负载VEGF DNA质粒人工真皮修复烧伤创面中对创面收缩与细胞凋亡的影响

目的 比较负载血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)DNA质粒胶原-磺化羧甲基壳聚糖真皮支架及胶原-磺化羧甲基壳聚糖真皮支架在修复Ⅲ度烧伤创面中对创面收缩与细胞凋亡的影响.方法 将两种不同真皮支架各移植于6头猪(共12头猪)Ⅲ度烧伤清创后创面,对植入支架1、2、3周后的创面及支架植入2周加植表皮2周的创面修复情况进行观察.同时,通过采用免疫组织化学方法,对不同时间的创面中表达α-SMA的成熟血管和肌成纤维细胞以及细胞凋亡发生情况进行检测和观察.以不植入支架的烧伤创面作为实验对照.结果 ①植入不同真皮支架的创面与无支架植人的肉芽创面不同,负载VEGF DNA质粒真皮支架修复创面效果好于无质粒负载真皮支架.②在两种不同支架植入后1～3周创面α-SMA表达阳性的血管数持续增加,支架植入2周加植表皮2周血管数比3周创面明显减少,不同时间点α - SMA表达阳性的血管以负载VEGF DNA质粒的胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架植入创面最多,无支架植入创面最少;③α-SMA表达阳性的肌成纤维细胞以负载VEGF DNA质粒的胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架植入创面最少,无支架植入创面最多,负载VEGF DNA质粒胶原-磺化羧甲基壳聚糖真皮支架及胶原-磺化羧甲基壳聚糖真皮支架创面中表达高峰为2周,无支架创面表达高峰为3周.④不同支架及无支架创面植入后2～4周,创面内细胞凋亡持续大幅增多,且无支架创面中发生细胞凋亡最少.结论 负载VEGF DNA质粒的胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架在烧伤创面愈合过程中可促进血管化,通过抑制创面收缩和促进细胞凋亡减少瘢痕的产生.     

血竭负载人工真皮支架对猪Ⅲ°烧伤创面修复中VEGF表达及创面收缩的影响

目的探讨胶原-壳聚糖人工真皮支架负载不同浓度血竭对Ⅲ°烧伤创面修复中VEGF表达及创面收缩的影响。方法将负载两种不同浓度血竭（4 g/L和1 g/L）的真皮支架各移植于6头猪（分别为A组和B组）Ⅲ°烧伤清创后创面,对植入支架1、2、3周后的创面及植入支架2周创面加植表皮后2周的创面修复情况（4周创面）进行观察。同时通过采用免疫组织化学的方法,对不同时间的创面中细胞表达的VEGF及肌成纤维细胞表达的α-SMA进行检测和观察。实验以植入胶原-壳聚糖人工真皮支架及不植入支架的烧伤创面作为对照（分别为C组和D组）。结果①负载高浓度血竭的胶原-壳聚糖/硅橡胶双层人工真皮支架创面修复好于其他两种支架及不植入支架创面;②VEGF表达结果：四组1~3周VEGF阳性表达呈持续性升高,差异有显著性（P〈0.05）;A、B、C组支架植入2周并植表皮2周后（4周）创面,VEGF阳性表达明显降低,D组4周与3周相比无显著性差异;不同时间点,四组的阳性信号A组最多,D组最少;③创面α-SMA表达阳性的肌成纤维细胞数：A组表达高峰在2周,B、C、D组表达高峰在3周;各组不同时间点,D组表达最多,3~4周,A组表达最少。结论血竭能明显诱导胶原-壳聚糖人工真皮支架在修复Ⅲ°烧伤创面中的VEGF表达从而促进血管化速度,同时可抑制创面的收缩从而抑制瘢痕的增生,且血竭的这些作用与药物浓度有相关性,高浓度比低浓度的作用更为显著。     

