牙龈卟啉单胞菌及其牙龈蛋白酶K对青少年牙龈健康的影响

目的：分析牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）及牙龈蛋白酶K（Kgp）对青少年牙龈健康的影响。方法???收集12~17岁青少年牙龈正常组（50例）、牙龈炎症指数Ⅰ级组（25例）和牙龈炎症指数Ⅱ级组（32例）的3组龈沟液标本,应用16S?rDNA?PCR技术检测各样本中的P. gingivalis及Kgp。3组P. gingivalis和Kgp阳性检出率的比较采用χ2检验;P. gingivalis和Kgp的相对含量与牙龈炎症指数之间的关系采用Spearman相关分析。结果???P. gingivalis在牙龈炎症指数Ⅰ级组的检出率大于牙龈正常组,牙龈炎症指数Ⅱ级组的检出率大于牙龈炎症指数Ⅰ级组和牙龈正常组,牙龈炎症指数Ⅰ级组、Ⅱ级组与牙龈正常组间有明显差异（P<0.01）,牙龈炎症指数Ⅰ级组与Ⅱ级组间差异具有统计学意义（P<0.05）。Kgp在牙龈炎症指数Ⅰ级组的检出率大于牙龈正常组,牙龈炎症指数Ⅱ级组的检出率大于牙龈炎症指数Ⅰ级组和牙龈正常组,牙龈炎症指数Ⅰ级组与牙龈正常组间差异具有统计学意义（P<0.05）,牙龈炎症指数Ⅱ级组与牙龈正常组间有明显差异（P<0.01）。P. gingivalis和Kgp的检出率随着牙龈炎症指数的增加而升高。结论???P. gingivalis和Kgp与青少年牙龈健康密切相关。     

蓝萼甲素对牙龈卟啉单胞菌体外抑菌活性研究

目的:探讨蓝萼甲素(GLA)对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的体外抑菌活性.方法:采用肉汤微量稀释法检测GLA对P.gingivalis的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC);采用结晶紫染色法及MTT法检测GLA对P.gingivalis生物膜的形成及其代谢活性的影响.结果:GLA对P.gingi...     

戈登链球菌对牙龈卟啉单胞菌生物膜形成的影响

目的 观察戈登链球菌（S.gordonii）对牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）生物膜超微结构及生物膜中牙龈卟啉单胞菌数量的影响。方法 分别形成P. gingivalis单菌种生物膜和P. gingivalis－S.gordonii混合生物膜,利用扫描电镜观察其超微结构,定量PCR法对生物膜中P. gingivalis数量进行定量分析。采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果 P. gingivalis生长72 h,与单菌种生物膜相比,P. gingivalis-S.gordonii混合生物膜形成量明显增多;而且混合生物膜的超微结构更规则、有序、多孔隙。在生物膜形成24、48、72 h后,混合生物膜中P. gingivalis的数量分别是单菌种生物膜中P. gingivalis数量的5.4、3.8和4.4倍。结论 早期定植菌S.gordonii的存在,使P. gingivalis更容易定植、形成生物膜。     

牙龈卟啉单胞菌的研究进展

牙龈卟啉单胞菌( Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)是牙周感染最重要的致病菌,与慢性牙周炎的发生发展密切相关。其致病性归因于一系列毒力因子如菌毛、荚膜、脂多糖、牙龈蛋白酶等。相关毒力因子的致病机制引起了国内外学者的广泛关注和重视。本文就牙龈卟啉单胞菌表面结构菌毛、荚膜及菌体分泌脂多糖、牙龈蛋白酶等重要致病因子的致病机制研究进展做一综述,以期为牙周炎的防治提供新的靶点和思路。     

牙龈卟啉单胞菌PG1055基因在临床菌株中的表达

目的应用基因芯片技术检测PG1055基因在不同人群的牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)中分布,探讨这些基因与牙周临床指数之间的关系。方法取龈下菌斑进行细菌分离培养,以临床采集样本提取的DNA为探针,以抑制消减杂交技术获得P.gingivalisW83的特异基因片段PG1055为目标序列,采用Cy5荧光标记目标序列。应用基因芯片技术检测PG1055基因在牙周病患者及健康人群的牙龈卟啉单胞菌中的分布。结果PG1055基因在牙周病患者及健康人群中的检出率有统计学差异,并且与牙周临床指数相关。结论PG1055基因与P.gingivalis的致病性有关。     

