三氧化二砷对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的试用三氧化二砷(As2O3)以提高胰腺癌的疗效。方法分别比较对照组和As2O3组裸鼠原位胰腺癌模型肿瘤体积、细胞增殖指数和细胞凋亡率。结果As2O3组肿瘤体积较对照组缩小31.2%。胰腺癌细胞增殖指数对照组为(21.05±2.18)%,As2O3组为(10.03±2.86)%(P<0.05);胰腺癌细胞凋亡率对照组(4.7±1.4)%,As2O3组(13.4±1.8)%(P<0.05)。结论As2O3体内能显著抑制胰腺癌的生长,其机制与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

金花茶醇提物对人低分化鼻咽癌CNE-2细胞增殖和周期的影响

目的探讨金花茶醇提物对人低分化鼻咽癌CNE-2细胞增殖、周期的影响及其机制。方法将人鼻咽癌CNE-2细胞分为两组,实验组加入终浓度为25、50、100、200、400μg／ml的金花茶醇提物,对照组不加药物,采用MTT法检测两组24、48、72h增殖抑制率,倒置相差显微镜及荧光显微镜观察48h后细胞形态的变化,流式细胞仪分析细胞周期变化及凋亡率。结果金花茶醇提物对CNE-2细胞的增殖有抑制作用,且呈时间和剂量效应;金花茶醇提物处理CNE-2细胞48h后,倒置相差显微镜及荧光显微镜示CNE-2细胞随着浓度的增加发生不同形态改变;流式细胞仪分析显示金花茶醇提物将CNE-2细胞阻滞于G1期。结论金花茶醇提物能够抑制CNE-2细胞的增殖,其作用机制可能是使CNE-2细胞阻滞于G1期从而抑制CNE-2细胞的生长。     

三氧化二砷对慢性髓系白血病细胞周期的影响

目的：探讨三氧化二砷(As2O3)对人类慢性髓系白血病细胞系(K562)细胞周期及其凋亡的影响。方法：将K562细胞与不同浓度的As2O3共同孵育，在不同时间点应用MTT方法检测K562细胞存活率，并用流式细胞仪检测As2O3的致凋亡作用，同时对As2O3作用后的K562细胞进行细胞周期分析及时相性周期蛋白表达检测。结果：As2O3明显抑制K562细胞增殖并表现为时间和剂量依赖性；在2．0--10．0μmol/L梯度浓度As2O3的作用下，细胞于12—24h时段内无明显凋亡现象，但K562细胞明显阻滞于G2／M期时相，同时周期调控蛋白cyclinE表达下调，cyclinB1表达基本不变。结论：As2O3可抑制K562细胞增殖，但其抑制机制不在于通过诱导凋亡，而依靠诱发K562细胞的G2／M期阻滞。     

三氧化二砷体外对人卵巢上皮癌细胞3AO增殖及凋亡的影响

目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3 )体外对人卵巢上皮癌细胞株 3AO增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法　将人卵巢上皮癌细胞株 3AO与不同浓度的As2 O3 进行体外培养 ,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定不同浓度As2 O3 对 3AO细胞的生长抑制率 ,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期时相及其Fas、FasL、P53 和bcl 2蛋白的表达。结果　 0 2 5～ 8 0 μmol /L浓度的As2 O3 均显著抑制3AO细胞的增殖 ,且随浓度升高及作用时间的延长 ,抑制率上升 ,As2 O3 与 3AO细胞联合培养 4 8小时的半数致死量 (IC50 )为 (3 90± 0 2 0 ) μmol /L。 0 2 5～ 4 0 μmol /L浓度的As2 O3 均诱导 3AO细胞凋亡 ,随浓度升高 ,凋亡率上升。As2 O3 阻滞 3AO细胞停滞于S期 ,并诱导细胞凋亡。As2 O3 (2 μmol/L )培养3AO细胞 4 8小时 ,Fas蛋白表达率为 (4 6 76± 4 5 0 ) % ,明显高于对照组的 (6 36± 0 82 ) % ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ,FasL、P53 和bcl 2蛋白表达无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　As2 O3 以剂量 时间依赖性方式抑制人卵巢上皮癌细胞 3AO增殖并诱导其凋亡 ,其作用机制与上调Fas基因表达有关。     

