人T细胞白血病病毒Tax基因与宿主细胞的相互作用

人T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ(HTLV-Ⅰ)可导致成人T淋巴细胞白血病(ATL).临床多以外周血T淋巴细胞的恶性增殖为特征,并伴有T淋巴细胞的形态异常.HTLV-Ⅰ Tax基因编码的蛋白在T淋巴细胞癌变过程中起重要作用.通过病毒基因的构成,着重介绍Tax基因与宿主细胞多种因素的相互作用对肿瘤形成的影响.     

成人T细胞白血病/淋巴瘤外周血异形淋巴细胞超微结构特征

目的进一步了解中国人嗜人T细胞病毒Ⅰ型（HTLV－Ⅰ）相关性成人T细胞白血病／淋巴瘤（ATLL）外周血异形淋巴细胞超微结构特征。方法用透射电镜对最近发现的12例ATLL中4例急性型患者外周血异形淋巴细胞的超微结构进行了观察。结果主要特点为：细胞大小基本一致,与正常淋巴细胞大小相似,偶见较大的异形淋巴细胞。核为多形性,表现为切迹、凹陷、扭曲、折叠、脑回状、分叶或花瓣状。细胞器减少和发育不良,线粒体肿胀和变性。1例见类病毒颗粒。结论对ATLL细胞超微结构的认识有助于了解和探索ATLL的致病过程以及结构与功能的关系。     

急性白血病T细胞与免疫球蛋白受体基因重排的临床意义

目的：探讨急性白血病化疗效应差异及基因受体重排在急性非淋巴细胞白血病中序列交叉存在。方法：应用聚合酶链反应技术对免疫球蛋白（ＩｇＨ）及Ｔ细胞受体（ＴＣＲγ）基因重排者测定。结果：该方法敏感性达１０＾－５,完全缓解（ＣＲ）后１８０ｄ检测,阳性率仍５５．５％（２５／４５）,２０例ＡＮＬＬ中５例检测到ＩｇＨ受体基因重排,观察６０ｄ有复发。结论：ＩｇＨ、ＴＣＲγ基因重排是检测残留白血病的敏感指标,但在ＡＮＬＬ中有失真现象。化疗效应的定量评价,有助于制定个体化的治疗方案。     

髓系白血病患者T细胞受体基因重排的检测及其意义

目的 了解髓系白血病患者Ｔ细胞受体基因重排及临床意义。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）４１例和慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）８例患者Ｔ细胞受体γ链（ＴＣＲγ）基因重排。     

人T细胞白血病细胞株Jurkat的TCR基因重排

背景与目的:近年的一些体外实验研究发现,重组激活基因(recombi-nationactivatinggene)编码的RAG1与RAG2(recombinationactivatinggenes,RAGs)蛋白能够介导DNA链的转位(transposition)作用,因而,可能与淋巴系统肿瘤性疾病的发生有关,但迄今尚未有明确定论。我们在实验中发现,代表T细胞发育成熟阶段的人白血病细胞株Jurkat同时表达重组激活基因RAG1和RAG2,并且经适当诱导后有RAGs表达的变化。本研究旨在确证Jurkat细胞是否发生RAGs介导的T细胞受体(T-cellreceptor,TCR)基因重排。方法:采用巢式和半巢式PCR检测T细胞受体D!-J!之间的信号结合T细胞受体删除DNA环(signaljointT-cellreceptorexcisionDNAcircles,sjTRECs);连接介导的PCR(LM-PCR)法检测TCRβ链位点重排中间物-重组信号序列(recombinationsignalsequence,RSS)断点;RT-PCR法检测V(D)J重排第二阶段非同源末端连接(non-homologousendjoining,NHEJ)途径中的核心蛋白Ku70/Ku80及末端脱氧核苷酸转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)。结果:在Jurkat细胞DNA中检测到结合区具有多样性特征的TCRDβ2-Jβ2sjTRECs和RSS5′端和3′端断裂点,并检测到TdT、Ku70/Ku80的表达。结论:Jurkat细胞有TCR基因重排的发生。Jurkat细胞可能成为研究RAGs和TCR基因重排与T细胞淋巴瘤的一个潜在的细胞模型。     

