CNTF及其受体在不同类型星形胶质细胞中的表达

目的：研究CNTF及其受体在不同类型星形胶质细胞中的表达分布。方法：星形胶质细胞的原代分离培养结合地高辛标记的RNA探针及寡核苷酸探原原位杂交技术。结果：0－2A前体细胞和纤维型星形胶质细胞中CNTFmRNA表达,大多数原浆型星形胶质细胞CNTF表达低,只有约5％的原浆型星形胶质细胞群可见较高,CNTNFmRNA的表达。原浆型与纤维型星形胶质细胞中CNTFRαmRNA表达相同。结论CNTF在不同类型星形胶质细胞中的表达水平不同。但其受体的表达水平无差别。     

EphB3基因受体蛋白在大鼠脊髓损伤组织中的表达

背景：Eph受体能够调节轴突介导,形成抑制轴突修复再生的内环境,而EphB3又是Eph家族中极其重要的一员,所以研究EphB3与脊髓损伤的关系将成为国内外研究的新方向。 目的：观察脊髓损伤大鼠EphB3基因和蛋白的表达情况。 方法：采用脊髓半切法建立大鼠脊髓损伤模型,RT-PCR和Western blot法检测脊髓损伤后1,2,4,8周脊髓组织中EphB3 mRNA及蛋白的表达,并且与正常大鼠进行比较。 结果与结论：损伤组脊髓组织中EphB3 mRNA及蛋白呈高表达,且1,2,4,8周时间点EphB3 mRNA及蛋白表达无明显变化(P ≥ 0.05)。对照组脊髓组织中EphB3 mRNA及蛋白表达极低。两组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。结果提示脊髓损伤引起EphB3基因和蛋白呈长时间稳定的高表达。     

CNTF基因在大鼠脊髓中的表达及生后发育的变化

目的 观察CNTF基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。方法 以地高辛标记（dig）－CNTF cDNA为探针,采用原位杂交法,观察CNTF mRNA在大鼠脊髓中的分布;采用TR－PCR法,半定量分析大鼠生后发育过程中,脊髓CNTF mRNA表达水平的变化。结果 CNTF mRNA原位杂交阳性信号存在于正常大鼠脊髓白质的腹索、外侧索周边的部分胶质细胞中;灰质中未能发现阳性杂交信号。RT－PCR结果显示,大鼠生后1d脊髓细胞中即可见CNTF mRNA表达,但表达量较低;出生15d表达量迅速增加;30d时最高;60d时的表达量有下降的趋势。结论 大鼠脊髓白质的部分胶质细胞可表达CNTF mRNA;大鼠出生后1d CNTF mRNA即有表达,之后随脊髓的发育而呈动态变化的趋势。     

尾加压素Ⅱ及其受体在急性肾损伤大鼠肾组织中的表达

目的: 观察急性肾损伤大鼠肾组织中尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体(GPR14)mRNA表达的变化。方法: 雄性Wistar大鼠随机分为对照组(10只,灌服生理盐水)和模型组(30只)。模型组大鼠给予关木通水煎剂灌胃25 d,于第3、7、15和25 d分别处死5只,停药10 d后2组大鼠全部处死,留取肾脏,用于肾脏病理学和UⅡ、GPR14 mRNA的检测。结果: (1)给药3 d后HE染色可见局部肾小管上皮细胞变性、坏死和崩解,并随给药时间的延长逐渐加重,停药10 d后病变未见减轻反而加重。(2)与对照组比较,模型组UⅡ mRNA在给药15 d后明显升高(P<0.05),25 d后更高(P<0.01),实验结束时最高;GPR14 mRNA在给药7 d后即明显增强(P<0.05),15 d后显著增强(P<0.01),此后随着实验时间的延长逐渐增强。结论: 在关木通所致肾损伤中UⅡ及其受体基因表达明显增强,提示UⅡ在急性肾损伤的发生发展中可能有一定的病理作用。     

