西红柿汁体外抑制血小板聚集功能及其机制探讨

目的:观察西红柿汁在体外对血小板聚集、血小板活化标志物的表达及对血小板纤维蛋白原结合量的影响,初步探讨西红柿汁对血小板聚集功能的影响机制。方法:将不同浓度的西红柿汁与正常人富血小板血浆(PRP)孵育,加入5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)和胶原,观察西红柿汁对血小板聚集的影响。用ADP及胶原激活血小板,流式细胞仪(FCM)分析西红柿汁对活化血小板纤维蛋白原受体(Fib-R)和P-选择素(CD62P)的表达水平及血小板纤维蛋白原结合量的影响。结果:西红柿汁能够明显抑制由ADP、胶原诱导的血小板聚集,且随着西红柿汁浓度的增加,对血小板聚集的抑制率增高。西红柿汁不能抑制ADP、胶原诱导的血小板Fib-R、CD62P表达,但能显著抑制由ADP、胶原诱导的血小板与纤维蛋白原结合量。结论:西红柿汁在体外能够显著抑制血小板聚集,其抗血小板聚集的作用机制与阻碍纤维蛋白原与血小板Fib-R结合有关。西红柿汁具有潜在的抗血小板治疗前景。     

Spectrum of platelet aggregation abnormalities in myeloproliferative diseases

Summary Several platelet abnormalities have been described in myeloproliferative diseases. The present study deals with 81 patients with polycythaemia vera, chronic myelogenous leukemia, essential thrombocythaemia and idiopathic myelolibrosis, and reports the analysis of the findings in platelet-induced aggregation. Platelet abnormalities induced by ADP, adrenaline and collagen were found in 41.9% of the patients. A defect of primary aggregation was documented in 13 cases and one of them showed an aggregation pattern similar to that of Glanzmann’s disease. Fifteen patients had an impairment of secondary aggregation, and in one case of this group the platelet malondialdehyde and serotonin findings were consistent with a defect resembling that of typical congenital storage pool deficiency. A disturbance of the arachidonic acid pathways associated with a storage pool deficiency was found in a third patient belonging to a group with abnormalities of primary and secondary aggregation. In conclusion, platelets in myeloproliferative diseases have several defects and in a few cases their combination is similar to those of congenital diseases.     

血小板膜糖蛋白、血小板聚集率在冠心病合并高血压中的意义

目的探讨血小板膜糖蛋白（GP）及血小板最大聚集率（PAgT）在冠心病合并高血压患者中的临床意义。方法将116例冠心病分为稳定性心绞痛（SAP组,36例）,不稳定性心绞痛（UAP组,38例）,UAP并高血压病（UH组,42例）,并选取48例健康者为对照组。按心绞痛发作情况将冠心病患者再分成有事件组（56例）和无事件组（60例）。测定各组总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白（LDL-C）、脂质过氧化物丙二醛（MDA）、GP、及PAgT水平,并对有事件组患者PAgT水平作相关性分析。结果四组间总胆固醇、三酰甘油、LDL-C、MDA、GP、及PAgT水平比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）。有事件组GP、PAgT及MDA水平均较无事件组明显升高（P均〈0．05）,且有事件组患者PA卵水平与GP及MDA水平相关性分析发现均呈明显正相关（P均〈0．05）。结论GP、PagT升高以及脂质过氧化损伤在冠心病患者心绞痛事件发生的病理过程中起重要作用,且高血压病可以加重这一病理过程。     

糖尿病视网膜病变血小板膜糖蛋白及血小板聚集功能的检测意义

目的探讨血小板CD62p、CD63的表达及聚集功能的变化与糖尿病视网膜病变的关系。方法对35例糖尿病视网膜病变患者分别用流式细胞仪和多功能血液聚集仪测定血小板膜糖蛋白CD62p、CD63的表达及聚集功能,并与糖尿病无血管并发症组和健康对照组比较。结果糖尿病视网膜病变组血小板膜糖蛋白CD62p(8.74±3.01)、CD63(9.38±3.25)的表达及聚集功能(58.9±9.7)均分别显著高于健康对照组的2.89±1.72(P<0.001)、3.06±2.11(P<0.001)、33.7±12.4(P<0.001)和糖尿病无血管并发症组的6.02±2.78(P<0.001)、6.89±2.97(P<0.005)、4.51±8.90(P<0.001);糖尿病无血管并发症组又均显著高于健康对照组(P<0.001)。结论血小板活化与糖尿病视网膜病变的发生、发展有密切联系。血小板膜糖蛋白CD62p、CD63和聚集功能的检测,对糖尿病视网膜病变的早期诊断及早期预防和治疗具有重要临床价值。     

