天津地区志贺菌耐药性及整合子携带调查

目的:了解天津地区志贺菌抗生素耐药性变迁及1、2类整合子携带状况。方法:K-B纸片法测定1981—1983年及2009年天津地区临床分离的57株志贺菌药敏情况。以煮沸法制备细菌总DNA作为PCR扩增模板。PCR方法扩增1、2类整合子整合酶及可变区并测序分析。PCR产物直接测序,结果经BLAST程序与GenBank数据库标准菌株比对分析。结果:1981—1983年组志贺菌对四环素、链霉素、氯霉素及复方新诺明敏感率低,3种及3种以上抗生素多重耐药率为66.67%;2009年组志贺菌对氨苄西林、链霉素、复方新诺明、哌拉西林和四环素敏感率低,3种及3种以上抗生素多重耐药率为83.33%。1981—1983年组1类整合子阳性率为87.88%(29/33),27株可变区含氨基糖苷类药物耐药基因aadA;1株宋内志贺菌可变区含甲氧苄啶耐药基因dfrA17和氨基糖苷类药物耐药基因aadA5;未发现2类整合子阳性株;2009年组1类整合酶阳性率为79.17%(19/24),可变区及3末端扩增均阴性;2类整合子阳性率87.50%(21/24),可变区含dfrA1+sat1+aadA1,介导甲氧苄啶、链丝菌素和链霉素耐药;其中17株1、2类整合酶均阳性。结论:2009年分离的志贺菌抗生素耐药较上世纪80年代分离的志贺菌增强,多重耐药菌株增加。天津地区志贺菌携带1、2类整合子。′     

临床分离志贺菌耐药性分析及1类整合子的检测

目的了解2007年至2010年安徽省临床分离志贺菌耐药性和1类整合酶基因(intⅠ1)、qacE△1-sul1基因及整合子携带的耐药基因盒的分布。方法琼脂稀释法检测21种抗菌药物对志贺菌的最低抑菌浓度。PCR扩增intⅠ1和qacE△1-sul1基因,对阳性菌株可变区基因盒序列进行分析。结果 137株志贺菌对萘啶酸、氨苄西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率均80.0%以上,且多重耐药率达94.2%,但对三代头孢菌素和氟喹诺酮类耐药率在33.0%以下。intⅠ1的检出率为89.1%(122/137),检出dfrA17-aadA5和aar-3-aacA4两种基因盒,首次在志贺菌中检测到aar-3-aacA4基因,GenBank登录号JF271916。结论安徽省临床分离志贺菌多重耐药现象严重。临床仍可选用氟喹诺酮类和三代头孢菌素作为本地区细菌性痢疾的经验性治疗。1类整合子与志贺菌的耐药具有一定的相关性。     

拉萨市1998～2002年志贺氏菌属菌型分布及耐药性分析

目的 了解拉萨地区近年来志贺氏菌属的菌型分布及其耐药情况，为防治志贺氏菌引起的细菌性痢疾和急性胃肠炎提供合理依据。方法 采集腹泻病人的新鲜粪便在麦康凯培养基上培养，把分离出的志贺氏菌作血清学鉴定，并按K—B法作药敏试验。结果 71株志贺氏菌基本上是福氏志贺氏菌，占95．8％；而福氏志贺氏菌又以福氏2a型为主，占94．1％。药敏结果显示全部菌株对头孢菌素类药物的耐药率较低，在10％以下，对阿莫西林的耐药率较高在85％左右，而对青霉素则完全耐药，耐药率为：100％。结论 拉萨市5年来志贺氏菌属以福氏2a型为主要流行菌群。志贺氏菌的耐药性有所增加，提示医师应合理用药以减少耐药菌株的增加。     

