慢性阻塞性肺疾病患者外周血Th17、CD4＋Treg细胞的检测及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Th17细胞、CD4。Treg细胞占CD4＋T细胞的比例及其比值、血浆中的弹性蛋白抗体水平,分析它们在c（）PD发病中可能的作用。方法采用流式细胞分析技术检测所有受试者外周血Thl7细胞及CD4＋Treg细胞占CD4＋T细胞的比例,酶联免疫吸附法检测血浆中弹性蛋白抗体水平。结果①c（）PD患者急性加重期组外周血Thl7细胞占CD4＋T细胞的比例,显著高于缓解期组和健康对照组,缓解期组显著高于健康非吸烟组,差异有统计学意义（P〈20．05）,缓解期组高于健康吸烟组,但两者相比较差异无统计学意义。与健康非吸烟组相比,COPD急性加重期组、缓解期组和健康吸烟组外周血CD4。Treg细胞占CD4＋T细胞的比例显著增高,差异有统计学意义（Pt〈o．05）,缓解期略高于急性加重期,高于健康吸烟对照组,但三者比较差异无统计学意义。急性加重期Thl7／CD4＋Treg的比值明显增高,与缓解期组、健康吸烟组和健康非吸烟组相比差异有统订学意义（P〈20．05）。②各组均检测到弹性蛋白抗体,COPD组、健康吸烟组的弹性蛋白抗体水平较健康非吸烟组增高,差异有统计学意义（P〈O．05）,但急性期组、缓解期组、健康吸烟组之间差异无统计学意义。③c（）PD急性加重期组、缓解期组Thl7与弹性蛋白抗体呈正相关（P〈20．05）。COPD缓解期组Th17与FEV．％pred和FEV,／FVC呈显著负相关（P〈O．08）。结论Thl7细胞、CD4＋Treg细胞及弹性蛋白抗体可能参与了COPD的发生和发展。Thl7细胞增高、CD4＋Treg细胞增高相对不足与COPD发病及发展密切相关。Thl7在COPD中的表达增高可能加重了肺组织的破坏,这提示它可能在COPD肺气肿弹性蛋白免疫学特异性表达中发挥重要作用。     

黄芪注射液对慢性阻塞性肺疾病患者外周血Th17/Treg细胞平衡的影响及意义

目的探讨黄芪注射液干预前后慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例及白介素-10(IL-10)的表达水平,及黄芪注射液对其的作用。方法收集COPD急性加重期(A组)、稳定期(B组)、肺功能正常吸烟者(C组)及肺功能正常非吸烟者(D组)各20例,分别抽取患者空腹静脉血制备单个核细胞悬液(PBMC),分为空白组和黄芪组,应用流式细胞术检测各组黄芪注射液干预前后Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例及IL-10的表达水平。结果CD4+Th17细胞的比例:空白组均高于黄芪组(P0.05),空白组:A组(2.87±0.90)%高于B组(2.07±0.76)%、C组(1.20±0.42)%、D组(1.02±0.30)%,B组高于C、D组,C组和D组相比差异无统计学意义(P0.05);黄芪组:A组(1.51±0.93)%高于B组(0.94±0.65)%、C组(0.75±0.45)%、D组(0.68±0.37)%(P0.05),B、C、D组组间两两比较差异无统计学意义(P0.05);CD4+Treg细胞的比例:黄芪组均高于空白组(P0.05),在黄芪组,D组(8.04±2.65)%高于A组(4.76±1.43)%、B组(5.89±1.93)%、C组(6.50±2.2)%(P0.05),B组和C组相比差异无统计学意义,C组高于A组(P0.05);在空白组,D组(6.29±3.24)%高于A组(2.42±1.45)%、B组(4.13±1.83)%、C组(4.41±2.67)%(P0.05),B组和C组相比差异无统计学意义,C组高于A组(P0.05);外周血IL-10水平:黄芪组均高于空白组(P0.05),黄芪组:D组(7.25±1.32)%高于A组(4.76±1.31)%、B组(6.32±1.75)%、C组(6.02±1.39)%(P0.05),B组和C组相比差异无统计学意义,C组高于A组(P0.05);空白组:D组(5.21±1.07)%高于A组(2.96±1.25)%、B组(4.00±0.81)%、C组(4.31±0.90)%(P0.05),B组和C组相比差异无统计学意义,C组高于A组(P0.05);Th17/Treg细胞的比值:空白组均高于黄芪组(P0.05),黄芪组:A组(0.34±0.21)%均高于B组(0.17±0.13)%、C组(0.14±0.10)%、D组(0.11±0.07)%(P0.05);空白组,A组(4.27±7.77)%均高于B(0.60±0.33)%、C(0.31±0.19)%、D组(0.21±0.13)%(P0.05)。结论 Th17/Treg比值升高,平衡失调,可能是COPD发病的免疫机制;黄芪注射液在一定程度上能调节Th17/Treg比例失衡,对COPD的治疗可能有一定的疗效。     