Fibrinogen and von Willebrand factor-independent platelet aggregation in vitro and in vivo

BACKGROUND: Fibrinogen (Fg) has been considered essential for platelet aggregation. However, we recently demonstrated formation of occlusive thrombi in Fg-deficient mice and in mice doubly deficient for Fg and von Willebrand factor (Fg/VWF(-/-)). METHODS AND RESULTS: Here we studied Fg/VWF-independent platelet aggregation in vitro and found no aggregation in citrated platelet-rich plasma of Fg/VWF(-/-) mice. Surprisingly, in Fg/VWF(-/-) plasma without anticoagulant, adenosine diphosphate induced robust aggregation of Fg/VWF(-/-) platelets but not of beta(3)-integrin-deficient (beta(3) (-/-)) platelets. In addition, beta(3) (-/-) platelets did not significantly incorporate into thrombi in Fg/VWF(-/-) mice. This Fg/VWF-independent aggregation was blocked by thrombin inhibitors (heparin, hirudin, PPACK), and thrombin or thrombin receptor activation peptide (AYPGKF-NH(2)) induced aggregation of gel-filtered Fg/VWF(-/-) platelets in 1 mm Ca(2+) PIPES buffer. Notably, aggregation in PIPES buffer was only 50-60% of that observed in Fg/VWF(-/-) plasma. Consistent with the requirement for thrombin in vitro, hirudin completely inhibited thrombus formation in Fg/VWF(-/-) mice. These data define a novel pathway of platelet aggregation independent of both Fg and VWF. Although this pathway was not detected in the presence of anticoagulants, it was observed under physiological conditions in vivo and in the presence of Ca(2+)in vitro. CONCLUSIONS: beta(3) integrin, thrombin, and Ca(2+) play critical roles in this Fg/VWF-independent aggregation, and both plasma and platelet granule proteins contribute to this process.     

乙二胺四乙酸盐对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响

目的 探讨乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2）对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响.方法 对38名血小板数量正常的体检者抽取静脉血标本,分别使用EDTA-K2、肝素钠抗凝20min、肝素钠抗凝20 min加入EDTA-K2、肝素钠抗凝60 min加入EDTA-K2的抗凝标本,进行计数及血涂片瑞氏染色观察.结果 肝素钠抗凝静脉血血小板计数结果为（93.7±32.18）× 109/L;EDTA-K2抗凝血血小板计数结果为（210＋58.39）×109/L.组间差异有统计学意义（t=16.74,P＜0.001）.肝素钠抗凝静脉血静置20min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（212.05 ＋60.20）× 109/L;与EDTA-K2抗凝血结果（210＋58.39）× 109/L比较,组间差异无统计学意义（t=1.844,B0.05）.肝素钠抗凝静脉血静置60 min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（56.74＋ 15.33）× 109/L,与EDTA-K2抗凝血结果（210t58.39）× 109/L比较,组间差异有统计学意义（t=22.88,P＜0.001）.结论 EDTA-K2钙离子螯合剂可可逆性地使初发聚集的血小板解聚.     

