测定大鼠血清甲胎蛋白的酶联免疫吸附法

用自制的甲胎蛋白(AFP)抗体和酶标AFP抗体,建立大鼠血清AFP定量的酶联免疫吸附法(ELISA)即双抗体夹心法。对方法的特异性和重复性进行了研究。测定时在酶标抗体溶液中加入0.5％的牛血清白蛋白可减少塑料板小孔对酶标抗体的非特异吸附。用本法对127例正常雄性Wistar成鼠血清AFP进行了测定,结果为30.35±31.34ng/ml,正常值范围应在115.25ng/ml以下。     

甲胎蛋白单克隆抗体酶联免疫诊断试剂盒的研制及应用

目的 为研制一种特异性强、灵敏度高、操作简便快速的甲胎蛋白（AFP）单克隆抗体酶联免疫诊断试剂盒，用于定量检测血清中的AFP。方法 将自行研制的AFP单克隆抗体（AFP-McAb）标记辣根过氧化物酶，AFP多抗（AFP-PcAb）包被微孔反应板，研制成AFP单克隆抗体酶联免疫诊断试剂盒。血清中的AFP与包被于微孔板上的AFP多抗结合，再与AFP酶标抗体结合，在TMB底物液作用下形成肉眼可见的蓝色。结果 该诊断试剂盒对305份临床病人血清进行了检测，结果与放射免疫法相比总符合率为98．6％；对215份临床病人血清进行检测，结果与化学发光法相比总符合率为99．0％；灵敏度达10ng／ml。结论 该试剂盒检测AFP特异性强、灵敏度高、操作简便、结果准确，具有临床推广应用价值。     

斑点-ELISA检测AFP

目的 探讨硝酸纤维素膜为固相载体的酶免疫测定法检测甲胎蛋白(AFP).方法 以硝酸纤维素膜代替常规ELISA中的固相载体聚苯乙烯板,其余步骤按ELISA方法操作.结果 以AFP标准品作试验,进行方法学探索,测出最佳包被抗体浓度为100 mg.L-1,酶标抗体稀释度为1∶4 000.不同来源不同孔径的硝酸纤维素膜无差异;同时发现包被过程中的封闭处理能减少非特异性反应;保存试验证明包被抗体的硝酸纤维素膜至少可保存2周.结论 该法具有特异性强、重复性好、灵敏度高的特点,通过与常规ELISA检测血清标本AFP含量值的比较,表明该法可半定量测定AFP的含量,尤其适用于标本的初步筛选.     

酶联免疫法和化学发光法在测定肿瘤标志物AFP中的结果对比分析研究

目的 分析肿瘤标志物AFP在酶联免疫法和化学发光法测定结果中的稳定性、敏感性.方法 对120名患者采取空腹静脉血利用酶联免疫法和化学发光法测定肿瘤标志物AFP的含量,采用方差法分析比较这两种方法稳定性、敏感性.结果化学发光法(CL)批内变异系数小于酶联免疫法(ELISA),并且稳定性高于酶联免疫法,P＜0.05.结论 在测定肿瘤标志物AFP方法中ELISA 的稳定性、敏感性及重复性均差于CL,但ELISA具有经济实惠,方法简单,适于一般医院检验科推广应用,有条件的医院检验科应该选用CL,有利于AFP准确定量,为临床提供更加准确有效的诊断依据.     

不同方法检测正常人群血清甲胎蛋白比较

目的:对甲胎蛋白(AFP)酶联免疫吸附试验法与甲胎蛋白化学发光法两种检测方法的敏感性和特异性进行对比,评价两种方法在正常人群中甲胎蛋白检测的应用效果.方法:用酶联免疫吸附试验法与化学发光法同时对2000份体检血清标本甲胎蛋白进行检测.结果:用酶联免疫吸附试验法检测出20例甲胎蛋白阳性标本,用化学发光法检测甲胎蛋白21例高于正常范围,化学发光法检出AFP高于正常范围的21例中,阳性率1.05%,经确证AFP高于正常范围的21例,均为阳性;酶联法检出20例阳性,阳性率1.15%,1例经确证为阴性,特异性为95%.两种方法同为阳性的20例标本,经确证均为阳性.结论:在正常体检甲胎蛋白人群中,酶联免疫吸附试验法与化学发光法检测AFP敏感性差别不大,而特异性差别较大,甲胎蛋白酶联免疫吸附试验法更适合于血液的甲胎蛋白筛查.甲胎蛋白筛查阳性的标本再用化学发光法定量检测AFP,可保证排除AFP假阳性.     