吸烟对稳定期COPD患者外周血Th17/Treg免疫平衡影响研究

目的观察稳定期COPD患者和健康人吸烟和非吸烟者外周血中的T辅助细胞(Th细胞)17和调节性T细胞(Treg细胞)比例差异,分析吸烟对稳定期COPD患者Th17/Treg的影响,探讨吸烟引发COPD发生发展的可能免疫机制。方法①选取2012年12~2013年4月我院就诊的稳定期COPD患者73例,分别设为不吸烟组46例、吸烟组27例,同时选取同期进行社区流行病学调查及医院体检中心的健康人26例设为对照组,不吸烟组16例和吸烟组10例。所有受试者均填写统一的调查问卷,明确个人史,现病史、用药史,完善肺功能检查;②各组受试者空腹6 h后清晨抽取静脉血2 ml,应用细胞内染色的流式细胞术检测各组受试者外周血中Th17/Treg细胞比例;③多组间比较采用单因素方差分析,多组内两两比较采用SNK检验(方差齐)和Games-Howell法(方差不齐),Th17/Treg细胞的比例与吸烟指数及肺功能关系用Spearman相关分析进行相关性检验。结果①COPD组吸烟者和非吸烟者与对照组吸烟与非吸烟者外周血Th17/Treg细胞比例分别为(3.23±0.86)%、(2.97±0.98)%和(2.07±0.40)%、(1.96±0.30)%,多组间比较差异呈显著性(P0.01);②COPD患者吸烟组和非吸烟组第1秒用力呼气容积实测值与预计值比(FEV1%prep)分别为(55.66±20.61)%、(64.04±13.80)%,第1秒用力呼气容积/用力肺活量比(FEV1/FVC)分别为(55.23±10.52)%、(62.62±5.49)%,两组间差异存在统计学意义(P0.05);③外周血Th17/Treg细胞比例与FEV1%prep和FEV1/FVC存在显著相关性(r=-0.517、-0.512,P值分别为0.00,0.00)。结论吸烟与COPD患者Th17/Treg细胞比例失衡相关;Th17/Treg细胞比例失衡可能参与了发病和进展过程;吸烟可能通过引起Th17/Treg细胞比例失衡导致COPD的发生发展。     

外周血Th17/Treg失衡与老年稳定期COPD患者肺功能及急性加重的相关性

目的 分析外周血辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)失衡与老年稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及急性加重的相关性.方法 100例老年COPD患者根据病情分为稳定期COPD(SCOPD组58例)和COPD急性加重(AECOPD组42例),同期50名体检者作为对照组.对3组基线资料及SCOPD组和...     

肠道菌群参与慢性阻塞性肺疾病Th17/Treg失衡机制的研究进展

免疫因素是慢性阻塞性肺疾病发病的关键环节,在疾病的发生发展中起重要作用。肠作为与肺同源的器官,其代谢产物及其他信号分子能够通过血液及淋巴管循环迁移至肺,进而发挥作用。近年研究发现肠道菌群通过影响肺部免疫平衡从而在慢性阻塞性肺疾病的进展中发挥重要意义。本文基于“肠-肺轴”这一结构基础,就肠道菌群参与调节慢性阻塞性肺疾病中Th17/Treg免疫失衡的机制进行综述,为慢性阻塞性肺疾病的防治提供新的思路。     

慢性阻塞性肺疾病中MMP-9/TIMP-1与Th17/Treg作用与联系

目的 检测慢性阻塞性肺疾病（COPD）外周血中Th17、Treg细胞占CD4^＋T细胞的比例、Th 17/Treg比值和血浆中MMP-9、TIMP-1含量、MMP-9/TIMP-1比值,探讨其在发病中的作用和机制.方法 COPD急性加重组患者30例,COPD缓解组25例患者健康吸烟组20例患者,健康非吸烟组20例患者;采用流式细胞分析技术检测Th17、Treg细胞占CD4^＋T细胞的比例,ELISA法检测血浆中MMP-9、TIMP-1含量.结果 外周血Th17占CD4^＋T细胞的比例在：COPD急性期组高于缓解组、健康非吸烟组、健康吸烟组,差异有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康吸烟组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,与健康非吸烟组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.外周血Treg占CD4＋T细胞比例在：各组间比较,差异无统计学意义（F=1.971,P＞0.05）;Th17/Treg比值的：COPD急性期组分别与COPD缓解期组、健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康吸烟和健康非吸烟组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;血浆中MMP-9含量的在：COPD急性期组与COPD缓解期组、健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,血浆中MMP-9/TIMP-1比值：COPD急性加重期组与其他三组相比均有统计学意义（P＜0.05）,COPD缓解期组与健康组相比,均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Th17、Treg细胞、MMP-9、TIMP-1可能均参与了COPD的发生和发展.Th17、MMP-9增高可能促发COPD的发生和急性加重,并且两者存在一定相关性,并相互影响,加重COPD的自体免疫反应.     