雌激素受体在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的研究雌性激素受体(ER)在肝癌组织中的表达和其临床价值。方法采用免疫组化法对59例肝癌患者肝肿瘤组织中雌激素受体(ER)表达情况进行研究。结果 59例肝癌患者ER表达阳性率为72.9%。22～36岁的肝癌患者ER表达阳性率为72.22%(13/18),37～52岁的患者表达阳性率为75.01%(15/20),53～67岁的患者的阳性率为71.42%(15/21);直径≤5 cm的肝癌中ER表达阳性率为33.33%(6/18),直径大于5 cm的癌组织阳性率为90.24%(37/41);分化程度为EdmondsonⅠ级的肝癌组织中表达阳性率为96.97%(32/33),Ⅱ级的阳性率为55.56%(10/18),Ⅲ级阳性率为12.5%(1/8)。年龄组间表达差异无统计学意义(P>0.05),而不同大小肿瘤和不同分化程度组间表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论原发性肝细胞癌具有一定的雌激素依赖性,肝癌发生、发展及预后与肝癌组织中ER表达有关。     

脂联素及其受体在酒精性肝病大鼠肝组织中的表达下降

目的探讨脂联素(Adip)及其受体1和2(AdipoR1,AdipoR2)在酒精性肝病(ALD)发病过程中的表达及意义。方法Wistar大鼠分为对照组和模型组,给模型组大鼠逐渐增加酒精浓度和剂量[30%～60%,5～9 g/(kg.d)]灌胃,分别于4、8、12和16周末随机分批处死,制备10%的肝匀浆,用比色法检测肝组织三酰甘油(TG);酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中TNFα和Adip含量;用RT-PCR和Western blot法观察肝组织Adip、AdipoR1和AdipoR2mRNA及蛋白表达。结果成功制造酒精性肝病大鼠模型,随着时间的延长血清TNFα和肝匀浆TG含量增高,血清Adip含量逐渐减少;肝组织Adip和AdipoR2mRNA和蛋白表达量逐渐减弱而AdipoR1无明显变化,血清Adip和肝组织AdipoR2蛋白表达量与血清TNF-α和肝匀浆TG呈负相关(P<0.01),血清Adipo检测水平与其肝组织蛋白表达量间呈正相关(P<0.01)。结论Adip及其AdipoR2在ALD模型大鼠肝组织表达减弱与肝细胞脂肪变和肝脏炎症反应密切相关。     

TRAIL及其受体在自身免疫性炎性肌病大鼠肺组织中的表达

目的 探讨自身免疫性炎性肌病肺间质病变的病因及发病机制.方法 用异种动物骨骼肌匀浆免疫诱导建立自身免疫性炎性肌病大鼠模型,HE染色和Masson染色观察肌肉和肺组织病理改变,免疫组织化学染色结合计算机图像分析方法检测TRAIL及其受体在病变肺组织中的表达.结果 45例自身免疫性炎性肌病大鼠中有16只出现不同程度的肺间质...     

炎性痛致大鼠脊髓后角ProBDNF及其受体的表达变化

目的:探讨完全弗氏佐剂(complete Freund’s Adjuvant,CFA)致炎性疼痛后大鼠脊髓后角内ProBDNF及受体P75NTR和Sortilin的表达变化及意义。方法:大鼠随机分为正常组和实验组,实验组大鼠左侧足底皮下注射CFA和生理盐水混合溶剂100μl,建立炎性疼痛模型,实验组包括注射CFA后6 h、1、3、7和14 d组。采用Von Frey纤维测定不同时间点大鼠机械缩足阈值(pawwithdrawal threshold,PWT)的变化;采用免疫组织化学方法检测ProBDNF及P75NTR、Sortilin在脊髓后角的表达变化。结果:足底注射CFA后1 h PWT即下降,并在6 h后达到最低值,3 d后逐渐上调,至14 d仍低于基础值。ProBDNF在正常脊髓后角可见阳性表达;注射CFA后1 d注射侧脊髓后角较对侧其ProBDNF的表达明显上调,上调持续到7 d左右,至14 d逐渐恢复。正常大鼠脊髓后角P75NTR有较弱表达,主要集中在后角I、II层纤维;注射CFA后6 h开始,注射侧脊髓后角内P75NTR的表达明显上调,III-V层的阳性产物也逐渐增加,这种上调持续到7 d左右达高峰,至14 d逐渐下降。Sortilin在正常脊髓后角浅层仅有较弱阳性产物表达,注射CFA后不同时间点脊髓后角Sortilin的表达无明显差异。结论:CFA能诱导大鼠产生为期2周以上的炎性痛病程;脊髓后角ProBDNF和P75NTR的表达上调可能与炎性疼痛中外周痛觉信号的传导和中枢敏化有关。     