三氧化二砷对肝癌细胞增殖的影响

为探讨三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用 ,应用台盼蓝拒染法、MTT比色法及细胞克隆形成试验 ,研究As2 O3 对肝癌细胞的增殖抑制和细胞毒作用。结果发现As2 O3 能显著抑制肝癌细胞的生长 ,5 μmol/LAs2 O3 抑制程度明显强于 1μmol/L。 5 μmol/L和 1μmol/LAs2 O3 作用后细胞克隆形成率分别为 1.5± 1.2 %和 12 3± 2 .2 % ,明显低于对照组的 30 .0± 4.2 % (P <0 .0 1)。As2 O3 对肝癌细胞有较强的细胞毒作用 ,且呈显著剂量和时间依赖性。其对于肝癌细胞的杀伤率高于 5 氟脲嘧啶 ( 5 FU )和丝裂霉素 (MMC) ,但无显著差异。As2 O3 与 5 FU及MMC存在协同效应 ,联合应用 ,对肝癌细胞的杀伤率明显升高。说明As2 O3 具有明显的抑制肝癌细胞增殖的作用 ,有必要进一步探讨其对肝癌的治疗价值     

三氧化二砷对人恶性黑素瘤细胞株A375生长和凋亡影响的研究

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人恶性黑素瘤细胞株A375的生长抑制与促凋亡作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测As2O3对黑素瘤细胞的抑制作用；倒置显微镜、电镜观察细胞形态变化和凋亡特征；流式细胞仪分析DNA含量和检测细胞周期。结果1．0、2．0、4．0、8．0、16．0μmol／L As2O3均能抑制A375细胞的生长，且抑制率具有浓度和时间依赖性。8．0和16．0μmol／L组主要表现细胞毒性作用；4．0μmol／L组作用72h后，A375细胞出现较典型的凋亡形态特征，流式细胞仪检测到亚二倍体凋亡峰，同时出现S期阻滞。结论As2O3能有效的抑制人恶性黑素瘤细胞株A375的生长并促进其凋亡。     

转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA的人骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡能力观察

目的观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2) shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化。方法以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、Sa OS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1. 19)中ATAD2 mRNA、蛋白。在U2-OS细胞中转染ATAD2 shRNA慢病毒载体,采用qRT-PCR法和Western blotting法检测转染效果,CCK8方法检测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白。结果骨肉瘤细胞中ATAD2mRNA、蛋白表达水平高于正常成骨细胞(P均<0. 05)。ATAD2 shRNA慢病毒载体转染后的骨肉瘤细胞...     

三氧化二砷对支气管哮喘小鼠气道成纤维细胞增殖及原癌基因表达的影响

目的探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对体外培养的哮喘小鼠气道成纤维细胞(fibroblast,FB)增殖及原癌基因c-myc与c-sis表达的影响。方法实验分为7组,在体外培养的FB中分别加入生理盐水,1μmol地塞米松及浓度为0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L、4.0μmol/L的As2O3,在第1天、第3天、第5天、第7天后用记数法观察FB生长情况,并用流式细胞仪(FCM)检测不同浓度药物对各组FB增殖的影响及各组FB中c-myc与c-sis的阳性表达率。结果各种实验浓度的As2O3对FB均有抑制作用,并有时间及剂量依赖效应。流式细胞仪分析显示,随着As2O3浓度的增高,G1期细胞比例逐渐增高,G2/M期细胞比例降低,浓度为2.0μmol/L、4.0μmol/L的As2O3能显著抑制c-myc与c-sis的表达。结论As2O3能抑制FB的增生,其机制可能与其下调c-myc与c-sis的表达有关。     