GGT—Ⅱ快速法检测AFP阴性肝癌的探讨

目的：鉴于GGT－Ⅱ以检测AFP表达为阴性的原发性肝癌有较高的诊断率，试图将GGT－Ⅱ和AFP联合应用以期提高AFP阴性肝癌的诊断率。方法：GGT－Ⅱ检测采用快速微量定性法；AFP检测采用酶标参比电泳法和双抗体夹心法。结果：GGT－Ⅱ特异性（阴性率）为92．21％，准确性为90．25％；敏感性（阴性率）为88．94％，AFP阳性率为71．07％，结论：单用AFP检测势必造成AFP表达为阴性的原发性肝癌的漏检（并非AFP检测方法的错误），采用GGT－Ⅱ法联合应用，可明显提高这部分病例的检出率。     

化学发光法与酶联免疫吸附分析法联合测定甲胎蛋白的应用

目的:通过酶联免疫吸附分析法(ELISA)与磁粒子捕获免疫发光法(ICA)联合测定血甲胎蛋白(AFP)进行分析和探讨。方法:预先用ELISA对检测AFP的血清标品进行分组。然后根据浓度级别分组再进行检测血清AFP的浓度。结果:ELISA法可快速进行检测。发出检验报告。结论:可大大节约非常昂贵的ICA试剂,又能快速发出检验报告,无论是医院或者病患者都带来了非常可观的经济效益。     

SPA菌体免疫协同凝集试验对人血清AFP检测的实验研究

建立了一种以含A蛋白的金黄色葡萄球菌（SPA）菌体包被AFP抗体的免疫协同凝集试验（简称SPA法），用以检测血清AFP，最低检出浓度为50μg／L。对97份血清检测的阳性率与酶标法（＞50μg／L者阳性）符合率为93．6％，对46例SPA法阳性病例作放射免疫分析法（RIA）测定，阳性符合率为84.8％。结果表明，SPA法检测AFP简便快速，敏感性强，可能成为肝癌普查的初筛方法之一。     

甲胎蛋白酶标对流参比电泳测定法与反向血凝法在肝癌普查中的比较

用新方法酶标对流参比电泳测定法和通常用于肝癌普查的方法反向间接血凝法测定海南垦区11,735名职工及家属血清AFP。用前一方法发现15名职工血清AFP水平高于正常范围,经放射火箭电泳法检查,结果完全一致,但用反向血凝法,15例中仅7例阳性,11,735人中出现532例假阳性。结果表明,新方法的特异性和灵敏度均优于反向血凝法,说明新方法更适用于肝癌普查。     

妊娠时血清甲胎蛋白水平检测的临床评价

目的:探讨妊娠血清甲胎蛋白(AFP)含量在异常妊娠诊断中的临床应用价值.方法:应用磁性微粒分离的酶联免疫法(IEMA)检测AFP,同时和放射免疫法(RIA)相比较,并对4 748名孕妇血清AFP含量进行回顾性分析.结果:该方法检测AFP线性范围在0.20～250 IU/ml,批内CV为4.48%,日间CV为4.0%,高、中、低三个浓度平均重现率为98.5%,与RIA法相关性良好(r=0.980,P＜0.001).异常妊娠患者AFP含量明显高于同期正常妊娠孕妇血清AFP含量.结论:IEMA法适用于对孕妇AFP进行监测,在优生优育检查中可作为一项有价值的实验室筛查方法.     