宿主细胞microRNAs对潜伏于静息初始CD4+T细胞中HIV-1病毒的作用

microRNAs是参与靶基因转录后调控的一类非编码小RNA，它们可分别来源于宿主细胞RNA或病毒RNA。研究证实，病毒编码的microRNAs可靶向宿主细胞或病毒自身基因，调控其表达而实现免疫逃逸和相关致病作用；而宿主细胞编码的microRNAs在抗病毒感染过程存在防御作用，但亦有研究发现宿主细胞microRNAs在病毒感染复制中起促进作用，如miR-122和HCV感染。艾滋病患者的临床治疗是个世界难题。HIV-1病毒潜伏于静息性初始CD4＋T淋巴细胞是艾滋病患者接受临床治疗方案HAART最终失败的主要原因。其中，HIV-1的潜伏存在作用于病毒生命周期多个环节的多种因素的影响。本论文作者向我们展示了在基因转录后水平宿主细胞microRNAs在其中发挥的作用。     

树突状细胞体外高效诱导白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞生成

[目的]研究体外诱导产生的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及其抗白血病反应.[方法]应用mGM-CSF及mIL-4细胞因子从小鼠骨髓细胞扩增出成熟树突状细胞(DC),使其负载冻融法制备的白血病细胞相关抗原(TAA),通过观察DC诱导的白血病特异性CTL的免疫表型,MTT分析其对于L7212细胞的抑制率,利用ELISA评价IL-2和IL-4水平.[结果]骨髓单个核细胞经mGM-CSF、mIL-4的联合作用7天后光镜及扫描电镜下观察到大量成熟DC生成.经负载TAA的DC活化后T细胞中CD3 、CD8 、CD25 细胞明显增多.FCM显示CD3 、CD8 、CD25 T细胞显著增多,CD8 细胞多于CD4 细胞.活化后T细胞对L7212细胞有特异性杀伤活性,在效靶比为50:1培养72 h后杀伤率达90.1%±2.7%.DC与T细胞共培养上清中IL-2的分泌水平为4.656±0.62pg/ml,明显高于普通T细胞培养组的1.436±0.11pg/ml(P=0.011),IL-4水平则无明显变化(P＞0.05).[结论] mGM-CSF及mIL-4配伍诱导生成的DCs经L7212冻融抗原负载后可在体外高效诱导白血病特异性CTL生成.     

HSV-tk基因转染过程对小鼠脾脏T细胞功能的影响

目的 :观察 HSV- tk基因转染过程对小鼠脾脏 T细胞增生、细胞毒效应和诱导移植物抗宿主病 (GVHD)能力的影响 ,为建立 HSV- tk/GCV系统治疗小鼠 GVHD模型作准备。方法 :将HSV- tk基因转染小鼠脾脏 T细胞 ,以未转染 T细胞作对照 ,比较两者增生能力 ;51 Cr释放试验测定TK+ T细胞和 T细胞的细胞毒效应 ;1× 1 0 6 雄性供鼠骨髓单个核细胞分别与 1× 1 0 7TK+ T细胞和 1× 1 0 7T细胞移植半相合雌性 Fl受鼠 ,观察两者诱导 GVHD的功能。结果 :TK+ T细胞和 T细胞增生能力和细胞毒效应无明显差异 ,诱导急性 GVHD能力相似。结论 :HSV- tk基因转染对小鼠脾脏 T细胞功能无明显影响     

抗原冲击树突状细胞介导细胞毒性T淋巴细胞特异性抗白血病作用的体外研究

 目的　研究白血病来源树突状细胞体外诱导的有效方法;观察不同抗原诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的抗白血病效应。方法　分离白血病患者骨髓单个核细胞,经钙离子载体A23187诱导分化,将弱酸洗脱抗原、低渗抗原分别冲击树突状细胞,96 h后树突状细胞与T细胞共同培养,采用MTT法比较CTL细胞对白血病细胞的杀伤活性。结果　骨髓来源的单个核细胞经过100 ng／ml的GM-CSF、500 ng／ml钙离子载体A23187成功诱导为树突状细胞,倒置显微镜下具有树突状细胞的典型形态,流式细胞术测定其CD1a、CD83表达较诱导前明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。弱酸洗脱法获得抗原冲击树突状细胞致敏T细胞后杀伤白血病的能力最高,未负载抗原的树突状细胞致敏T细胞杀伤白血病细胞的能力最低,两者差异具有统计学意义（P＜0.01）。结论　白血病来源的骨髓单个核细胞经GM-CSF、钙离子载体A23187能够成功诱导为树突状细胞;弱酸洗脱后获得的抗原冲击树突状细胞致敏T细胞能够获得更强的杀伤白血病细胞的能力。     

急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

目的:研究急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞水平的变化及临床意义.方法: 采用流式细胞仪对60例急性白血病(AL)患者[急性髓细胞性白血病(AML)30例、急性淋巴细胞性白血病(ALL)30例]及40例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测.结果: 初诊AL组与正常对照组比较,CD3+ T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+ 比值及CD16+/56+ NK细胞百分比均明显降低( P<0.05) ;CD8+ T 淋巴细胞百分比与CD19+ B淋巴细胞百分比均明显升高(P均 <0.01).ALL组CD4+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+ 比值明显低于AML组( P<0.01).与对照组相比较,初诊AL患者外周血CD4+CD25+ T细胞和CD4+CD25high Treg 细胞均明显升高(P<0.01).结论: AL患者细胞免疫功能明显异常;与AML患者相比,ALL患者细胞免疫功能更为低下.CD4+CD25 high Treg细胞增多可能是AL患者免疫功能受抑的重要原因之一.淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价AL疗效及判断预后方面具有一定的临床价值.     

