黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血sICAM一1和sVCAM一1的影响*

目的 探讨黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血清中细胞间黏附分子-1(ICAM-1) 和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平的影响及其作用机制。方法 雄性SD大鼠,随机分成正常对照组,模型对照组,黄连解毒汤低中高3个剂量组及阿托伐他汀组,每组10只,喂以高脂饲料（正常对照组喂普通饲料）,连续10周,同时模型对照组,黄连解毒汤低、中、高剂量组,阿托伐他汀钙片组实验大鼠定期灌服维生素D3（60 万u/3次,第2,4,6周）造模8周,从第6周开始每天灌胃给药1次,低剂量2.7 g/kg,中剂量5.3 g/kg,高剂量10.6 g/kg,阿托伐他汀钙片组1.8 mg/kg,正常对照组灌服等量蒸馏水,连续4周。结果 黄连解毒汤中剂量组,高剂量组及阿托伐他汀组均与模型对照组有显著差异,ICAM-1,VCAM-1表达均比模型对照组降低 (P<0．05~0.01)。结论 黄连解毒汤对动脉粥样硬化起到一定干预作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血sICAM-1和sVCAM-1的影响

目的 探讨黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血清中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平的影响及其作用机制.方法 雄性SD大鼠,随机分成正常对照组、模型对照组、黄连解毒汤低中高3个剂量组及阿托伐他汀组,每组10只.除正常对照组喂普通饲料外,其余喂以高脂饲料,同时定期灌服维生素D3(60万U/次,第2,4,6周)造模8周,从第6周开始每天灌胃给药1次,黄连解毒汤低剂量组2.7 g/kg,中剂量组5.3 g/kg,高剂量组10.6 g/ks,阿托伐他汀钙片组1.8mg/kg,正常对照组灌服等量蒸馏水,连续4周.结果 黄连解毒汤中剂量组,高剂量组及阿托伐他汀组均与模型对照组的ICAM-1,VCAM-1表达均比模型对照组低(P<0.05～0.01).结论 黄连解毒汤对动脉粥样硬化起到一定干预作用,其机制可能与抑制炎症反应有关.     

C57 BL/6小鼠动脉粥样硬化中CD4+ CD25+ Treg和TGF-β的表达及其意义

目的通过建立C57BL/6小鼠动脉粥样硬化模型探讨CD4+CD25+调节性T细胞( Treg)在动脉粥样硬化发病及治疗过程中的作用。方法24只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组：正常对照组、动脉粥样硬化组、阿托伐他汀组。正常对照组给予基础饲料,其余组给予高脂饲料。高脂饲养4周后,阿托伐他汀组继续高脂饲养并加用阿托伐他汀干预,3组共观察16周。苏木精染色观察血管病变情况,流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Treg的表达情况, ELISA法检测外周血TGF-β浓度。结果①动脉粥样硬化组的动脉血管的内膜显著增生,CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例显著低于正常对照组,差异有统计学意义( P<0．01)。阿托伐他汀组的动脉血管较动脉粥样硬化组病变明显减轻。阿托伐他汀组的CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例较动脉粥样硬化组有显著提升(P<0．01),与正常对照组差异无统计学意义。②动脉粥样硬化组TGF-β浓度较正常对照组明显降低( P<0．01)。阿托伐他汀组的 TGF-β的浓度显著高于动
　　脉粥样硬化组( P<0．01);较正常对照组略低,差异无统计学意义。结论 CD4+CD25+Treg及其分泌的TGF-β具有抑制动脉粥样硬化发展的作用,有望成为治疗动脉粥样硬化的新靶点。     

黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血脂水平的影响

目的研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂水平的影响,探讨AS大鼠血脂水平的变化以及黄连解毒汤对AS的干预作用。方法应用高脂饲料联合维生素D3建立动脉粥样硬化模型,设正常对照组、模型对照组、黄连解毒汤低剂量组、中剂量组、高剂量组及阿托伐他汀组,第10周检测大鼠血脂水平。结果黄连解毒汤能降低AS模型大鼠CHOL、TG、LDL-C水平,提高HDL-C水平。结论黄连解毒汤对AS有干预作用,通过抗脂质的过氧化而抑制主动脉粥样硬化病变。     