酶联免疫法与电化学发光法检测人血清AFP肿瘤标志物结果的对比分析

目的:通过对比分析酶联免疫法(ELESA)与电化学发光法(ECLIA)检测人血清甲胎蛋白(AFP)肿瘤标志物的效果。方法:选取60例肿瘤患者的血清样本作为研究对象,分别采用酶联免疫法与电化学发光法对血清中AFP含量进行检测,对比检测的结果。结果:两种检测方法都能够准确的检测出人血清血清中AFP的含量,通过对两种检测方法进行均值分析发现,酶联免疫法与电化学发光法在检测AFP中并没有明显的统计学差异(P>0.05)。结论:酶联免疫法与电化学发光法检测人血清AFP肿瘤标志物都有很高的实用价值,但两者之间并无明显差异。     

酶联免疫法与化学发光免疫法检测AFP的比较

目的对甲胎蛋白(AFP)试验进行方法学探讨.方法 ①对比实验用酶联免疫法和化学发光免疫法同时测定88例临床送检血清标本甲胎蛋白(AFP)的含量.②线性实验 将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验.③精密度实验 用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验.结果 ①结果表明,两法无显著差异(P>0.05),相关系数r=0.995,提示两法呈良好相关性.②线性实验显示酶联免疫法和化学发光免疫法分别在5~400 ng/ml和2~900 ng/ml范围内呈良好的线性关系.③精密度实验表明化学发光重复性好于酶联免疫法,特别是病理高值化学发光明显优于酶联免疫法.结论 化学发光免疫法的精密度和准确性均优于酶联免疫法.     

浅述原发性肝癌时血清学检查的意义

<正> 原发性肝细胞癌(PHC)时的实验室检查,主要是了解患者血清甲种胎儿球蛋白(AFP)和一系列酶的变化,其目的是协助临床诊断,估计病情程度,判定治疗效果,本文重点介绍AFP和某些血清酶试验对PHC的诊断意义。一、AFP 众所周知,血清中AFP浓度增高是诊断PHC灵敏度较高的一项重要指标。其准确性仅次于病理活检,且可发现无症状病例,为患者的早期诊断,早期手术切除癌灶提供了可能。AFP对PHC的诊断标准是: 1.对流免疫电泳法阳性,或定量法≥500ng/ml,     

孕中期产前筛查孕妇2912例随访结果分析

我院以血清AFP、free-β-HCG作为指标进行酶联法产前筛查,产后随访妊娠结局,报告如下. 资料与方法     

化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附法检测AFP肿瘤标志物结果的对比分析

目的对化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附法检测甲胎蛋白(AFP)肿瘤标志物结果进行对比和分析。方法选择2013年8月至2016年8月在长葛市人民医院进行治疗的肿瘤患者85例,分别采用化学发光酶免疫分析法和酶联免疫吸附法对其血清中AFP含量进行检测。结果化学发光酶免疫分析法检测与酶联免疫法吸附法检测方法之间存在明显的线性关系,相关性良好(r=0.946),检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);两种方法检测病理低值和中值精密度差异无统计学意义(P>0.05),而对于高值,化学发光酶免疫分析法的精密度明显优于酶联免疫法吸附法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论化学发光酶免疫分析法检测与酶联免疫法吸附法检测AFP肿瘤标志物无明显差异,具有较高的一致性,但化学发光酶免疫分析法检测的精密度要优于酶联免疫法吸附法。     

小儿卵黄囊瘤

本院1966年～1989年共收治小儿卵黄囊瘤37例,经血清甲胎蛋白(AFP)测定,光镜确定诊断又通过10例电镜观察,8例AFP免疫组化观察,文献复习,本文支持Teilum提出该瘤来源于卵黄囊瘤背壁的全能性生殖细胞的组织发生观点;1.胚胎卵黄囊有合成AFP能力,本文意儿血清AFP明显升高,免疫酶标可作AFP定位。2.超微结构观察:肿瘤形态与妊娠7周卵黄囊相似,电镜下可见到上皮性及间叶性成份相当于胚外内胚层及胚外中胚层成份。且讨论了该瘤的命名与畸胎瘤关系和免疫组化的应用     

