基质细胞源性生长因子1α和血管内皮生长因子在退变椎间盘组织中的表达及意义

背景:在正常情况下成人椎间盘组织中含有很少量的小血管,但在突出的椎间盘中却出现了明显的血管化,基质细胞源性生长因子1α在人类出生后成人组织血管发生的启发过程中起到了非常重要的作用,但在椎间盘中的表达少见报道.目的:检测基质细胞源性生长因子1α和血管内皮生长因子在腰椎间盘中的表达,进而评估两者在椎间盘的血管化中的作用.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-05/2007-01在中国医科大学组织工程实验室完成. 材料:48份椎间盘突出标本及14份非椎间盘突出标本.椎间盘突出标本分突出型、脱出型、游离型.方法:采用SABC免疫组织化学技术对实验组48份腰椎间盘突出标本及对照组14份非腰椎间盘突出标本进行抗SDF-1α和抗 VEGF单克隆抗体染色.主要观察指标:腰椎间盘中基质细胞源性生长因子1α及血管内皮生长因子的表达.结果:实验组椎间盘标本中基质细胞源性生长因子1α和血管内皮生长因子的表达均高于对照组标本,实验组标本中游离型及脱出型的基质细胞源性生长因子1α和血管内皮生长因子蛋白表达均比突出型高,游离型与脱出型之间的表达无差异.结论: 腰椎间盘组织中基质细胞源性生长因子1α和血管内皮生长因子的表达可能与腰椎间盘血管新生有关.     

腰椎间盘突出髓核的自身免疫性

背景：引起椎间盘源性腰腿痛的发病机制很多,在椎间盘退变的发生和发展过程中血管内皮生长因子与T,B淋巴细胞的表达与突出类型、病程等是否具有相关性还未完全清楚。目的：观察不同类型腰椎间盘突出症患者腰椎间盘组织中T,B淋巴细胞及血管内皮生长因子的表达变化,分析其与患者症状、体征的相关性。方法：选取腰椎间盘突出症患者的腰椎间盘标本作为实验组,包括游离脱出型、突出型及膨出型;以腰椎骨折患者的正常椎间盘作为对照。采用苏木精-伊红染色法观察椎间盘标本中血管形成及周边淋巴细胞聚集情况,免疫组化法检测CD4,CD8,IgG,IgM及血管内皮生长因子的分布。结果与结论：①在突出髓核组织中有大量新生血管形成并可见血管内皮细胞,在其周围可见明显的淋巴细胞聚集。②实验组均有活化的CD4,CD8阳性T细胞、IgG,IgM阳性B细胞和血管内皮生长因子表达,其中脱出游离组和突出组的阳性细胞率高于膨出组（P〈0.05）,而对照组均无阳性表达。提示髓核组织暴露于自身免疫系统中可以激活T、B细胞,引起自身免疫反应,血管内皮生长因子参与了退变椎间盘新生血管的形成,并可能与T,B细胞引起的自身免疫反应对椎间盘突出腰腿痛机制有协同作用。     

基质金属蛋白酶1在不同程度退变腰椎间盘髓核与纤维环中的表达及意义

背景：基质金属蛋白酶在椎间盘退变中通过影响基质合成及降解导致基质成分紊乱及功能的改变。目的：观察基质金属蛋白酶1在人类退变腰椎间盘组织中的表达变化。方法：获取经手术治疗腰椎间盘突出症患者椎间盘标本30份,突出型、脱出型、游离型各10份,分离髓核与纤维环,设为实验组;腰椎损伤致椎体骨折切除椎间盘10份设为对照组。应用免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶1在椎间盘中髓核与纤维环细胞中的表达。结果与结论：①苏木精-伊红染色显示,对照组椎间盘标本纤维环仍保持着致密的板层结构,实验组椎间盘组织多呈纤维化样改变。②两组髓核细胞中基质金属蛋白酶1表达均高于纤维环细胞中的表达。③实验组突出型椎间盘标本中基质金属蛋白酶1表达明显高于对照组（P〈0.01）,脱出型和游离型椎间盘标本中基质金属蛋白酶1表达明显高于突出型（P〈0.01）。     

