查菲埃利希体分子生物学研究进展

人类埃利希体病是由埃利希体（Ehrlichia）引起的人类疾病。是一种新发现的蜱传人兽共患病^[1]。目前,世界上已经发现了3种人类埃利希体病。即：查菲埃利希体(Ehrlichia chaffeensis)引起的人类单核细胞性埃利希体病(Human monocytic Ehrlichiosis,HMG）;类马埃利希体（E.e-qui-like organism）或称人类粒细胞性埃利希体引起的人类粒细胞性希体病（Human Granulocytic Ehrlichia,HGE）和由腺热埃利希体（E.sennetsu）引起的人类腺热（亦称传染性单核细胞增多症）^[2]。     

广州市郊鼠中检出埃立克体样微生物

目的　了解曾经两次暴发犬埃立克体病流行的广州市郊某养犬基地野生啮齿动物感染埃立克体情况。方法　用 16SrRNA基因埃立克体属特异引物对抓捕的动物全血及脾脏样本进行PCR检测 ,阳性样本克隆测序 ,所得序列与Gen Bank中注册的核苷酸序列进行比较。结果　在所抓捕的 2 6只野生啮齿动物中 ,3份褐家鼠全血样本和一份脾样本检出埃立克体特异阳性带。序列测定结果显示 ,这 3只鼠所携带的埃立克体样微生物基因完全一致。该基因与核酸数据库中的埃立克体Schotti株有最大同源性 (99 0 4 % )。结论　此次发现的埃立克体与该基地流行的犬埃立克体Gzh982株和扁平埃立克体Gzh981株有很大差异。该菌在流行病学上的意义有待进一步研究。     

三大洲家蝇体内检出幽门螺杆菌DNA

大部分人幽门螺杆菌(Ｈｐ)感染的来源不明,一般认为是粪口和口口传播。本文作者研究显示在实验室条件控制下可使Ｈｐ在苍蝇体内移生,表明摄入被苍蝇排泄物污染的食物或由苍蝇直接污染粘膜表面均可导致Ｈｐ感染。本文作者研究出一种特异且敏感的ＰＣＲ方法,用以检出野生家蝇(Ｍｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａ)体内的Ｈｐ异柠檬酸盐脱氢酶(ｉｃｄ)ＤＮＡ。结果从乡村、农业区和都市区捕获的野生家蝇可检出ｉｃｄ基因,在北美、波兰和埃及的检出率分别为10/97组(每组5只家蝇)、8/14组和3/9组。家蝇可以从环境中获得Ｈｐ感染,因此该菌ＤＮＡ在家蝇消…     

HBsAg阴性/抗-HBc阳性供血员抗-HBc IgM和HBV DNA血清流行病学调查

了解ＨＢｓＡｇ阴性、抗 ＨＢｃ阳性供血员ＨＢＶ感染状况 ,探讨改进供血员ＨＢＶ筛检标志。ＥＬＩＳＡ法检测 4 31名ＨＢｓＡｇ阴性供血员抗 ＨＢｃ ,阳性者检测抗 ＨＢｃＩｇＭ (ＥＬＩＳＡ法 ,Ｓ/Ｎ≥ 2 .1为阳性 )和ＨＢＶＤＮＡ(ＰＣＲ法 )。结果表明 ,196名 ( 4 5.5% )供血员抗 ＨＢｃ阳性 ,抗 ＨＢｃＩｇＭ和ＨＢＶＤＮＡ的检出率分别为 32 .1% ( 63/ 196)和 14.8% ( 2 9/ 196) ,抗 ＨＢｃＩｇＭ阳性和阴性者ＨＢＶＤＮＡ检出率分别为 39.7% ( 2 5/ 63)和3.0 % ( 4 / 133) (Ｐ <0 .0 0 1) ,抗 ＨＢｃＩｇＭ和ＨＢＶＤＮＡ的阴阳…     

