高迁移率族蛋白B1在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在子宫内膜腺癌组织及细胞系中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学染色法检测45例不典型增生子宫内膜、120例子宫内膜腺癌和20例正常子宫内膜组织中HMGB1的表达,用免疫印迹法(Western blot)分析HMGB1的表达水平;另外选取高、中、低分化子宫内膜腺癌细胞系ECC-1、HEC-1 a、KLE细胞,应用免疫细胞化学染色和Western blot检测其HMGB1的表达差异。结果 HMGB1在子宫内膜癌和不典型增生组织中的阳性表达率分别为80.00%(96/120)、66.67%(30/45),明显高于正常内膜5.00%(1/20),差异有统计学意义(P＜0.05);HMGB1表达阳性率与肿瘤浸润程度、转移和手术病理分期联系密切(P＜0.05),而与肿瘤的分化程度无明显联系(P＞0.05)。ECC-1、HEC-1-a、KLE细胞中均发现HMGB1表达,表达水平无明显差异。结论 HMGB1在子宫内膜腺癌及癌前病变中表达水平明显升高,可能在子宫内膜癌发生和发展过程中具有重要作用。     

KAI1蛋白在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的:研究KAI1蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系.方法:采用免疫组织化学EnVision二步法检测76例子宫内膜癌、15例不典型增生子宫内膜、20例正常增生期子宫内膜组织中KAI1蛋白的表达情况,对检测结果与子宫内膜癌的临床病理参数及预后关系作统计学分析.结果:KAI1蛋白在子宫内膜癌的阳性表达低于不典型增生内膜和正常增生期子宫内膜,差异有统计学意义.KAI1蛋白在子宫内膜癌的表达与组织学分级、肌层浸润程度呈负相关,差异有统计学意义.KAI1表达阴性的患者术后生存期更短.结论:KAI1蛋白在子宫内膜癌的进展过程中表达降低.KAI1蛋白的检测可能成为监测子宫内膜癌进展及临床判断预后有价值的生物学指标.     

p16、Rb、cyclinD1蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的检测细胞周期相关蛋白p16、Rb和cyclinD1在子宫内膜腺癌组织中表达。探讨其在子宫内膜腺癌中的临床病理意义及相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测60例子宫内膜腺癌组织和20例子宫内膜单纯性增生及20不典型性增生中p16、Rb和cyclinD1蛋白的表达状况。结果p16在子宫内膜腺癌和不典型性增生中及子宫内膜单纯性增生中表达率分别为（46．7％,60．0％,75．0％）。Rb在三者中表达率分别为（58．3％,75．0％,85．0％）。cyclinD1在三者中表达率分剐为：（55．0％,45、0％,20．0％）。p16与Rb表达呈负相关（P〈0．05）,cyclinD1与Rb表达呈正相关（P〈0．05）。p16与cyclinD1表达无相关性。结论子宫内膜腺癌发生机制涉及p16、Rb和cyclinD1调节环路中多个基因的异常。p16、Rb低表达和cyclinD1过度表达可能起在子宫内膜腺癌发生中起协同作用。     

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

目的研究Stathmin-1在子宫平滑肌肿瘤中的表达及临床意义。方法选取2013年1月～2016年12月温州市人民医院及温州医科大学附属第一医院82例手术患者,分为典型子宫平滑肌肿瘤(UL组)30例、子宫富于细胞平滑肌肿瘤(CL组)30例、子宫平滑肌肉瘤(LMS组)22例,同时选择肌瘤旁正常肌层(M组)30例。采用免疫组化Envision二步法研究Stathmin-1在各组中的表达、临床病理学特征及预后的相关性。根据Stathmin-1表达水平,CL组及LMS组进一步分成低表达组及高表达组,进行复发及生存率分析。结果 Stathmin-1表达于细胞质,在子宫平滑肌肉瘤组的染色分值高于另三组(均P0.05)。Stathmin-1在子宫平滑肌肿瘤中的表达与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤数目等临床病理学特征均无相关(均P0.05)。子宫富于细胞平滑肌中Stathmin-1高表达组较低表达组复发率高(P0.05)。子宫平滑肌肉瘤中Stathmin-1高表达组较低表达组生存率低(P0.05)。结论Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤中的高表达,提示检测Stathmin-1在早期辅助诊断子宫平滑肌肉瘤上有一定的临床意义。其在子宫平滑肌肿瘤中的表达水平与富于细胞平滑肌肿瘤的复发及子宫平滑肌肉瘤的预后可能相关。     

