GeneXpert Mtb/RIF检测技术在结核病诊断中的应用评价

目的 评估GeneXpert Mtb/RIF检测技术对肺结核诊断和耐利福平肺结核筛查的效果,为筛选最佳实验室检测方法提供依据。方法 收集三亚市定点医院结核病门诊2015年5月—2016年12月243例临床诊断为肺结核的痰标本,分别进行涂片镜检、痰培养和GeneXpert Mtb/RIF检测,分析三种方法的敏感度和特异度。以比例法药敏为标准,分析GeneXpert检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 涂片镜检与GeneXpertMtb/RIF对比,GeneXpertMtb/RIF检测结核菌的敏感度为93.7%,特异度为28.9%,GeneXpertMtb/RIF检测与涂片镜检一致率为83.5%。痰培养与GeneXpertMtb/RIF对比,GeneXpert检测结核菌的敏感度为96.7%,特异度为56.6%,GeneXpert检测与痰培养的一致率为91.8%。利福平耐药大多与rpoB基因突变有关,GeneXpertMtb/RIF检测利福平耐药与比例法药敏一致率为98.1%, 敏感度为88.9%,特异度为98.9%,并且可检测出利福平耐药基因位点。结论 GeneXpert Mtb/RIF 检测技术适用于结核分枝杆菌及耐药结核分枝杆菌的快速筛查,在痰涂片和痰培养上补充GeneXpertMtb/RIF检测可提高病原学检出率,尽早发现耐多药病患。     

五种检测方法在艾滋病合并结核双重感染诊断中的价值

目的探讨抗酸染色涂片法(AFS)、MGIT960液体培养法、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测体系[(GeneXpert MTB/RIF)X检测法(Xpert MTB/RIF)]、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)及结核抗体(TB-Ab)方法在艾滋病合并结核诊断中的价值。方法对67例艾滋病合并结核患者分别进行AFS、MGIT960液体培养、Xpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB及TB-Ab检测。结果 AFS、MGIT960液体培养、Xpert MTB/RIF、T-SPOT.TB和TB-Ab 5种检测方法的阳性检出率分别为34.5%、59.7%、65.7%、74.6%和25.4%。以MGIT960液体培养为标准,Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值以及Kappa值分别为95.0%、81.5%、88.4%、91.7%、0.78和87.5%、44.4%、70.0%、70.6%、0.34。以液体药敏为标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为88.9%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为96.7%,Kappa值为0.92。结论 Xpert MTB/RIF与其他4种方法相比具有简便快速、敏感性高、特异性强等优势,是临床艾滋病合并结核双重感染快速诊断的有效方法。     

结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的 评价结核分枝杆菌rpoB基因和突变(GeneXpertMTB/RIF)检测技术对结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的诊断价值。方法 回顾性分析2019年1月至2020年6月陕西省结核病防治院收治的同时采用抗酸杆菌(AFB)涂片镜检(简称“AFB涂片”)、BECTECMGIT960液体培养(简称“MGIT960培养”)和GeneXpertMTB/RIF(简称“GeneXpert”)检测的142例疑似TBM患者,其中确诊TBM患者82例、非TBM患者60例。以临床确诊TBM患者为参考标准评价AFB涂片、MGIT960培养和GeneXpert检测对TBM的诊断效能。结果 AFB涂片、MGIT960培养和GeneXpert检测的敏感度分别为3.7%(3/82),24.4%(20/82)和40.2%(33/82);特异度均为100.0%(60/60);符合率分别为44.4%(63/142),56.3%(80/142)和65.5%(93/142)。结论 AFB涂片技术在诊断TBM时的敏感度很低,MGIT960培养检测技术在诊断TBM时的敏感度较高,而GeneXpert检测技术在诊断TBM时的敏感度更高。     

GeneXpert MTB/RIF在检测系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用

目的 评价GeneXpert MTB/RIF系统在诊断系统性自身免疫病（SAD）合并肺结核（MTB）患者中的应用价值。方法 对临床诊断和影像学检查确诊的350例系统性自身免疫病合并肺结核患者和50例系统性自身免疫病非结核对照组患者的痰标本进行GeneXpert MTB/RIF检测,评价GeneXpert MTB/RIF诊断性能,并与结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法等比较,判断优劣以及半定量检测结核菌的效能。以结核菌液体药敏法为标准,分析GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 GeneXpert MTB/RIF、结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法4种方法检测的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,特异度分别为100.00%,92.00%,84.00%,100.00%。GeneXpert MTB/RIF系统灵敏度与T-SPOT比较差异无统计学意义（χ² =4.21,P>0.05）,高于抗酸涂片染色法（χ² =36.60,P<0.05）。GeneXpert MTB/RIF检测利福平(RIF)耐药性的灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。结论 GeneXpert MTB/RIF与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸涂片染色法等联合,可显著提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。     

GeneXpert Mtb/RIF检测技术在结核病诊断中的应用探讨

目的分析Gene Xpert Mtb/RIF检测技术快速诊断肺结核及利福平耐药的可靠性。方法对2014年7月~2015年12月某院门诊纳入的92例肺结核可疑患者送检的痰标本进行涂片镜检,同时开展固体培养和Gene Xpert Mtb/RIF检测。对比3种检测方法的符合性和一致性。结果对92份涂片检测标本涂片和培养,Gene Xpert Mtb/RIF检测结果敏感度、特异度分别为88.24%、69.33%和78.95%、85.18%。与临床诊断比较,Gene Xpert Mtb/RIF检测结核病敏感度、特异度分别为48.05%、93.33%。在进行传统利福平药敏试验的31份标本中,Gene Xpert Mtb/RIF检测结核病利福平耐药敏感度、特异度分别为100.00%、96.55%。结论 Gene Xpert Mtb/RIF法能够快速初步检出结核分枝杆菌,对发现结核病患者和耐药结核病患者具有重要价值。     

四种检测方法在结核病诊断中的比较

目的 比较分析MGIT960液体培养法、结核/非结核分枝杆菌核酸检测(PCR-荧光探针法)、Xpert MTB/RIF和直接涂片镜检在结核病诊断中的应用。方法 收集我院2019年5～12月临床上疑似为结核病患者的各类标本。将疑似结核病患者2天内所有的标本混匀后进行直接涂片镜检,然后平均分装为3份,进行MGIT960液体培养、PCR-荧光探针法和Xpert MTB/RIF。结果 2019年5～12月间总共收集了我院710份疑似结核病患者的各类标本。直接涂片镜检、PCR-荧光探针法、MGIT960液体培养和Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌的阳性率分别为12.0%、18.7%、21.4%和24.8%。以临床诊断作为参考标准时,直接涂片法、PCR-荧光探针法、MGIT960液体培养和Xpert MTB/RIF检出结核分枝杆菌的灵敏度分别为40.2%、60.3%、78.4%和70.1%,而特异度分别为98.6%、96.9%、100.0%和92.2%,且四种方法组间比较均具有统计学差异。结论 四种临床检测方法在结核病诊断中各有优缺点,联合应用可以更好的诊断、治疗和监测结核病。     

不同类型标本中GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的分析

目的 分析比较不同类型标本中GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的效能,评价GeneXpert MTB/RIF在肺及肺外结核诊断中的应用价值。方法 以2019年1月1日—2020年12月31日西安市胸科医院7 687例BACTEC MGIT 960培养（简称“960液体培养”）阳性的标本为研究对象。以960液体培养为金标准,评价GeneXpert MTB/RIF在不同类型标本中检测结核分枝杆菌效能;以微孔板法药敏试验为金标准,评价GeneXpert MTB/RIF在不同类型标本中检测利福平耐药性的效能。结果 GeneXpert MTB/RIF在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液、脓液及组织中检测出结核分枝杆菌的阳性率分别为：75.1%（653/869）、82.1%(1 093/1 332)、57.3%(110/192)、80.0%(60/75)、77.3%（34/44）,差异具有统计学意义（χ²=64.100,P<0.001）;以微孔板法药敏试验为金标准,GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌利福平耐药性的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别为：95.3%、95.2%、74.9%、99.3%、0.81;以微孔板法药敏试验为金标准,在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液、脓液及组织标本中GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药性的灵敏度、特异度、Kappa值分别为：94.6%、95.1%、0.83;95.1%、95.2%、0.78;100%、97.3%、0.89;100%、92.3%、0.73;100%、90.9%、0.86。结论 GeneXpert MTB/RIF在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液、脓液及组织标本中检测结核分枝杆菌均有较高的灵敏度,可作为检测结核分枝杆菌的有效方法;GeneXpert MTB/RIF在痰标本、肺泡灌洗液、浆膜腔积液（包含胸水、腹水、脑脊液）、脓液及组织标本中检测结核分枝杆菌利福平耐药性准确度较高。     

Xpert MTB/RIF在疑似淋巴结结核患者中诊断价值的研究

目的：探讨Xpert MTB/RIF技术在疑似淋巴结结核患者中的诊断价值。方法：连续收集2016.4-2018.4在我院就诊的100例初诊疑似淋巴结结核患者的淋巴结标本,分别应用Xpert MTB/RIF、病理检查及BACTEC MGIT 960液体快速培养对样本标本进行检测,以临床综合诊断为金标准,计算Xpert MTB/RIF方法检测结核分枝杆菌的敏感度和特异度。评估Xpert MTB/RIF与病理检查及BACTEC MGIT 960液体快速培养诊断效能。以药敏试验为金标准,计算Xpert MTB/RIF检出利福平耐药的敏感度。结果：100例疑似病例中最后临床确诊88例淋巴结结核。以最后临床确诊的88例淋巴结结核病例为金标准,Xpert检测、病理及960液体培养检出结核分支杆菌的敏感度分别为95.45%（84/88）,69.32%(61/88)和 23.86%(21/88),特异度为100%（12/12）,100%(12/12)及91.67%（11/12）。Xpert检测的敏感度明显高于病理（χ2=20.711,P＜0.01）和960快速培养（χ2=93.701,P＜0.01）。在药敏试验证实的5例利福平耐药中,Xpert全部检测出rpoB基因突变,检测敏感度为100%（5/5）。结论：Xpert MTB/RIF方法在诊断淋巴结结核中具有较高的诊断效能,尤其是在病理疑似和菌阴性淋巴结结核的诊断中具有特殊优势。     

脑脊液环介导等温扩增和GeneXpert MTB/RIF在结核性脑膜炎早期诊断中的效能分析

目的分析和比较脑脊液环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)和GeneXpert MTB/RIF(简称GeneXpert)在结核性脑膜炎早期诊断中的效能。方法选取沈阳市胸科医院2018年6月～2019年6月疑诊结核性脑膜炎的患者189例,采集患者抗结核治疗前的脑脊液标本分别进行液体培养(MGIT)、LAMP和GeneXpert检测。以液体培养法(MGIT)为标准,计算2种检测技术在结核性脑膜炎诊断中的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率、Kappa值。结果 LAMP的敏感度为79.6%,特异度为94.3%,阳性预测值为83.0%,阴性预测值93.0%,一致率90.5%,Kappa值=0.749。GeneXpert的敏感度为98.0%,特异度为88.6%,阳性预测值为75.0%,阴性预测值为99.2%,一致率为91.0%,Kappa值=0.787。结论 LAMP和GeneXpert对结核性脑膜炎检测的灵敏度较液体培养(MGIT)明显提高,可以在一定程度上提高临床医生对疑似结核性脑膜炎患者的诊治能力,值得在基层结核病院实验室广泛推广。     

微孔板变色硅胶显色法检测结核分枝杆菌利福平耐药性

目的 探讨微孔板变色硅胶显色法快速检测利福平(RIF)耐药结核分枝杆菌(MTB)的临床应用价值.方法 对江苏省南通市第六人民医院结核病实验室保存的50株MTB临床分离株用微孔板变色硅胶显色法检测RIF耐药性,并与Bactec MGIT960作比较.再对40份临床涂阳痰标本使用微孔板变色硅胶显色法与Bactec MGIT960同时进行RIF药敏检测,并比较检测结果的灵敏度、特异度、准确度.结果 微孔板变色硅胶显色法最佳接种菌量为10-3 mg/mL、检测最佳时间为7～10 d、RIF的最低抑菌浓度(MIC)判断界值为1.00μg/mL.以Bactec MGIT960检测法为金标准,微孔板变色硅胶显色法对涂阳痰标本RIF药敏检测灵敏度达94.12％,特异度为100％,准确度为97.37％.结论 微孔板变色硅胶显色法可直接检测痰标本中MTB对RIF的药物敏感性.     