恶性疟原虫海南株MESA基因的序列分析

成熟疟原虫感染红细胞表面抗原 (ｍａｔｕｒｅｐａｒａｓｉｔｅ ｉｎｆｅｃｔｅｄｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓｕｒｆａｃｅａｎｔｉｇｅｎ ,ＭＥＳＡ)又称恶性疟原虫红细胞膜蛋白 2 (Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ 2 ,ＰｆＥＭＰ2 )或ＰＰ30 0 ,是成熟期疟原虫合成的磷蛋白。它通过小泡运送至感染的红细胞膜骨架上[1 ,2 ] ,与红细胞蛋白 4 .1以非共价方式紧密结合。ＭＥＳＡ包含 7个明显的重复区 ,重复区占全部氨基酸残基的 60 % [3] 。至今 ,ＭＥＳＡ在感染的红细胞中的功…     

应重视对隐匿性乙型肝炎的诊断

ＨＢｓＡｇ阴性不能排除ＨＢＶ感染已经成为共识 ,尤其在ＨＢＶ感染的高发地区。自 1978年Ｈｏｏｆｎａｇｌｅ等首次报告抗 ＨＢｃ阳性的供血者可导致受者ＨＢＶ感染以来[1] ,大量文献报道证明这种现象确实存在 ,是临床不明原因慢性肝炎的常见病因。ＨＢｓＡｇ阴性的ＨＢＶ感染文献常称为隐匿性 (ｏｃｃｕｌｔ)、沉默性 (ｓｉｌｅｎｔ)或潜在性 (ｌａｔｅｎｔ)ＨＢＶ感染 ,是指血清ＨＢｓＡｇ阴性 ,而应用ＰＣＲ技术检测血清和 (或 )肝组织中ＨＢＶＤＮＡ阳性。可以分为两类 ,一是可检出血清ＨＢＶ标志 ,包括抗 ＨＢｓ(+ )、抗 ＨＢｃ(+ …     

黑龙江全沟硬蜱中检测出类似人粒细胞埃利希体的病原体DNA

目的：寻找我国蜱中人粒细胞埃利希体感染存在的病原学证据。方法：应用从人粒细胞埃列希体16 rRNA基因构建的特异引物进行半套式PCR,检测蜱标本中埃利希体DNA。然后对PCR扩增产物进行克隆和序列测定,与已知序列进行同源性比较。结果：从黑龙江采集的全沟硬蜱（Ixodes persulcatus）中扩增出特异DNA片段,计算最小阳性率为0.8％。对919bp的扩增产物进行序列分析,证实为埃利希体DNA,与美国人粒细胞埃利希体分离株对应序列比较,相差4个核苷酸。结论：这是首次证明我国有类似人粒细胞埃利希体的病原体存在。表明我国北方林区可能存在人粒细胞埃利希体感染垢自然疫源地。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌院内感染情况及耐药性分析

超广谱 β 内酰胺酶 (ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ β ｌａｃｔａｍａｓｅｓ ,ＥＳＢＬｓ)是一类由质粒介导的对包括第 3代头孢菌素和氨曲南在内的 β 内酰胺类广谱抗生素具有强大水解作用的酶类 ,主要由大肠埃希菌和克雷伯菌产生[1] 。携带产ＥＳＢＬｓ耐药基因的质粒往往同时还带有对其它抗生素如氨基糖甙类、喹诺酮类的耐药基因而形成多重耐药。为了解产ＥＳ ＢＬｓ细菌的院内感染流行情况及耐药性 ,我们对我院 1999- 0 1～ 2 0 0 0 - 12临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌中ＥＳ ＢＬｓ阳性菌株进行了分析 ,报告如下1　材料和方法1 …     

新一代抗病毒制剂——MAP30

从成熟的苦瓜种子中分离纯化出一种具有抑制ＨＩＶ 1感染和复制的植物蛋白质ＭＡＰ30 (ＭｏｍｏｒｄｉｃａＡｎｔｉ ＨＩＶＰｒｏｔｅｉｎ) ,该蛋白质的相对分子质量大小为 30× 10 3。通过检测 :( 1)ＣＥＭ ｓｓ单层细胞中合胞体的数量 ;( 2 )病毒核心蛋白Ｐ2 4的表达 ;( 3)ＨＩＶ 1在Ｈ9细胞中反转录酶的活性 ,观察了该蛋白质对ＨＩＶ 1感染及复制的抑制作用。研究结果表明 ,成熟的苦瓜种子经缓冲提取液粗提、硫酸铵沉淀 ,再经ＤＥＡＥ ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ 6Ｂ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ75ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ和ＣＭ52进一步纯化后 ,通过Ｓ…     