鸦胆子油对血小板聚集的抑制作用及其机制的体外研究

目的 以人洗涤血小板为模型,体外观察鸦胆子油对血小板聚集的抑制作用,并探讨其可能机制.方法 将不同浓度鸦胆子油与人洗涤血小板作用,分为4组:空白组(加丙酮)、阴性对照组(加丙酮,0%),9.0%鸦胆子油组及22.5%鸦胆子油组.以血小板聚集分析仪检测ADP、AA、胶原和凝血酶诱导的血小板最大聚集率、以流式细胞仪检测活化血小板膜FIB-R和P-选择素表达水平,以SDS-PAGE分析血小板肌动蛋白聚合体的变化.结果 9.0%鸦胆子油组ADP、AA、胶原和凝血酶诱导的血小板聚集率分别为(57.7±4.0)%、(62.2±3.9)%、(66.9±5.0)%和(71.8±5.1)%,均低于阴性对照(0%)组的(75.3±4.1)%、(79.3±4.8)%、(80.6±5.4)%和(84.1±6.2)%,差异均有统计学意义(t值分别为7.312、8.785、9.123和9.466,P均<0.01);22.5%组分别为(39.2±3.5)%、(45.8±3.4)%、(51.2±3.9)%和(56.7±4.8)%,显著低于9.0%组,差异有统计学意义(t值分别为9.123、10.221、9.533和10.243,P均<0.01).22.5%鸦胆子油组对血小板聚集的抑制率分别为47.9%、42.2%、36.5%和32.6%,显著高于9.0%组的23.4%、21.6%、17.0%和14.6%,差异有统计学意义(χ~2值分别为13.08、9.77、9.70和8.93,P均<0.01).血小板聚集水平与鸦胆子油浓度呈负相关(r=-0.952,-0.961,-0.970和-0.975,P<0.01).9.0%鸦胆子油组ADP诱导的血小板FIB-R表达水平和P-选择素表达水平分别为(64.7±4.0)%、(3.91±0.21)%,均低于阴性对照组的(85.5±4.6)%和(5.05±0.27)%,差异有统计学意义(t值分别为11.35、7.81,P均<0.01);22.5%鸦胆子油组分别为(36.2±3.9)%和(2.34±0.15)%,低于9.0%组,差异有统计学意义(t值分别为14.35、14.80,P均<0.01);22.5%鸦胆子油组对FIB-R的抑制率为57.7%,高于9.0%组的24.3%,差异有统计学意义(χ~2=23.05,P<0.01).9.0%和22.5%鸦胆子油组与空白组在相对分子质量43 000为肌动蛋白区带的吸光度值之比分别为1.77±0.12和1.68±0.10,明显低于阴性对照组与空白组的比值2.22±0.15,差异有统计学意义(t=7.21、8.14,P值均<0.01);22.5%胆鸦子油组为1.68±0.10,与9.0%组间差异无统计学意义(t=2.77,P>0.05).结论 鸦胆子油通过抑制活化血小板膜纤维蛋白原受体的表达,并抑制肌动蛋白聚合以及释放反应,从而剂量依赖性地抑制血小板的聚集反应,可能有抗血栓的功效.     

不同浓度硝苯地平对血小板聚集功能的影响

目的 探讨不同浓度硝苯地平对血小板聚集功能(PAG)的影响.方法 收集62名健康志愿者血浆,分别加入终浓度为0μmo1/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L、7.5μmol/L、10.0μmol/L的硝苯地平后行血小板聚集试验,观察不同浓度硝苯地平对血小板聚集的抑制率.结果 加入0 μmol/L,2.5μmol/L、5.0 μmol/L、7.5 μmol/L、10.0μmol/L的硝苯地平对血小板聚集的抑制率分别为0％、6.65％、10.68％、22.14％、18.20％.结论 硝苯地平以浓度依赖的方式抑制血小板聚集,当浓度为7.5 μmol/L时抑制率最高.     

脑通胶囊对急性血瘀证大鼠血液流变学和家兔血小板聚集的影响

目的 研究脑通胶囊对急性血瘀证大鼠血液流变学和家兔血小板聚集的影响.方法 经皮下注射大剂量肾上腺素加冰水冷浴造大鼠血瘀证模型,观察脑通胶囊对急性血瘀证大鼠血液流变学的影响;采用家兔血小板聚集试验,研究脑通胶囊抗血栓形成的作用.结果 脑通胶囊可明显降低急性血瘀模型大鼠血液流变学主要指标,并可明显抑制家兔血小板聚集.结论 脑通胶囊可明显改善急性血瘀证大鼠血液流变学,同时具有抗血栓形成的作用.     