人工真皮支架修复猪Ⅲ度烧伤动物模型的构建

目的 建立猪Ⅲ度烧伤所致全层皮肤缺损并植入人工真皮支架的动物模型,观察人工真皮支架移植后1、2、3周,支架血管化情况以及人工真皮支架上移植刃厚皮片的可能性.方法 造成直径约3 cm的Ⅲ度烧伤创面,48 h后清创后植入胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶双层人工真皮支架,术后悬吊饲养、隔天换药护理.支架植入后1、2、3周观察创面并植刃厚皮片,植皮2周后观察植皮成活及创面修复.结果 ①造成约3 cm直径烧伤创面的铜锭最佳直径为2.5 cm;②为防止创面收缩必须应用移植环,手术后必须悬吊饲养;③支架植入后植皮时间最好选择在2周以后;④良好的术后处理是实验成功的重要因素.结论 本实验模型稳定、可重复性强,为人工皮肤的研究和生物学意义的验证提供了良好的大型动物模型.     

人工真皮移植和异体脱细胞真皮基质移植对烧伤瘢痕患儿创面愈合及功能恢复的影响

目的 探讨人工真皮移植和异体脱细胞真皮基质(ADM)移植对烧伤瘢痕患儿的创面愈合情况、功能恢复、愈合后瘢痕增生情况、瘙痒程度及创面不良事件发生率等的影响。方法 回顾性分析2019年6月—2022年6月台州市立医院收治的80例烧伤瘢痕患儿病例,40例患儿纳入对照组(采用人工真皮移植复合自体刃厚皮片进行创面愈合);40例烧伤患儿纳入观察组(采用异体ADM移植复合自体刃厚皮进行创面愈合)。观察两组患者的治疗后的创面愈合情况,包括皮片成活和创面愈合的总有效率、供皮区创面的愈合时间、植皮区温哥华瘢痕量表(VSS)评分、局部功能(术后关节活动度、手功能)优良率、创面不良事件(疼痛、瘙痒)发生率及患儿治疗满意度。结果 观察组的总有效率为97.5%,略微高于对照组92.5%,组间差异无统计学意义(χ²=1.053,P>0.05)。两组患儿的供皮区创面愈合时间接近,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组术后3个月的(5.24±1.58)分,显著低于术前(13.96±2.39)分,且低于对照组术后3个月的(5.96±0.82)分,差异有统计学意义(t=2.558,P&l...     

持续封闭负压引流技术在深度烧伤创面修复中的应用

目的探讨持续封闭负压引流(VAC)技术在深度烧伤创面修复中的应用效果。方法选取我院收治的60例深度烧伤患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组。观察组行持续封闭负压引流技术,对照组行生物敷料A方法。结果观察组患者的总有效率显著高于对照组(P<0.05)。观察组患者的创面愈合时间、Mc Gill疼痛评分、抗感染药物使用时间、住院时间均显著低于对照组(P<0.05)。结论持续封闭负压引流技术可显著提高深度烧伤创面的修复效果,值得在临床推广应用。     

人工真皮联合自体薄皮片移植在关节部位烧伤瘢痕挛缩修复中的临床应用

目的:研究人工真皮联合自体薄皮片移植在关节部位烧伤瘢痕挛缩修复中的临床应用价值。方法:选取2015年7月至2018年4月河北省保定市第五医院收治的52例关节部位烧伤瘢痕挛缩患者进行前瞻性研究,随机数字表法分组,各26例,瘢痕松解后观察组采用人工真皮联合自体薄皮片移植,对照组采用中厚皮移植术,比较两组自体皮成活率,并取人...     

T-1型脱细胞异体真皮基质组织补片在修复口腔黏膜缺损中的临床应用

目的 了解T-1型脱细胞异体真皮基质组织补片(瑞诺口腔组织补片)应用于修复口腔黏膜缺损的效果和安全性.方法 选择临床病例13例,其中下唇部黏液腺囊肿摘除术9例,上唇系带瘢痕松解术4例,术后缺损面积在2.0cm×2.0cm～3.0cm×3.5cm.术后缺损行瑞诺口腔组织补片修补,观察术后修复的效果并进行临床评价.结果 11例完全成活,2例部分成活.组织缺损修复效果良好,均无感染和排斥反应.结论 瑞诺口腔组织补片修复口腔黏膜缺损是一种安全有效的方法.     