迷走神经对心房肌电重塑恢复期影响的实验研究

近年来 ,自主神经系统尤其迷走神经对心房颤动电重塑的影响越来越受到重视。我们通过分析心率变异性 (ＨＲＶ)反映自主神经的变化 ,分析心房有效不应期 (ＡＥＲＰ)及ＡＥＲＰ离散度反映心房电重塑的变化 ,来观察迷走神经对电重塑恢复期的影响。1 .材料与方法 :成年杂种犬 8只 ,雌雄不拘 ,体重 1 9～ 2 6ｋｇ ,以 30ｍｇ/ｋｇ剂量的戊巴比妥钠腹腔麻醉 ,气管插管 ,麻醉后右侧颈部备皮 (1 2ｃｍ× 1 2ｃｍ) ,胸壁备皮 (2 0ｃｍ× 2 0ｃｍ)。采用美国产Ｍａｒｓ30 0 0型心电分析系统及其ＨＲＶ分析软件来分析ＨＲＶ参数。所有犬均于上午 8～ 9…     

实验性顿抑心肌的微循环改变

心肌顿抑是一种可逆性心肌缺血再灌注损伤 ,其具体发生机制尚未完全明了。顿抑心肌是否存在微循环障碍 ,目前尚有争议。本研究应用静脉心肌声学造影 (ｍｙｏｃａｒｄｉａｌｃｏｎｔｒａｓｔｅｃｈｏｃａｒｄｉｏｇｒａｐｈｙ ,ＭＣＥ)在犬心肌顿抑模型中观察不同缺血时间后再灌注心肌微循环改变 ,并检测冠状静脉窦血乳酸浓度 ,以探讨顿抑心肌内微循环改变的机制。一、材料与方法1.动物实验方法 :体重 13～ 18ｋｇ的雄性杂种犬随机分入顿抑Ｓ组、顿抑Ｌ组和假手术组 ,以各组成功完成犬 6只为目标。动物模型建立、ＭＣＥ和图像分析、心肌标本…     

Preliminary study on measure men of esophageal variceal pressure with an endoscopic balloon technique

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ :Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓｏｆｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆｅｓｏｐｈｇｅａｌｖａｒｉｃｅａｌｐｒｅｓｓｕｒｅ(ＶＰ)ｗｉｔｈａｎｅｎｄｏ ｓｃｏｐｉｃｂａｌｌｏｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ .Ｍｅｔｈｏｄｓ:Ｔｈｅｖａｒｉｃｅａｌｐｒｅｓｓｕｒｅｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃｂａｌｌｏｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ (ＥＶＭＥｓｏｐｈａｇｅａｌＶａｒｉｘＭａｎｏｍｅｔｅｒ)ｉｎ 2 6ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｏｒｔａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ,ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ ,ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｌｉｖｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ .ＴｈｅＥＶＭｍａｉｎｕｎｉｔｗａｓｃｏｎｎｅｃｔｅｄｔｏａｒｅｍｏｔｅｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｔｏａｃａｔｈｅｔｅｒｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｉｎｔｏｔｈｅｗｏｒｋｉｎｇｃｈａｎｎｅｌｗｈｉｃｈｅｎｄｅｄｉｎａｂａｌｌｏｏｎｆｉｘｅｄａｔｔｈｅｔｉｐｏｆｔｈｅｅｎｄｏｓｃｏｐｙ .Ｏｎｃｅｔｈｅｖａｒｉｃｅｓｗｅｒｅｃｌｅａｒｌｙｖｉｓ ｉｂｌｅ ,ｔｈｅｂａｌｌｏｏｎｗａｓｐｒｏｇｒｅｓ...     