青春期龈炎龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌的牙龈蛋白酶K的表达

目的:检测并比较青春期龈炎的牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中牙龈蛋白酶K(Kgp)的表达强度,揭示Kgp与青春期龈炎之间可能存在的致病关系。方法:受试对象为14～17岁青春期龈炎患者36例,检测并记录受检者的各牙周指数GI、SBI和PD测值,取龈下菌斑进行P.gin-givalis的分离培养,16SrRNAPCR法鉴定。将P.gingivalis临床分离株于对数生长期末提取分泌蛋白和菌体蛋白,用抗KgpN-末端IgG亚基的单克隆抗体进行Westernblot检测,采用SPSS11.0软件包,秩相关检验分析Kgp的表达强度与各牙周指数之间的相关关系。结果:青春期龈炎的P.gingivalis临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中,KgpN-末端IgG亚基的表达强度与各牙周指数数值的高低有正相关关系,统计学上有显著性差异(P<0.01)。结论:Kgp对青春期龈炎有一定的致病作用。     

牙龈卟啉单胞菌上调钙结合蛋白1促进牙龈上皮细胞增殖

目的 探究钙结合蛋白1在牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)影响牙龈上皮细胞增殖和凋亡中的作用.方法 P.gingivalis感染CA9-22细胞,在感染24 h后,采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫印迹法和免疫荧光法检测钙结合蛋白1(CALB1)的表达.通过RNA干扰法抑制CALB1表达,BrdU分析检测细胞增...     

牙龈卟啉单胞菌的牙龈蛋白酶K活性与青春期龈炎的临床相关性

目的：检测并比较青春期龈炎患者的龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）临床分离株的分泌蛋白和菌体蛋白中牙龈蛋白酶K（Kgp）的活性,探讨Kgp在青春期龈炎中的临床意义。方法：受试对象为36例14～17岁青春期龈炎患者,检测并记录受检者的各牙周临床指标GI、SBI、PD的测值,取龈下菌斑进行P.gingivalis的分离培养,16S rRNA聚合酶链反应（PCR）法鉴定。将P.gingivalis临床分离株复苏,在对数生长期末提取分泌蛋白和菌体蛋白,用N-p-硝基苯胺乙酸盐分析Kgp的氨基酸溶解活性。采用SPSS11.0软件包,分泌蛋白与菌体蛋白的Kgp活性比较用t检验;Kgp活性与各牙周临床指标之间的相关关系用秩相关检验分析,P〈0.05具有显著性差异。结果：青春期龈炎的P.gingivalis临床分离株的分泌蛋白中Kgp的活性高于菌体蛋白（P〈0.01）,Kgp的活性与GI、SBI、PD之间有正相关关系,统计学上有显著性差异（P〈0.05）。结论：Kgp酶活性的高低与青春期龈炎的严重程度有关。     

牙龈卟啉单胞菌临床菌株毒力相关性质分析

目的:以模式菌株作为对照,对来自中国人口腔牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, P. gingivalis)临床菌株进行多种致病性质的分析,对致病性质与其毒力高低之间的关系进行初步探讨。方法:在前期对临床菌株毒力性质分析的基础上,检测和比较各菌株黏附宿主细胞、牙龈素活性以及抵抗宿主免疫吞噬等致病性质。采用SAS 8.02软件包对数据进行统计学分析。结果:P. gingivalis低毒模式菌株表现出较高的黏附红细胞及较弱的抵抗宿主血清杀伤的能力,高毒模式菌株表现出较弱的黏附红细胞及较强的抵抗血清杀伤的能力;但临床菌株的表现却与模式菌株相反。另外,P. gingivalis菌株牙龈素活性与毒力性质间无明显关系。结论:P. gingivalis毒力性质的多样性与其致病性质之间的关系不明确。     

血红素浓度对双菌生物膜中牙龈卟啉单胞菌致病潜力的影响

目的:研究血红素浓度对白色念珠菌(C.albicans)-牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)双菌生物膜中P.gingivalis致病潜力的影响.方法:在0.1μg/mL(低)和5μg/mL(高)血红素培养条件下构建P.gingivalis-C.albicans双菌生物膜以及P.gingi-valis单菌生物膜,...     

牙龈卟啉单胞菌对牙龈上皮细胞焦点黏附成分paxillin和FAK的作用

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)对牙周组织的破坏机制,探讨菌毛的致病作用.方法:应用Western blot法检测P.gingivalis ATCC 33277及其fimA缺陷突变株对Hela细胞及永生化人牙龈上皮细胞 (immortalized human gingival epithelial cells, IHGE细胞) 的焦点黏附成分——焦点黏附蛋白paxillin和焦点黏附激酶 (focal adhesion kinase,FAK) 蛋白表达的影响.结果:P.gingivalis ATCC 33277野生株和fimA缺陷突变株能够使HeLa细胞和IHGE细胞的paxillin和FAK发生降解,fimA缺陷突变株对paxillin和FAK的降解能力较野生株显著减弱.在IHGE细胞中,paxillin和FAK的降解呈时间依赖性和MOI依赖性.结论:菌毛介导的P.gingivalis的黏附和侵入可能对焦点黏附成分的降解起促进作用,IHGE细胞较Hela细胞更适用于牙周致病菌的研究.     