丁胺卡那霉素对血小板聚集和凝血功能的抑制作用

目的 观察丁胺卡那霉素对血小板聚集和凝血功能试验的抑制作用,探讨其对止血功能的影响及相关作用机制.方法 将不同浓度丁胺卡那霉素分别与献血者富血小板血浆和乏血小板血浆作用,分为4组:0 mg/L组、30 mg/L组、91 mg/L组和910 mg/L组.以血小板聚集分析仪检测ADP诱导的血小板最大聚集率,以流式细胞仪检测活化血小板P-选择素、GPⅡb/Ⅲa及Fg-R表达水平,以血液凝固分析仪测定PT、APTT、TT及Fg水平.以前述4种浓度丁胺卡那霉素以及62.5 U/ml肝素钠和109 mmoL/L柠檬酸钠分别与新鲜全血作用,测定CT及血浆Ca2+浓度.分别检测10例急性下呼吸道感染患者在丁胺卡那霉素常规剂量治疗前和治疗后30 min ADP诱导的血小板最大聚集率、P-选择素、GPⅡb/Ⅲa及Fg-R表达水平,并测定PT、APTT、CT和血浆Ca2+浓度.结果 30 mg/L组血小板最大聚集率、P-选择素和Fg-R分别为(65.8±3.9)%、(9.2±1.0)%和(12.6±1.7)%,显著低于0 mg/L组的(88.0±4.6)%、(16.1±1.3)%和(31.0±2.5)%,差异均有统计学意义(t值分别为9.442、8.432和9.993,P均＜0.01);30 mg/L组APTT(80.5±6.8)s和CT(857±66)s明显高于0 mg/L组的(33.0±3.6)s和(447±35)s,差异均有统计学意义(t值分别为11.312和13.211,P均＜0.01);丁胺卡那霉素浓度与血小板最大聚集率呈显著负相关,与聚集的抑制率呈显著正相关,与APTT呈显著正相关[r值分别为-0.832、0.939和(＞0.870),P均＜0.05];30 mg/L组,91 me/L组和910 mg/L组呈剂量依赖性抑制P-选择素和Fg-R表达及使CT增加[F组间=21.44、26.24和(＞29.81),P均＜0.01].0 mg/L组、30mg/L组、91 mg/L组和910 mg/L组PT值分别为(14.7±1.9)s、(15.2±1.7)s、(15.6±1.5)s、(22.1±2.1)s,差异有统计学意义(F=8.21,P＜0.05),而GPⅡb/Ⅲa、TT、Fg以及血浆Ca2+浓度在4组间差异无统计学意义(P均＞0.05).丁胺卡那霉素治疗后患者血小板最大聚集率(51.6±10.1)%、P-选择素(6.8±1.8)%和Fg-R(20.1±5.8)%明显低于治疗前的(66.8±11.4)%、(10.9±3.1)%和(28.5 ±7.4)%,APTT(49.8±5.9)s和CT值(660±59)s则明显高于治疗前的(26.9±3.8)s和(410±45)s,差异均有统计学意义(t值分别为5.456、8.875、7.423、10.012和11.322,P均＜0.01).治疗前、后GPⅡb/Ⅲa、PT和Ca2+浓度变化无统计学意义(P＞0.05).结论 丁胺卡那霉素通过抑制血小板纤维蛋白原受体活化和释放反应途径抑制血小板聚集,可能通过抑制内源凝血系统因子途径而抑制凝血功能,从而对止血功能有抑制作用;应用丁胺卡那霉素抗感染治疗可能有发生出血的危险.     

老年人血小板聚集功能及影响因素调查

目的:初步了解老年人群的血小板聚集功能,分析影响血小板聚集功能的危险因素方法:选取2018年3月?8月在福建医科大学附属泉州市第一院体检中心健康检查的60岁以上老年人群226例,其中男性120例,女性106例。采用PL-12血小板功能分析仪测定二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)诱导的血小板最大聚集率(MAR)。采用贝克曼AU5800生化分析仪测定总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白等生化指标。分析年龄、性别、血糖、血脂、吸烟、血压等对老年人群血小板聚集功能的影响.结果:老年人群A A诱导的PLT-MAR为(54.27±17.93)%,ADP诱导的PLT-MAR为(44.90±13.81)%,相关性分析显示,AA诱导的PLT-MAR与ADP诱导的PLT-MAR具有显著相关性(r=0.471,P<0.001)。AA诱导的PLT-MAR与血小板的数量具有显著正相关(r=0.254,P<0.001),而ADP诱导的PLT-MAR与血小板的数量无明显相关(r=0.014,P=0.837);同时研究显示AA诱导的PLT-MAR及ADP诱备的PLT-MAR均与平均血小板体积MPV呈正相关的关系(ADP:r=0.302,P<0.001)(AA:r=0.261,P<0.001)。逐步回归分析进一步证明:AA诱导的PLT-MAR与血小板的数量及MPV具有显著相关(P<0.001);ADP诱导的PLT-MAR与MPV显著相关(P<0.001).样本组中胆固醇异常且M A R位于血栓发生风险区的比例为10.1%(15/149),明显高于胆固醇正常且MAR位于血栓发生风险区比例2.6%(2/77)(P<0.05)结论:老年人群中,AA诱导的PLT-MAR与ADP诱导的PLT-MAR具有显著相关性本研究表明,血小板数量、MPV影响血小板的聚集功能。高胆固醇老年人群,发生血栓的风险增加.     