溃疡性结肠炎患者外周血Th17/Treg免疫平衡的研究

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血Th17细胞（CD4＋IL-17＋T细胞）与Treg细胞（CD4^＋CD25^＋T细胞）数量以及相关细胞因子的表达水平,分析Th17／Treg细胞免疫平衡在UC发病机制中的作用。方法收集UC患者（UC组）和健康体检者（对照组）的外周肝素抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。分别以PE-CD4与FTTC—CD25单抗,PE-CD4与FITC—IL-17的单抗作双色流式细胞术,分析溃疡性结肠炎患者外周血Th17、Treg细胞的百分率,ELISA法检测血清中相关细胞因子IL-17和TGF—β1的水平。结果与对照组比较,溃疡性结肠炎患者外周血Th17细胞百分率升高,Treg细胞的百分率显著下降,Th17／Treg比值升高（P〈0．05）,血清中细胞因子IL-17升高、TGF-β1降低,并且IL-17／TGF-β1比值升高。结论溃疡性结肠炎患者外周血存在细胞免疫功能失调;Th17／Treg细胞数量与免疫平衡状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与溃疡性结肠炎的发病机制有关。     

参麦注射液对支气管哮喘患者外周血Th17/Treg细胞的影响

目的 探讨参麦注射液对支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血Th17/Treg细胞的影响及其意义.方法 选取山西医科大学第一医院呼吸科急性发作期、缓解期哮喘患者各25例,选取山西医科大学第一医院体检中心肺功能正常、激发或者舒张试验阴性的健康人25例作为对照组,分别使用1640培养液及参麦注射液进行干预处理.抽取晨起空腹静脉血5 ml,运用流式细胞仪对各组外周血Th17细胞、Treg细胞分别占CD4+的比例及Th17/Trcg细胞的比值进行比较,同时检测血清中IL-10因子的水平.结果 ①各组间干预前CD4+ Th17细胞/CD4+T细胞、CD4+ Th17细胞/CD4+ Treg细胞的比值,急性发作期组(3.05±1.27、1.49±1.78)高于缓解期组(2.38±0.93、0.61±0.24)及对照组(1.19±0.39、0.30±1.14),差异有统计学意义(P＜0.05),缓解期高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);CD4+Treg细胞/CD4+T细胞的比值,对照组(5.20±3.26)高于缓解期组(3.99±0.90)及急性发作期组(2.76±0.93),差异有统计学意义,(P＜0.05),缓解期组高于急性发作期组,差异有统计学意义(P ＜0.05).血清中IL-10因子的水平,对照组(5,28±1.31)高于缓解期组(4.46±0.83)及急性发作期组(3.90±0.64),差异有统计学意义(P＜0.05),缓解期组高于急性发作期组,差异有统计学意义(P ＜0.05).②同一组间CD4+ Th17细胞/CD4+T细胞、CD4+Th17细胞/CD4+ Treg细胞的比值,干预前高于干预后,差异有统计学意义(P＜0.05).CD4+ Treg细胞/CD4+T细胞的比值,干预后高于干预前,差异有统计学意义(P＜0.05).血清中IL-10因子水平,干预后高于干预前,差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 哮喘患者外周血中存在Th17/Treg细胞失衡,参麦注射液可以改善哮喘患者的Th17/Treg细胞失衡.     

