红景天对支气管哮喘小鼠Th17/Treg细胞及其细胞因子的影响

目的:观察红景天对支气管哮喘小鼠Th17/Treg T细胞及其细胞因子白介素IL-17、IL-23、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达影响,探讨其可能作用机制。方法:选择8周龄健康雌性BALB/C小鼠,随机分为3组:对照组、支气管哮喘模型组、红景天组,每组10只;支气管哮喘模型采用卵清蛋白致敏方法构建,小鼠支气管灌洗液细胞(BALF)计数,ELISA法测定肺组织中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β1水平,流式细胞术测定外周血CD_4~+IL-17~+与FOXp_3~+CD_4~+CD_(25)~+占CD_4~+的比例,HE染色观察肺组织病理形态学变化。结果:与对照组比较,模型组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数及肺匀浆IL-17、IL-23、CD_4~+IL-17~+占CD_4~+比例明显升高(P<0.05),肺匀浆IL-10、TGF-β1及FOXp_3~+CD_4~+CD_(25)~+占CD_4~+比例明显降低(P<0.05),肺组织炎症反应增加;与模型组比较,红景天组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数及IL-17、IL-23、CD_4~+IL-17~+占CD_4~+比例明显降低(P<0.05),IL-10、TGF-β1及FOXp_3~+CD_4~+CD_(25)~+占CD_4~+比例明显升高(P<0.05),肺组织炎症反应减轻。结论:红景天可有效抑制哮喘小鼠气道炎症反应,其作用可能与调控哮喘小鼠Th17/Treg T细胞及其细胞因子IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β1表达有关。     

豨莶草治疗MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎疗效初观察

目的观察豨莶草对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的改善情况。方法通过观察小鼠的一般状况以及检测尿蛋白含量、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和肾组织病理的改变来评价豨莶草对狼疮性肾炎疗效。结果与对照组相比,豨莶草可以改善小鼠的一般状况,提高小鼠的体质量,显著降低尿蛋白含量、减少血清中炎性细胞因子IL-6、TNF-α的水平,肾脏脏组织病理损害明显减轻;各组生存分析结果显示无统计学差异(P 0.05)。结论豨莶草可在一定程度上起到缓解狼疮性肾炎的作用,且豨莶草副作用相较于强的松更低,可为狼疮性肾炎的治疗提供新的可能。     

益肾活血方对狼疮性肾炎患者Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察益肾活血方对狼疮性肾炎患者临床疗效及对Th1/Th2细胞因子的影响,探讨益肾活血方治疗狼疮性肾炎的机制。方法:将60例狼疮性肾炎患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组给予单纯西药治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用益肾活血方,疗程12周。比较治疗前后LN的临床症状及体征,24小时尿蛋白、血浆白蛋白、肝肾功能(Cr、BUN、ALT),检测外周血液中白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、γ-干扰素(INF-γ)水平。结果:治疗组总有效率为90.0%,对照组总有效率73.3%,治疗组与对照组比较有统计学意义(P0.05);两组治疗后24h尿蛋白、血清白蛋白、Cr、BUN、ALT较本组治疗前具有统计学意义(P0.01),治疗组治疗后与对照组治疗后比较差异有统计学意义(P0.05);两组治疗后IL-6、IL-10、INF-γ较治疗前降低,IL-2较治疗前升高,与治疗前有非常显著性差异(P0.01),治疗组与对照组比较有显著性差异(P0.05)。结论:益肾活血方配合西药治疗狼疮性肾炎优于单纯西药治疗,益肾活血方对狼疮性肾炎患者Th1/Th2细胞因子具有调节作用。     

昆仙胶囊对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的代谢组学研究

目的:探讨昆仙胶囊对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响及作用机理。方法:MRL/lpr小鼠随机分为模型对照组、昆仙胶囊组、来氟米特组,各组均连续用药4周。分别于给药前,给药结束后采集小鼠清晨空腹尿液与血清。考马斯亮蓝G250法检测尿蛋白浓度,ELISA法测定血清抗ANA抗体及抗ds-DNA抗体,基于1HNMR的代谢组学方法分析给药后各组小鼠尿液的代谢特征。结果:昆仙胶囊组按照234mg/kg剂量给药后,与模型组比较,小鼠尿蛋白浓度,血清抗ANA抗体及抗ds-DNA抗体水平显著降低;并且尿液中乳酸、TMAO、柠檬酸、葡萄糖、谷氨酰胺、丙氨酸降低,а-酮戊二酸、肌酸/肌酐、马尿酸盐升高。结论:昆仙胶囊可以显著改善MRL/lpr小鼠的免疫状况和肾脏功能,该研究结果为临床治疗LN提供了实验基础。     