三氧化二砷对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖及新癌基因PPO表达的影响

目的 探讨三氧化二砷对人恶性黑素瘤A375细胞株细胞周期、增殖、凋亡及新癌基因PPO(proliferation and phosphorylation oncogene)表达的影响.方法 培养人恶性黑色素瘤A375细胞株,采用 MTT法检测三氧化二砷在不同浓度和不同时间下对A375细胞增殖的影响,流式细胞术分析三氧化二砷对细胞周期及凋亡的影响,倒置相差显微镜观察药物处理后对人A375细胞的细胞分化及形态的影响,免疫细胞化学(SP)法检测三氧化二砷对PPO蛋白表达的影响.结果 MTT法证实三氧化二砷在1～10 μmol/L浓度范围内对A375细胞有明显的增殖抑制作用,呈现明显的剂量和时间依赖效应关系.流式细胞术检测发现,随着药物浓度的增加,G0/G1的细胞逐渐减少(P＜0.01),S期的比例显著增加,出现S期阻滞.倒置显微镜观察发现细胞出现典型凋亡细胞形态学改变.免疫细胞化学法检测PPO蛋白主要表达于A375细胞胞浆内,染色呈棕黄色.三氧化二砷作用48 h后,随着药物浓度的增加,PPO的染色程度逐渐减弱,差异具有显著性(P＜0.01).结论 三氧化二砷能够显著抑制A375细胞株增殖,并诱导凋亡发生,且与三氧化二砷的浓度和作用时间成正相关,其作用机制可能是通过下调新癌基因PPO的表达发挥作用.     

Decorin对肝星状细胞和肝细胞周期的影响

目的探讨decorin对肝星状细胞(HSC-T6)和肝细胞(L-02)生长抑制的作用机制.方法细胞培养,经dccorin处理后用流式细胞仪分析细胞周期的变化.结果Decorin使细胞周期发生明显改变.G1期细胞百分率明显增加,S期细胞百分率降低G2期细胞百分率减少甚至缺失(P＜0.05,P＜0.01).结论Decorin对肝星状细胞(HSC-T6)和肝细胞(L-02)有细胞周期阻滞作用,通过细胞周期阻抑可以抑制细胞生长.     

三氧化二砷对人膀胱癌裸鼠移植瘤作用的实验观察

有研究证实,三氧化二砷(As2O3)对人膀胱癌细胞有明显的诱导凋亡作用,作者通过建立膀胱癌裸鼠移植瘤模型,观察As2O3对人膀胱癌生长作用。1材料与方法     

Rho激酶抑制剂Y-27632对人气道平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

目的观察Rho激酶抑制剂Y-27632对人气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖的影响，为哮喘防治提供新思路。方法组织块贴壁法培养人ASMCs，对数传代后随机分为4组，A组加入含10％FBS的DMEM培养基，B、C、D组分别加入浓度为0．4、2．0、10．0μmol／L的Y-27632＋含10％FBS的DMEM培养基，非放射性细胞增殖（MTS）／吩嗪甲酯硫酸盐（PMS）法检测各组细胞增殖情况（490nm处A值），流式细胞仪分析细胞周期。结果C、D组A值均显著低于A组（P〈0．05、0．01）；C、D组G0／G1期细胞比例显著高于A组，S、G2／M期细胞比例显著低于A组（P〈0．05、0．01）。结论Rho激酶抑制剂Y-27632可抑制人ASMCs增殖，阻滞细胞周期于G0／G1期；本研究为哮喘防治提供了新的选择。     

槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响

目的研究槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响。方法制备浓度为0、3、6、9 mg/ml的槐耳清膏与人肺腺癌A549细胞作用后,采用流式细胞检测观察细胞凋亡率,并分析药物干预36 h对细胞周期和细胞凋亡率的影响。结果流式细胞术检测结果显示,槐耳清膏各浓度组均可发生细胞凋亡,与对照组相比差异显著(P0.05)。各浓度组可使人肺腺癌A549细胞G0/G1、S期细胞比例减少,G2/M期细胞比例增多。结论槐耳清膏能诱导人肺腺癌A549细胞增殖,可能与细胞被阻滞于G2/M期有关。     