志贺菌菌型分布和耐药性分析及治疗策略

目的 了解广州市部分医院检测的志贺菌的菌型分布及耐药情况,指导临床合理用药及有效的治疗.方法 126株志贺茵均按常规的方法进行培养、分离、鉴定及分型,采用K-B法检测其对14种抗生素的敏感性.结果 126株志贺菌中福氏志贺菌71株(占56.3%);鲍氏志贺菌34株(占27.0%);宋内志贺菌14株(占11.1%);痢疾志贺菌7株(占5.6%);其对氨苄西林及复方新诺明耐药率较高达90.0%以上,对阿莫西林/棒酸、氨曲南的耐药率次之分别为72.2%和69.8%;对亚胺培南、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦较敏感,耐药率在10.0%以下;对喹诺酮类的耐药率在20%～30%之间;主要流行菌福氏和鲍氏志贺菌对各种受试抗菌素的耐药性均无显著差异.结论 广州市部分医院所检测的志贺菌以福氏志贺菌为主,对临床常用的抗生素的存在一定的交叉耐药,相关的医疗卫生部门应加强对志贺菌菌型及耐药性监测.     

1989-2010年全国志贺菌属耐药情况及血清群分布回顾性分析

【摘要】 目的回顾性分析1989-2010年全国范围内志贺菌属的药物耐药情况和血清群分布特征,为细菌性痢疾的临床合理用药和预防控制工作提供依据。方法检索中国知网中国期刊全文数据库1989-2010年关于全国各地区志贺菌属耐药情况和血清群分布数据的全部文献,按照地区和时间跨度分组,分别进行统计学分析。结果全国范围内志贺菌属对多种抗生素的耐药性在2000年后呈显著增加的趋势,且同一年代内南北方相比差异有统计学意义。1989-2010年全国范围内志贺菌属血清群分布始终以福氏志贺菌(B群)为主,宋内志贺菌(D群)次之。2000年后,南方D群构成比显著上升;北京D群构成比20年来始终明显高于上海。结论全国范围内志贺菌属的耐药性持续增加,血清群分布发生变化。     

151株志贺菌菌群分布及耐药性分析

目的 研究近年来肠道门诊腹泻患者志贺菌菌群分布及其耐药特点,为细菌性痢疾临床治疗和预防控制提供依据.方法 采用志贺菌及沙门菌琼脂培养基培养,可疑菌株经VITEK-32细菌鉴定仪及血清凝集鉴定到群,K-B法检测抗菌药物的耐药性.多重耐药菌用纸片确认试验检测产超广谱p-内酰胺酶(ESBLs),三维试验检测AmpCp-内酸胺酶(AmpC酶).结果 151株志贺菌中主要为宋内志贺菌(85株,占56.3%)和福氏志贺菌(64株,占42.4%),且感染患者主要集中在0~10岁年龄段,占总感染率的72.2%(109/151).药敏结果显示,福氏志贺菌和宋内志贺菌对氨节西林、氨苄西林/舒巴坦、呱拉西林和复方磺胺甲噁唑的耐药率较高,均＞50%,对三代头孢及四代头抱的耐药率均在35%以下;福氏志贺菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为29.6%和21.8%,未发现宋内志贺菌耐药者,且两者对呱拉西林/三唑巴坦和亚胺培南全部敏感.31株多重耐药菌经纸片确认试验均为ESBLs阳性菌株,但未发现AmpC酶阳性者.结论 我院肠道门诊腹泻患者以感染宋内志贺菌和福氏志贺菌的婴幼儿为主,两种志贺菌对部分种类的抗菌药物药敏性差别较大,临床医师应根据菌群鉴定及药物敏感试验结果合理选择抗菌药物.     