Treg/Th17细胞失衡对尿毒症血液透析患者微炎症因子及血管钙化的影响

目的探讨尿毒症患者血液透析调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞17(Th17)水平失衡对相关炎症因子及血管钙化因子的影响。方法 105例尿毒症患者为受试对象,其中35例尿毒症合并心血管病行血液透析的患者为观察1组,33例尿毒症行血液透析无心血管病的患者为观察2组,37例尿毒症无心血管病未行血液透析的患者为对照1组,另选取同期的30例正常健康体检者作为对照2组。以流式细胞技术对单个核细胞中Treg、Th17细胞水平进行检测,酶联免疫吸附法(ELISA)对单个核细胞上清液中白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17等炎症因子及血管钙化因子中的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)进行监测,实时荧光定量(PCR)法检测叉头蛋白p3(Foxp3)、维甲酸相关孤独受体γt信使RNA(ROR-γt mRNA)的表达。结果观察1组与对照2组相比,存在Treg/Th17细胞比例失衡、BMP-2异常分泌,主要表现为IL-6、IL-17水平和Foxp3、ROR-γt相对表达量升高,而IL-10水平、Foxp3/ROR-γt相对表达量降低(P0.01);同时,这一失衡在观察1组、观察2组及对照组1组中均存在(P0.01)。结论 Treg/Th17细胞比例失衡将引起尿毒症血液透析患者微炎症因子水平异常,导致血管钙化加剧。     

不同分期老年COPD患者Th17、Treg细胞比例及炎性因子水平研究

目的探讨不同分期老年慢性阻塞性肺病(COPD)患者外周血Th17、调节T细胞(Treg)细胞及相关炎症因子水平的变化及其与患者肺功能的关系。方法选取2012年1月至2014年1月在本院呼吸内科就诊的68例COPD患者(其中稳定期32例,急性期36例)为研究对象,另选取30例健康体检者为对照组。应用流式细胞仪测定两组外周血CD+4Th17、CD+4CD+25 Treg细胞的比率。应用ELISA法测定两组白细胞介素-6,10,17,21,22(IL-6,10,17,21,22)及转化生长因子β(TGF-β)水平。结果急性期组患者FEV1、FEV1/FVC水平显著低于稳定期及对照组(P0.05),而稳定期组低于对照组(P0.05)。急性期组CD+4Th17细胞比率高于稳定期及对照组,CD+4CD+25Treg细胞的比率则低于稳定期及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。急性期组IL-6,17,21,22水平高于稳定期及对照组,而IL-10、TGF-β水平低于稳定期及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。FEV1与IL-6,17,21,22呈负相关,而与IL-10、TGF-β水平呈正相关,FEV1/FVC与IL-6,17,21,22呈负相关,而与IL-10、TGF-β水平呈正相关。结论 Th17/Treg比例失衡可导致机体促炎因子生成增多,抑制炎症作用不足,促进气道炎症反应,导致患者呼吸功能障碍,加重COPD病情。     

Increase of Th17 cells in peripheral blood of patients with chronic obstructive pulmonary disease

Background

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a progressive disorder characterized by an inflammatory response to cigarette smoke. A disorder in immune regulation contributing to the pathogenesis of COPD has been suggested, however, little is known about the involvement of CD4 ⁺ T cells. To determine the distribution of different CD4⁺ T cell subsets in patients with COPD, current smokers without COPD (CS) and healthy subjects (HS), and its correlation with pulmonary function.

Methods

Th1, Th2, Th17 and Treg, subsets, were quantified by flow cytometry in peripheral blood (PB) of 39 patients with COPD, 14 CS and 15 HS. Correlations were assessed with Spearman’s rank test. The association between Th17 and lung function was evaluated with a multivariate logistic regression analysis.

Results

An increase of Th17 cells (median 9.7% range 0.8–22.5%) was observed in patients with COPD compared with CS (median 2.8% range 0.8–10.6) and HS (median 0.6% range 0.4–1%, p < 0.0001). Th1 and Tregs subsets were also increased in COPD and CS compared to HS. Inverse correlations were found between Th17 with FEV₁%p r = −0.57 and with FEV₁/FVC r = −0.60, (p < 0.0001 for both comparison). In addition, increase of Th17 predicted the presence [OR 1.76 (CI 95% 1.25–2.49, p = 0.001)] and severity of airflow limitation [OR 1.13 (CI95% 1.02–1.25, p = 0.02)].

Conclusions

The increase of Th17 response and the lost of balance between CD4⁺ T cell subsets, suggest a lack of regulation of the systemic inflammatory response that may contribute to pathogenesis in COPD patients.     