腰椎间盘组织中血管内皮生长因子mRNA表达与其病变程度和病程的相关性

目的：探讨血管内皮生长因子mRNA在突出腰椎间盘组织中的表达情况及其与病程和病变程度的关系。方法：选择2002—06／11在郑州市骨科医院脊柱骨科住院的腰椎间盘突出症患者25例作为病变组，均知情同意。病程1个月～10年，平均23．67个月。硬膜外麻醉下行髓核摘除术，记录椎间盘突出类型，病情从轻至重为：凸起型4例，突出型15例，游离型6例。同时选择3例急性腰椎爆裂性骨折行椎管内减压内固定术患者及2例行脊柱侧弯行前路松解术患者作为对照组，既往健康。手术中选取纤维环、髓核、软骨终板组织标本，每组标本分为两份，一份液氮速冻后转入-70℃超低温冰箱中冻存备用。另一份作光镜下病理组织学观察，根据Norbet Boos等的组织学分级将所有标本的病理病变程度分为轻、重两度。不同类型椎间盘髓核、纤维环、软骨终板组织标本血管内皮生长因子mRNA表达情况以反转录-聚合酶链反应技术测定，并探讨其与病程的关系。结果：腰椎间盘突出症患者25例及对照组5例全部进入结果分析。①血管内皮生长因子mRNA的表达水平：在髓核中的表达水平显著高于在纤维环、软骨终板中的表达[13．05&;#177;0．82，6．91&;#177;0．33，2．47&;#177;0．37（t=12．03，10．16，P〈0．05）]。游离型显著高于突出型[8．36&;#177;0．41，4．13&;#177;0．14，（t=7．81，P〈0．05）]；突出型显著高于凸起型（1．19&;#177;0．48）（t=3．35，P〈0．05）。病变组明显高于正常对照组（0．61&;#177;0．34），（t=8．64，P〈0．05）。重度病变患者显著高于轻度病变患者[10．43&;#177;0．27，6．01&;#177;0．34 （t=8．26，P〈0．05）]。②病程与血管内皮生长因子mRNA表达的关系：病程大于12个月患者椎间盘组织中血管内皮生长因子mRNA表达的阳性率显著高于病程3-6个月及7～12个月的患者[88．9％，39％，30．7％，（X^2=19．24，P〈0．05）]。结论：血管内皮生长因子参与腰椎间盘突出的病理过程，随病情的加重而分泌增多。病程在12个月以上椎间盘突出症患者的血管内皮生长因子mRNA阳性率较高。     

腰椎间盘组织中血管内皮生长因子mRNA表达与其病变程度和病程的相关性

目的:探讨血管内皮生长因子mRNA在突出腰椎间盘组织中的表达情况及其与病程和病变程度的关系。方法:选择2002-06/11在郑州市骨科医院脊柱骨科住院的腰椎间盘突出症患者25例作为病变组,均知情同意。病程1个月～10年,平均23.67个月。硬膜外麻醉下行髓核摘除术,记录椎间盘突出类型,病情从轻至重为:凸起型4例,突出型15例,游离型6例。同时选择3例急性腰椎爆裂性骨折行椎管内减压内固定术患者及2例行脊柱侧弯行前路松解术患者作为对照组,既往健康。手术中选取纤维环、髓核、软骨终板组织标本,每组标本分为两份,一份液氮速冻后转入-70℃超低温冰箱中冻存备用。另一份作光镜下病理组织学观察,根据NorbetBoos等的组织学分级将所有标本的病理病变程度分为轻、重两度。不同类型椎间盘髓核、纤维环、软骨终板组织标本血管内皮生长因子mRNA表达情况以反转录-聚合酶链反应技术测定,并探讨其与病程的关系。结果:腰椎间盘突出症患者25例及对照组5例全部进入结果分析。①血管内皮生长因子mRNA的表达水平:在髓核中的表达水平显著高于在纤维环、软骨终板中的表达犤13.05±0.82,6.91±0.33,2.47±0.37(t=12.03,10.16,P<0.05)犦。游离型显著高于突出型犤8.36±0.41,4.13±0.14,(t=7.81,P<0.05)犦;突出型显著高于凸起型(1.19±0.48)(t=3.35,P<0.05)。病变组明显高于正常对照组(0.61±0.34),(t=8.64,P<0.05)。重度病变患者显著高于轻度病变患者犤10.43±0.27,6.01±0.34(t=8.26,P<0.05)犦。②病程与血管内皮生长因子mRNA表达的关系:病程大于12个月患者椎间盘组织中血管内皮生长因子mRNA表达的阳性率显著高于病程3～6个月及7～12个月的患者犤88.9%,39%,30.7%,(χ2=19.24,P<0.05)犦。结论:血管内皮生长因子参与腰椎间盘突出的病理过程,随病情的加重而分泌增多。病程在12个月以上椎间盘突出症患者的血管内皮生长因子mRNA阳性率较高。     