膀胱移行细胞癌细胞周期蛋白D1的表达及其意义

目的：检测细胞周期蛋白D1（cyclinD1)在膀胱移行细胞癌（TCC）中的表达,研究其与该肿毒生物学行为的关系,方法：应用免疫组化SP法检测33例膀胱TCC和12例正常膀胱cyclinD1组织的表达。结果：cyclinD1阳性表达率膀胱TCC组为54．54％,对照组无表达（P＝0．001）,临床分期T0－T1为76．19％,T2－T1为16．67％,肿瘤分级G1为81．25％,G2为40．00％,G3为14．28％,随着肿瘤分期分级上升,阳性表达率逐渐升高（P＝0．001,P＝0．001）,但与肿瘤的复发性差异无显著性（P＝0．183）,结论：cyclinD1在膀胱TCC形成的早期起重要的作用。在评估膀胱TCC的生物学行为方面有着重要的临床意义。     

高迁移率族蛋白A1在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 探讨高迁移率族蛋白A1(high mobility group protein A1,HMGA1)在子宫内膜癌细胞系AN3CA、ECC-1、Ishikawa以及子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织中的表达及意义.方法 采用半定量RT-PCR和Western Blot检测子宫内膜癌细胞系AN3CA、Ecc-1、Ishikawa以及21例子宫内膜癌组织(研究组)、18例正常子宫内膜组织(对照组)中HMGA1-mRNA与HMGA1蛋白的表达水平.结果 HM-GA1-mRNA与HMGA1蛋白在子宫内膜癌细胞系AN3CA、ECC-1、Ishikawa以及两组子宫内膜组织标本中均有不同程度的表达,研究组中HMGA1-mKNA与HMGA1蛋白的平均表达水平显著高于对照组(P＜0.05),并与手术一病理分期有关(P＜0.05),与子宫内膜癌组织的分化程度无关(P＞0.05).结论 HMGA1的过度表达可能参与了子宫内膜癌的发生和发展,在子宫内膜癌细胞的增殖与侵袭中可能发挥重要作用.     

结核分枝杆菌MycP1蛋白的原核表达及其对巨噬细胞的毒性作用

目的:构建结核分枝杆菌MycP1蛋白原核表达系统。方法:构建pGEX-4T-1-Rv3883c重组质粒,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Westernblot法检测目标蛋白的表达情况。目标蛋白经亲和层析纯化后,以不同质量浓度MycP1作用于小鼠巨噬细胞ANA-1,48h后XTT法检测活细胞数,同时测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,以评价其细胞毒性。结果:成功构建pGEX-4T-1-Rv3883c质粒,该质粒能在大肠杆菌中表达,经鉴定,表达的融合蛋白为目标蛋白MycP1。该融合蛋白作用后可使ANA-1活细胞数下降(F=34.327,P<0.001),培养上清液中LDH活力升高(F=336.720,P<0.001)。结论:成功构建了MycP1原核表达系统,目标蛋白对巨噬细胞有一定的毒性效应。     

子宫内膜腺癌组织中p-mTOR和p-4EBP1蛋白的表达

子宫内膜癌是发生于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤,以腺痛最常见,为女性生殖系统三大恶性肿瘤之一.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)具有蛋白激活酶的活性,与癌细胞的牛长密切相关,是细胞生长、分化的中心调控者[1].     