神经生长因子及其高亲和力受体在脊髓损伤大鼠大脑运动皮质及皮质脊髓束的表达

目的探讨脊髓损伤后大脑运动皮质及皮质脊髓束内神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体(TrkA)表达的变化。方法成年SD大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、脊髓损伤(SCI)组。参照Allen重击法,重击SCI组动物T12节段脊髓背侧,顿挫损伤双侧皮质脊髓侧束,按损伤后存活时间将动物分为SCI 1d组、SCI 2d组、SCI 5d组。各组大脑及脊髓切片经ABC法免疫组织化学染色,光镜及电镜观察,并用图像分析技术对结果进行分析。结果脊髓损伤后上述部位酪氨酸蛋白激酶A(TrkA)的表达随SCI后动物存活时间的延长明显上调,电镜观察发现损伤后的皮质脊髓侧束轴浆内有TrkA免疫反应阳性产物积聚,轴膜上亦有免疫反应产物分布,且轴索末端有生芽现象;皮质脊髓侧束的神经纤维内可见串珠状的NGF免疫反应阳性产物,束内NGF阳性胶质细胞亦随动物术后存活时间的延长逐渐增多。结论脊髓损伤可刺激大脑相应区域运动皮质锥体细胞表达TrkA并向其轴突末梢运输定位于轴膜,以摄取损伤局部胶质细胞等产生的NGF,后者借逆向轴浆运输运回胞体,维持锥体细胞的存活及促进其轴突的再生。     

CCK-A及CCK-B受体基因在SD大鼠肺组织中的表达

ＣＣＫ－Ａ及ＣＣＫ－Ｂ受体基因在ＳＤ大鼠肺组织中的表达河北医科大学病理生理学教研室（石家庄０５００１７）丛斌凌亦凌谷振勇河北医科大学分子生物学研究室王俊霞姚玉霞彭郁葱我们先前的研究发现胆囊收缩素（ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎＣＣＫ）有调节离体肺血管...     

BDNF及其受体TrkB在成年恒河猴脊髓的表达

目的观察脑源性神经营养因子BDNF及其高亲合力受体TrkB在成年恒河猴胸髓的表达分布,为成年恒河猴脊髓BDNF、TrkB的功能研究提供形态学依据。方法灌注固定成年雄性恒河猴,取其胸段脊髓制作冰冻切片,用BDNF、TrkB特异性抗体行免疫组织化学SP法染色,观察BDNF、TrkB免疫阳性物质在胸段脊髓的分布。结果成年恒河猴胸髓内均可见BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元,反应产物呈棕黄色颗粒。BDNF和TrkB免疫反应阳性细胞遍及胸髓灰质各板层,在腹角、侧角以及中央管邻近区域均可见阳性神经元,它们的阳性产物主要定位于神经元胞浆中,胞浆着色深,胞浆与胞核的界线清楚。BDNF免疫反应细胞的胞核未见染色,而不同的TrkB阳性细胞其胞核染色不一。结论成年恒河猴胸髓存在BDNF、TrkB的表达,其作用可能与猴脊髓的正常生理功能和损伤后的修复有关。     

雌激素受体在大鼠血管平滑肌细胞中的表达及其调控

目的：观察血管平滑肌细胞(VSMC)中雌激素受体(ER)的表达,研究雌激素和血清(含多种生长因子)对细胞中：ER表达的影响。方法：原位杂交和RT-PCR检测大鼠主动脉中层VSMC中的ERmRNA。分别在有或无他莫昔芬(TAM)(ER拮抗剂)预处理的情况下,免疫细胞化学观察VSMC中的ER蛋白,比较雌二醇(E2)以及新生小牛血清(NCS)对VSMC中ER表达的影响。结果：VSMC中存在ERmRNA和蛋白,E2以及NCS均能上调细胞中ER的表达,TAM能阻断其效应。结论：ER是雌激素作用于VSMC的靶基因之一。     