乳腺癌中肝细胞生长因子及其受体C-Met和血管内皮生长因子表达的意义

目的：研究肝细胞生长因子及其受体C—Met和血管内皮生长因子蛋白在乳腺癌组织中表达的意义。方法：应用免疫组织化学方法检测53例乳腺癌患者组织标本中肝细胞生长因子、C—Met和血管内皮生长因子蛋白的表达情况。结果：肝细胞生长因子、C—Met和血管内皮生长因子蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于乳腺良性肿瘤组织（P〈0．05），其阳性表达率随癌组织的组织学分级，临床分期和淋巴结转移的增多而增高。结论：乳腺癌组织中肝细胞生长因子、C-Met和血管内皮生长因子蛋白的高表达，表明了乳腺癌细胞的高活动性，可能与患者的预后密切相关。     

多效生长因子及血小板源性生长因子在增龄鼠椎间盘中的表达

背景：在组织缺氧状态下,多效生长因子能够直接参与新生血管的生成,在人类腰椎间盘退变方面起重要的作用。目的：观察增龄鼠椎间盘中多效生长因子和血小板源性生长因子的表达,及其与椎间盘退变的关系。方法：取1,3,6,12,18月龄Wistar大鼠各10只。采用免疫组织化学染色方法检测椎间盘组织中多效生长因子及血小板源性生长因子的表达情况。采用Spearman相关分析方法对多效生长因子和血小板源性生长因子的相关性进行分析。结果与结论：随着大鼠月龄的增加,椎间盘细胞中多效生长因子及血小板源性生长因子的表达有逐渐减低的趋势,但至18月龄又有所增加。同月龄组椎间盘细胞中,多效生长因子及血小板源性生长因子在终板的表达高于髓核和纤维环（P〈0.05）。多效生长因子及血小板源性生长因子在椎间盘组织中的表达有一定的相关性（P〈0.01）。提示大鼠椎间盘结构随月龄增加发生退行性变,多效生长因子及血小板源性生长因子参与了大鼠椎间盘的退变。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子-2在退变腰椎间盘髓核与纤维环组织的表达及意义

目的:测定基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)在退变椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞中的表达,探讨其在椎间盘退变中的意义.方法:选取腰椎间盘突出症患者手术摘除椎间盘标本30例,分离椎间盘标本髓核与纤维环组织,设为实验组.创伤致腰椎椎体骨折经手术摘除椎间盘组织标本10例作为对照组.采用免疫组织化学法检测两组椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞中TIMP-2的表达.结果:TIMP-2在椎间盘组织标本髓核与纤维环细胞的表达中,实验组阳性率多于对照组(P＜0.01);在髓核细胞中的表达要强于纤维环,而且不同退变程度的表达也不同,TIMP-2在突出型中的表达较正常对照组组织标本中的表达增高(P＜0.01),TIMP-2在脱出型和游离型组织标本中的的表达较突出型有所增高(P＜0.01).结论:实验组椎间盘髓核与纤维环细胞中TIMP-2表达程度与椎间盘退变程度呈正相关;TIMP-2参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,TIMP-2可能作为MMPs的一个重要调节因素,与MMPs相互协调.     