时间分辨荧光免疫分析法检测甲胎蛋白的临床应用

目的:评价时间分辨荧光免疫(TRF)分析法检测甲胎蛋白(AFP)的临床应用。方法:对血清标本做批内批间重复性测定、回收试验及TRF分析法与放射免疫分析法进行AFP对比测定。结果:用高、中、低3种浓度AFP标准品进行批内测定,n=10 ,所得结果计算CV值,分别为2 .8% ,3.1%和3.6 % ;批间连测10 d,CV值分别为3.36% ,3.8%和4 .2 %。回收试验回收率为95 .8%～10 2 .6 %。2种方法呈正相关,回归方程Y=0 .988+0 .938X,r=0 .986 9。临床应用对16 1例临床血清标本(其中女性87例,男性74例)进行检测,结果稳定可靠。结论:酶免疫法作定量检测,误差较大且酶标记物不稳定;放射免疫法因其具有放射性而污染环境;化学发光免疫法其灵敏度、精密度高,但其仪器、试剂价格较高,不适用于中小医院开展。TRF分析法检测AFP灵敏度高、重复性好、不污染环境是取代酶免疫法和放射免疫法的最佳免疫分析技术。     

两种甲胎蛋白血清学检测方法比较

目的：对甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）与甲胎蛋白（AFP）化学发光法检测方法的敏感性和特异性进行对比,评价两种方法在甲胎蛋白检测中的应用效果。方法：用甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）与甲胎蛋白（AFP）化学发光法检测法同时对100份肝硬化患者血清标本进行AFP检测。结果：在甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）检测出37例阳性标本中,甲胎蛋白（AFP）化学发光法检测方法同样检出阳性38例,敏感性为94.29%;酶联法检出阳性20例,敏感性为57.14%。（AFP）检测试纸（胶体金法）检出的37例阳性中,有1例确证为阴性,特异性为99.9%;酶联法检出的22例阳性中,2例确证为阴性,特异性为99.32%。两种方法同为阳性的38例标本,经确证均为阳性。有1例经确证为阳性的标本为甲胎蛋白（AFP）化学发光法检出而甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）法未能检,结论：甲胎蛋白（AFP）化学发光法方法的敏感性远远大于甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）法,而特异性差别不大,甲胎蛋白（AFP）检测试纸（胶体金法）方法更适合于血液的甲胎蛋白（AFP）筛查。     

人体肝癌和癌周宿主肝甲胎蛋白免疫酶标记定位及其形态学观察(摘要)

近年我们用间接免疫酶标抗体技术,对22例外科手术切除的人体原发性肝细胞癌标本进行了有关甲胎蛋白(AFP)的组织内定位及其在光学显微镜的形态学观察研究。其结果: 一、AFP主要存在于部分肝癌细胞和癌周宿主肝细胞原浆中。阳性颗粒在细胞浆内的分布可分四型,多数弥漫分布,少数局限分布,或呈胞膜型和核周型。含AFP的肝癌细胞或宿主肝细胞在组织中多呈散在随机分布,但密度不一,个体差异较大。一般以癌组织的周边及靠血窦的癌细胞染色较强,酶标阳性颗粒也较粗大、清楚。癌周宿主肝组织亦以小叶外周或肝内静脉分支周围的细胞较为突出。     

抗人AFP单克隆抗体酶联免疫检测法的建立及其应用

报道用抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(McAb)标记辣根过氧化物酶(HRP),以纯化之免抗人AFP多克隆抗体包被徽孔条板,建立用于检测血清中AFP的酶联免疫法。结果表明:该方法具有特异、敏感(10ng/ml)、重复性好(变异系数<10％)和简便等优点。在204例临床血清标本的检测中,本方法与放射免疫法(RIA)的结果相符合。