血管生成素及其受体在腹膜透析腹膜组织中的表达

目的 分析并研究尿毒症腹膜透析大鼠腹膜血管生成素(Ang)及其受体(Tie)的表达情况及影响因素.方法 SD雄性大鼠5/6肾切除术建立尿毒症模型,成模后腹腔内植入腹透管,随机分为尿毒症组(NS组)及腹透组(PD组).尿毒症组每日给予20 ml生理盐水腹腔灌注,腹透组每日给予20 ml 4.25%百特腹透液腹腔灌注,持续6周.对照组(C组)行假手术且不予液体灌注.实验结束取大鼠腹膜组织,观察腹膜血管新生情况;行免疫组化及RT-PCR检测腹膜组织血管生成素及其受体的表达变化.结果 实验表明PD组相对其他两组新生血管数明显增多,NS组新生血管数较C组为多(P均<0.05).免疫组化显示Ang2及其Tie2阳性细胞数PD组相对于C组和NS组明显增加,NS组较C组亦有增加(P均<0.05).RT-PCR显示PD组Ang2 mRNA和Tie2 mRNA表达较NS组和C组明显上调,而NS组高于C组(P均<0.05).结论 尿毒症本身及腹膜透析液均会上调腹膜的血管生成素及其受体表达,且与血管新生密切相关.     

白细胞介素-6及其受体在卵巢组织中的表达

本研究通过检测白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）及其受体在正常卵巢和多囊卵巢综合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）患者卵巢中的表达,测定其在血清中的含量,初步研究IL-6在卵巢组织的分布情况,探索其在卵泡形成发育中的作用及其对PCOS患者排卵障碍的影响。     

雌激素α、β受体在雌性大鼠眼葡萄膜组织中的表达

目的 探讨雌激素α、β受体（ERα、ERβ）在雌性大鼠眼葡萄膜组织的表达。方法 选择青春期SD雌性大鼠22只,采用颈椎脱臼处死大鼠, 取眼球作常规石蜡包埋,连续切片, SP免疫组织化学方法显示ERα、ERβ在葡萄膜组织的表达;采用Tanaka记分法对ERα、ERβ进行定量分析,并设正常大鼠子宫作阳性对照;PBS代替一抗作阴性对照。同时采用放射免疫分析方法检测大鼠血清雌二醇的浓度。结果 ERβ在虹膜基质细胞、虹膜前后两层色素上皮细胞、睫状体非色素上皮和色素上皮、脉络膜各层血管内皮的表达水平主要呈中表达或高表达;ERα则表达不明显。ERβ阳性表达率明显高于ERα,经统计学分析两者间有显著性差异（P＜0.05）。ERα、ERβ免疫阳性反应物呈颗粒状,定位在细胞质或细胞核。正常大鼠血清雌二醇水平经检测含量为(22.13±3.54)ng/L。结论 大鼠葡萄膜组织以ERβ表达为主,雌激素主要通过ERβ信号转导途径对这些组织的功能起调控作用。     

性激素受体在前列腺病变组织中的表达

用抗雄、雌及孕激素受体（ＡＲ、ＥＲ和ＰＲ）的多克隆抗体，采用ＡＢＣ法检测３０例良性前列腺增生（ＢＰＨ）和３０例前列腺癌（ＰＣ）石蜡标本中性激素受体（ＳＲ）的表达。结果显示：ＢＰＨ组和ＰＣ组ＡＲ、ＥＲ和ＰＲ表达的阳性率差异均无显著性，因而不能根据ＡＲ、ＥＲ和ＰＲ阳性率区分ＢＰＨ和ＰＣ。另外，ＡＲ、ＥＲ或ＰＲ阳性者的存活时间均长于ＳＲ阴性者，提示ＳＲ表达与ＰＣ患者内分泌治疗的预后有一定关系，受体阳性率     