不同剂量阿司匹林对阻抗血小板聚集的作用评价

目的　评价阿司匹林 (ASP)对阻抗血小板聚集 ,改善微循环的最佳用量。方法　采用ACT 2 0 0 0超高倍多媒体显微诊断仪对检查确诊的 12 0例血小板重度聚集患者 ,随机分成甲、乙、丙、丁 4组 ,其中甲组为对照组 ,乙、丙、丁 3组按组序分别给予服用不同剂量 (5 0mg/d、10 0mg/d、30 0mg/d)的ASP 1个月 ,用同法检查血小板聚集程度。结果　乙组治疗后与甲组比较无显著性差异 (χ2 =1.4 5 ,P >0 .0 5 ) ,丙、丁两组的治疗效果分别与甲、乙两组比较差异非常显著 (χ2 分别为 35 .6 ,2 6 .7,38.6 ,2 9.4 ,P <0 .0 1)。而丙组和丁组之间比较 ,治疗效果无显著性差异 (χ2 =0 .13,P >0 .0 5 )。结论　每日服用 10 0mgASP为降低血小板聚集 ,是预防血栓性疾病的最佳用药剂量。     

西洛他唑对脑梗死患者血小板聚集功能的影响及二级预防的作用

目的观察西洛他唑对脑梗死患者血小板聚集功能及二级预防的作用。方法选择在泰兴市人民医院神经内科住院的脑梗死患者72例,随机分为两组,治疗组在常规治疗的基础上予以西洛他唑100mg,早晚各1次;对照组予以拜阿司匹林100mg,每晚1片,分别在入院当时及服用药物后2、4、8、12、24周,监测血小板聚集功能、再次发生脑梗死及不良反应发生的情况。结果两组患者血小板聚集功能及再次发生脑梗死情况比较差异无统计学意义,但对照组有3例出现消化道出血,5例出现牙龈出血,而治疗组无一例出血情况的发生。结论西洛他唑更适宜应用于脑梗死患者的二级预防。     

巨核细胞形态及血小板聚集功能检测在特发性血小板减少性紫癜诊疗中的应用研究

目的研究特发性血小板减少性紫瘕（ITP）患者骨髓象中的巨核细胞数量、分类、形态变化,血小板聚集功能在lTP治疗前后的变化。方法骨髓细胞学计数巨核细胞数量、分类,应用血小板聚集试验。检测20名正常人和24例ITP患者治疗前后的血小板聚集活性。结果TTP患者的巨核细胞数量、分类、形态与正常人之间有明显差异;治疗前后血小板聚集活性有明显差异。结论TTP患者的出血倾向与血小板数量、血小板的聚集功能下降有关,治疗后可以通过改善血小板数量和质量,促进血小板的聚集功能,纠正TTP患者的出血倾向。     