多效生长因子及血小板源性生长因子在增龄鼠椎间盘中的表达

背景:在组织缺氧状态下,多效生长因子能够直接参与新生血管的生成,在人类腰椎间盘退变方面起重要的作用.目的:观察增龄鼠椎间盘中多效生长因子和血小板源性生长因子的表达,及其与椎间盘退变的关系.方法:取1,3,6,12,18月龄Wistar大鼠各10只.采用免疫组织化学染色方法检测椎间盘组织中多效生长因子及血小板源性生长因子的表达情况.采用Spearman相关分析方法对多效生长因子和血小板源性生长因子的相关性进行分析.结果与结论:随着大鼠月龄的增加,椎间盘细胞中多效生长因子及血小板源性生长因子的表达有逐渐减低的趋势,但至18月龄又有所增加.同月龄组椎间盘细胞中,多效生长因子及血小板源性生长因子在终板的表达高于髓核和纤维环(P < 0.05).多效生长因子及血小板源性生长因子在椎间盘组织中的表达有一定的相关性(P < 0.01).提示大鼠椎间盘结构随月龄增加发生退行性变,多效生长因子及血小板源性生长因子参与了大鼠椎间盘的退变.     

血管内皮生长因子在脑复发胶质瘤中的表达

背景：脑胶质瘤病灶介质中富含新生血管，血管内皮生长因子表达不同可能与其病理表现和复发存在一定的相关性。 目的：分析血管内皮生长因子在复发脑胶质瘤中表达的特征。 设计：对照实验。 单位：四川大学华西医院神经外科。 对象：从华西医院1996—06／2001—06手术切除且病理证实为脑胶质瘤143例石蜡标本中，收集临床资料完整且相同的个体复发前、后脑胶质瘤标本44例（22对）。取首次手术及第1次复发手术标本。其中Kernohan评分Ⅰ级8例；Ⅱ级10例；Ⅲ级14例；Ⅳ级12例。分为初发和复发2组，每组22例。 方法：采用免疫组织化学SP法，一抗羊抗人血管内皮生长因子IgG（单抗）、二抗兔抗羊IgG，工作度1：50，阴性对照为磷酸盐缓冲液置换一抗染色。检测44例复发前、后的脑胶质瘤病理组织中血管内皮生长因子蛋白表达水平，结合病理分级作对照分析。①胞浆内呈棕黄色颗粒为阳性信号。②在MPIAS-500型多媒体彩色病理图文分析系统上，对肿瘤细胞进行表达强度PU值（阳性单位）和细胞数测定。③PU值95％临界值，分别计数阳性细胞率。④常规苏木精一伊红染色Kemohan病理分级。 主要观察指标：①脑胶质瘤复发前、后标本血管内皮生长因子表达强度PU值。②脑胶质瘤复发前、后组病理分级。结果：①脑胶质瘤血管内皮生长因子表达强度PU值：初发组为21．9273&;#177;6．607，复发组为33．0545&;#177;6．684。②病理分级：初发Ⅰ级8例，复发Ⅱ级2例、Ⅲ级5例、Ⅳ级1例；初发Ⅱ级6例，复发Ⅱ级2例、Ⅲ级1例、Ⅳ级3例；初发Ⅲ级6例，复发Ⅲ级2例、Ⅳ级4例；初发Ⅳ级2例，复发Ⅳ级2例。③脑胶质瘤复发前、后标本血管内皮生长因子蛋白表达PU值和肿瘤复发前、后病理分级各自对比检验差异均有显著性（P〈0．05）。 结论：血管内皮生长因子表达强度在脑胶质瘤复发较初发时增加明显，复发肿瘤恶化趋势与血管内皮生长因子的高表达在胶质瘤的复发中呈一致性。     