RNAi沉默survivin基因对胰腺癌细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的 应用RNAi技术沉默胰腺癌细胞株中survivin基因对肿瘤细胞凋亡、细胞周期和增殖的变化.方法 靶向survivin的RNAi载体转染胰腺癌细胞,Western印迹检测基因沉默效果,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及细胞周期.结果 survivin基因沉默效率可达85%;MTT检测显示,干扰组survivin沉默细胞增殖抑制与非特异性质粒对照组相比显著增高(P<0.01).流式细胞术显示,干扰组细胞凋亡百分率显著高于非特异性质粒对照组(P<0.01);G_2/M期显著高于非特异性质粒对照组(P<0.01或P<0.05),而S期则显著降低(P<0.05).结论 survivin基因沉默可引起胰腺癌细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖.     

白藜芦醇对人肾癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨白藜芦醇（Res）对人肾癌细胞786-0（以下简称肾癌细胞）增殖和周期的影响。方法分别采用12.5、25、50、100μmol/L的白藜芦醇（Res）作用于肾癌细胞24 h;并设空白对照组。流式细胞仪检测细胞细胞周期。结果各浓度Res对肾癌细胞增殖均具有明显的抑制作用,表现为G1期及G2期细胞比例明显降低,S期比例明显升高,与对照组比较,P均〈0.05。Res 12.5μmol/L与25、50及100μmol/L比较,P均〈0.05;但25μmol/L与50、100μmol/L比较,P〉0.05。12.5μmol/L的Res抑制作用明显,当浓度达到25μmol/L时,抑制作用达最强;而继续升高浓度不能提高抑制作用。结论 Res对人肾癌细胞增殖有抑制作用,且具有剂量依赖性。     

辛伐他汀体外对人U251脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的观察辛伐他汀体外对人U251胶质瘤细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法对照组和实验组分别行辛伐他汀干预,培养24、48、72、96 h,采用MTT比色法和流式细胞仪检测不同浓度及不同时间干预后人U251胶质瘤细胞增殖活性和细胞周期的变化;采用TUNEL法检测干预后细胞凋亡的情况及RT-PCR检测对照组和实验组在干预48 h后检测Caspase-3的表达。结果辛伐他汀体外可明显降低人U251胶质瘤细胞增殖活性及诱导其凋亡,浓度到达1.0μmol/L时抑制作用明显,与对照组相比具有显著性差异(P0.05)。此外,辛伐他汀对人U251胶质瘤细胞的生长抑制呈明显的量-效关系。人U251胶质瘤细胞凋亡随药物浓度增加而显著,Caspase-3的表达亦呈剂量依赖关系。结论辛伐他汀在体外可一定程度上抑制人U251胶质瘤细胞的增殖及诱导其凋亡,Caspase-3参与细胞的凋亡过程。     

三氧化二砷对类风湿关节炎滑膜细胞增殖及分泌作用的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对体外培养的RA滑膜成纤维细胞的增殖及分泌功能的影响.方法 体外培养RA滑膜成纤维细胞,用含As2O3浓度分别为0、0.5、2、5 μmol/L的培养液分别作用于培养细胞,24 h后检测上清液TNF-α和IL-1的水平;采用TUNEL法和流式细胞仪测定细胞增殖情况.结果 As2O3作用组TNF-α及IL-1水平均较对照组降低(P<0.05),随浓度梯度的增加作用增强.TUNEL法检测细胞增殖,As2O3作用第3天后各实验组均明显低于对照组(P<0.05),且其作用呈剂量依赖性.滑膜细胞细胞周期在As2O3作用组均与对照组有明显差异,其变化亦呈剂量依赖性.结论 As2O3可促进RA滑膜B型细胞增殖,抑制TNF-α及IL-1的表达.     

银杏黄酮苷对人巨细胞病毒感染的人脐静脉内皮细胞周期和凋亡的影响

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC304)细胞周期和凋亡的影响和机制及银杏黄酮苷对其感染HUVEC304的作用。方法:实验分为4组,分别为正常对照组、银杏黄酮苷组、HCMV感染组、HCMV感染加银杏黄酮苷组。采用流式细胞技术对HCMV感染的体外培养的HUVEC304及银杏黄酮苷对其作用后进行观察和分析。结果:HCMV感染HUVEC304后24h,正常对照组G0/G1期的细胞为74.4%,加入HCMV后为59.3%,较正常对照组降低20.3%(P<0·05)。正常对照组凋亡细胞为8.3%,当加入HCMV后为5.8%,较正常对照组降低30.1%(P<0·01)。银杏黄酮苷可以降低HCMV增加进入S和G2/M期的细胞,HCMV感染的细胞处在G0/G1期的为59.3%,用10-2mol/L银杏黄酮苷后被感染细胞处在G0/G1期的增加为67.5%,较感染组增加13.8%(P<0·05)。银杏黄酮苷可以增加HCMV感染的HUVEC304凋亡水平。HCMV感染后凋亡细胞为5.8%,加入10-2mol/L银杏黄酮苷后凋亡细胞为6.2%,较HCMV组升高6.9%(P<0·05)。结论:HCMV感染HUVEC304后,可以降低HUVEC304停留在G1期的细胞,使进入S和G2/M期的细胞明显增加,表明HCMV感染早期可通过增加G0/G1期细胞进入S和G2/M期,导致细胞最终表现为增殖。应用银杏黄酮苷可以促进细胞从G1期向S和G2/M期的转化和细胞的凋亡。HCMV感染HU-VEC304引起的炎性反应可能影响内皮细胞的功能,导致血栓形成、脂质代谢紊乱,最终参与动脉粥样硬化的形成。而银杏黄酮苷可促进HCMV感染HUVEC304的凋亡,抑制被感染细胞的过度增生,因而可能对防治动脉粥样硬化有一定的作用。     

Med19基因沉默对胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的 研究Med19基因在胃癌MGC-803细胞中沉默后对细胞增殖和周期的影响.方法 应用shRNA慢病毒载体感染胃癌MGC-803细胞沉默Med19基因,通过MTT和克隆形成实验观察Med19基因在胃癌细胞增殖中的作用,并用流式细胞术验证抑制Med19基因对细胞周期的影响.结果 构建的shRNA慢病毒载体感染MGC-803细胞后细胞增殖能力显著降低、细胞克隆形成能力明显减弱,同时,细胞周期阻滞于G1期.结论 Med19基因沉默后胃癌细胞的增殖能力和细胞周期均受到显著影响,提示Med19在肿瘤形成过程中具有重要作用.     

三氧化二砷诱导胃癌细胞凋亡及其对C-myc和TGF-β1表达的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法 用MTT法检测药物效应，透射电镜及流式细胞仪观察As2O3处理SGC-7901细胞后细胞周期细胞凋亡。细胞免疫化学观察As2O3处理后SGC-7901细胞TGF-β1及C-myc表达的变化。结果 ①MTT法证实As2O3对SGC-7901细胞生长有抑制作用，并呈剂量．效应关系。②流式细胞仪分析As2O3处理SGC-7901细胞后细胞滞留于G2／M期，并可见凋亡峰。③透射电镜可见SGC-7901细胞出现典型的细胞凋亡及坏死形态学改变。④As2O3导致C—myc表达的波动，下调TGF-β1，表达。结论As203对人胃癌细胞SGC-7901有抑制作用，其抑制作用可能通过导致C—myc基因表达波动，诱导胃癌细胞凋亡和坏死、阻抑细胞周期进程，抑制SGC-7901细胞增殖。同时通过下调TGF-β1表达阻止胃癌的恶性进程。