415例HBV感染的不同血清学指标组合的HBVDNA的检测

了解ＨＢＶ感染的不同血清学指标组合的相应的ＨＢＶＤＮＡ阳性情况 ,以指导临床。对 4 15份不同肝病临床类型的血清同时行ＥＬＩＳＡ方法测定ＨＢＶ标志及普通ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ。结果表明 ,ＨＢｓＡｇ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率为 77.8% ( 2 70 /34 7) ,ＨＢｓＡｇ阴性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率为 19.1% ( 13/68) ,两者差异显著 (Ｐ <0 .0 0 1)。其中 153例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｃ阳性血清 ,ＨＢＶＤＮＡ全部阳性 ,阳性率为 10 0 %。ＨＢｓＡｇ阳性、抗 ＨＢｅ和抗 ＨＢｃ阳性组血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率为 66.9% ( 79/118)…     

急性胆石性胰腺炎内镜治疗体会

1997年 5月～ 2 0 0 0年 10月 ,我们对 2 8例急性胆石性胰腺炎 (Ａｃｕｔｅｇａｌｌｓｔｏｎｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ,ＡＧＰ)患者进行了内镜逆行胰胆管造影 (Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｃｈｏｌａｎｇｉｏｐａｎｃｒｅａｔｏｇｒａｐｈｙ ,ＥＲＣＰ)检查 ,并进行了经鼻胆管引流 (Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃｎａｓｏ ｂｉｌｌａｄｒａｉｎａｇｅ ,ＥＮＢＤ)及经内镜乳头括约肌切开术 (Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃｓｐｈｉｎｃｔｅｒｏｔｏｍｙ ,ＥＳＴ)等内镜治疗 ,取得了较好的临床疗效。1　资料和方法1.1　一般资料　本组 2 8例中…     

Preliminary study on measure men of esophageal variceal pressure with an endoscopic balloon technique

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ :Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓｏｆｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆｅｓｏｐｈｇｅａｌｖａｒｉｃｅａｌｐｒｅｓｓｕｒｅ(ＶＰ)ｗｉｔｈａｎｅｎｄｏ ｓｃｏｐｉｃｂａｌｌｏｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ .Ｍｅｔｈｏｄｓ:Ｔｈｅｖａｒｉｃｅａｌｐｒｅｓｓｕｒｅｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃｂａｌｌｏｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ (ＥＶＭＥｓｏｐｈａｇｅａｌＶａｒｉｘＭａｎｏｍｅｔｅｒ)ｉｎ 2 6ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｏｒｔａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ,ａｔｔ…     

猪囊尾蚴cDNA表达文库构建及抗原基因筛选

采用Ｑｕｉｃｋ Ｐｒｅｐ ｍ ＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 试剂盒提取猪囊尾蚴ｍ ＲＮＡ;Ｔｉｍ ｅ－ Ｓａｖｅｒ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒反转录合成双链ｃＤＮＡ,并在末端加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩａｄａｐｔｏｒ,修饰后的ｃＤＮＡ 与λｇｔｌｌＥｃｏＲＩ臂连接,体外包装为λ噬菌体颗粒;感染Ｅ．ｃｏｌｉＹ１０９０ 构建成功库容量为２×１０６、重组率为８０％ 的ｃＤＮＡ表达文库。利用兔抗猪囊尾蚴虫体抗原和囊液抗原血清分别对一部分文库进行免疫印迹筛选,分别获得８ 个阳性克隆。提取阳性克隆ＤＮＡ,利用ＰＣＲ法从重组噬菌体ＤＮＡ中扩增出ｃＤＮＡ片段,长度自４００—９００ｂｐ。本文工作为研制猪囊尾蚴核酸疫苗打下了基础。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅲ.双抗体夹心ELISA法检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的现场评价

本文报道用槟榔碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果.73只受试犬中有16只对槟榔碱无反应.在导泻成功的57只犬中粪抗原阳性者11只阳性率19.2%.其中驱虫阴性的38只犬中粪抗原阳性者仅2只(5.3%).在10只驱出细粒棘球绦虫的家犬中8只粪抗原阳性.5只驱出泡状带绦虫的犬中粪抗原阳性者1只,但反应强度低.粪抗原的反应强度与细粒棘球绦虫的感染强度呈正相关(r=0.94).证明本法可用于家犬细粒棘球绦虫感染的调查.     