志贺菌临床株耐药性分析及对氟喹诺酮类抗生素耐药机制的研究

目的:了解本地区志贺菌抗生素耐药情况,探讨志贺菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制和耐药基因的突变及流行情况。方法:K-B纸片扩散法测定2009—2010年天津地区临床分离的119株志贺菌的药敏情况,对氟喹诺酮耐药志贺菌的gyrA、parC基因及质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR)基因qnrA、qnrB、qnrS、aac(6′)-ib-cr、qepA进行扩增、测序,将PMQR阳性菌株与大肠埃希菌J53ARZ进行质粒接合试验,比较接合前后受体菌对抗菌药物的敏感性变化。结果:119株志贺菌对萘啶酸敏感率最低(1.72%),其次为氨苄西林(2.52%)及复方磺胺甲口恶唑(3.36%)。福氏志贺菌与宋内氏志贺菌对氟喹诺酮耐药性差别较大,5株志贺菌对环丙沙星等氟喹诺酮耐药,均为福氏志贺菌,其中2株对左氧氟沙星耐药。4株同时存在gyrA83、87位点及parC80位点突变,1株缺乏gyrA87位点突变。PMQR基因阳性菌3株,包括1株qnrS及2株aac(6′)-ib-cr阳性菌,接合菌对多种抗生素的敏感性降低。结论:本地区志贺菌临床株对多种抗生素的多重耐药率较高,对氟喹诺酮耐药率低于5%。喹诺酮耐药机制既有染色体介导靶位酶突变,也存在质粒介导喹诺酮耐药。     

萧山医院肠道门诊2010—2014年志贺菌菌群分布及耐药性分析

目的调查浙江萧山医院肠道门诊志贺菌血清群分布及耐药情况,为临床治疗及合理用药提供依据。方法收集2010年1月至2014年12月该院肠道门诊分离的志贺菌,经血清凝集和VITEK-2 Compact微生物分析系统进行细菌鉴定,采用纸片扩散法进行药敏试验。结果共检出304株志贺菌,其中宋内志贺菌188株(61.8%),福氏志贺菌116株(38.2%);其中,年龄≤5岁检出志贺菌最多,为144株(47.4%),其次为≥20岁92株(30.3%);菌株分布以8月、9月、7月为最高;福氏志贺菌对氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、磷霉素、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶和左旋氧氟沙星的耐药率均明显高于宋内志贺菌,宋内志贺菌对复方新诺明耐药率高于福氏志贺菌。结论浙江萧山地区腹泻好发于夏秋季节,以学龄前儿童多见,志贺菌以宋内志贺菌和福氏志贺菌两个血清群为主,且两个血清群对多种抗菌药物的耐药率有显著差异,含酶抑制剂抗生素可作为治疗志贺菌感染的首选药物。     

北京地区携带 OXA-1 型超广谱-内酰胺酶志贺菌耐药特点研究

目的了解本地区志贺菌中携带OXA-1型超广谱母-内酰胺酶（exteneded spectrum beta—lactamases,ESBLs）耐药基因型及耐药特征。方法收集2008至2011年分离出的志贺菌83株,聚合酶链反应（PCR）检测OXA-1型耐药基因,阳性产物序列在GenBank上比对确定基因亚型;对携带OXA-1型耐药基因菌株按照Kirby—Bauer法进行药物敏感性试验,测定志贺菌对8种头孢类抗生素耐药情况。结果83株志贺菌中,21株携带OXA—l型ESBLs基因,阳性率为28．57％,其中21株福氏志贺菌检出15株,61株宋内志贺菌检出6株。阳性产物均为OXA-1亚型。药敏结果显示,携带OXA-1型基因菌株对头孢噻吩、头孢唑林等头孢类抗生素耐药,对头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟和头孢哌酮等头孢类抗生素均敏感。结论本地区志贺菌中以携带OXA-1亚型ESBLs耐药基因为主,在福氏志贺菌中检出高于宋内志贺菌,该基因与志贺菌对头孢类抗生素的耐药性呈-定相关性。     