血管内皮生长因子在鼠尾胶原凝胶诱导三维血管新生中的作用研究

背景:血管新生在组织工程研究中已引起了高度重视.血管内皮生长因子在二维平面培养中已证实能促进血管新生.目的:观察血管内皮生长因子在三维血管新生中的作用.方法:取SD大鼠骨髓,分离出内皮祖细胞.待细胞融合至70%～80%时添加鼠尾另一层胶原凝胶建立三维立体模型.实验组采用完全培养液含M199培养液、胎生血清加血管内皮生长因子及双抗;对照组培养液中不含血管内皮生长因子.培养第1,4,7,20天观察骨髓来源内皮祖细胞的体外培养和扩增情况并进行细胞鉴定.三维立体模型建立后第3,6,9,12天进行形态观察及定性定量分析.结果与结论:实验组内皮祖细胞在三维基质内向胶原基质内生长,24 h内即可出现向胶原内的出芽及浸润并逐渐形成分支样结构,对照组细胞生长慢,出芽慢,管状结构细小,向胶原内浸润的深度浅,网状结构稀疏,不完整.实验组新生血管数目显著高于对照组(P<0.01).取第3,6,9,12天的凝胶块检测,可见内皮素1、内皮型一氧化氮合成酶3表达阳性.结果表明,血管内皮生长因子能动员和诱导内皮祖细胞促进血管新生.鼠尾胶原凝胶可以诱导内皮祖细胞表现出血管新生中的迁移、增殖和发芽等步骤.     

碱性成纤维细胞生长因子在正常及不同类型腰椎间盘突出组织中的表达及其意义

目的:研究碱性成纤维细胞生成因子在不同类型的椎间盘组织中的表达及其意义,以期探讨腰椎间盘退行性变分子生物学机制。方法:中南大学湘雅二医院2002-12/2003-05手术中所获得的椎间盘组织标本54例,其中41例来源于腰椎间盘突出症患者手术中取得的椎间盘组织(包含型17例,非包含型24例),13例来源于脊柱侧凸前路手术及腰椎骨折前路手术所获得的椎间盘组织。将这些椎间盘组织作苏木精-伊红染色及碱性成纤维细胞生长因子免疫组化检测,并作对照分析。结果:对照组中椎间盘组织碱性成纤维细胞生长因子表达为阴性,突出椎间盘组织中包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率为47%(8/17),非包含型为83%(20/24),包含型及非包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性率均高于对照组(P<0.01)。包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率低于非包含型(P<0.05)。非包含型中病程在1年以上的碱性成纤维细胞生长因子阳性率明显低于病程在1年之内者(P<0.05)。结论:突出椎间盘组织可以诱导产生碱性成纤维细胞生长因子且与突出类型、病程相关,提示碱性成纤维细胞生长因子在腰椎间盘组织退变、自发性吸收中有重要的促进作用。     