诱骗受体1在椎间盘组织中的表达

背景：诱骗受体1输肿瘤坏死因子相关凋亡配体受体,其可能作为诱饵受体生理性阻断细胞凋亡过程。 目的：观察诱骗受体1在突出和正常腰椎间盘组织中的表达。 方法：2010-01/09收集退行性椎间盘患者手术切除的突出椎间盘标本20个及自愿流产的胎儿的正常腰椎间盘标本8个,免疫组化方法检测诱骗受体1蛋白在不同椎间盘组织中的分布。 结果与结论：突出腰椎间盘组织中诱骗受体1阳性表达的髓核和纤维环细胞明显多于正常椎间盘,说明突出椎间盘组织中诱骗受体的表达提高。     

5-HT受体亚型在原代培养大鼠脊髓背角神经元的表达

为探讨脊髓背角内 5 -HT发挥作用的受体类型及其胞内信号转导机制 ,本研究首先利用免疫荧光技术对胎鼠脊髓背角神经元的产率进行了观察 ,再利用反转录 PCR方法观察了 5 -HT受体 14种亚型 m RNAs在原代培养神经元中的表达。原代培养的背角神经元生长状态良好 ,存活时间达到 14～ 2 1d。对培养的背角细胞用神经元特异性标志物—神经细胞核蛋白 (Neu N)进行免疫荧光检测的结果表明 ,神经元的产率超过 90 % ;用 PCR方法在培养的背角神经元中检测到了 5 -HT1 A、5 -HT1 B、5 -HT1 D、5 -HT1 F、5 -HT2 A、5 -HT2 C、5 -HT3、5 -HT4 、5 -HT5A、5 -HT5B、5 -HT6 和 5 -HT7等受体亚型 m RNAs的表达。但上述各受体亚型的表达水平存在差异 ,未检测到 5 -HT1 E和 5 -HT2 B受体亚型 m RNAs的表达。结果表明 ,本研究建立的实验方法可满意地获得原代培养脊髓背角神经元 ;这些神经元不但表达多种受体亚型 ,而且表达类型与以往在成年大鼠脊髓背角观察到的表达状况基本一致。上述结果为进一步开展 5 -HT作用机制的体外研究奠定了基础。     

大鼠脑组织中CNTF基因克隆及其探针制备

目的　克隆大鼠CNTF基因并制备地高辛标记的CNTF探针。方法　采用RT PCR法 ,从大鼠脑组织mRNA中扩增CNTF基因ORF区片段 ,克隆入T载体 ,并经序列测定。以地高辛素标记CNTF基因片段为探针 ,对成年大鼠脊髓组织切片进行原位杂交。结果　RT PCR法扩增出一特异产物与预期长度 6 16bp相符 ,序列测定与CNTF基因 10 0 %同源。原位杂交显示阳性信号出现在成年大鼠脊髓白质的前索及侧索的周边部分 ,为杵棒形和三角形带有纤细突起的胶质细胞。结论　采用RT PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的CNTF基因克隆 ,地高辛标记的CNTF探针原位杂交显示正常大鼠脊髓白质的部分胶质细胞中表达CNTFmRNA。     

神经生长因子及其受体在前列腺癌中的表达

目的探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体TrkA、p75在前列腺增生和前列腺癌中的表达。方法采用免疫组织化学SABC法检测前列腺良性增生10例、高分化8例、中分化14例和低分化23例石蜡包埋组织中NGF和TrkA、p75的表达。结果NGF和TrkA在前列腺增生、高分化癌、中分化癌、低分化癌中的均有表达;而p75在前列腺增生全部表达、高分化癌(8/4)、中分化癌(14/6)、低分化癌(23/3)中的表达呈逐渐降低趋势,其差异有显著性(p<0.05),前列腺增生与高分化癌、中分化癌、低分化癌相比差异均有显著性(p<0.05)。结论NGF和TrkA的表达与前列腺增生和前列腺癌进展无关。p75与前列腺癌恶性进展有关,p75表达减少在前列腺癌过程中起着重要的作用。