Apelin对葡萄糖的毒性作用及对胰岛细胞PDX-1表达的影响

目的 探讨Apelin对葡萄糖毒性作用及对胰岛细胞胰十二指肠同源盒蛋白-1(PDX-1)表达的影响.方法 在不同葡萄糖浓度下(正糖组5.6 mmol/L,高糖组16.7 mmol/L,极高糖组33.3 mmol/L),+/-Apelin-36培养胰岛β细胞株NIT-1细胞3d,然后测定基础和葡萄糖刺激后胰岛细胞胰岛素分泌量,测定细胞内胰岛素含量和PDX-1蛋白及mRNA表达.结果 与正糖组比较,高糖组和极高糖组的基础和葡萄糖刺激后胰岛素分泌、细胞内胰岛素均明显减少,PDX-1蛋白表达下降(P＜0.05);与未加Apelin组比较,加Apelin高糖组和极高糖组的基础和葡萄糖刺激后胰岛素分泌、细胞内胰岛素明显减少,PDX-1蛋白表达下降(P＜0.05);6组胰岛细胞的胰岛素水平与PDX-1蛋白表达呈正相关,与PDX-1 mRNA表达无关.结论 Apelin可能通过降低PDX-1蛋白表达参与葡萄糖毒性作用,引起胰岛素分泌减少,从而在糖尿病的发病机制中发挥作用.     

大剂量孕激素治疗对子宫内膜腺癌细胞凋亡和bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的探讨大剂量孕激素治疗对子宫内膜腺癌组织细胞凋亡及其调控基因bcl-2、bax蛋白表达的影响.方法选取2000～2005年收住院手术治疗、资料完整的子宫内膜腺癌患者病理标本30例,应用原位细胞凋亡检测技术(TUNEL)检测孕激素治疗前后子宫内膜腺癌组织细胞凋亡指数,其中16例采用免疫组化S-P法检测bcl-2和bax蛋白表达.结果孕激素治疗前后子宫内膜腺癌组织细胞凋亡指数、bcl-2和bax蛋白表达率分别为(6.00士5.68)和(27.67±2.41)、87.50%和75.00%、100.00%和93.75%.孕激素治疗后子宫内膜腺癌组织中细胞凋亡指数较治疗前明显增加(P＜0.01),其变化与bcl-2及bax蛋白表达无关.结论大剂量孕激素治疗通过促进细胞分化、增加细胞凋亡而达到治疗子宫内膜腺癌的目的.     

氨氯地平对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭影响的体外实验

目的 探讨氨氯地平对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231体外侵袭的影响及其相关机制.方法 用8.34 μmol/L氨氯地平处理肿瘤细胞,以人工重组基底膜侵袭小室(Transwell)观察氨氯地平对MDA-MB-231细胞侵袭的影响;免疫细胞化学方法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix met-allo-proteinaae,MMP-9)的表达.结果 8.34 μmol/L的氨氯地平可显著抑制MDA-MB-231细胞的侵袭能力,侵袭抑制率为36.27%;免疫细胞化学检测结果显示,MMP-9和VEGF蛋白的表达在MDA-MB-231细胞中亦明显降低.结论 氨氯地平对MDA-MB-231细胞体外侵袭具有明显的抑制作用,此作用与降低肿瘤细胞的MMP-9和VEGF的表达有关.     

CD146 as an adverse prognostic factor in uterine sarcoma

Background

Uterine sarcoma is an aggressive malignancy with a poor prognosis. This study aimed to determine the expression of CD146, P53, and Ki-67 in uterine sarcoma and to evaluate their prognostic significance.

Methods

We retrospectively analyzed the prognosis and clinicopathologic features of 68 patients with uterine sarcoma. Immunohistochemical analyses of CD146, P53, and Ki-67 were performed in tissue samples collected from these patients and their relationship with prognosis was investigated.