纳米微囊包裹血管内皮细胞生长因子对创伤组织中细胞因子表达的调控

背景:近年研究表明,生长因子作为一种分子信号调控细胞的增殖、分化、迁移与代谢,其表达与调控在慢性创面愈合中起着很重要的作用。目的:观察血管内皮生长因子对创伤组织血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子mRNA表达的影响,分析其促进损伤组织修复的作用途径。设计:对照动物实验。单位:解放军第四军医大学西京医院整形科。材料:实验用新西兰白兔6只,兔龄48～60个月。纳米微囊包裹的重组质粒DNA真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-血管内皮生长因子165(VEGF165)由第四军医大学西京医院整形外科贾宁硕士惠赠。方法:实验于2004-10/2005-06在西京医院整形外科实验室完成。①以血管内皮生长因子165为目的基因,构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-VEGF165,利用纳米微囊包裹制成纳米微囊-血管内皮生长因子165复合体。兔经麻醉后,在其耳腹侧制成直径为6mm的3个圆形创面,暴露软骨。以明胶海棉薄片蘸取纳米微囊-血管内皮生长因子165复合体100μL覆于每只兔一侧耳创面,外层覆盖无菌密封薄膜,作为血管内皮生长因子组;对侧每一创面以明胶海棉薄片蘸取100μL纳米微囊-空载质粒覆于创面作为对照组;在环切部位近端的兔耳皮肤作为正常皮肤组。②利用反转录聚合酶链反应方法观察术后14d损伤组织血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子mRNA的表达变化。③术后14d,以创面为中心,切取1cm×1cm正方形组织块(含兔耳全层),制成标本,苏木精-伊红染色,光镜下观察新生肉芽组织的生长情况。主要观察指标:创伤组织血管内皮生长因子受体、碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子表达。结果:①苏木精-伊红染色显示,血管内皮生长因子组创面肉芽生长及上皮爬行速度明显快于对照组。②反转录聚合酶链反应显示,血管内皮生长因子组损伤组织内血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子mRNA的表达水平明显高于对照组(P<0.05)及正常组(P<0.01)。结论:外源性血管内皮生长因子可以上调创伤组织中血管内皮生长因子受体,碱性成纤维细胞生长因子和血小板源性生长因子的表达,血管内皮生长因子可能作用于其受体,通过与其他细胞因子的协同作用来实现其对伤口愈合的促进作用。     

血管内皮生长因子在大鼠静脉窦血栓模型水肿脑组织中的表达与影像学评估指标的关系

目的：分析血管内皮生长因子在静脉窦血栓的血管源性水肿中的作用。方法：实验于2004—10／2005—5在解放军沈阳军区总医院放射诊断科完成。Wistar大鼠14只，随机选取7只结扎上矢状窦，定为实验组。另外7只不结扎上矢状窦，定为正常对照组。24h后行大鼠脑组织磁共振检查弥散加权成像。计算表观弥散系数值。并将脑组织标本分别进行苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色，观察血管内皮生长因子的表达，分析表观弥散系数值与血管内皮生长因子的关系。结果：血管内皮生长因子表达与血管源性水肿相关，在表观弥散系数图上表现为高信号[实验组血管源性水肿区域血管内皮生长因子免疫阳性细胞数为（21．00&;#177;2．23）个／高倍视野，表观弥散系数值（0．81&;#177;0．05）&;#215;10^-3mm^2/s。正常对照组血管内皮生长因子免疫阳性细胞数为（3．34&;#177;1．05）个／高倍视野，表观弥散系数值（0．75&;#177;0．03）&;#215;10^-mm^2/s]。结论：血管内皮生长因子表达在急性期静脉窦血栓的血管源性水肿脑组织中明显增强，并与影像学指标变化一致。     

转染血管内皮生长因子165基因的狗骨髓基质细胞超微结构变化及成骨能力

目的：探讨转染血管内皮生长因子165基因的狗骨髓基质细胞体外生物学特性。 方法：实验于2002—05／2005—06在华中科技大学同济医学院协和医院骨科完成。实验分为血管内皮生长因子基因转染组与对照组。从3只成人杂交犬髂骨取骨髓进行骨髓基质细胞分离培养，将重组的血管内皮生长因子165基因用脂质体介导转染狗骨髓基质细胞，用反转录聚合酶链反应方法检测血管内皮生长因子的表达；通过四唑盐、对硝基苯磷酸盐检测细胞增殖与碱性磷酸酶的活性；考马斯亮蓝法检测蛋白质含量；透射电镜观察细胞超微结构。 结果：（D重组质粒pcDNA3-人血管内皮生长因子165转染骨髓基质细胞后第7，14天，反转录聚合酶链反应方法检测有血管内皮生长因子mRNA表达。②骨髓基质细胞转染基因后，细胞的增殖能力无明显影响。③培养后第6，8，10，12天，转染血管内皮生长因子基因骨髓基质细胞与对照组细胞比较，碱性磷酸酶活性增高，蛋白质合成增多[转染组碱性磷酸酶为（428．09&;#177;96．67），（565．11&;#177;94．17），（562．94&;#177;39．17），（596．45&;#177;30．17）nkat，对照组碱性磷酸酶为（363.57&;#177;20.67），（536．44&;#177;11．42），（537．11&;#177;96．83），（548．10&;#177;92．34）nkat；转染组细胞蛋白合成为1．41&;#177;0．23，1．46&;#177;0．24，1．59&;#177;0．33，1．74&;#177;0．26；对照组细胞蛋白合成为0．82&;#177;0．11，0．83&;#177;0．09，0．85&;#177;0．06，0．91&;#177;0．091。④透射电镜可见转基因细胞内质网增多，线粒体致密，而糖原溶解与脂肪空泡则减少。 结论：血管内皮生长因子基因转染可促进骨髓基质细胞的成骨分化。     