Xpert MTB/RIF对初治涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液检测的研究

目的 探讨Xpert MTB/RIF检测支气管肺泡灌洗液对初治涂阴肺结核的早期快速诊断价值。方法 对南通市第六人民医院2015年6月—2018年1月连续三次痰涂片阴性的疑似初治肺结核住院患者332例,在抗结核治疗前行支气管镜检查,收集支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,行结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF检测,比较三种方法的阳性率,并分别以培养阳性及临床诊断为标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果 共有279例初治涂阴肺结核和53例非肺结核患者入组,279例初治涂阴肺结核的BALF检测结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF阳性率分别为2.51%、25.81%及50.90%,Xpert MTB/RIF阳性率明显高于涂片法及培养法,差异有统计学意义。以MGIT960培养阳性为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为98.61%（71/72),特异度为100%（53/53）;阳性预测值为100.00%（71/71）,阴性预测值98.15%（53/54)。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为50.9%（142/279),特异度为100%（53/53）。阳性预测值为100%（142/142）,阴性预测值27.89%（53/190)。以DST 结果为金标准,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为 87.5％,98.44％,Xpert MTB/RIF与 DST两种方法检测利福平耐药的一致率达到 97.22％。且检测完成时间仅需2 h。结论 BALF中Xpert MTB/RIF检测敏感度、特异度均较高且能判断是否对利福平耐药,对初治涂阴肺结核有较大的早期快速诊断价值。     

荧光定量PCR在结核分枝杆菌快速诊断中的研究

目的 在痰液标本中,探讨荧光定量PCR技术快速检测结核分枝杆菌应用的诊断价值。方法 选取210例初诊的疑似结核病患者的痰液标本,分别进行痰涂片、MGIT960液体培养以及荧光定量PCR的检测,其中103例标本还进行了Xpert MTB/RIF检测,通过比较来分析荧光定量PCR在检测结核分枝杆菌方面的敏感度和特异性。结果 荧光定量PCR方法从痰液中检出结核分枝杆菌的阳性率高达28%,显著高于痰涂片15.2%的检出率,并且与结核培养的30.9%检出率相接近。以MGIT960液体培养为金标准,荧光定量PCR方法检测痰液标本中的结核分枝杆菌的敏感度和特异度分别为67.7%、 89.7%,阳性预测值和阴性预测值分别为74.6%和86.1%,两者之间差异没有统计学意义。将荧光定量PCR方法与Xpert MTB/RIF诊断方法相比较,分析发现荧光定量PCR方法的敏感度和特异度分别为85.9%、94.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为96.5%和80.4%,两者之间差异没有统计学意义。结论 荧光定量PCR方法在检测结核分枝杆菌时具有较好的敏感度和特异度,效果优于传统的痰涂片方法,并且与Xpert MTB/RIF方法具有较好的一致性。荧光定量PCR检测成本较低,且结果准确,在快速检测结核菌方面具有比较好的应用前景。     

Comparison of Two Molecular Assays For Detecting Smear Negative Pulmonary Tuberculosis

Objective To compare the performance of MTBDRplus V2 and Xpert MTB/RIF for detecting smear negative pulmonary tuberculosis (PTB).
Methods Clinical PTB suspects were enrolled consecutively in Anhui Chest Hospital and Xi’an Chest Hospital from January to December in 2014. The sputum samples of smear negative PTB suspects were collected and decontaminated. The sediment was used to conduct MTBDRplus V2, Xpert MTB/RIF and drug susceptibility test (DST). All the samples with discrepant drug susceptibility result between molecular methods and phenotypic method were confirmed by DNA sequencing.
Results A total of 1973 cases were enrolled in this study. The detection rates ofMycobacterium tuberculosiscomplex (MTBC) by MTBDRplus V2 and Xpert MTB/RIF were 27.67% and 27.98%, respectively. When setting MGIT culture result as a gold standard, the sensitivity and specificity of MTBDRplus V2 were 86.74% and 93.84%, and the sensitivity and specificity of Xpert MTB/RIF were 86.55% and 93.43%, respectively. For the detection of the resistance to rifampin, the sensitivity and specificity of MTBDRplus V2 were 94.34% and 96.62%, and the sensitivity and specificity of Xpert MTB/RIF were 88.68% and 95.96%, respectively. For the detection of the resistance to isoniazid, the sensitivity and specificity of MTBDRplus V2 were 77.38% and 98.02%, respectively.
Conclusion MTBDRplus V2 and Xpert MTB/RIF can be used to detect MTBC in smear negative samples with satisfactory performance.     

环介导等温扩增技术用于结核病诊断的价值评估

目的 评估环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)在诊断结核病中的应用价值.方法 以疑似活动性结核患者为研究对象.前瞻性收集患者临床标本,分装后进行荧光涂片显微镜镜检、BACTEC MGIT 960液体培养、MTB GeneXpert(Xpert)和L...