刘氏菖郁汤对缺血性脑卒中风痰阻络证患者Th17/Treg 免疫平衡的影响

目的观察刘氏菖郁汤对缺血性脑卒中风痰阻络证患者辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)及其相关细胞因子的影响,并评价其改善神经功能缺损的疗效。方法将88例缺血性脑卒中风痰阻络证患者随机分为对照组(44例)和刘氏菖郁汤组(44例)。对照组按缺血性脑卒中相关指南进行基础治疗,刘氏菖郁汤组在此基础上加用刘氏菖郁汤,干预期为10 d。比较2组患者治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,Treg、Th17数量以及白细胞介素(IL)-6、IL-10、转化生长因子(TGF)-β含量的变化。结果治疗后,刘氏菖郁汤组NIHSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),神经功能缺损改善有效率为65.9%(29/44),明显高于对照组[36.4%(16/44),P<0.05];刘氏菖郁汤组Treg数量高于对照组(P<0.05),且刘氏菖郁汤组Treg数量上升,对照组Treg数量下降,差异有统计学意义(P<0.05);刘氏菖郁汤组IL-6水平低于对照组(P<0.05),2组IL-10、TGF-β均升高,差异有统计学意义(P<0.05);Th17/Treg比值降幅有大于对照组的趋势。结论刘氏菖郁汤能有效改善缺血性脑卒中风痰阻络证患者神经功能缺损,其机制可能与抑制IL-6的升高,提高IL-10、TGF-β含量,增加Treg数量,调整Th17/Treg平衡状态,减轻炎症反应有关。     

润燥灵对干燥综合征模型小鼠Th17/Treg细胞的影响

目的:探讨润燥灵对免疫诱导性干燥综合征(SS)模型小鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)的影响。方法:将90只C57bl/6j小鼠随机分成为正常组、模型组、润燥灵36g/kg组、润燥灵18g/kg组、润燥灵9g/kg组和泼尼松0.2g/kg组,每组15只,除正常组外,其余各小鼠采用免疫诱导法建立SS模型,造模第5 w开始灌胃给药,每周测量小鼠饮水量,给药4 w后眼球取血,断颈处死,分离颌下腺,HE梁色后病理检测,PCR检测颌下视黄醇类核内受体(RORγt)和转录因子叉头框蛋白3(Fox P3)的表达,流式细胞术检测Thl7细胞和CD4~+CD25~+T细胞的含量。结果:与模型组比较,润燥灵36g/kg组和润燥灵18g/kg组小鼠饮水量增加,颌下腺淋巴细胞浸润减少。PCR法结果显示,与正常组比较,模型组RORγt m RNA和Fox P3 m RNA表达量升高;与模型组比较,润燥灵36gkg、润燥灵18g/kg和泼尼松0.2g/kg组RORγt m RNA和Fox P3 m RNA表达量降低。流式细胞术结果显示,与模型组比较,润燥灵36gkg组和泼尼松0.2g/kg组CD4~+/CD4~+CD25~+T比值降低。结论:润燥灵能够抑制SS模型小鼠RORγt m RNA和Fox P3 m RNA表达量,调节Thl7/Treg细胞平衡作用。     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg、Th1/Th2细胞平衡的影响

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)、Th1/Th2细胞平衡的影响。方法：60只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.2 g·kg^-1),黄芩汤低、中、高剂量组(4.55、9.1、18.2 g·kg^-1),除正常组外均予以2.5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮水5 d诱导UC,连续灌胃给药7 d后处死小鼠,取肠系膜淋巴结(MLNs)和结肠组织,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17/Treg、Th1/Th2,流式细胞微球芯片捕获技术检测结肠组织白细胞介素(IL)-2、IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10等细胞因子含量,对结肠组织样本进行病理切片观察,并采用免疫组化法检测结肠组织中T细胞表达的T-box(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)、IL-17A、叉头蛋白P3(FoxP3)的表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠结肠组织中转化生长因子-β(TGF-...     