大肠埃希菌临床分离株Ⅰ类整合子分布与耐药相关性研究

目的 川北地区大肠埃希菌的整合子携带情况及其与耐药性之间的关系.方法 采用琼脂稀释法测定临床分离的180株大肠埃希菌对15种抗菌药物的敏感性,敏感、中介、耐药采用美国临床实验室标准化协会(CSLI)2006年公布的标准判定.PCR方法检测临床大肠埃希菌中的第一类整合酶基因(intI),应用统计学方法比较第一类整合酶基因(intI)阳性与阴性菌株的耐药性差异,分析Ⅰ类整合子与耐药性形成的的相关性.结果 180株大肠埃希菌对氨苄西林、环丙沙星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、复方磺胺甲嗯唑、头孢唑啉、妥布霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松的耐药率高,达32.9%～92.3%.临床分离180株大肠埃希菌中intI带率为64.4%,intI性菌株对β-内酰胺类、喹诺酮类和氨基糖苷类等抗菌药物呈现多重耐药性.结论 川北地区大肠埃希菌对临床常用抗菌药物耐药突出.intI携带率高,并且与耐药性的形成关系密切.     

大肠埃希菌中Ⅰ类整合子耐药基因的分析

目的 对临床分离大肠埃希菌株携带的Ⅰ类整合子及相关耐药基因进行筛选和分析.探讨Ⅰ类整合子在大肠埃希菌耐药中的作用.方法 对43株大肠埃希菌临床分离株做药敏试验;采用PCR扩增、DNA测序、DNA序列比对的方法 对其携带的Ⅰ类整合子相关耐约基因进行分析.结果 43株大肠埃希菌分离株对10种抗菌药物的耐药率依次为亚胺培南4.7%、阿米卡星18.6%、头孢他啶、27.9%、头孢吡肟37.2%、头孢呋辛55.8%、复方磺胺甲嗯唑58.1%、妥布霉素74.4%、庆大霉素79.1%、头孢噻肟81.4%和哌拉两林83.7%.在43株大肠埃希菌分离株中有25株含有Ⅰ类整合子,其中18株携带整合子相关耐药基因,如介导对磺胺类和氨基糖苷类约物的耐药基因等;某些菌株携带的整合子相关耐药基因相同.结论 Ⅰ类整合子在大肠埃希菌中广泛存在,整合子相关耐约基因在该菌耐药性的形成和播散中发挥作用.     

树突状细胞与移植物抗宿主病及二者相关性的研究进展

树突状细胞是机体内最重要的作用最强的抗原提呈细胞(Antigen presenting cells,APC),在机体免疫应答中起着关键的调控作用,还可以作为肿瘤免疫反应的启动因素,在机体抗肿瘤免疫应答中占有重要的地位.最近的研究表明,其在移植物抗宿主病的发生发展中起着极为重要的作用.     

铜绿假单胞菌中整合子的分布及其可转移耐药性研究

目的 研究淮北地区Ⅰ类、Ⅱ类整合子在多重耐药铜绿假单胞菌(PA)中分布及其可转移耐药情况.方法 用聚合酶链反应(PCR)技术榆测多重耐药菌中整合子基因,并对整合酶基因阳性菌株进行转移接合试验;采用K-B法对接合转移成功菌株及接合子进行13种药物敏感试验.结果 多重耐药铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合子检出率为86.1%,未检出Ⅱ类整合子,含整合酶基因的接合子在转移成功接合子中所占比率为35.7%.结论 淮北地区铜绿假单胞菌中整合子的分布以Ⅰ类整合子为主,且水平传播率达到35.7%,应引起高度重视.     