急性冠脉综合征患者体内CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及阿托伐他汀对其影响

目的:研究急性冠脉综合征患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及阿托伐他汀对其影响。方法:经冠状动脉造影和血管内超声显示病变斑块狭窄率>50%或管腔面积<4 mm2临床诊断急性冠脉综合征患者120例,随机分成两组,即传统治疗组(主要使用行气活血,通脉止痛类中药)和传统治疗加阿托伐他汀治疗组,每组60例,选取健康人群48例作为对照组。比较各研究组外周血中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组细胞炎性因子浓度。结果:与传统治疗组比较,阿托伐他汀治疗组CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的数目显著增加(P<0.05),CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增殖反应下降;上清液中TGF-β和IL-10浓度显著升高,而IFN-γ浓度显著下降。结论:急性冠脉综合征患者循环血调节性T细胞数目及功能下降,阿托伐他汀治疗能增加CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数目并增强其功能,抑制急性冠脉综合征患者免疫炎性反应。     

通络方剂对实验性糖尿病大鼠胸腺CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的探讨通络方剂对实验性糖尿病大鼠胸腺CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响。方法 112只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组、通络方剂干预组。后两组一次性腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg制备1型糖尿病大鼠模型。通络方剂干预组再分为2组:分别于糖尿病造模成功后当天及普通饲养12周后0.4g.kg-1.d-1)灌胃给药,即预防性给药组(TL-1)和治疗性给药组(TL-2)。灌胃时间均为12周。实验周期6个月,不同时间点(对照组和模型组:4、8、12、16、20、24周;通络方剂组:12和24周)处死大鼠,流式细胞仪检测胸腺CD4+CD25+Treg数量及其占CD4+T细胞比例,H-E染色观察胸腺形态,免疫组化检测Foxp3蛋白表达。结果随糖尿病病程发展,与正常对照组相比,糖尿病大鼠胸腺逐渐萎缩,Treg占CD4+T细胞比例逐渐减少,Foxp3表达减少。两组通络方剂组较糖尿病组Treg比例升高(P<0.01),胸腺指数升高(P<0.05),Foxp3有表达。结论通络方剂可显著提高Treg比例,提高胸腺指数,提高Foxp3表达,可能对实验性糖尿病大鼠的胸腺Treg有保护作用。     

肾移植术后受者CD4+CD28nullT淋巴细胞的表达和阿托伐他汀的干预作用

目的 探讨肾移植术后受者CD4+CD28nullT淋巴细胞的表达和阿托伐他汀的干预作用.方法 采用流式细胞仪检测35例肾移植术后3年以上无明显排斥反应受者以及20例健康人外周血CD4+CD28nullT淋巴细胞数量.对21例合并高脂血症的患者,给予阿托伐他汀20 mg/d干预3月后再次检测外周血CD4+CD28nullT淋巴细胞数量的变化.结果 与健康人相比,肾移植术后受者外周血CD4+CD28nullT淋巴细胞表达明显增加(P＜0.01),通过阿托伐他汀干预后其表达可以明显下降(P＜0.01).结论 肾移植术后受者外周血CD4+CD28nullT淋巴细胞表达增加可能是移植后心血管事件风险增加的重要因素之一,阿托伐他汀可以抑制其作用.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

正常妊娠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞和雌二醇水平变化的研究

目的 探讨外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平在正常妊娠整个过程中的变化.方法 采用三色荧光标记流式细胞术检测正常非妊娠健康女性(对照组),早早孕组、早孕组、中孕组、晚孕组各35例妇女外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率;采用电化学发光酶免分析技术分别检测以上各对象外周血雌二醇水平.结果 对照组和早早孕组外周血雌二醇水平明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05);对照组和早早孕组外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05),晚孕组略低于中孕组,但无统计学意义(P＞0.05).结论 正常妊娠过程孕8周左右之后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平均呈现明显升高,并且随孕周增大而升高,正常的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和外周血雌二醇水平在维持正常妊娠过程中发挥重要作用.     

1,25二羟基维生素D_3对大鼠脾CD4~+CD25~+调节性T细胞及Foxp3基因表达的影响

目的:探究1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠脾CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响.方法:近交系雄性Lewis大鼠,随机分成对照组和3个剂量的VitD3组: 0.125 μg组,0.25 μg组和1 μg组,每组30只;灌胃给药,3次/周,共2周后对照组给予赋形剂;各组随机抽取20只大鼠,于第15 d腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg),随机选择其中10只于6 h后切取脾,其余10只观察注射LPS后96 h大鼠的病死率,同时留取未注射LPS大鼠的脾;流式细胞仪检测脾CD4 CD25 Treg数量变化,RT-PCR检测脾Foxp3 mRNA表达.结果:1,25(OH)2D3明显上调大鼠脾CD4 CD25 Treg的数量及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达;1,25(OH)2D3能保护大鼠抵抗LPS的攻击.结论:1,25(OH)2D3对大鼠脾CD4 CD25 调节性T细胞及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达有显著影响.1,25(OH)2D3保护大鼠抵抗LPS攻击可能与其促进CD4 CD25 Treg的发育和功能有关.     