当归对阴虚哮喘Balb/c小鼠Th1/Th2及Th17/Treg的影响及机制研究

当归是临床常用中药,具有补阴养血、活血润燥的功能。为研究当归对阴虚哮喘Balb/c小鼠Th1/Th2及Th17/Treg的影响及机制,该实验通过卵清白蛋白加甲状腺素复制阴虚哮喘Balb/c小鼠模型,造模同时分别给予地塞米松(DXM)、当归提取液、当归提取液+DXM灌胃处理,HE染色进行肺组织病理学检查,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4,IL-17,IFN-γ,TGF-β水平及维甲酸受体相关孤儿受体(RORγt)的表达情况。结果显示,当归可显著减轻肺组织炎症浸润程度,升高IFN-γ/IL-4及TGF-β/IL-17的比值,降低肺组织中RORγt的表达强度,当归与DXM配伍的治疗效果最为显著。提示,当归可通过抑制肺组织RORγt表达、调节Th1/Th2及Th17/Treg的功能平衡,改善气道的炎症状态,发挥对阴虚型哮喘的治疗作用。     

鼠神经生长因子联合针灸治疗小儿面神经炎的疗效及对reg/Th17相关细胞因子表达的影响

目的观察鼠神经生长因子联合针灸治疗小儿面神经炎的疗效及对Treg/Th17相关细胞因子表达的影响。方法将90例面神经炎患儿随机分为观察组45例和对照组45例,对照组给予鼠神经生长因子治疗,观察组在对照组治疗基础上给予针灸治疗,治疗前后采用日本神经研究会提议的"40分法"对临床症状进行评分,采用House-Brachmann(HB)分级评估患儿治疗前后面神经麻痹分级情况;检测2组治疗前后神经肌电图、Treg/Th17相关细胞因子表达情况。结果 2组治疗后静止、轻闭眼、重闭眼、蹙额、动鼻翼、患侧闭眼、示齿、吹哨、鼓腮、口呈一字型评分均显著升高(P均<0.05),且观察组上述评分均高于对照组(P均<0.05);观察组治疗后H-B分级改善情况优于对照组(P<0.05);2组治疗后面神经传导速度、面神经运动传导诱发电位R1潜伏期与CAMP波幅均显著改善(P均<0.05),血清白细胞介素-17(IL-17)、IL-6水平降低(P均<0.05),而IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平均显著升高(P均<0.05),且观察组的改善情况优于对照组(P均<0.05)。2组治疗期间均未发现有严重不良反应。结论鼠神经生长因子联合针灸治疗面神经炎患儿能够显著改善临床症状,调节外周血Th17/Treg免疫平衡,促进面神经功能恢复,且安全性好。     

Th17/Treg细胞与卵巢早衰的关系

卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)是生殖医学届的一项重大难题,卵子形成与发育的任一环节受损都有可能导致POF。POF的病因复杂多样,除遗传因素外自身免疫的影响越来越受到重视。POF患者能被早期病因诊断出的极少,绝大部分卵巢功能恢复的机会极小,若能提早诊断并及时治疗,可以延缓甚至治愈POF,因此研究POF的发病机制,为其有效预防和治疗提供理论依据成为研究的方向。主要从免疫学角度出发,总结免疫细胞Th17和Treg与POF的关系,为进一步研究POF提供新的思路和依据。     

积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞表达的影响

目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响.方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg-1),积雪草苷低、中、高剂量(5,15,45 mg· kg-1)组.除正常组...     

补肾通督胶囊对RA患者Th17/Treg平衡影响的研究

目的:观察补肾通督胶囊对肾虚寒凝型类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg细胞及血清白细胞介素17A(IL-17A)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-10的影响。方法:入选类风湿性关节炎患者随机双盲分为治疗组(36例)和对照组(35例),治疗组口服补肾通督胶囊,对照组口服雷公藤多苷片,均服药12周,采用流式细胞术观察比较治疗前后两组患者外周血Th17/Treg及采用酶联免疫吸附法(ELISA)观察血清IL-17A、TGF-β1、IL-10的变化。结果:治疗后两组与各自治疗前相比,Th17及Th17/Treg显著降低(P0.01),Treg显著升高(P0.01);治疗后两组间比较无统计学意义(P0.05)。治疗后两组与各自组治疗前相比,IL-17A显著降低(P0.01),TGF-β1、IL-10显著升高(P0.01);治疗后两组间比较,治疗组TGF-β1与IL-10升高更加明显(P0.01),IL-17A无统计学意义(P0.05)。结论:补肾通督胶囊可以明显降低肾虚寒凝型类风湿性关节炎患者外周血Th17/Treg水平,降低血清IL-17A含量,而使血清TGF-β1、IL-10含量升高。     