Class 1 integrons in environmental and clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa

The aims of this study were to ascertain the presence and spread of class 1 integrons amongst environmental and clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa and to characterise their variable regions. A total of 76 isolates (56 clinical and 20 environmental) were studied. The presence of plasmids was explored, and polymerase chain reaction (PCR) was used for integron detection. All amplicons were sequenced. PCR detected class 1 integrons in 26 of the 56 clinical isolates; environmental isolates were integron-free. No plasmids were found, thus all the integrons found are possibly on the chromosome. Most isolates presented one amplicon, except PA110514 and PA116136, which showed two PCR products each. Variable regions revealed that 18 strains carried only one gene involved in aminoglycoside resistance, whereas in 3 strains gene cassettes were not found. The most prevalent cassettes amongst isolates were those encoding aminoglycoside adenyltransferase B (aadB). Several of the strains had acquired the same or a highly similar cassette array as those detected in geographically distant P. aeruginosa. This finding suggests that contact with bacterial reservoirs contributes to the evolution of this pathogen towards multiresistance. Empty structures found may represent a reservoir increasing the capacity to adapt to the environment. However, these integrons are not retained when the selective pressure disappears. It is hypothesised that integrons containing gene cassettes are crucial vehicles for the rapid horizontal transfer of resistance. If this is so, reduced use of antibiotics may lead to a significant decrease in the carriage of integrons amongst P. aeruginosa strains.     

肺炎克雷伯菌Ⅰ型整合子的检测与鉴定

目的研究Ⅰ型整合子参与肺炎克雷伯菌耐药的分子机制。方法收集2007年至2010年某院临床分离的297株肺炎克雷伯菌,应用K-B纸片扩散法检测耐药性,采用聚合酶链式反应进行I类整合子整合酶基因的检测;整合子可变区扩增、克隆测序,分析I类整合子基因结构。结果 297株肺炎克雷伯菌中,除MEM、IPM外,对其余11种抗菌素,Ⅰ类整合酶基因阳性菌株的耐药率明显高于Ⅰ类整合酶基因阴性菌株。57.91%(172/297)的菌株I类整合子整合酶基因阳性,共检测出10种不同基因盒。可变区编码耐药基因有aadA2、aadA1、aadA5、aadA3C、aacA4,介导氨基糖苷类抗菌素耐药;dhfrhI、dfrA12、dfrA14、dfrA17、dfrA1、dfrA25、dhfrhI,介导磺胺类抗菌素的耐药;aar-2,介导利福平耐药。结论Ⅰ类整合子在本院临床分离肺炎克雷伯菌中分布较广泛,主要介导氨基糖苷类和磺胺类抗菌素耐药。整合子与肺炎克雷伯菌的耐药有关,在肺炎克雷伯菌耐药性的形成和播散中具有重要作用。     

Molecular diversity and conjugal transferability of class 2 integrons among Escherichia coli isolates from food,animal and human sources

Integrons are genetic platforms able to excise, integrate and express antibiotic resistance gene cassettes (GCs). Here we investigated the complete genetic organisation, genetic environment, location and conjugative transferability of a collection of class 2 integrons carried by Escherichia coli strains from different sources (poultry/pork meat, animals and humans). PCR cartography was conducted to determine the genetic arrangement of the integrons, their physical linkage to Tn7 and chromosomal insertion at the attTn7 site. Clonal relatedness of specific isolates was determined by MLST and DO-PCR. Transferability of class 2 integrons was tested by conjugation. The resulting transconjugants were characterised by antimicrobial resistance genotyping, S1-PFGE and replicon typing. Although a limited diversity of GCs was shown, a high percentage of novel structures was identified owing to the integration of insertion sequence (IS) elements at different sites (IS3/IS4/IS5/IS21 families). Insertion of IS10 in the attI2 site of a class 2 integron, between Pc2B and Pc2C promoters, was likely mediated by a site-specific transposition event. Chromosomal insertion of integrons at attTn7 was confirmed in 80% of the isolates. Conjugation experiments demonstrated that 29% of class 2 integrons could be mobilised to E. coli CHS26, demonstrating that they can be located in conjugative/mobilisable elements at a low frequency. Reported structures evidence how class 2 integrons have evolved by the activity of integron integrases and the invasion of ISs. Since most of them are chromosomally located, dispersion is predominantly vertical, although conjugation events also contribute to the spread of class 2 integrons among bacterial communities.