牙龈卟啉单胞菌诱导的耐受对小鼠牙槽骨吸收的影响

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)诱导的耐受对小鼠骨吸收相关因子白细胞介素-1β(IL-1β)、骨保护素(OPG)/NF-κB受体激活蛋白配体(RANKL)表达水平,以及牙槽骨吸收的影响。方法:采用1×10~9CFU P.gingivalis口内涂布给菌5 d,磷酸盐缓冲液(PBS)洗脱后,再次口内涂布P.gingivalis给菌2 d,构建Balb/c小鼠牙周组织耐受模型。10 d后收集新鲜牙龈组织,采用western bolt检测牙龈组织中IL-1β、OPG和RANKL表达水平的变化。6周后,收集上颌骨,采用亚甲基蓝染色法检测牙槽骨吸收水平的改变。结果:耐受组小鼠牙龈组织中IL-1β表达水平较非耐受组降低,OPG/RANKL比值较非耐受组升高。亚甲基蓝染色结果显示,耐受组小鼠釉牙骨质界至牙槽嵴顶(ABC-CEJ)的距离小于非耐受组(P<0.01),说明耐受组小鼠牙槽骨吸收较非耐受组降低。结论:P.gingivalis诱导小鼠牙周组织耐受后,小鼠牙龈组织中骨吸收相关因子IL-1β分泌降低,OPG/RANKL比值升高,抑制了牙槽骨吸收。     

黏性放线菌和牙龈卟啉单胞菌间共聚对黏性放线菌黏附于S-HA的影响

目的:研究黏性放线菌(A.viscosus)和牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)间共聚对A.viscosus黏附于唾液包被的羟基磷灰石(S-HA)的影响.方法:将0.5mL 5×108CFU/mL A.viscosus分别与0.5mL 1×109、3×109、5×109CFU/mL的P.gingivalis菌液混合,室温旋转,SEM观察P.gingivalis与A.viscosus间的共聚;将不同浓度的P.gingivalis和用放射性核素标记的A.viscosus混合,室温旋转1.5h,荧光闪烁记数法检测A.viscosus对S-HA的黏附量,以单菌种的A.viscosus作为对照,设定其黏附量为100%.采用SPSS10.07软件包对数据进行单因素方差分析,比较不同浓度P.gingivalis对A.viscosus黏附的影响.结果:1个A.viscosus的细胞表面可黏附多个P.gingivalis.P.gingivalis浓度较小时,A.viscosus对S-HA黏附量相对于对照组略增加;随P:gingivalis浓度增加,A.viscosus黏附量显著下降(P＜0.05).结论:A.viscosus和P.gingivalis可发生细菌之间的共集.这种共集可影响A.viscosus对S-HA的黏附.     

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激中性粒细胞产生基质金属蛋白酶8和9的比较

目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）刺激下人外周血中性粒细胞（PMNs）产生基质金属蛋白酶8、9（MMP-8、MMP-9）的差异。方法采用密度梯度离心分离法分离纯化培养PMNs,P.gingivalis ATCC33277（ⅠfimA）、WCSP 115（ⅡfimA）、WCSP 1.5（ⅢfimA）、W83（ⅣfimA）、WCSP 559（ⅣfimA）菌悬液与新鲜分离的PMNs悬液共孵育2 h,于5 min、30 min、1 h、2 h收集上清液,用ELISA方法检测MMP-8、MMP-9的表达。结果不同fimA基因型P.gingivalis刺激PMNs产生MMP-8、MMP-9的能力都显著高于未受刺激组;ⅡfimA、ⅣfimA（W83）型P.gingivalis刺激PMNs分泌MMP-8在速度及量上均高于ⅢfimA、ⅣfimA（WCSP 559）型P.gingivalis;ⅠfimA、ⅡfimA、ⅣfimA（W83）型P.gingivalis刺激PMNs分泌MMP-9能力高于ⅢfimA、ⅣfimA（WCSP 559）型P.gingivalis。结论ⅡfimA、ⅣfimA型P.gingivalis的致病能力相对较强,提示P.gingivalis的毒力和致病性与fimA基因型存在相关性。     

亲水性钛表面负载肉桂醛抑制牙龈卟啉单胞菌的作用研究

目的 机械清除对种植体周炎的治疗效果预后差,需要辅助以局部抗菌药物的应用。肉桂醛（cinnamaldehyde,CA）具有抑菌作用,但其在种植体周炎中的应用仍不清楚。本研究拟探究CA对种植体周炎的主要致病菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的抑制作用,并进一步通过等离子及碱热处理在钛表面负载CA,为其在体内应用提供可能。方法 通过倍比稀释法明确CA对P.gingivalis的最低抑菌浓度及最低抗菌浓度,及其对P.gingivalis产生的牙龈素活性的影响;随后通过碱热联合等离子体处理钛表面,检测其亲水性以及对CA的负载能力及缓释能力;最后将P.gingivalis培养于不同处理的钛表面,检测CA的抗菌性能。结果 CA对P.gingivalis的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为21.12μg/mL和42.24μg/mL,1/2/及1/4最低抑菌浓度的CA对P.gingivalis产生的牙龈素具有显著的抑制作用。碱热处理和等离子-碱热复合处理能显著提升钛片的亲水性,均可负载CA,对P.gingivalis的黏附和生长具有抑制作用,等...     

