且DCM患者心功能越差,CD4＋CD2＋5T细胞占CD4＋T细胞的比例越低。结论DCM患者CD4＋CD2＋5T细胞比例减少,可能打破自身免疫耐受,发生针对心肌抗原的免疫反应,参与DCM发病。     

不同程度的非酒精性脂肪肝患者CD4+ CD25+ Foxp3T细胞的检测及其意义

目的 探讨不同程度的非酒精性脂肪肝患者的CD 4+ CD 25+ Foxp 3T细胞水平的变化.方法 应用流式细胞术检测不同程度的非酒精性脂肪肝60例患者和20例健康体检者外周血的CD 4+ CD 25+和CD 4+ CD 25+ Foxp 3的比例.结果 非酒精性脂肪肝组外周血CD 4+ CD 25+细胞占CD 4+...     

扩张型心肌病患者CD4~+CD25~+Foxp3~+ T细胞的检测及意义

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的水平及意义。方法:采用流式细胞术检测DCM患者30例及健康对照组20例外周血CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+T细胞的比例。结果:DCM患者外周血CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例为(8.53±1.64)%,显著低于健康对照组的(11.4±2.17)%,P0.01;DCM患者CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例为(0.99±0.54)%,显著低于健康对照组的(1.55±0.55)%,P0.01;且DCM患者心功能越差,CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例越低。结论:DCM患者调节性T细胞比例的减少,可能打破了自身免疫耐受,发生了针对心肌抗原的自身免疫反应,参与了DCM的发病。     

不同免疫抑制诱导治疗对肝移植受者CD4+CD25+high细胞的影响

目的CD4^＋CD25^＋Treg细胞介导的免疫调节对诱导和维持移植物免疫耐受有非常重要的作用，本研究探讨抗胸腺淋巴细胞球蛋白（ATG）和噻呢哌这两种不同作用途径的免疫抑制诱导药物对CD4^＋CD25^＋high／CD4^＋T细胞及其表面标志性因子CTLA-4、Foxp3的影响，为临床合理选择应用免疫诱导药物提供依据。方法选择15例在我院行同种异体肝移植患者，随机分为ATG组（8例）和噻呢哌组（7例），两组除免疫抑制诱导药物不同外，均接受相同治疗。分别于术前、术后3周、6周、8周取血，应用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋high/CD4^＋T细胞的数量及其表面因子CTLA-4和Foxp3表达状况，比较不同诱导药物对其影响。结果这两种免疫抑制诱导药物对CD4^＋CD25^＋Treg细胞短期内有一定影响，但可逐渐恢复，两者比较，使用ATG后各指标恢复较噻呢哌快，尤其是Foxp3更加明显。结论作为诱导治疗药物，ATG更有利于CD4^＋CD25^＋Treg细胞功能恢复，从而有助于更好形成移植免疫耐受。     

肺癌患者胸腔积液及外周血CD4+CD+25 T细胞、Foxp3基因表达及意义

目的探讨CD+4CD+25T细胞及Foxp3基因在肺癌发生、发展中的作用及机制.方法流式细胞仪检测32例肺癌合并胸腔积液患者外周血、胸腔积液及30例无胸腔积液肺癌患者外周血、胸腔冲洗液中CD+4 CD+25T细胞水平,RT-PCR法检测特异性转录因子Foxp3基因在胸腔积液及外周血中的表达.结果肺癌合并胸腔积液患者胸腔积液中CD+4CD+25T细胞水平显著高于无胸腔积液患者胸腔冲洗液及外周血;Foxp3基因在肺癌患者外周血和胸腔积液中呈高表达.结论肺癌患者外周血和胸腔积液中增高的CD+4CD+25T细胞主要是CD+4CD+25调节性T细胞.CD+4cD+25调节性T细胞可促进肺癌的进一步恶化,其机制可能是抑制肿瘤免疫.     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者CD_4~+CD_(25)~+ T细胞亚群的变化

目的探讨成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者外周血免疫调节性CD4+CD25+T细胞亚群的变化及其意义。方法以流式细胞仪检测32例LADA、16例T1DM、25例T2DM及27例正常对照外周血CD4+CD25+、CD3+CD8+T细胞。结果①LADA组外周血CD4+CD25+T细胞低于而CD3+CD8+T细胞高于T1DM组、T2DM组和正常对照组;②LADA患者CD3+CD8+T细胞比例与起病年龄、FC-P、2hC-P呈负相关。结论LADA患者免疫调节性CD4+CD25+T细胞减少,不能有效维持对胰岛自身抗原的耐受;细胞毒性CD3+CD8+T细胞增多从而破坏胰岛β细胞,导致自身免疫性糖尿病的发生和发展。     

Allo-PBSCT患者CD4＋CD25＋调节性T细胞的体外研究

目的探讨异基因外周血干细胞移植（Allo-PBSCT）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Tregs）在协同刺激信号作用下的增殖反应、与CD4＋CD25-T细胞混合淋巴细胞反应及上述两种培养细胞的细胞因子分泌情况。方法对36例Allo-PBSCT患者离体CD4＋CD25＋Tregs在抗CD3-mAbs和抗CD28-mAbs的刺激下行CD4＋CD25＋Tregs培养和CD4＋CD25＋Tregs、CD4＋CD25-T细胞混合淋巴细胞培养72 h,然后加入CCK-8溶液孵育1 h,用酶标仪检测OD450值,同时测量上述两种细胞培养上清液中IL-10、TGF-β和IFN-γ的浓度。另以7例健康者为对照组。结果 CD4＋CD25＋Tregs细胞OD450值低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.01）。CD4＋CD25＋Tregs与CD4＋CD25-T细胞混合OD450值也低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.01）。有移植物抗宿主病（GVHD）和无GVHD患者离体CD4＋CD25＋Tregs在抗CD3-mAbs和抗CD28-mAbs的共刺激下分泌的IL-10、TGF-β和IFN-γ低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.01）,有GVHD和无GVHD患者的两细胞混合组分泌的这3种细胞因子均低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.05）,Allo-PBSCT患者分泌细胞因子情况与对照组类似。结论有效地利用Allo-PBSCT受者外周血CD4＋CD25＋Tregs的抑制功能,则有可能降低Allo-PBSCT后GVHD的发病率。     

Expression of CD44 in rat liver allografts during rejection

As CD44 is believed to be a homing receptor involved in lymphoid trafficking and inflammatory responses, it is expected to be closely linked to transplant rejection. In this study, the expression of CD44 during liver transplant rejection was compared with the expression of lymphocyte-function associated antigen-1 (LFA-1) and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), which play an essential role in cell interactions and the initiation of immune responses. Male Brown Norway (BN) and Lewis (LEW) rats were used as donors and recipients, respectively. Orthotopic liver transplantation (OLTX) was done using the cuff technique of Kamada and Calne. Animals were killed on days 3, 5, and 7 after OLTX, and a piece of tissue from each of the liver grafts was obtained. Immunohistochemical staining was used to investigate the expression of CD44, ICAM-1, and LFA-1. CD44 was strongly expressed in portal areas of the rejected liver, and LFA-1 and ICAM-1 were expressed mainly on sinusoids and hepatocytes. These findings indicate that CD44 is closely involved in lymphocyte infiltration, which is dominant in portal areas, and that lymphocyte infiltration during the rejection process may involve a homing mechanism.     

CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞在小鼠肺结核发生中的作用

目的 研究CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(Treg)在小鼠肺结核发生中的作用.方法 PC61处理组小鼠腹腔注射抗-CD25(PC61),50μg/只,消除体内的Treg,IgG对照组注射相同剂量的IgG同型对照抗体.3 d后静脉注射H37Rv 0.1 mL(含1×10~6CFU活菌),攻击小鼠.流式细胞技术分析PC61对小鼠体内不同组织中Treg的消除效果,体外分析Treg消除对特异性细胞免疫、肺组织病理学和肺组织内结核分枝杆菌生长情况的影响.采用方差齐性F检验和非配对t检验比较实验数据.结果 PC61处理组与IgG对照组小鼠脾细胞中Treg占CD4~+T淋巴细胞比例在第10天分别为(21.13± 3.58)%和(30.42± 4.20)%(f=2.38,P<0.05);第30天为(16.12± 1.26)%和(17.34± 1.62)%(t=0.84,P>0.05),Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比例在第10天为(32.07± 3.95)%和(60.55± 5.48)%(t=5.96,P<0.05).外周血也有类似结果.在PC61处理组及IgG对照组,感染后第10、30和60天时体外培养小鼠脾细胞分泌的卡介苗特异性细胞因子1L-17(ng/L)分别为5.1± 0.9比0、43.1± 10.0比5.9±2.8、124.8± 5.8比102.5±8.1(t=7.90,t=5.10,t=3.19;均P<0.05);IFN-7(ng/L)分别为28.4±8.2比4.0± 1.3、685.9±128.6比418.7± 20.4、310.9± 119.7比32.8±7.5(t=4.21,t=8.43,t=3.27;均P<0.05);TNF-a(ng/L)分别为38.6±5.0比16.3±4.0、112.9± 12.3比71. 5± 12.6、86.2± 8.2比0(t=4.95,t=3.33,t=14.8;均P<0.05).PC61处理小鼠在感染早期(第10天)肺内结核菌量低于IgG对照小鼠(t=4.63.P<0.01),但后期比较差异无统计学意义.PC61处理小鼠感染后期(第120天)肺组织病理改变较IgG对照组为轻.结论 结核菌感染后小鼠Treg显著增加;Treg能有效抑制结核菌特异性细胞免疫.进而影响小鼠肺内结核菌的清除和结核病的发生.