Results

The 5-year overall survival (OS) rate was 46 %. Endometrial stromal sarcoma (ESS) patients had a better prognosis than leiomyosarcoma (LMS) patients, with a 2-year survival rate of 82 %. The membrane and cytoplasm of tumor cells exhibited CD146 overexpression in 8 (32 %) ESS cases, which was less than the 25 (69.4 %) cases observed in LMS and 2 (28.6 %) in MMMT. CD146 overexpression in the membrane and cytoplasm of tumor cells was closely related to lymph node metastasis (P = 0.021) and Ki-67 overexpression (P = 0.0053); there was no significant correlation with age, tumor size, International Federation of Obstetrics and Gynecology stage, or P53 overexpression in LMS.

Conclusions

CD146, P53, and Ki-67 are overexpressed in uterine sarcoma. CD146 expression correlates with lymph node metastasis and is associated with poor OS in LMS; it may be a potential prognostic marker for LMS.     

Aumolertinib可体内外抑制人脉络膜黑色素瘤MUM-2B细胞的增殖

目的 评估新型第3代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂Aumolertinib对人脉络膜黑色素瘤MUM-2B细胞增殖的影响,探索Aumolertinib在眼科肿瘤治疗中的应用潜力。方法 不同浓度Aumolertinib（0、2、4、6、8、10 μmol/L）处理MUM-2B细胞。用CCK-8法检测Aumolertinib对MUM-2B细胞存活率的影响;细胞集落克隆形成实验检测Aumolertinib对MUM-2B细胞的增殖抑制作用;利用流式细胞分析技术检测Aumolertinib对MUM-2B细胞凋亡坏死、线粒体膜电位、活性氧、细胞周期分布的影响;建立人脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B裸鼠荷瘤模型,设置空白组,给药组（40 mg/kg）,考察Aumolertinib在体内的抗肿瘤活性。结果 CCK-8和细胞集落克隆形成实验的结果表明,Aumolertinib显著抑制MUM-2B细胞的增殖,并呈浓度依赖性。凋亡坏死分析结果显示,当Aumolertinib浓度增加到8 μmol/L时,MUM-2B细胞的总凋亡率可达到76.65%。同时,MUM-2B细胞内ROS水平也随Aumolertinib浓度增加显著增多。此外,Aumolertinib能够有效降低MUM-2B细胞的线粒体膜电位,诱导MUM-2B细胞发生G1期周期停滞。体内研究表明,Aumolertinib有效抑制肿瘤增长,而不会使动物体质量明显减轻。结论 Aumolertinib对人脉络膜黑色素瘤MUM-2B细胞在体外、体内试验中均发挥有效的抗肿瘤作用,在脉络膜黑色素瘤的治疗方面 具有潜在用途。     

In vitro effects of monoclonal antibody targeted daunomycin on human gastric cancer cells

In the present study,daunomydn (DIM) was chosen to conjugate cowdently with amonoclonal antitibody,MGb_2,against human gastric cancer cells via a cis-aconitic anhydride linker(directly) or a dextmn bridge (indirectly,) The mo-lar ratio of MGb_2 to DM in the conjugates was1:6 (direct method) and 1:54 (indirect method),respectively.The ELISA results revealed theantibody after conjugation retained antigen-binding capacity.The conjugates showed a highly se-lective cytotoxicity to the target cells.In lh cytotoxidty test,cytotoxidty of the conjugates wasgreater than that of free DM or irrevalent conjugates to human gastric cancer cell lines,SGC-7901and very low as far as non-target cells (HeLa) were concerned.It is sugared that theselective cytotoxidty on target cells of the conjugates is mediated by the monoclonal antibody.     

TEM observation on LAK cells killing the human rectal adenocarcinoma cells in vitro

ＴＥＭｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎＬＡＫｃｅｌｌｓｋｉｌｌｉｎｇｔｈｅｈｕｍａｎｒｅｃｔａｌａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏ￥ＤｉｎｇＹａｎｑｉｎｇ（丁彦青），ＬｉＣｈｕｎｄｅ（李春德），ＺｈａｎｇＪｉｎｈｕａ（张进华），ＺｈｕＭｅ...     