牙龈卟啉单胞菌感染对血管内皮细胞LOX-1mRNA表达的影响

目的 研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)感染对血管内皮细胞(vein endothelial cell,VEC)血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)mRN...     

牙龈卟啉单胞菌红细胞凝集素A黏附和入侵人牙龈上皮细胞的研究

目的:检测牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)膜表面红细胞凝集素A(hemagglutinin A,HagA)黏附和入侵人牙龈上皮细胞的功能。方法:构建P.g381hagA基因的变异菌株,连接hagA基因到pYA292质粒上,并克隆到无毒性的沙门杆菌x4072菌中,通过比较变异菌株、野生菌株和表达hagA基因的沙门杆菌对人牙龈上皮细胞的黏附和入侵功能,检测HagA在此过程中的作用。结果:P.g381hagA基因变异菌株和野生菌株在对细胞的黏附和入侵过程中没有显著差别,但沙门杆菌x4072HagA表达菌株对细胞的黏附性和入侵性比对照组分别提高了3倍和4倍。结论:HagA参与了P.g381黏附和入侵牙龈上皮细胞的过程。     

对氨基苯甲酸对牙龈卟啉单胞菌细胞形态影响的扫描电镜观察

目的　观察不同浓度对氨基苯甲酸(PABA)对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)菌体形态和黏附能力的影响,从而探讨血链球菌(S.sanguis)在龈下菌斑微生态平衡中的作用。方法　用1/2浓度的BHI培养基为实验培养基,分别加入不同质量浓度的PABA,对P.gingivalis进行常规培养,并对培养出的菌细胞做扫描电镜观察。结果　过高或过低质量浓度的PABA均影响P.gingivalis的菌体形态,并对其黏附产生影响。结论　S.sanguis产生的PABA影响P.gingivalis的菌体形态和黏附能力,提示S.sanguis对龈下菌斑的微生态平衡具调节作用。     

乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响

目的:探讨乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)胰酶样蛋白酶(TLP)活性的影响。方法:在BHI培养基中加入不同浓度的乳铁蛋白和一定浊度的P.g进行厌氧培养。测定培养物上清液和菌细胞上清液中TLP活性及蛋白质含量,计算TLP的比活。结果:乳铁蛋白对P.g结合态TLP活性有明显的抑制作用,高浓度的牛乳铁蛋白对P.g游离态TLP活性有明显抑制作用,但低浓度的牛乳铁蛋白对其抑制不明显。结论:乳铁蛋白抑制P.g TLP的活性,提示其对牙周病可能具有防治作用。     

黏性放线菌对牙龈卟啉单胞菌生长的影响

目的:研究黏性放线菌(Actinomyces viscosus,A.viscosus)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)生长的影响。方法:将细菌分为3组,即A.viscosus组、P.gingivalis组和2种细菌等量、等浓度混合组。3组细菌专性厌氧培养48h,绘制生长曲线;混合细菌组每隔2h取菌悬液梯度稀释,接种于BHI血琼脂平板,培养72h,计数P.gingivalis占菌落总数的百分比;制备P.gingivalis BHI血琼脂平板,将不同浓度的A.viscosus菌悬液及除菌后的上清液滴注于已经接种P.gingivalis的固体血琼脂平板,厌氧条件下培养72h,测量抑菌圈直径。实验数据采用SPSS10.0软件包进行单因素方差分析。结果:3组中,A.viscosus2h已处于对数生长期,8h达平台期;P.gingivalis在12h进入对数生长期,32h达平台期;混合细菌组在2h开始进入对数生长期,12h达平台期;混合细菌组前8h P.gingivalis所占总菌落数的百分比随时间延长呈下降趋势﹙P<0.05﹚,8h后平板上已经没有P.gingivalis的存在;1×109、108、107、106A.viscosus对P.gingivalis的抑菌圈平均直径(mm)为19.3、17.4、13.2和9.8,差异具统计学意义﹙P<0.05﹚;A.viscosus的上清液对P.gingivalis无抑制作用。结论:A.viscosus对P.gingivalis生长的抑制作用是由于前者生长速度快,造成营养性竞争所致。