胰岛素样生长因子Ⅰ在正常与退行性变腰椎间盘中表达的差异

目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ在正常与突出椎间盘中的含量并分析其与病程、患者年龄的关系。方法:于2003-08/2005-01在安徽省立医院骨科收集腰椎间盘标本50例,自椎间盘突出症患者术中取出椎间盘组织,包括纤维环和髓核(L3～S1),分为椎间盘退行性变组和正常对照组。椎间盘退行性变组42例,年龄:≤30岁,12例;31～50岁,16例;>50岁,14例。病程:3～6个月,16例;7～12个月,15例;>12个月,11例。正常对照组,8例,年龄19～31岁。所有标本用苏木精-伊红染色观察椎间盘组织有无血管组织,软骨细胞是否增生和退行性变,纤维板状结构有无破坏,基质是否有增生,用来确定椎间盘软骨细胞是否有退行性变。采用胰岛素样生长因子Ⅰ的免疫组化染色,进行免疫图像分析。观察胰岛素样生长因子Ⅰ表达情况及其在不同病程、年龄患者中的阳性表达比较。结果:实验标本50例全部进入结果分析。①正常对照组软骨细胞呈纺锤形,位于软骨陷窝内,胞膜完整,胞质均匀,胞质内少见空泡,基质少见。椎间盘退行性变组软骨细胞增生,胞膜不清,胞质内有较多空泡,部分细胞核消失,细胞外基质增多。②所有标本胰岛素样生长因子Ⅰ均有阳性表达,阳性表达主要位于椎间盘软骨细胞的胞核,呈棕黄色。③椎间盘退行性变组≤30,31～50,>51岁3个年龄段的胰岛素样生长因子Ⅰ含量均显著低于正常对照组[(0.031±0.009)%,(0.029±0.009)%,(0.029±0.010)%,(0.045±0.007)%,P<0.01～0.05],退行性变的腰椎间盘中的胰岛素样生长因子Ⅰ含量在3个年龄段中差异无显著性意义(P>0.05)。④椎间盘退行性变组病程3～6,7～12,≥12个月3个时间段,随着病程延长,胰岛素样生长因子Ⅰ含量有明显减少趋势[(0.037±0.008)%,(0.029±0.007)%,(0.020±0.003)%,P<0.05]。结论:退行性变与正常的腰椎间盘中均有胰岛素样生长因子Ⅰ,但在退行性变腰椎间盘中含量较低。退行性变的腰椎间盘中的胰岛素样生长因子Ⅰ量与患者年龄无相关性,而病程越长其中胰岛素样生长因子Ⅰ的含量越低。提示胰岛素样生长因子Ⅰ可能与椎间盘细胞及基质正常的代谢、椎间盘细胞凋亡、椎间盘细胞外基质代谢有关。     