中医药对哮喘Th17细胞/Treg细胞免疫失衡影响的研究进展＊

免疫失衡机制在哮喘的发病中占有主导地位，既往认为Th1/Th2比例失衡是哮喘的主要免疫发病机制，但近年来，Th17/Treg免疫失衡与哮喘关系的研究越来越多，大量的实验和临床研究表明：Th17细胞比例的上调、Treg细胞比例的下降导致的Th17/Treg免疫失衡与哮喘发病和严重程度密切相关。中医药治疗哮喘历史悠久，利用现代科学技术来阐释中医药治疗哮喘的机制是现阶段研究的热点，不仅为中医药治疗哮喘赋予科学内涵，也为更多的哮喘患者带来福音。本文通过阐释Th17、Treg细胞在哮喘中的作用，对近十年来中医药对哮喘Th17/Treg免疫失衡影响的研究进展进行综述，以供同仁互鉴。     

消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法:将75只C57BL/6小鼠随机分为消水方(33.5 g·kg~(-1))组、顺铂(6 mg·kg~(-1))组、消水方(27 g·kg~(-1))+顺铂(6 mg·kg~(-1))组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射磷酸盐缓冲液(PBS)外,其余各组小鼠均采用Lewis肺癌细胞胸腔注射建立模型,连续给药10 d后各组取10只小鼠处死,采用流式细胞技术检测外周血中Th17,Treg细胞数量;流式微球阵列法(CBA)以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21),白细胞介素-23(IL-23)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脾组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt),叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白表达。结果:各组小鼠外周血Th17,Treg细胞数量均高于空白组(P0.05,P0.01)。其中消水方+顺铂组、消水方组较模型组能明显增加Th17细胞数量(P0.05),降低Treg细胞数量(P0.01)。消水方+顺铂组IL-6,IL-17A,IL-21含量分别较其余各组均显著升高(P0.01);消水方+顺铂组较消水方组、模型组IL-23含量升高(P0.05),TGF-β1含量降低(P0.05)。与顺铂组、模型组比较,消水方+顺铂组、消水方组可上调脾组织中RORγt mRNA表达(P0.01),下调Foxp3 mRNA表达(P0.05)。与模型组比较,消水方+顺铂组可上调脾组织RORγt蛋白表达(P0.05),下调Foxp3蛋白表达(P0.01)。结论:消水方联合顺铂可能通过上调Th17细胞水平,下调Treg细胞水平,从而纠正Th17/Treg免疫失衡,发挥抑制MPE作用。     

乙肝相关性慢加急性肝衰竭“阳黄-阴阳黄-阴黄”不同证候分型患者Treg/Th17的表达

目的:检测乙肝相关性慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)"阳黄-阴阳黄-阴黄"不同证候分型患者外周血调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)及其相关细胞因子表达水平,探讨肝衰竭不同中医证候分型的细胞免疫学特征。方法:选择早期、中期、晚期各32例HBV-ACLF并符合"阳黄-阴阳黄-阴黄"中医证候分型的患者,采用流式细胞术检测外周血Treg/Th17细胞频数表达,流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测白细胞介素-10(IL-10),转化生长因子-β(TGF-β),白细胞介素-17A(IL-17A),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-23(IL-23)表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测叉状头(或)翅膀状螺旋转录因子(FoxP3),维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt) mRNA表达;采用SPSS 20.0软件进行数据统计处理,分析不同中医证候分型HBV-ACLF患者的Treg/Th17细胞及相关细胞因子的表达特点。结果:HBV-ACLF阳黄证患者主要分布在肝衰竭病程的早期,阴阳黄证主要分布于中期,阴黄证主要分布于晚期;从阳黄证、阴阳黄证到阴黄证Treg,Th17细胞频数逐渐升高,且各组间比较差异性均具有统计学意义(P<0.05);从阳黄证、阴阳黄证到阴黄证,Treg型细胞因子IL-10,TGF-β逐渐升高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),Th17型细胞因子IL-17A,TNF-α,IL-23逐渐升高,其中IL-17A阳黄组与阴黄组、阴阳黄组与阴黄组比较均有差异性(P<0.05);从阳黄证、阴阳黄证到阴黄证,FoxP3表达逐渐下降,ROR-γt表达逐渐升高,二者组间比较其差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:HBV-ACLF患者早、中、晚期不同病程与中医证型的分布存在一定相关性,Treg,Th17细胞频数及IL-17A,TGF-β,IL-10与中医辨证分型存在相关性,提示Treg,Th17细胞对HBVACLF患者所处病期及中医证候分型辨证有一定参考价值。     