部分蔬菜抗血小板聚集功能及其作用机制的初步研究

目的对部分具有抗血小板聚集功能蔬菜的作用机制进行初步探讨。方法将不同种类的蔬菜汁（以西红柿汁作为阳性对照）分别与正常人富血小板血浆（PRP）孵育，加入血小板聚集诱导剂，观察各种蔬菜汁对血小板聚集的影响；用诱导剂激活血小板，流式细胞仪分析蔬菜汁对活化血小板纤维蛋白原受体（Fib-R）和P-选择素（CD62P）的表达水平及血小板纤维蛋白原结合量的影响；利用动物试验对血小板抑制作用进行体内验证，普通白兔随机分为5组，分别定量饲以生理盐水、熟西红柿汁、蒜黄汁、大白菜汁及菠菜汁，观察不同时间后血小板聚集情况。结果在花生四烯酸（AA）诱导下，未发现熟蔬菜汁有明显抑制体外人血小板聚集的作用，但在二磷酸腺苷（ADP）、胶原或肾上腺素诱导下，熟蒜黄汁、大白菜汁、菠菜汁能够明显抑制血小板聚集，并且随着蔬菜汁浓度的增加，对血小板聚集的抑制率增高。熟蒜黄汁、大白菜汁、菠菜汁不能抑制ADP、胶原或肾上腺素诱导的血小板Fib-R、CD62P表达，但能够显著抑制由ADP或胶原诱导的血小板与纤维蛋白原结合量。普通白兔在饲以熟大白菜汁、蒜黄汁、菠菜汁后，ADP诱导的兔血小板聚集率分别在第3、5、8周末时开始降低，熟大白菜汁喂养组血小板聚集的抑制率在第3、5、8周末分别为：45．7％、53．6％、48．5％，熟蒜黄汁喂养组分别为：10．7％、66．7％、46．3％，熟菠菜汁喂养组分别为：8．7％、21．0％、42．6％；饲以熟大白菜汁、蒜黄汁后，胶原诱导的兔血小板聚集率分别在第5、8周末时开始降低，熟大白菜汁喂养组血小板聚集的抑制率在第5、8周末分别为：54．9％、56．3％，熟蒜黄汁喂养组分别为：28．4％、86．7％。在8周内，熟西红柿汁对兔血小板未产生抗聚集作用。结论在ADP或胶原诱导下，熟蒜黄汁、大白菜汁及菠菜汁能明显抑制活化血小板与纤维蛋白原的结合，能够显著抑制血小板的聚集，具有潜在的预防或治疗血栓性疾病的前景。     

全血电阻法检测血小板聚集程度对抗血小板治疗效果的评价

目的研究全血电阻法检测血小板聚集程度对抗血小板治疗效果的评价。方法比较全血电阻法和经典的血浆光学法测定血小板聚集程度的重复性。采用全血电阻法，分别以二磷酸腺苷（ADP）、花生四烯酸和胶原为诱导剂，检测30名健康志愿者和60例服用血小板聚集抑制剂的患者的血小板聚集程度。采用Kappa分析比较全血电阻法和经典的血浆光学法检测血小板聚集程度的一致性。结果全血电阻法的平均CV值为4．8％，优于血浆光学法（CV值为7．7％）。采用全血电阻法，分别以ADP、花生四烯酸和胶原为诱导剂，健康志愿者的平均聚集程度分别为（9．6±3．4）Ω、（10．4±2．8）Ω和（13．5±2．2）Ω。服用阿司匹林（100mg／d）的患者，以花生四烯酸为诱导剂，95％的患者血小板聚集程度为0Ω。服用血小板聚集抑制剂患者的血小板聚集程度显著低于健康志愿者（ADP为诱导剂，t=2．391，P〈0．05；花生四烯酸为诱导剂，t=4．057，P〈0．01；胶原为诱导剂t=2．047，P〈0．05）。同时服用阿司匹林和氯吡格雷两种抑制剂的患者的血小板聚集程度显著低于单独服用阿司匹林的患者（t=3．646，P〈0．01）。另外，以花生四烯酸为诱导剂，阿司匹林抵抗的患者的血小板聚集开始时间，有比健康志愿者延长的特点。经Kappa分析，表明全血电阻法和经典的血浆光学法两种方法检测患者对阿司匹林（Kappa=1）和氯吡格雷（Kappa=0．67）两种血小板聚集抑制剂的效果的一致性良好。结论采用全血电阻法和多种诱导剂测定血小板聚集能力对帮助临床判断抗血小板治疗的效果，辅助个体化用药是很有意义的。     

应用血小板图和快速血栓弹力图评价体外凝血功能

自的 用血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa抑制剂阿昔单抗在体外抑制全血中血小板来观察血小板图(PlateletMapping(R))技术的方法学可靠性,并对血小板图和凝血激活检测试剂盒(Rapid TEGTM,快速血栓弹力图)两种方法进行评估.方法 根据临床性能评价的要求,将不同浓度的阿昔单抗与健康志愿者全血混合后进行血小板图测试,并用Rapid TEG试剂盒测定肝素抗凝血的活化凝血时间(TEG(R) ACT)等参数,计算两种方法的线性、重复性和有效性.结果 随着阿昔单抗浓度的升高,除纤维蛋白原以外各激活方式凝集曲线的MA都有明显的线性减低;在(1～4)×10-2 mg阿昔单抗作用下,不同通道和系统的血小板抑制率重复性良好(CV＜10%);加入阿昔单抗后,AA激活途径的血小板抑制率由28.0%±2.8%升至63.4%±0.0%(t=21.9,P＜0.01);ADP激活途径血小板抑制率由35.9%±0.56%升至91.4%±1.1%(t=58.9,P＜0.01).TEG(R) ACT与肝素呈现明显的剂量线性关系;快速血栓弹力图检测参数除R以外,K、α、MA和TEG(R)ACT的测量重复性良好(CV＜5%).结论 血小板图能够灵敏地反映出血小板所受抑制程度的不同,具有良好的测量精密度和剂量效应关系.Rapid TEG在以TEG(R) ACT监测肝素浓度的同时,还提供了对总体凝血功能的分析.     