慢性淋巴细胞白血病外周血T细胞亚群及免疫球蛋白研究

 目的　分析慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者的免疫状态及其与疾病分期的关系。方法　应用流式细胞术（FCM）分析60例B-CLL患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，用免疫速率比浊法分析其中37例患者血清中IgG、IgA和IgM的变化，比较各Binet分期患者免疫功能的变化。结果　与正常对照组相比，60例B-CLL患者外周血中CD+3、CD+4和CD+8细胞比率均明显降低（P＜0.01），Binet B、C期组患者CD+4／CD+8比值也明显低于Binet A和正常对照组（P＜0.01）。37例B-CLL患者中有21例患者（56.8 %）出现有免疫球蛋白（Ig）减低的情况。Binet C期组Ig减低发生率高于Binet A和B期（P＜0.05），Binet C期组IgG、IgA、IgM的平均水平明显低于Binet A和B期组（P＜0.05）。结论　CLL患者存在细胞免疫和体液免疫功能的低下，与CLL病程密切相关。检测CLL患者外周血T细胞亚群及Ig水平的变化，对了解CLL免疫功能状态，从而判断病情具有重要作用。     

成人T细胞白血病／淋巴瘤外周血异形淋巴细胞超微结构特征

目的 进一步了解中国人嗜人Ｔ细胞病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）相关性成人Ｔ细胞白血病／淋巴瘤（ＡＴＬＬ）外周血异形淋巴细胞超微结构特征。方法 用透射电镜对最近发现的１２例ＡＴＬＬ中４例急笥型患者外周血异形淋巴细胞的超微结构进行了观察,结果 主要特点为：细胞大小基本一致,与正常淋巴细胞大小相似,偶见较大的异形淋巴细胞,核为多形性,表现为切迹,凹陷,扭曲,折叠,脑回状,分叶或花瓣状,细胞器减少和发育不良,线     

抑制性杀伤细胞受体在NK细胞和T细胞上的表达及其与急性移植物抗宿主病的关系

 目的 研究异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者移植前后外周血NK及T细胞上4种抑制性杀伤细胞受体（CD158a、CD158b、NKB1和CD94／NKG2A）的表达及其与急性移植物抗宿主病（aGVHD）的关系。方法 采用流式细胞术检测NK及T细胞上抑制性杀伤细胞受体的表达。结果 NK细胞上CD158a和CD158b的表达于移植后3～4个月、NKB1和CD94／NKG2A的表达于移植后2个月恢复移植前水平。移植前后CD158a和NKB1在CD+3 T细胞上持续低水平表达;移植前CD158b和CD94／NKG2A在CD+3 T细胞上的表达水平较高,且主要表达于CD+8 T细胞上,移植后其在CD+8 T细胞上的表达增加。CD+8 T细胞上CD158b的表达在发生Ⅰ度aGVHD时显著增高,与无aGVHD组及Ⅱ~Ⅳ度aGVHD组相比,差异均有统计学意义（P均＜0.05）;在发生Ⅱ~Ⅳ度aGVHD时增高不明显,与无aGVHD组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 CD158b在CD+8 T细胞上高表达可能有助于降低T细胞同种反应性,减轻aGVHD的程度。     

伴T315I突变的Ph＋急性淋巴细胞白血病一例

患者 女,64岁.2013年2月19日因反复发热半月余,尿频、尿急10d入院.行骨髓穿刺检查分类：增生明显活跃,原始及幼稚淋巴细胞占0.815;免疫组织化学提示原始及幼稚淋巴细胞比例增高;流式细胞术分析异常细胞表达CD34、HLA-DR、CD10、CD19、CD33、CD38、CD123、TdT、cCD79a、CD22,弱表达CD20,不表达MPO、cIgM、sTgM;染色体核型为46,XX,t（9;22）（q34;q11）[10];MLL基因重排阴性;荧光原位杂交（FISH）检测bcr-abl融合基因阳性率90.4％,定量检测bcr-abl p 190121.52％;FLT-ITD及TKD突变阴性.