小青龙颗粒对支气管哮喘患者外周血Th17/Treg平衡影响的研究

目的探讨小青龙颗粒对支气管哮喘患者外周血Th17/Treg平衡的影响。方法将60例支气管哮喘急性发作期患者随机分为2组:治疗组给予小青龙汤治疗,对照组给予西医常规治疗组,治疗7 d后评定疗效。治疗前后采集标本进行Th17细胞、Treg细胞检测。结果 2组治疗后外周血Th17细胞百分率和Th17/Treg细胞的比值均下降,Treg细胞的百分率均上升;治疗后治疗组外周血IL-17细胞百分率、IL-17/TGF-β1的比值均低于对照组,TGF-β1细胞百分率高于对照组。结论小青龙颗粒可有效调控Th17/Treg失衡,在支气管哮喘发作期治疗和调节免疫上有应用价值。     

半夏泻心汤对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道微生态及Th17/Treg细胞平衡的影响＊

目的 观察半夏泻心汤对饮用葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立的溃疡性结肠炎（UC）模型小鼠Th17/Treg细胞平衡及肠道微生态的影响，从免疫失衡及菌群紊乱角度分析半夏泻心汤治疗UC的作用机制。方法 将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药（美沙拉嗪）组及半夏泻心汤组，除空白组外的各小鼠采用2.5% DSS水溶液自由饮用7天诱导建立UC小鼠模型。自实验第8日起，分别采用灭菌水、美沙拉嗪水溶液、半夏泻心汤水溶液给上述各组别小鼠灌胃。采用HE染色观察结肠组织病理学变化，ELISA方法检测组织炎症因子含量，流式细胞术检测Th17及Treg细胞的相对数量，16S rRNA测序技术进一步检测模型小鼠粪便中菌群的变化。结果 与空白组比较，模型组小鼠结肠损伤严重，血清炎症因子含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，中药干预组小鼠结肠损伤减轻，血清TNF-α、IFN-γ含量显著下降（P<0.05）。较空白组小鼠相比，模型组小鼠Th17细胞百分比显著升高（P<0.01），而Treg细胞百分比显著降低（P<0.01）。经半夏泻心汤干预后，其小鼠Th17细胞数量均显著降低（P<0.05），Treg细胞数量则显著升高（P<0.05）。同时，半夏泻心汤可升高门水平上Firmicutes、属水平上Lachnospiraceae_NK4A136_group、unclassified_f_Lachnospiraceae、Prevotellaceae_UCG-001、Alistipes；降低门水平上Actinobacteriota，科水平上Bifidobacteriaceae、Atopobiaceae、Clostridiaceae，属水平上Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002、Bifidobacterium的相对丰度。结论 半夏泻心汤可使Treg细胞相对数量升高、Th17细胞相对数量降低，以维持Th17/Treg细胞动态平衡；同时可降低有害菌Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002的相对丰度，升高产短链脂肪酸类菌Lachnospiraceae_NK4A136_group、Prevotellaceae_UCG-001、unclassified_f_Lachnospiraceae等菌属的相对丰度，调控肠道微生物结构及动态平衡，从而发挥治疗UC的作用。     

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠外周血Treg/Th17平衡的干预作用

目的从效应T细胞活化的源头Treg/Th17入手,探讨溃结灵调节Th17和Treg的平衡转化机制,揭示溃结灵治疗溃疡性结肠炎(UC)的深层次作用机理及作用靶点。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)(25 g·L-1TNBS+50%的乙醇)诱导复制UC大鼠模型,并随机分为模型组,溃结灵高、中、低剂量组,阳性药柳氮磺胺吡啶(SASP)组,另取12只SD大鼠设为正常组。流式细胞术检测大鼠外周血中Treg细胞和Th17细胞占总CD4+T细胞百分比及计算Treg/Th17之比。结果模型组Treg/Th17之比,较正常组显著降低(P0.01),溃结灵高、中、低剂量组以及柳氮磺胺吡啶组Treg/Th17之比与模型组比较均有显著升高(P0.05,P0.01)。结论溃结灵对TNBS诱导的实验性溃疡性结肠炎大鼠有明显的治疗作用,其作用机制可能与提高外周血CD4+Foxp3+Treg细胞比例和降低CD4+IL-17A+Th17细胞比例,进而恢复机体Treg/Th17平衡有关。     

基于Th17/Treg细胞平衡探讨抗纤益心方对自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制

目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1∶5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 m L(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg^-1·d^-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg^-1·d^-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3(Fox P3)m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt m RNA表达升高,Fox P3 m RNA表达降低,RORγt/Fox P3升高(P<0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt m RNA表达降低,Fox P3 m RNA表达升高,RORγt/Fox P3值降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方可能通过调节Th17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤。