去骨瓣减压术对大鼠局灶性脑缺血后脑水肿、血脑屏障、脑血流变化的影响

目的:观察去骨瓣减压术对局灶性脑缺血大鼠脑水肿、血脑屏障(BBB)及脑血流(CBF)的影响,探讨该手术对缺血性脑损害的保护机制。方法:改良Koizumi′s法制作脑缺血大鼠动物模型,脑缺血后6h行去骨瓣减压术,分别在术后3和7d观察脑水肿和血脑屏障的变化,另持续观察缺血1h 去骨瓣减压2h的CBF变化。结果:去骨瓣减压术后半暗区CBF增加更加持久和有效,在术后第3天时BBB破坏范围明显缩小,术后第7天时脑水含量明显降低。结论:去骨瓣减压术对局灶性脑缺血的保护作用可能与增加半暗区CBF、改善BBB破坏和减轻脑水肿有关。     

去骨瓣减压术对大鼠局灶性脑缺血保护作用的有效时间窗

目的 :探讨去骨瓣减压术对大鼠局灶性脑缺血保护作用的时间窗。方法 :改良Koizumi法制作脑缺血动物模型 ,然后在不同时间点行去骨瓣减压术 ,观察 7d内体重、神经功能和生存率的变化 ,第 7天时取脑行氯化 2 ,3 ,5 三苯基四氮唑 (TTC)染色 ,计算梗死灶面积和体积。结果 :脑缺血后 6、12、2 4h行去骨瓣减压术可显著缩小梗死体积 ,6、12h减压可显著改善神经功能 ,其中以 6h减压的效果最好。结论 :去骨瓣减压术对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用 ,其有效时间窗为脑缺血后 2 4h以内     

脑挫裂伤并发中央型脑疝的显微手术治疗

目的 探讨双侧与单侧去骨瓣减压术治疗脑挫裂伤并发中央型脑疝的疗效。方法 回顾性分析2018年1月至2019年6月显微手术治疗的84例脑挫裂伤并发中央型脑疝的临床资料。42例行单侧去骨瓣减压术（单侧组），42例行双侧去骨瓣减压术（双侧组）。结果 术后4 h、12 h、24 h、72 h、7 d，两组颅内压呈逐步降低趋势（P<0.05），而且双侧组均明显低于单侧组（P<0.05）。术后第14 d、1个月、3个月及6个月，两组NIHSS评分均明显降低（P<0.05），而且双侧组均明显低于单侧组（P<0.05）。双侧组并发症总发生率（21.43%，9/42）明显低于单侧组（35.71%，16/42；P<0.05）。伤后6个月，双侧组预后良好率（61.90%，26/42；GOS评分4~5分）明显高于单侧组（42.86%，18/42；P<0.05）。结论 对于脑挫裂伤并发中央型脑疝，去骨瓣减压术具有一定效果，双侧去骨瓣减压术较单侧效果更好。     

不同时机开颅去骨瓣减压治疗恶性大脑中动脉区梗死的实验研究

目的比较高血压大鼠一侧大脑中动脉主干闭塞后不同时间点进行开颅去骨瓣减压术的疗效。方法将168只易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)随机分为1、4、12、24h手术组,每组各32只,分别于MCA闭塞后1、4、12、24h开颅手术。另40只作为假手术对照组。使用线栓法复制MCA梗死模型。比较各组大鼠病死率、梗塞灶体积和神经功能评分,以评估不同时间点手术的疗效。结果1、4、12和24h手术组大鼠术后病死率分别为15.6%、12.5%、15.6%和28.1%,均低于假手术对照组(52.5%)(P均小于0.05)。1、4和12h手术组术后1、2周神经功能评分均低于同期对照组和24h手术组(P<0.05),4、8周各手术组神经功能评分均低于同期对照组(P<0.05)。1、4、12h手术组术后1、2周梗塞灶体积小于同期对照组和24h手术组(P<0.05),1、4、12h手术组4、8周的梗塞灶体积小于同期对照组,24小时手术组术后第1、2、8周梗塞灶体积小于对照组(P<0.05),1h手术组4周和12h组4、8周的梗塞灶体积小于24h手术组(P<0.05)。结论大鼠大脑中动脉主干闭塞后1～24h内开颅去骨瓣减压均可降低病死率。12h内手术者术后神经功能恢复较好。     

超早期去骨瓣减压术对大面积脑梗死老年患者神经功能及血小板活化能力水平的影响

目的探讨超早期去骨瓣减压术对大面积脑梗死老年患者神经功能及血小板活化能力水平的影响。方法将郑州中康医院2018年6月至2019年6月收治的123例大面积脑梗死老年患者按照手术时间分组,对照组61例发病24~48 h内行去骨瓣减压术,观察组62例超早期(发病24 h内)行去骨瓣减压术。观察两组患者的疗效、神经功能、血小板活化能力水平及手术并发症。结果观察组疗效优于对照组(P<0.05);观察组术后1个月、6个月末用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分较对照组低(P<0.05);观察组术后1周末血小板淋巴细胞聚集体(PlyA)、血小板-单核细胞聚集体(PMA)、血小板-白细胞聚集体(PLA)及血小板中性粒细胞聚集体(PNA)的百分比水平较对照组低(P<0.05);观察组手术并发症发生率(6%)较对照组(20%)低(P<0.05)。结论超早期去骨瓣减压术可降低大面积脑梗死老年患者血小板活化水平,改善神经功能,提高治疗效果并减少手术并发症。     

一期双侧去骨瓣减压术对重型颅脑损伤颅内压及预后的影响

目的 探讨一期双侧去骨瓣减压术对重型颅脑损伤（STBI）颅内压及预后的影响。方法 回顾性分析2017年1月~2018年12月去骨瓣减压术治疗的92例STBI的临床资料。44例分期双侧去骨瓣减压术,48例一期双侧去骨瓣减压术。结果 与术前比较,两组术后1、2、3 d颅内压均明显降低（P<0.05）,而且观察组明显低于对照组（P<0.05）。观察组急性脑膨出、切口疝、迟发性颅内血肿、脑脊液漏等并发症总发生率（18.8%,9/48）明显低于对照组（47.7%,21/44;P<0.05）。出院后随访3个月,观察组观察组预后良好率（70.83%,34/48;GOS评分4~5分）明显高于对照组（43.18%,19/44;P<0.05）。结论 对于病情严重的STBI,与分期双侧去骨瓣减压术相比,一期双侧去骨瓣减压术有助于控制颅内压,减少并发症,改善病人的预后。     

香港远志提取物对局灶性脑缺血大鼠脑保护作用与作用机制

目的探讨香港远志提取物对局灶性脑缺血大鼠脑保护作用与机制。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,随机分4组:假手术组、模型组及治疗A、B组。治疗组按设定方式给药,假手术组、模型组给1%吐温溶液。观察术后24h神经功能缺损评分(NBDS)、脑梗死体积(IV)、血清神经元烯醇化酶(NSE)及神经元凋亡、Bcl-2、Bax表达。结果与假手术组比较,模型组和治疗组NBDS、IV、NSE、神经元凋亡及Bcl-2、Bax显著增高、Bcl-2/Bax显著降低(P<0.05)。与模型组比较,治疗组NBDS、IV、NSE及神经元凋亡、Bax显著降低、Bcl-2、Bcl-2/Bax显著增高(P<0.05),治疗组间数据亦有显著差异(P<0.05)。结论香港远志提取物预处理,对局灶性脑缺血大鼠脑神经有保护作用,机制可能是促进Bcl-2、抑制Bax表达,上调Bcl-2/Bax比值,阻止神经元凋亡。     

润坦注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经元凋亡的影响

目的研究润坦对局灶性脑缺血再灌注的神经保护效应.方法制备线栓法大脑中动脉闭塞再灌注模型,干预组每天给予润坦3 mg/kg,对照组给予等量生理盐水,每日对大鼠神经功能缺损进行评分,于再灌注12 h、24 h、48 h和5 d处死动物,切片作TUNEL原位凋亡检测.结果润坦可以显著改善术后第2 d大鼠的神经功能缺损(P＜0.05),降低致死率,减少再灌注24 h以后的细胞凋亡数目(P＜0.05).结论润坦可以抑制大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡,对急性期脑梗死可能有神经保护效应.     

缺血后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及其最佳时间窗的探讨

目的探讨缺血后处理(IP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)神经保护作用的最佳时间窗。方法 80只雄性SD大鼠,随机分为5组(假手术组、对照组、IP 15s组、IP 30s组和IP 1min组)。假手术组和对照组行单纯I/R;IP 15s组、IP 30s组和IP 1min组,反复3次缺血再灌注。除假手术组外的大鼠均采用线栓法闭塞大鼠大脑中动脉(MACO)建立脑缺血SD大鼠模型。所有大鼠行神经功能障碍评分(NDS),并应用组织原位标记凋亡细胞检测、免疫组织化学等技术观察IP后海马CA1区细胞凋亡及肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的变化。结果再灌注24 h后,IP各组NDS明显低于对照组(P<0.05),其中IP 15s组、IP 30s组NDS低于IP 1min组(P<0.05)。对照组海马CA1区TNF-α、凋亡细胞表达量明显增加,IP 15s组、IP 30s组海马CA1区TNF-α、凋亡细胞的表达量较IP 1min组明显下降(P<0.05)。结论 IP可改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能、减少海马CA1区炎性因子TNF-α及细胞凋亡的表达。大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的最佳时间窗为15s、30s。     

亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑皮质神经元凋亡及存活素、脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察亚低温干预对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑皮质神经元凋亡及存活累(Survivin)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨Survivin、BDNF在亚低温脑保护机制中的作用。方法采用线栓法制备成年雄性SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)局灶性脑缺血再灌注改良模型,将90只大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组,缺血组分别于缺血3h再灌注3h、6h、12h、24h、48h、72h、7d处死,亚低温缺血组于缺血后10min实施全身亚低温持续3h。进行TUNEL染色及免疫组化染色,检测梗死灶周围皮质神经元凋亡数量和Sur-vivin、BDNF的表达水平。结果 (1)亚低温缺血组和常温缺血组于再灌注6h皮质区均出现TUNEL染色阳性细胞,72h达高峰,随后逐渐减少,两组内相邻时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05);在相同时间点亚低温缺血组凋亡细胞数明显少于常温缺血组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)亚低温缺血组于再灌注3hSurvivin、BDNF表达有所增加,BDNF于24h达高峰,Survivin于48h达高峰,随后表达逐渐降低,但7d时仍高于假手术组,常温缺血组表达趋势与之相似,两组各时间点Survivin、BDNF表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);除再灌注3h Survivin表达在亚低温缺血组与常温缺血组间无明显差异外,其余各时间点亚低温缺血组Sur-vivin、BDNF表达均高于常温缺血组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温干预可抑制梗死灶周围脑皮质神经细胞凋亡,促进存活素及脑源性神经营养因子的表达,发挥脑保护作用。     

Apoptosis occurs in the penumbra zone during short-duration focal ischemia in the rat.

To investigate the appearance of apoptosis in short-duration focal ischemia, the authors induced left middle cerebral artery (MCA) occlusion in male rats by insertion of an intraluminal suture. The total number of apoptotic cells was determined by hematoxylin-eosin staining and TUNEL labeling and confirmed by gel electrophoresis. The data indicate that the total number of apoptotic cells increased with ischemia duration (P = 0.0006), with most apoptotic cells located in the striatum of the ischemic hemisphere. As the duration of ischemia lengthened, necrosis became more prevalent and apoptosis receded to the periphery of the infarct. Using iodo[14C]-antipyrine to correlate the distribution of apoptosis to regional CBF (rCBF), the authors found that rCBF in the ischemic dorsolateral striatum was compatible with penumbra flow and significantly lower than the ventromedial striatum and frontoparietal cortex. This difference disappeared after 45 minutes of reperfusion. The authors conclude that focal ischemia of short duration results in changes compatible with apoptosis in regions of low rCBF, and this can occur without necrosis. This model is relevant to transient ischemic attack in the human and may suggest that, in addition to being a harbinger of stroke, transient ischemic attacks may cause histopathologic changes not yet clinically detectable.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞的凋亡

本实验用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型64只,分脑缺血90min再灌注0.5、6h、1、3、14d组,放线菌酮处理组及对照组。观察脑缺血后再灌注不同时间凋亡细胞的发生情况及其与梗塞体积、神经功能缺损积分间的关系,以及蛋白质合成抑制刺的干预作用;细胞凋亡通过Tunel染色及电镜检测。结果发现脑缺血90min再灌注0.5h开始出现凋亡细胞,24h达高峰,持续2周;梗塞灶的形成较凋亡细胞出现晚,但24h同时达到高峰,随着时间延长,凋亡细胞数减少,梗塞体积无明显变化;蛋白质合成抑制剂放线菌酮可以减少缺血后梗塞体积及凋亡细胞。     

bcl-xl over-expression in transgenic mice reduces cerebral ischemia/reperfusion injury*☆

BACKGROUND： Basal cell lymphoma-extra large （bcl-xl） can inhibit neuronal apoptosis by stabilizing the mitochondrial membrane and suppressing cytochrome C release into the cytoplasm. OBJECTIVE： This study aimed to further investigate the cascade reaction pathway of cellular apoptosis. We established an ischemia/repcrfusion model by middle cerebral artery occlusion （MCAO） in transgenic and wild-type mice, and observed changes in the number and distribution of apoptotic neural cells, differences in cerebral infarct volume, in neurological function score, and in cytochrome C expression in the ischemic cerebral cortex, at different time points, DESIGN AND SETTING： The present gene engineering and cell biology experiment was performed at the Laboratory of Biology, Hubei Academy of Agricultural Sciences and at the Laboratory of Immunology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology. MATERIALS： Male bcl-xl over-expression Kunming mice aged 8 weeks and age-matched male wild-type mice were used for this study. Terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling （TUNEL） kits were purchased from Boliman, France. Cytochrome C antibody and Bcl-x immunohistochemical kit were purchased from PharMingen, USA and Santa Cruz Biotechnology, USA, respectively. METHODS： Following MCAO and reperfusion, apoptosis in the ischemic cerebral cortex was detected by the TUNEL assay. Prior to MCAO and 3 hours after reperfusion, the Bcl-xl protein level in the ischemic cerebral cortex was measured by immunohistochemistry. At 3, 6, 12 and 24 hours after reperfusion, the level of cytochrome C in the ischemic cerebral cortex was examined by western blot analysis. Subsequent to MCAO, cerebral infarct volume measurement and neurological examination were performed. MAIN OUTCOME MEASURES： Neural cell apoptosis and cytochrome C expression in the ischemic cerebral cortex; cerebral infarct volume and neurological function score. RESULTS： Twenty-four hours after reperfusion, cerebral inf     

bcl-xl over-expression in transgenic mice reduces cerebral ischemia/reperfusion injury

BACKGROUND:Basal cell lymphoma-extra large (bcl-xl) can inhibit neuronal apoptosis by stabilizing the mitochondrial membrane and suppressing cytochrome C release into the cytoplasm. OBJECTIVE: This study aimed to further investigate the cascade reaction pathway of cellular apoptosis. We established an ischemia/reperfusion model by middle cerebral artery occlusion (MCAO) in transgenic and wild-type mice,and observed changes in the number and distribution of apoptotic neural cells,differences in cerebral infa...     

缺血预处理后Fas蛋白表达与迟发性神经元凋亡的关系初步探讨

目的动态观察缺血预处理后大鼠大脑皮层和海马CA1区神经元凋亡与Fas蛋白表达变化情况,初步探讨缺血预处理后Fas蛋白表达与迟发性神经元凋亡的关系。方法四血管阻断法复制全脑缺血模型,动物随机分为非缺血对照组、预处理对照组、缺血预处理组和缺血组。采用尼氏和TUNEL染色法观察皮层及海马CA1区神经元存活数和凋亡细胞数,免疫组化方法检测Fas蛋白在缺血预处理后表达变化情况。结果缺血组缺血6h在皮质及海马CA1区Fas阳性表达细胞计数升高,12h达高峰;缺血预处理组缺血12h阳性细胞计数升高,24h达高峰。缺血组缺血6h出现凋亡细胞,48h凋亡细胞数达到高峰;缺血预处理组凋亡细胞数较缺血组明显减少。缺血组缺血7d神经元数明显减少,12周时神经元大量减少;缺血预处理组缺血7d时神经元数无明显变化,但12周时神经元同样大量减少。结论全脑缺血可能通过诱导Fas蛋白的表达增多,启动细胞凋亡,导致缺血后神经元凋亡的发生;缺血预处理虽可延缓缺血后神经元的凋亡,但无法提供真正的长时期的神经元保护作用,其有限的保护作用可能是通过延缓Fas蛋白的表达而减缓了神经元凋亡的进程。     

Inhibition of Na(+)-K(+)-Cl(-) cotransporter during focal cerebral ischemia decreases edema and neuronal damage

Our previous study demonstrated that pharmacological inhibition of the Na(+)-K(+)-Cl(-) cotransporter isoform 1 (NKCC1) during ischemia and reperfusion attenuated neuronal damage and edema. In this study, we further investigated whether NKCC1 activity contributes to ischemic damage during either ischemia or reperfusion. Immunoblotting revealed that expression of NKCC1 protein was increased following 2-h focal ischemia in cerebral cortex. A sustained up-regulation of NKCC1 in cortex was detected at 4, 8, 12, and 24 h of reperfusion. An increase in the phosphorylated NKCC1 (NKCC1-p) was found at 4 and 8 h of reperfusion. In striatum, a significant increase in NKCC1 expression occurred between 4 and 24 h of reperfusion and no elevation of NKCC1-p signal was observed. Artificial cerebral spinal fluid (aCSF) or 100 microM bumetanide in aCSF were continuously microdialyzed into left cortices either 1 h prior to ischemia plus 2-h ischemia, or only during 24-h reperfusion. Infarction volume was significantly decreased in the pre-ischemic bumetanide-treated group (P<0.05) but not in the post-ischemic treatment group (P>0.05). In addition, pre-ischemic bumetanide treatment reduced the ipsilateral water content increase by 70% (P<0.05). Inhibition of NKCC1 did not attenuate poly (ADP-ribose) polymerase cleavage or the number of TUNEL-labeled apoptotic cells in ischemic brains. These results suggest that inhibition of NKCC1 attenuates cytotoxic edema and necrotic neuronal death during focal ischemia. Activation of NKCC1 activity plays a role in the early stage of ischemic damage.     

小鼠局灶性脑缺血再灌注后IL-33及其受体的时程表达

目的检测白细胞介素-33(IL-33)及其膜受体ST2和可溶型受体sST2在小鼠局灶性脑缺血再灌注后不同时程的表达特征。方法利用线栓法闭塞大脑中动脉(MCAO)30 min诱导建立小鼠可逆性局灶性脑缺血再灌注损伤模型,通过半定量RT-PCR检测脑缺血再灌注后6 h、24 h和3 d缺血脑组织中IL-33及其膜受体ST2、凋亡相关蛋白Caspase-8和Caspase-3的mRNA表达水平,并通过免疫组织化学染色观察了IL-33在不同缺血脑区(运动皮质、感觉皮质、海马和纹状体)的时程表达情况;ELISA法检测了小鼠MCAO模型再灌注后不同时间点血清中IL-33及其可溶型受体sST2的表达水平。结果 IL-33 mRNA在缺血后6 h和3 d表达减少,但在24 h无明显改变;凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-8在缺血后3个时间点均显著增高,且Caspase-3在6 h和3 d的mRNA表达水平较24 h高;ST2 mRNA在缺血后6 h无减少,但在24 h和3 d有明显减少;除了MCAO 24 h组运动皮质和纹状体阳性染色增加外,IL-33阳性细胞数在缺血后不同时程各脑区均有不同程度减少;缺血后外周血中IL-33的表达量无明显升高或降低,而sST2的表达水平在缺血后6 h即已显著升高。结论脑缺血再灌注后IL-33/ST2信号通路被下调,其与sST2表达增多的效应发挥和神经元凋亡有关。