T-1型脱细胞异体真皮基质组织补片在修复口腔黏膜缺损中的临床应用

目的了解T-1型脱细胞异体真皮基质组织补片（瑞诺口腔组织补片）应用于修复口腔黏膜缺损的效果和安全性。方法选择临床病例13例，其中下唇部黏液腺囊肿摘除术9例，上唇系带瘢痕松解术4例，术后缺损面积在2．0cm×2．0cm～3．0cm×3．5cm。术后缺损行瑞诺口腔组织补片修补，观察术后修复的效果并进行临床评价。结果11例完全成活，2例部分成活。组织缺损修复效果良好，均无感染和排斥反应。结论瑞诺口腔组织补片修复口腔黏膜缺损是一种安全有效的方法。     

转化生长因子-β_1/Smad信号通路在肾小球系膜细胞的表达及血管紧张素转化酶抑制剂对其影响

目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylationSmad2/3,P-Smad2/3)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制。方法采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:TGF-β1组(TGF-β15ng/mL处理);②Fos组(TGF-β15ng/mL+Fos1×10-4mol/L处理);③对照组(空白)。甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linkedi mmunosorbent assay,ELISA)法测定Ⅰ型胶原蛋白的变化,计算抑制率。结果各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.05)。磷酸化Smad2/3在对照组仅极微量表达,TGF-β1组在刺激30min后,荧光强度显著增强,且集中于细胞核。与TGF-β1组相比,Fos组磷酸化Smad2/3表达下降,细胞荧光强度较弱,差异有显著意义(P<0.05)。对照组Ⅰ型胶原蛋白仅少量基础性分泌。与对照组相比,TGF-β1组在各时间点Ⅰ型胶原蛋白分泌量显著上升,差异有显著意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Fos组Ⅰ型胶原蛋白在15min和6h的表达量比较,差异无显著意义(P>0.05);在12h和24h比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论人重组转化生长因子-β1能激活体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smads表达,并激活转化生长因子-β/Smads信号途径,该途径激活能致Ⅰ型胶原分泌增多,并能诱导肾小球系膜细胞增殖,其作用呈一定的时间依赖性关系。福辛普利能部分阻断转化生长因子-β/Smads信号传导通路在大鼠肾小球系膜细胞的激活,抑制Ⅰ型胶原分泌及肾小球系膜细胞增殖,其抑制作用呈一定的时间依赖性关系。     

少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤关节液IL-1β及软骨修复组织Ⅱ型胶原影响的实验研究

目的应用少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤进行干预,观察其对大鼠在体软骨损伤关节液中IL-1β水平及和修复组织中Ⅱ型胶原的影响。方法选用在相同条件下喂养的6⁸周清洁级SD大鼠,制作成关节软骨损伤动物模型,按照组内均衡一致原则随机编为3组,即少阳生骨方组实验组(S组)、盐酸氨基葡萄糖胶囊组对照组(A组)和生理盐水空白对照组(K组),每组9只。于造模完成后的第二天,开始灌胃药物,S组少阳生骨方灌胃,A组盐酸氨基葡萄糖胶囊灌胃,K组生理盐水灌胃。对比观察少阳生骨方及盐酸氨基葡萄糖胶囊对大鼠关节软骨损伤后不同时期(4周、8周、12周)关节液中IL-1β水平和修复组织中Ⅱ型胶原的影响。结果三组关节液中IL-1β水平检测,S组和A比较:第4、8、12周A组高于S组(P<0.05);第4、8、12周K组高于S组(P<0.05);第4、8、12周K组高于A组(P<0.05)。治疗前后自身比较:S组第8周、第12周均低于第4周(P<0.05);A组第8周、第12周均低于第4周(P<0.05);K组第4周>第8周>第12周(P<0.05)。组织学观察显示S、A组软骨缺损修复组织的数量及质量均优于K组,S组的修复效果强于A组。结论通过和解少阳的方法可显著降低关节液中导致软骨细胞损伤的炎性介质IL-1β水平,提高软骨损伤后修复组织中Ⅱ型胶原的表达,从而有助于软骨损伤的修复。