Th17/IL-17在气道炎症疾病中的研究进展

辅助性 T 细胞简称 Th 细胞,其中 Th1/Th2失衡被认为是气道炎症性疾病发生、发展的重要因素。但近年来发现,Th17是一种不同于 Th1、Th2新的 Th 细胞亚群,具有独立的分化和发育调节机制,其分化不依赖于传统的 Th1、Th2细胞亚群分化的细胞因子及其转录因子。目前研究发现 Th17细胞与 IL-17 在呼吸系统疾病的发生、发展中起着重要的作用。本文对 Th17 细胞及 IL-17 在气道炎症疾病中的作用进行综述。     

西罗莫司对高脂饮食诱导的NAFLD大鼠外周血Treg/Th17细胞的影响

目的 研究西罗莫司对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠外周血Treg/Th17细胞的影响。方法 随机将60只SD大鼠分为西罗莫司干预组、模型组和对照组,每组20只。采用高脂饮食喂养12周建立NAFLD模型,在造模成功后,在其中20只动物,给予西罗莫司干预2周。采用ELISA法检测血清白介素-10(IL-10)、IL-17和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,使用全自动生化分析仪检测血生化指标,使用FACSVia型流式细胞仪检测外周血Treg和Th17细胞百分比。结果 干预后,西罗莫司干预组血清AST和ALT水平分别为(134.9±15.3)U/L和(109.4±18.2)U/L,显著低于模型组【(151.1±28.9)U/L和(128.9±17.7)U/L,P<0.05】;血清TG、TC和LDL-C水平分别为(0.9±0.3)mmol/L、(2.6±0.8)mmol/L和(3.3±1.2)mmol/L,显著低于模型组【(1.1±0.5)mmol/L、(3.6±1.3)mmol/L和(5.4±1.8)mmol/L,P＜0.05】,而血清HDL-C水平为(1.3±0.5)mmol/L,显著高于模型组【(0.7±0.4) mmol/L,P＜0.05】;血清IL-10水平为(68.9±26.6)pg/ml,显著高于模型组【(37.8±17.2)pg/ml,P＜0.05],而血清IL-17和TNF-α水平分别为(13.2±3.3)pg/ml和(0.7±0.2)ng/ml,显著低于模型组【(22.6±4.0)pg/ml和(1.2±0.4)ng/ml,P＜0.05】;西罗莫司干预组外周血Treg细胞百分比为(4.5±0.7)%,Th17细胞百分比为(1.7±0.6)%,Treg/Th17比值为(2.6±0.7),与模型组比,差异显著【(3.8±0.9)%、(2.8±1.1)%和(1.5±0.7),P＜0.05]。结论 应用西罗莫司干预高脂饮食诱导的NAFLD大鼠能减轻炎症反应,纠正外周血Treg/Th17细胞比值失衡状态,可能有助于阻止NAFLD进展,值得进一步研究。     

Th17/Treg失衡与炎症性肠病的关系

炎症性肠病(inflammatory bowel disease.IBD)的病因和发病机制尚未完全明确,肠道黏膜免疫系统异常反应所导致的炎症过程在发病中起重要作用.辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)可介导慢性炎症和自身免疫性疾病的发生,调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)有抑制自身免疫的功能,二者存在相互转化的关系.有研究表明Th17/Treg转化平衡是维持肠道免疫稳态的重要因素,这可能是导致人类IBD的原因之一.最近研究表明TGF-β,IL-6和维甲酸(retinoic acid,RA)可能是调控二者平衡关系的重要因素.肠道菌群(intestinal flora)与IBD的发生发展关系密切,益生菌(probiotics)对IBD的治疗作用成为研究的热点.深化对Th17/Treg转化调控关系的研究是当前重要的研究课题.     

Th17、Treg细胞及其细胞因子变化在特发性肺动脉高压患者中的监测作用

目的分析特发性肺动脉高压(IPAH)患者外周血Th17、Treg细胞及其细胞因子的变化,探讨其在IPAH中的作用。方法以2013年3月-2015年9月本院收治的特发性肺动脉高压患者28例为研究对象,以同期收治的慢性支气管炎患者54例为对照(其中慢性支气管炎合并肺动脉高压者24例,单纯慢性支气管炎患者30例),测定各组外周血Th17和Treg细胞比例和细胞因子。结果 IPAH组和(慢支+PAH)组外周血Th17细胞比例均高于慢支组,而IPAH组和(慢支+PAH)组外周血Th17细胞比例差异无统计学意义;IPAH组和(慢支+PAH)组外周血Treg细胞比例低于慢支组,IPAH组低于(慢支+PAH)组(P0.05);IPAH组和(慢支+PAH)组外周血IL-17水平均高于慢支组,IPAH组高于(慢支+PAH)组(P0.05);IPAH组和(慢支+PAH)组外周血IL-10水平均低于慢支组,IPAH组低于(慢支+PAH)组(P0.05)。IPAH组外周血IL-17水平与肺动脉压力呈正相关(P0.01);IL-10水平与肺动脉压力呈负相关(P0.01)。结论Th17/Treg失衡及其细胞因子变化在特发性肺动脉高压的发生发展中起着重要作用。