实时荧光PCR快速检测创伤组织中繁殖状态金黄色葡萄球菌的方法研究

目的为解决临床对创口组织金黄色葡萄球菌培养鉴定时间偏长、阳性率低的不满意现象,探讨建立一种检测时间显著缩短而阳性率得到明显提高的方法。方法以金黄色葡萄球菌检测的国家标准方法为金标准,选用246份原始组织样本与其增菌后组织样本同时用实时荧光PCR法检测,与创口组织标本的金黄色葡萄球菌常规培养法作平行检测比对,经统计分析评估实时荧光PCR法和常规培养法的7项指标及标准方法的一致性与检测时间的比较。结果常规培养法与实时荧光PCR法的灵敏度分别为40.91%、100%;特异度分别为100%、100%;约登指数分别为0.41、1.00;阳性预测值分别为40.91%、100%;阴性预测值分别为88.60%、100%;与标准方法的一致性检验Kappa值分别为0.53、1.00;常规培养法的检出阳性率为7.32%,时间需3 d~4 d;实时荧光PCR法的检出阳性率为18.70%,所需时间仅为2 h~26 h。结论实时荧光PCR法的灵敏度、约登指数、检测时间和检出阳性率等均优于常规培养法,基本解决了临床对创口组织金黄色葡萄球菌培养鉴定时间偏长、阳性率低的不满意现象。     

痰液中结核杆菌4种检查方法的结果分析

目的 通过临床实践,对痰液聚合酶链反应法(PCR)、痰液常规培养法、痰液直接涂片镜检法、痰液浓集涂片镜检法,进行比较,从而评估其诊断价值,进而日常临床检查方法提供客观有效的参考.方法 对采集到的同一组标本,运用4种方法进行检查,PCR法检测痰液中TB-DNA;常规培养法培养痰液中结核菌;直接涂片镜检法和浓集镜检法分别检测抗酸杆菌.结果 PCR法阳性率25.7％,常规培养法阳性率5.6％,直接涂片镜检法阳性率3.5％,浓集涂片镜检法阳性率10.6％.结论 PCR法检测TB-DNA既能缩短检测时间又具有敏感度高.要降低漏检率,可同时采用PCR法、常规培养法、浓集涂片镜检法等不同方法,从不同角度进行检测.     

微量全血真空采血管培养法应用于染色体畸变分析的研究

目的建立一种简便有效的外周血淋巴细胞染色体培养及畸变分析方法。方法以市售国产的真空采血管为培养载体,微量全血培养54 h,收获、制片、镜检并将染色体畸变分析结果与常规培养方法进行比较(χ2检验)。结果该体系对60名放射工作人员和30名正常对照人员的外周血淋巴细胞染色体畸变进行检测分析,发现本法与常规法差异无统计学意义(P>0.05)。结论微量全血真空采血管培养法可用于染色体的培养及畸变的检测,简便、有效,值得推广。     

天然水和地面水生化需氧量测定中稀释倍数的估计

生化需氧量（BOD5）.是水质分析中的常规项目,是评价水体受有机物污染程度的一项测定指标。水体中有机物越多,消耗的氧就越多,生化需氧量也高。BOD5的测定,是用样品培养前与培养后溶解氧之差来计算。培养的方法分直接培养法和稀释培养法两种。     

水产品中霍乱弧菌检测结果报道

霍乱是由霍乱弧菌感染机体所致的一种甲类传染病,对外环境标本进行常规监测是霍乱防治工作的重要组成部分。但霍乱弧菌常规监测阳性结果可能性极低,常规培养分离鉴定法工作量大,检测中检验人员容易出现侥幸心理,从而可能     

荧光判读仪快速培养结核分枝杆菌方法的应用效果评价

目的评价荧光判读仪对结核分枝杆菌快速培养法在结核病诊断中的应用价值。探讨建立一种经济、快速、有效的结核菌的培养方法。方法对43例活动性肺结核确诊病人的痰液进行快速结核分枝杆菌培养,同时以改良的罗氏培养基对其进行结核分杆杆菌慢速培养作对照。对这2种方法所用时间、培养阳性率进行比较。结果采用荧光判读仪快速培养法比罗氏培养法出结果提前15d左右,培养阳性率高8.7%。结论荧光判读仪测定法比常规结核分支杆菌培养方法用时短,阳性率高,相对于其他快速培养经济实用,适合基层结核病院使用推广,应用。     