高渗NaCl溶液治疗肉瘤180的光镜与透射电镜观察

用以NaCl为主的高渗溶液注射鼠肉瘤180内,治疗24h末肿瘤坏死面积与对照组相比有显著差异(P<0.01).透射电镜观察,对照组肿瘤细胞的结构清楚,几乎无循环障碍;治疗组,最初见到细胞和细胞器皱缩,电子密度增高,淤滞性充血和小血管内红细胞皱缩,继而细胞浆空胞化,核固缩和核溶解,表明肿瘤细胞已坏死。     

Zoledronic acid inhibits hepatocellular carcinoma cells growth in vitro and in vivo

背景 越来越多的临床前研究表明,唑来磷酸能抑制多种肿瘤细胞生长,但其对肝癌细胞的作用尚未见报道。本研究我们通过体内体外实验验证唑来磷酸对肝癌细胞的作用。 方法 SRB及流式细胞术验证唑来磷酸对肝癌细胞生长及周期的影响。westernblot验证周期蛋白表达变化。H22腋下核瘤小鼠及H22腹水瘤小鼠模型验证唑来磷酸在体内对肝癌细胞效应。 结果 唑来磷酸可能通过下调CDC2和上调cyclin A表达诱导S期阻滞从而抑制肝癌细胞株SK-HEP-1、H22细胞生长。在体内试验中,唑来磷酸显著抑制核瘤小鼠肿瘤生长且可显著延长腋下核瘤小鼠及腹水瘤小鼠生存。 结论 唑来磷酸体内外均可抑制肝癌细胞生长且可延长核瘤小鼠生存。本研究结果将为唑来磷酸直接应用于肝癌的治疗提供一定的理论和试验基础。     

CIK细胞及LAK细胞对小鼠克洛氏肉瘤作用的实验研究

通过向ＰＢＭＣ中加入ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－α及抗ＣＤ３单克隆抗体,诱导出高效免疫活性细胞因子激活的杀伤细胞（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｋｕｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ,ＣＩＫ）,并建立了小鼠克洛氏肉瘤（Ｓ１８０）荷瘤动物模型,证实ＣＩＫ过继免疫疗法具有显著的抗肿瘤作用,其抑瘤率可达７８％;并同时以ＬＡＫ细胞作为对照,ＬＡＫ组的抑瘤率为３３．７０％,明显低于ＣＩＫ组１３．３０％（Ｐ〈０．０５）     

尤文肉瘤细胞总RNA修饰的树突状细胞的体外培养及其鉴定

目的:探讨树突状细胞(DC)经尤文肉瘤细胞总RNA加载后的体外RNA表达情况. 方法:采用分离尤文肉瘤患者外周血单核细胞体外诱导DC,用流式细胞仪检测DC成熟后的表面标志,Trizol法提取患者尤文肉瘤组织总RNA,用总RNA转染DC,用RT-PCR方法检测肿瘤总RNA加载的DC的表达. 结果:经尤文肉瘤总RNA加载的DC表面标记发生明显变化,DC的特异性表面标志如CD40由32.24%增高至72.32%,CD83由17.39%增高至30.97%,而代表单核细胞的CD14则由26.37%下降至10.46%,标志其抗原呈递功能显著增强. RT-PCR测定显示尤文肉瘤中的特异性序列EWS-FLI1可以和引物特异性结合,并且最佳结合温度为54℃. 结论:尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC可以呈递肿瘤特异性抗原,并特异性的表达其特有序列EWS-FLI1.     

Zoledronic acid inhibits growth of hepatocellular carcinoma cells in vitro and in vivo

Background Growing preclinical evidence shows that zoledronic acid (ZOL) exhibits direct antitumor activity in various cancer cell lines.However,the cytotoxic effects of ZOL on human hepatocellular car...