骨折局部注射结缔组织生长因子后骨保护素和血管内皮生长因子的表达

背景：研究发现结缔组织生长因子在软骨发育过程中起重要作用,并具有强烈的促血管增殖作用,但其对骨折愈合的影响尚不清楚。目的：观察局部注射结缔组织生长因子对骨折愈合过程中骨保护素和血管内皮生长因子表达的影响及作用机制。方法：40只SD大鼠随机分为2组,建立胫骨干骨折模型后实验组动物即刻在骨折断端注射结缔组织生长因子0.1μg/kg,对照组注射等量生理盐水,隔日1次。结果与结论：实验组骨痂组织的早期即可见大量软骨细胞;免疫组织化学染色显示实验组骨保护素和血管内皮生长因子的表达均较对照组明显增强（P〈0.05）,并且两者表达的高峰期与对照组相比有所延长,有效缩短了两者表达高峰期之间的时间间隔。提示局部注射外源性生长因子结缔组织生长因子能增加骨折愈合过程中骨保护素和血管内皮生长因子在骨痂组织中的表达,并能改变两者的表达高峰期进而促进骨折愈合。     

血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2在血管瘤不同生长过程中的表达特征

目的:观察血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2在血管瘤不同分期中的表达。方法:取自承德医学院附属医院1998-01/2005-12期间血管瘤手术切除的标本共60例及正常带血管皮肤手术切除标本10例,患者家属知情同意。①实验分组:根据Mulliken标准进行病理诊断并分类,所有标本共分4组。增生组22例;退化组20例;退化完成组18例。另取10例正常带血管皮肤组织作为对照组。②采用免疫组织化学S-P法对各组标本的血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶2进行染色。③实验评估:以正常血管上皮细胞或肿瘤细胞胞浆出现棕黄色颗粒为阳性,检测各组血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2的表达。结果:①随着血管瘤病理时期的变化,血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2出现明显不同的表达。②增生组血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2的阳性表达率明显高于其他各组,且随着血管瘤的退化,两者的阳性表达率逐渐下降,至退化完成期时与对照组几乎无差别。③血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2的表达呈正相关。结论:血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2在血管瘤的不同分期中起重要作用,其表达水平与血管瘤的病理分期有密切关系。     

碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1在退变椎间盘组织中的表达和意义

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)在椎间盘退变组织中的表达情况和意义.方法 选取2004年至2006年手术切除的50例腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘组织(病变组)及10例因外伤手术切除椎间盘的正常间盘组织(对照组).采用免疫组化方法、酶联免疫吸附法(ELISA)检测标本中bFGF、TGF-β1的表达.结果 病变组椎间盘组织bFGF、TGF-β1的表达明显高于对照组(P＜0.05).结论 bFGF、TGF-β1在椎间盘的退变过程中可能发挥重要作用.     

碱性成纤维细胞生长因子在正常及不同类型腰椎问盘突出组织中的表达及其意义

目的:研究碱性成纤维细胞生成因子在不同类型的椎间盘组织中的表达及其意义,以期探讨腰椎间盘退行性变分子生物学机制.方法:中南大学湘雅二医院2002-12/2003-05手术中所获得的椎间盘组织标本54例,其中41例来源于腰椎间盘突出症患者手术中取得的椎间盘组织(包含型17例,非包含型24例),13例来源于脊柱侧凸前路手术及腰椎骨折前路手术所获得的椎间盘组织.将这些椎间盘组织作苏木精-伊红染色及碱性成纤维细胞生长因子免疫组化检测,并作对照分析.结果:对照组中椎间盘组织碱性成纤维细胞生长因子表达为阴性,突出椎间盘组织中包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率为47%(8/17),非包含型为83%(20/24),包含型及非包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性率均高于对照组(P＜0.01).包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率低于非包含型(P＜0.05).非包含型中病程在1年以上的碱性成纤维细胞生长因子阳性率明显低于病程在1年之内者(P＜0.05).结论:突出椎间盘组织可以诱导产生碱性成纤维细胞生长因子且与突出类型、病程相关,提示碱性成纤维细胞生长因子在腰椎间盘组织退变、自发性吸收中有重要的促进作用.