结核分枝杆菌培养快速烟酸测定法的研究

目的评价结核分枝杆菌培养快速烟酸测定法在肺结核诊治中的应用价值,建立一种经济、快速的结核分枝杆菌培养方法。方法将能与结核菌代谢产物-烟酸发生颜色反应的物质加入结核分枝杆菌液体培养基中,对128例患者痰标本进行抗酸菌培养,同时以改良罗氏培养法作为对照,对两种方法所用时间进行比较。结果快速烟酸测定法比改良罗氏培养法提前10 d左右。结论快速烟酸测定法比常规结核分枝杆菌培养方法所用时间短,经济、实用、快速,适合在各级结核病医院推广应用。     

脑膜炎奈瑟菌荧光定量PCR法检测

目的 评价新型水解探针(TaqMan-MGB探针)荧光定量PCR法在检测脑膜炎奈瑟菌中的应用价值.方法 分别采用TaqMan-MGB探针荧光定量PCR法、常规PCR法和传统分离培养法检测230例无症状者咽拭子标本,比较3种方法的检出率.结果 3种方法的阳性检出率分别为10.43%,6.52%和3.48%;TaqMan-MGB探针荧光定量PCR法的检出率高于常规PCR法和传统分离培养法(P<0.001).结论 TaqMan-MGB探针荧光定量PCR法检测脑膜炎奈瑟菌具有灵敏、特异、快速方便的特点,可为流脑流行病学调查提供一种快速、方便的病原学诊断手段,具有实用价值.     

微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度

[目的]建立一种简便、灵敏的微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗感染性滴度。[方法]取适宜稀释度病毒接种细胞已成致密单层的96孔培养板,至增殖高峰时直接在板上固定细胞/病毒系统,用间接免疫荧光法观察结果,以Reed-Muench公式计算CCID50。[结果]随着培养时间的延长,感染性滴度逐渐增高,18d可达增长高峰,比常规组织培养ELISA法提前1周左右;此法的重复性良好,灵敏度与常规组织培养法相似(P>0.05);可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。[结论]此法具有简便、灵敏、省时的优点,可代替常规组织培养ELISA法应用于甲肝减毒活疫苗感染性滴度检测中。     

微核胞质分裂阻滞细胞(CB-MNT)方法学探讨和比较

目的微核胞质分裂阻滞细胞(CB-MNT)实验方法学探讨,对CB-MNT和常规法微核(C-MNT)两种检测方法进行比较。方法选取85名从事放射作业人员外周血标本,分别采用CB-MNT法和常规法两种方法培养微核细胞。通过制片染片及镜下检查,识别双核淋巴细胞微核和转化的单核淋巴细胞微核;比较两种方法培养出的淋巴细胞的自发微核细胞率,并进行统计分析。结果采用淋巴细胞微核自发率CB法制片的结果是3.85±8.43;采用常规法制片的结果是1.13±1.60。两种方法得到的自发率差异有统计学意义(t=-6.17,P0.01)。采用CB法制片获得的双核淋巴细胞核完整膨大,胞质清晰,微核易识别。结论胞质分裂阻滞法优于常规培养法;胞质分裂阻滞法对毒性损伤反映更加敏感;微核细胞更易识别;能减少阅片误差,结果准确可靠。建议作为职业健康体检对遗传损伤监护中实验室中的优先检查方法。     

不同微生物检验法对念珠菌阴道炎患者阴道分泌物的检验效果比较

目的探究用不同的微生物检验法对念珠菌阴道炎患者进行阴道分泌物检验的效果对比。方法选取2018年3月-2019年6月在该院就诊的念珠菌阴道炎患者165例,所有患者留取的分泌物均采用凝集法、培养法和镜检法检验。采用病理组织学结果为金标准,比较3种检验方法的阳性率和临床应用效果。结果所有患者检验后,镜检法检出率为91.52%(151/165),明显高于凝集法检验出率81.21%(134/165)和培养法检出率84.24%(139/165),差异有统计学意义(χ~2=7.436、4.097,P=0.006、0.043);培养法检出率略高于凝集法,但两者差异无统计学意义(χ~2=0.530,P=0.467)。结论 3种常规微生物检验法中,镜检法对念珠菌阴道炎的阳性检出率明显高于凝集法和培养法,可作为诊断念珠菌阴道炎的常规方法进行临床推广应用。     

微量板培养法在O139群霍乱疫情中的应用与比较

目的：通过采用霍乱弧菌常规培养法与微量板培养法,对一起O139群霍乱疫情现场疫源标本进行比对检测研究,以探讨微板法替代常规法的可能性。方法：用霍乱弧菌常规培养法口与霍乱弧菌微量板培养法心,对某地O139群霍乱疫情现场采集的442份疫源检索样品,同时进行病原学检测,对比观察检测结果。结果：两种方法同时检测442份样品,共检出O139群霍乱弧菌18株,其中常规法检出16株,微板法多检出2株为18株。阳性检出率分别为3．62％和4．07％,阳性符合率为88．89％,检出率之间差别无统计学意义。结果显示微板法稍好于常规法,并且微板法还具有以下优点：1）灵敏度高;2）抗原凝集性好;3）培养板体积小、培养基量少（每孔仅1ml）、容量大（每板可做24份样品）;4）操作简便,不需要特殊设备;5）微量板使用后,经消毒清洗可回收再利用,节约成本,在工作量大时,其实用、简便的优点更为突出。结论：微板法可以用于霍乱弧菌病原检测,可靠性较高,且检测霍乱的特异性和敏感性已达到卫生部《霍乱防治手册》的要求。     

赖氨酸脱羧试验底物微量快速法的研究与建立

目的探讨赖氨酸脱羧试验底物微量快速法的建立与应用。方法采用赖氨酸脱羧试验底物微量快速法、常规方法对肠道致病菌及条件致病菌共115株进行赖氨酸脱羧试验的敏感性和符合性试验。结果赖氨酸脱羧快速试验法37℃培养1~2 h,即可准确判断结果,而常规法需培养24 h读结果。因此,快速法具有较高的敏感性,并且与常规法24 h培养结果相一致,符合率达到100%。结论该方法可缩短检测时限,操作简捷,成本低廉,便于推广使用。     

两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用

[目的]比较直接法与常规法对血培养阳性标本进行细菌鉴定及药敏试验的一致率,证明血培养阳性标本快速直接药敏试验的准确性和可行性。[方法]对2009年6月～2010年6月期间360份阳性血液标本进行直接药敏试验和常规药敏试验比较。[结果]360例血培养标本经血培养仪报警为阳性的135例,其中经常规法鉴定出G-杆菌102株,G+球菌33株,直接法鉴定出G-杆菌89株,G+球菌25株。两种方法菌种鉴定总一致率为83.7%,其中肠杆菌科鉴定一致率为86.3%,G+球菌一致率75.7%。两种方法对所有阳性标本细菌药敏结果的总一致率较高,对G-菌及G+菌药敏结果无显著差异。[结论]血培养阳性标本直接药敏试验结果是快速和准确的,它能够缩短阳性血培养的报告时间,降低病人的死亡率。     

4种方法检测男性尿道分泌物淋菌结果比较分析

目的 通过4种方法对尿道分泌物淋病奈瑟球菌(简称淋菌)检测结果比较分析,以期为临床提供一种更加简便和适用的检测方法.方法 瑞氏染色和革兰染色同时检测226份分泌物中的淋菌,其中部分标本加用培养法和(或)聚合酶链反应(PCR)进行鉴定.结果 瑞氏染色和革兰染色检查尿道分泌物淋菌阳性率分别为71.68%和73.89%,差异无统计学意义(P＞0.05),两种染色法的阳性率均明显高于分离培养法(33.33%)(P＜0.05),而较PCR法检出率85.71%低(P＜0.05).结论 对于男性尿道分泌物淋菌检查,PCR法阳性率最高;染色法阳性率较高,其中瑞氏染色法更简便、快速和廉价;培养法阳性率最低,不适于常规检查.     

临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法应用分析

目的探究直接药敏试验与常规药敏试验在临床血液细菌鉴定与检验中的临床应用价值。方法对我院640例阳性血培养标本,分别给予直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验对比。结果两种检测方法的符合率为84.5%,亦无明显差异。结论阳性血培养标本进行直接药敏试验,其检验结果不仅操作简便、时间短,而且检测结果准确,可广泛应用于细菌感染的临床血液检验。     

半定量PCR检测致龋性变形链球菌技术及应用

目的　创建一种临床半定量检测致龋性变形链球菌的分子生物学方法。方法　采用靶基因与参照基因同步扩增法 ,根据变形链球菌葡聚糖酶 (dexA)基因序列 ,作者设计一对特异性引物 ,以 pET2 3b质粒DNA为参照基因。对 196名儿童的唾液样品进行半定量PCR检测并进行常规培养法的对比研究。结果　 196份唾液样品半定量PCR检测致龋性变形链球菌≥ 10 5CFU/ml唾液的检出率为 91.3%。与常规培养计量法的对比符合率为94 .9%。结论　变形链球菌PCR半定量检测是一种早期发现龋病活性的新方法 ,具有快速可靠 ,特异性强 ,符合率高等特点 ,故具有广泛的临床应用前景     

临床血液检验中的2种不同细菌鉴定法应用分析

目的 探讨在临床血液检验中采用直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验.方法 本文将选取2010年5月～2011年12月期间我院收治的发烧并伴全身感染症状者患者中的720例阳性血培养标本,并分别对其采用直接法与常规法进行细菌鉴定和药敏试验对比.结果通过对720例血液样品进行BacT9050型全自动血培养仪检出的420例的阳性样,其中通过直接法鉴定出G+球菌282株,而G-球菌66株,而通过采用常规法鉴定出G+杆菌332株,G-球菌88株.两种检测方法的符合率为82.86％,然后对阳性样行药敏试验,其检测结果两种方法的总符合率均比较高,其中G+球菌和G-杆菌的耐药、敏感、中度敏感结果均无显著差异.结论 通过本实验的表明,对阳性血培养标本进行直接药敏试验,其检验结果不仅操作简便,而且检测结果准确以及检测时间较短,因此,直接法可替代常规药敏实验对G-杆菌和G+球菌的抗菌药物敏感度进行检测.其将有效提高败血症以及菌血症的临床诊治效率.     

溶血离心血培养法分离伤寒副伤寒沙门氏菌的实验研究及初步应用

对溶血离心血培养法分离伤寒、副伤寒沙门氏菌进行了系列的实验研究。筛选出了０．０４ｍｇ／ｍｌ的理想溶血剂使用浓度、检出阳性最小标本量和最小细菌检出量比较结果结果表明，溶血离心培养法敏感优于常规培养法将溶血离心培养法初步应用于临床及伤寒流行现场 常规法配对试验，细菌分离最性率分别为３５．１２％和２６．７９％前者明显高于后者。溶血离心血培养法可能排除血标本中各种抑菌物质的影响。从而提高细菌的检出率，燕能     

不同方法分离流感病毒结果分析

目的通过两种常规分离流感病毒方法的比较,对流感病毒分离结果进行分析。方法对467份咽拭子标本同时采用MDCK细胞培养法和鸡胚双腔培养法分离。结果细胞培养法分离流感病毒10株,而鸡胚双腔培养法只分离到1株。10株病毒株,其中甲3型8株,乙型2株。10株病毒株全部从第一医院所采标本中分离到,而儿童医院227份标本中全部未检出阳性。结论流感病毒分离中,细胞培养法比鸡胚培养法敏感,同时用两种方法培养,可明显提高流感病毒分离率。同时也可看出,标本采集对能否分离到病毒至关重要。