牙周炎发生时外周血中CD4~+CD25~+T细胞表达的变化研究

目的:探讨CD4+CD25+Treg在牙周炎发生时的免疫调节作用。方法:选择35只成年SPF级Wistar大鼠,丝线结扎加高糖饮食建立大鼠牙周炎发生的动物模型,获得类似牙周炎自然病程的连续组织标本,病理切片确定病损,分别获取第4、8、12、16周的大鼠外周血,术前未结扎组对照。以流式细胞仪检测不同时段外周血中CD4+CD25+Treg的比例变化。结果:建立了Wistar大鼠牙周炎发生的动物模型,病理切片确定了牙周病损的存在。结果显示伴随牙周炎发生的牙槽骨的吸收逐渐增多。流式细胞仪结果显示结扎后第4、8、12、16周外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例为7.70%、9.12%、9.74%、10.31%,与术前比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:外周血中CD4+CD25+Treg自牙周炎发生早期逐渐升高,牙周炎发生发展规律一致,从而证实CD4+CD25+Treg细胞参与介导了牙周炎发生的免疫调控。     

花姜酮对小鼠CD4+CD25+Treg细胞分化功能的影响及机制

目的：建立小鼠CD4+CD25+Treg细胞的体外诱导及培养方法,同时探讨花姜酮（Zerumbone）对Treg细胞的分化、分泌功能的影响及其机制。方法：从BABL/c小鼠的脾脏分离、纯化CD4+CD62L+T细胞,加入转化生长因子（transforming growth factor,TGF）? β（5 ng/mL）、 白细胞介素（interleukin,IL）?2（30 μg/mL）促进CD4+CD62L+T细胞向Treg细胞分化。Treg细胞被分为5组：正常组、模型对照组、Zerumbone（1 μmol/L）组、Zerumbone（10 μmol/L）组、Zerumbone（30 μmol/L）组。流式细胞术检测各组Treg细胞的比例,酶联免疫吸附试验（enzyme?linked immunosorbent assay,ELISA）方法检测IL?10含量,Foxp3、IL?10 mRNA的表达用实时荧光定量聚合酶链反应（RT?PCR）方法检测。结果：本实验方法使Treg细胞的诱导比例明显升高（P< 0.01）。与模型对照组相比,Zerumbone组的Treg细胞比例呈剂量依赖性升高（P均< 0.05）。IL?10蛋白的表达与模型对照组比较也呈剂量依赖性升高（P均< 0.05）,Foxp3、IL?10 mRNA的表达同样升高（P < 0.05）,其中Zerumbone（30 μmol/L）组升高最明显（P < 0.01）。结论：在体外实验中,Zerumbone可以促进BABL/c小鼠体内的CD4+CD62L+T细胞向Treg细胞分化,并促进IL?10蛋白的表达,其机制可能与诱导CD4+CD25+Treg特异性转录因子Foxp3的表达有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞的体外扩增

 【目的】 探讨有效的体外培养扩增CD4+CD25+Treg的方法。【方法】 收集健康志愿者外周血5例，免疫磁珠法分选出CD4+CD25+Treg。将实验分为三组，第一组在CD4+CD25+Treg中加入100 nM rapamycin (1μg/ml)和包被了CD3/CD28单抗的磁珠培养3周，第8 天开始加入1000U/mL的IL-2，第二组培养条件除不加rapamycin外其余与第一组相同，第三组培养细胞为CD4+CD25-T细胞，培养条件同第一组。培养第7、14、21天收集细胞计数，第21天收集细胞行流式细胞术三标法检测CD4、CD25、FOXP3的表达。MTT法检测体外扩增的CD4+CD25+Treg对自体和异体的CD4+T细胞增殖的抑制作用。 【结果】 三组细胞均有明显的扩增，加rapamycin培养的CD4+CD25+Treg细胞的扩增率比不加rapamycin扩增倍数低，但细胞的纯度明显增加。CD4+CD25-T细胞组在培养第一周扩增迅速，从第二周开始增殖减慢，CD4+CD25+ Treg 细胞的比例较培养前无明显的差别。三组至第三周时扩增倍数分别为 89.4+20.53、338.4+77.64 、215.6+54.58（F=484.655,p<0.0001），细胞的纯度分别为84.32+4.62%、34.04+5.78%、0.68+0.39% (F=24.660,p<0.0001)。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体和异体的CD4+T细胞增殖均有明显的抑制作用，并且随着效靶比浓度的降低而降低。在CD4+T/Treg比例为8：1、4：1、2：1、1：1时对自体CD4+T细胞的抑制率分别为9.65%、16.43%、28.75%、55.34%，对异体CD4+T细胞的抑制率分别为6.43%、14.72%、26.47%、50.25%，而且在各浓度梯度其抑制作用在自体和异体之间均无明显的差异。结论 我们采用rapamycin+CD3/CD28单抗标记的磁珠+IL-2在体外成功扩增了CD4+CD25+Treg，其扩增的倍数为89.4+20.53，具有免疫抑制功能，有望进一步应用于临床。     

黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠单核细胞趋化蛋白-1及特异性受体CCR2 mRNA表达的影响

【目的】观察黄连解毒汤对动脉粥样硬化(AS)大鼠主动脉组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其特异性受体CCR2 mRNA表达的影响。【方法】选用SD大鼠,随机分为正常对照组,模型组,黄连解毒汤低、中、高剂量组(中药组,剂量分别为2.7、5.3、10.6 g.kg-1.d-1),阿托伐他汀组(剂量为1.8 mg.kg-1.d-1)。除正常对照组外,其他组均采用高脂饮食法复制AS模型,造模第6周开始给药,连续4周。取各组大鼠主动脉采用实时荧光定量PCR法检测各组MCP-1/CCR2 mRNA表达。【结果】与正常对照组比较,模型组主动脉MCP-1/CCR2 mRNA表达显著升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组MCP-1/CCR2 mRNA表达均显著降低(P0.05或P0.01),且呈一定的剂量效应关系,MCP-1与CCR2两者表达呈正相关。【结论】黄连解毒汤治疗AS的作用可能与其能下调MCP-1、CCR2 mRNA在主动脉的表达有关。     

供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对心脏移植小鼠体内B细胞功能的影响

目的 观察供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对同种异系心脏移植小鼠受体B细胞功能的影响.方法 以Balb/c小鼠为供体、C57bl/6小鼠为受体建立小鼠心脏移植模型,于术前1 d、术后2周分别将供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg (1×106)于尾静脉注入受体体内,术后1个月抽取小鼠外周血,分离B细胞,检测其在抗IgM抗体刺激下的增殖情况,检测小鼠外周血IgG、IgA水平,以判断应用CD4+CD25+Treg后小鼠体内B细胞功能状态.实验组:术前、术后2周使用CD4+CD25+Treg(n＝8);阳性对照组:术前、术后未使用CD4+CD25+Treg(n＝8);空白对照组:未移植小鼠(n＝8).结果 实验证实,实验组B细胞增殖水平最低,空白对照组其次,阳性对照组最高,3组差异均有统计学意义(P<0.05).外周血IgG、IgA水平检测证实,实验组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),二者明显低于阳性对照组(P<0.01).结论 经尾静脉注入CD4+CD25+Treg后心脏移植受体体内B细胞的功能可明显受到抑制,CD4+CD25+Treg可通过对B细胞的这一作用调节受体免疫状态,从而达到控制排斥反应,诱导免疫耐受的作用.     

肿瘤细胞对CD4~+CD25~+Treg细胞数量和功能的影响

目的：探讨肿瘤细胞与免疫细胞相互作用对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响。方法：建立Lewis肺癌细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养体系。Lewis肺癌细胞与不同浓度小鼠脾淋巴细胞共培养,分为4组：实验组Ⅰ（5×105个Lewis肺癌细胞与1×106个淋巴细胞共培养）、对照组Ⅰ（1×106个淋巴细胞单独培养）、实验组Ⅱ（5×105个Lewis肺癌细胞
与2×106个淋巴细胞共培养）、对照组Ⅱ（2×106个淋巴细胞单独培养）;Lewis肺癌细胞与
淋巴细胞共培养不同时间,采用3个时间点：24、48和72 h;Lewis肺癌细胞培养上清与淋巴细
胞共培养,选择培养上清浓度为20%和50%。采用流式细胞术检测了Lewis肺癌细胞与脾淋巴
细胞共培养系统中CD4+CD25+Treg细胞数量变化,通过RT-PCR方法检测了共培养对Foxp
3 mRNA表达的影响。结果：与对照组比较,实验组Ⅰ 中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRN
A表达明显增强（P<0.05）,实验组Ⅱ中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达无明
显变化（P>0.05）;Lewis肺癌细胞与淋巴细胞培养24及48 h可见CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3
mRNA表达明显升高（P<0.05）,而72 h后变化不明显;20%和50% Lewis肺癌细胞培养上清
均可明显提高CD4+CD25+Treg数量及Foxp3 mRNA表达（P<0.05）。结论：肿瘤细胞及其培养
上清可诱导CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,由肿瘤细胞所引起的CD4+CD25+Treg细
胞产生及功能增强可能是肿瘤逃避免疫监视机制之一。     

CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞在成人免疫性血小板减少症中的意义

目的 :探讨CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)在成人免疫性血小板减少症(ITP)发病及发展中的意义。方法 :采集26例成人ITP患者和20例正常对照者外周血标本,应用流式细胞术检测正常对照组及ITP患者治疗前后的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例,并将正常对照组与ITP组及ITP组治疗前后的Treg细胞进行比较。结果 :ITP组(治疗前)较对照组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞下降,差异有统计学意义(P<0.05);ITP组经治疗后18例有效,8例无效,有效组治疗后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞明显上调(P<0.05);治疗无效组治疗后Treg细胞的比值较前无明显统计学意义(P>0.05)。结论 :ITP的发病可能与CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例下调相关,治疗有效后Treg细胞的失调会得到改善,改善Treg细胞的功能并增加其数量可能是一个新的治疗方法。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在HBV宫内感染的表达及意义

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在HBV宫内感染者血液中的表达及意义。方法:流式细胞技术检测157例乙肝大三阳但肝功能正常孕产妇外周血、其分娩新生儿脐血、HBV宫内感染婴幼儿外周血中CD4+CD25+Treg表达水平。结果:HBV宫内感染产妇外周血及新生儿脐血中CD4+CD25+Treg的百分数较未感染组高(P<0.05);HBV持续感染者CD4+CD25+Treg比例较感染转阴组高(P<0.05)。结论:CD4+CD25+Treg抑制体内HBV清除,宫内感染与其表达上调有关。     

CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭中作用

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭发病过程中的表达。方法:采用流式细胞仪检测36例慢加急性肝衰竭患者、38例慢性乙型肝炎患者、40例无症状乙肝病毒携带者及40例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平,并追踪慢加急性肝衰竭组患者转归,评价好转组与未恢复组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分率差异。结果:慢加急性肝衰竭组、慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组及健康对照组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞分别为(5.14±1.03)%、(9.86±1.72)%、(7.93±1.67)%及(7.06±1.61)%,慢加急肝衰竭组外周血Treg细胞百分率显著低于慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组和健康对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎组外周血Treg百分率明显高于慢加急肝衰竭组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而无症状乙肝病毒携带组与健康对照组外周血Treg百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的百分率与患者血清HBVDNA呈正相关。慢加急性肝衰竭好转组与未恢复组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢加急性肝衰竭患者发病可能与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达过低有关,Treg细胞表达水平不能预示慢加急性肝衰竭患者预后。     

血管活性肠肽调控CD4~+CD25~+Treg/Th17平衡对实验性自身免疫性脑脊髓炎防治作用的影响

目的探讨血管活性肠肽(vocative intestinal peptide,VIP)调控CD4~+CD25~+Treg/Th17平衡对防治实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的影响。方法 60只健康雌性wistar大鼠随机分成正常对照组、EAE对照组、VIP低剂量防治组和VIP高剂量防治组。利用髓鞘碱性蛋白(MBP)~+完全福氏佐剂(CFA)诱导建立EAE模型。自造模当日起,每隔一日分别对VIP低、高剂量防治组大鼠腹腔注射VIP 4nmol/kg(0.2 m L)、16 nmol/kg(0.8 m L),正常对照组及EAE对照组注射0.8 m L生理盐水,连续10 d。观察大鼠发病情况;HE染色观察脑组织基本病理改变;流式细胞仪检测脾组织CD4~+CD25~+Treg、Th17细胞比例;ELISA法检测脑组织中TGF-β1、IL-17A因子含量变化。结果与EAE对照组比较,VIP各剂量防治组大鼠发病潜伏期延长、进展期缩短、发病高峰期神经功能障碍评分(NDS)降低;HE染色显示正常对照组大鼠脑组织中未见炎细胞浸润,VIP各剂量防治组大鼠脑组织中炎细胞浸润程度较EAE组明显下降;与EAE对照组比较,VIP各剂量组大鼠脾组织中CD4~+CD25~+Treg细胞亚群比例升高,Th17细胞亚群比例降低,且各组间存一定的量效关系;VIP各剂量组大鼠脑组织中TGF-β1含量较EAE组明显升高,IL-17A含量较EAE组明显降低,且各组间存在一定剂量依赖关系。结论 VIP通过上调CD4~+CD25~+Treg细胞比例,促进TGF-β1因子分泌,同时下调Th17细胞比例,抑制IL-17A因子表达,从而减轻脑组织炎症细胞的浸润程度,发挥对EAE的防治作用。