荜茇酰胺对儿童抗凝、抗血小板聚集作用的体外实验研究

目的观察荜茇提取物荜茇酰胺(PL)对儿童具有抗血小板、抗凝作用,为临床用药提供实验依据。方法抽取30名健康儿童静脉血,随机分为5组,分离富血小板血浆(PRP),取PRP分别加入二甲基亚砜(DMSO)作为空白组,加入阿司匹林(终浓度10μmol/L)作为对照组,加入PL(终浓度分别为20、100、200μmol/L)作为不同浓度PL组,37℃孵育5min,作用后PRP分别加入诱导剂二磷酸腺苷(ADP)终浓度10μmol/L,胶原(Coll)终浓度2.5μg/mL,花生四烯酸(AA)500μg/mL,采用比浊法在37℃条件下测定血小板聚集率。抽取静脉血分离血浆后分5组,将不同浓度PL分别与3组血浆混合,终浓度分别为5、10、20μmol/L,空白组将1%DMSO与血浆混合,对照组将肝素钠与血浆混合(35U/mL),各组37℃孵育5min后上机检测纤维蛋白原(FIB)水平、凝血酶原时间(PT)及凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)。结果与对照组比较,PL(20、100、200μmol/L)干预后对AA、Coll诱导的血小板聚集均有显著抑制作用(P0.05),PL 100μmol/L、PL 200μmol/L可以显著抑制ADP诱导的血小板聚集率(P0.05);PL 10μmol/L、PL 20μmol/L干预后可以显著延长儿童血浆的PT、APTT、TT值(P0.05),但FIB未见明显变化。结论 PL能抑制儿童血浆的血小板聚集,抑制抗凝活性。     

抗幽门螺杆菌尿素酶B单抗对人血小板聚集与活化的影响及其机制研究

目的研究抗幽门螺杆菌尿素酶B（Hp ureB）单克隆抗体（1F11）对二磷酸腺苷（ADP）诱导的人血小板聚集与活化的影响及其机制。方法采用Western blot分析血小板膜糖蛋白（GP）成分与1Fll的相关性，采用比浊法检测血小板聚集情况，分别用双抗夹心、抗原竞争的酶联免疫测定法检测各组血浆中的P-选择素、血栓烷B2。通过流式细胞术（FCM）分析单抗1F11与SZ21单抗对血小板GPⅢa的竞争性。结果1F11与血小板成分GPⅢa有一定程度结合，1F11单抗可明显抑制ADP诱导的人血小板的聚集，随着1F11浓度的增加，血小板聚集抑制率呈剂量依赖性增高，但1F11并不抑制血浆中P-选择素、血栓烷B2的水平。FCM结果显示：加单抗1F11后可使FITC—SZ21单抗与血小板结合的阳性细胞率从99．5％降至77．4％。，结论1F11可与人血小板GPⅢa结合并抑制血小板聚集，但不能阻止血小板的活化过程。HpureB与人血小板GPma具有交叉识别的抗原表位。提示幽门螺杆菌可能与ITP发病有关。     

Effect of acetaldehyde on rat platelet aggregation in vivo and in vitro

The effect of acetaldehyde on primary hemostasis and platelet aggregation was studied in vivo and in vitro in the rat. Acetaldehyde was found in circulation following ethanol intoxication or was present after direct i.v. injection. In vitro, acetaldehyde was added to whole blood or platelet plasma suspension. Bleeding time and blood loss were increased upon ethanol intoxication and immediately after i.v. infusion of acetaldehyde. The intrinsic coagulation system, assayed by APT-time, was unaffected. In vivo, ADP and collagen-induced platelet aggregation was inhibited upon the presence of acetaldehyde. In vitro, inhibition of platelet aggregation was observed when acetaldehyde was added to blood, while the addition of the compound to plasma did not affect platelet function.