换代犬与阻断结膜吸吮线虫病流行关系的研究

冒的为了探寻控制结膜吸吮线虫病流行的有效措施。方法采取对现症病人所在村的传染源犬、传播媒介冈田氏饶眼果蝇(A.o)感染结膜吸吮线虫(T.c)进行调查和实行换代犬后的犬及A.o感染T.c追踪调查,将前后调查结果进行比较。结果 1981～1992年安徽淮北地区连续出现T.c病人,这时对宿县芦岭、泗县大庄、五河县城郊病人所在村犬进行了检查,当时感染T.c分别占63.6％(14/22)、75.0％(12/16)和86.1％(19/231)。同时重点检查了五河城郊A.o蝇737只,阳性12只,其感染率为1.6％。其中个别A.o带有T.c感染期幼虫达20余条。于1998年即实行换代犬之后 5年,再查五河城郊及泗县大庄家犬计31只,全部阴性。此期间无新病例。同时查五河城郊A.o果蝇206只,也全部阴性。表明换代犬已失去原先犬群那种强力传染源作用。于 1998～1999年在合肥郊区一新病例居住村,对犬进行检查,犬感染T.c占79.2％(19/24),查犬时即取出虫体,为犬治病。此时进行健康教育,群众易于接受,采用换代大及拴养犬措施,预防该病。于2000年再去检查该村犬12只,阳性8只,占66.7％,犬的感染率及感染度虽较前2年有所降低,但其传染源作用的下降,明显不如其他实行群众性换代犬措施地区的效果好。结论对结膜吸吮线虫病流行区,在健康教育基础上,果断实行换代大措施,是阻断本病传播的最有效方法。     

碱性碱酸酶单克隆抗体治疗血管源性脑水肿的实验研究

血管源性脑水肿 (ｖａｓｏｇｅｎｉｃｃｅｒｅｂｒａｌｅｄｅｍａ ,ＶＣＥ)是指血脑屏障通透性增高造成毛细血管内血浆蛋白与水分渗出 ,引起脑组织水肿。其特征是脑白质水肿明显。本研究从酶屏障的角度观察抗碱性磷酸酶单克隆抗体 (ＡＡＰ)治疗ＶＣＥ ,并与甘露醇进行比较研究 ,为临床药物治疗ＶＣＥ提供一个新的有效方法。1　材料和方法取普通级Ｗｉｓｔａｒ鼠 40只 ,随机分为 4组 :正常组、脑水肿组、甘露醇组、ＡＡＰ组 ,各组 10只。另取 2 0只普通级Ｗｉｓｔａｒ鼠 ,按上述分组 ,每组 5只 ,做Ｅｖａｎ’ｓｂｌｕｅ(ＥＢ)通透性测定。Ｗ…     

附红细胞体病对某警犬群及有关人员感染调查

附红细胞体 (ＥＰｅｒｙｔｈｒｏｚｏｏｎ)所致的附红细胞体病(ＥＰｅｒｙｔｈｒｏｚｏｏｎｓｉｓ) ,作为一种人畜共患的传染病 ,自 80年代后越来越引起国内外有关方面的关注 ,已有近 30个国家和地区报告了该病的发生〔1〕。笔者于 1995年在对某警犬群作年度健康普查时 ,发现有 5条犬已感染了附红细胞体病 ,结合临床治疗 ,对这个犬群的全部警犬进行了连续 3年的监测与调查 ,并且对与之有关的工作人员作了感染情况检查。1　对象与方法1 1　对象1 1 1　犬群　某警犬群中的种犬、孕犬、新生仔犬、幼犬及训练犬 ,累计 417条 ,全部为德国牧羊犬。…