人脐带间充质干细胞在神经系统疾病治疗中的研究进展

人脐带间充质干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,可被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、血管内皮细胞等,表达多种神经营养因子并具有免疫调节作用,且来源广泛、采集方便、无伦理学问题,为神经系统疾病治疗提供了新的细胞来源,可在多种神经系统疾病中发挥治疗作用。     

NRTN与GDNF联合神经干细胞移植对AD大鼠CREB和TrkB表达的影响

神经干细胞因可分化为各类神经细胞,为临床很多疾病提供了一个崭新的研究视野[1].阿尔茨海默病患者脑内神经病理改变的主要原因之一是淀粉样β蛋白使神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元的过程受到抑制而不能实现结构修复.外源性神经干细胞成为补充阿尔茨海默病患者中枢结构内缺损神经细胞的一个重要来源.Neurturin(NRTN)是近些年发现的一种对多种神经细胞的正常生存及分化具有维持和促进作用的神经营养类蛋白因子,尤其是能够诱导神经干细胞向胆碱能类记忆相关神经细胞的转化,CREB是NRTN下游作用的一个因子,其磷酸化与非磷酸化比例失衡与海马区记忆认知障碍直接相关[2].GDNF能够促使损伤的胆碱能神经元恢复,具有细胞来源的特异性.幼稚神经细胞能被GDNF维持存活及向某些类型神经细胞诱导分化但成熟的神经细胞GDNF仅表现促进存活而不能诱导其分化,TrkB是GDNF调节突触活性与细胞分化进而影响大鼠海马结构和神经行为的一个重要蛋白靶点[3].     

骨髓间质干细胞体外诱导分化神经样细胞功能的研究进展

骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可经药物、细胞营养因子、细胞共培养等多种方法诱导分化为神经样细胞,移植后可显著改善和促进损伤部位的结构和功能修复并代替坏死的神经元发挥正常的生理作用。研究发现此神经样细胞可能具备突触联系、神经递质、神经电生理等正常神经细胞的功能。     

细胞因子对神经干细胞增殖和分化的影响

神经干细胞是指具有分化为神经细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞的能力,能自我更新并能够提供大量脑组织细胞的细胞.以前的神经干细胞多来自于胎儿胚胎组织,不仅来源少,而且受到伦理道德的影响,所以其应用也受到了一定的限制.自Reynolds BA 1992从成年哺乳动物中培养出干细胞,提出成年人体内也存在干细胞以来,有关干细胞的研究已成为国内外学者研究的热点.由于成年神经干细胞来源广,不存在伦理道德问题,具有多分化潜能,能够携带外源性治疗基因,且可通过导入原癌基因获得永生细胞系等诸多优点,所以神经干细胞移植为神经退行性疾病的治疗提供了一个新的方向,其应用前景十分广阔.神经干细胞具有多分化潜能,尽管其分化方向主要取决于在神经管中的最初定位以及从神经管迁移后在大脑中的最终定位,但同时也受细胞外的环境因素影响.本文就近年来细胞外的环境因素对神经干细胞的增生和分化作一综述.     

人胚神经干细胞定向诱导分化为多巴胺能神经元的实验研究

目的　建立神经干细胞与骨髓基质细胞的共培养系统,根据该系统的条件性培养液诱导多巴胺能神经元的分化。方法　来源于胎脑海马、纹状体、额叶、中脑的神经干细胞与骨髓基质细胞建立起各自的共培养系统,并根据数种条件性培养液诱导神经干细胞的分化,以免疫细胞化学检测神经元的总体分化率及多巴胺能神经元的诱导率。结果　骨髓基质细胞及CO-BMSC能显著提高不同来源的神经干细胞的神经元分化率,同时只有中脑神经干细胞能被有效地进行多巴胺能神经元的诱导。结论 共培养系统诱发了神经干细胞与骨髓基质细胞的自/旁分泌作用,该作用可根据神经干细胞的区域特异性有效的定向诱导中脑神经干细胞的分化。     

骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死的研究现状

从传统的发生生物学观点来看 ,成年受损伤大脑不具备结构上有意义的自身修复功能 ,成熟脑细胞一旦受损就不能再生。骨髓间充质干细胞 (m esenchym al stem cells,MSCs) ,又称骨髓基质干细胞 ,是骨髓中非造血实质细胞的干细胞 ,具有高度的自我复制能力和多向分化潜能 ,可分化成多种细胞。传统观点认为 ,MSCs只能够分化成中胚层来源的间质细胞 ,如 :成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌腱细胞、网状细胞和血管内皮细胞 ,但近来研究表明它可以向三个胚层的多种组织分化 ,如来源于外胚层的神经元、神经胶质细胞等 ,故MSCs近年来被用于脑缺血动…     

神经干细胞的来源

神经干细胞是近年来神经科学领域研究的一个热点。神经干细胞可来源于胚胎干细胞和成年干细胞，前者包括早期胚胎细胞和胎儿神经组织细胞，由于从胚胎获取干细胞面l临伦理学的束缚，从成年来源的神经干细胞将是未来临床应用更具可行性的途径。成年来源的神经干细胞包括存在于成年神经组织中的干细胞和从其他组织中分化得到的干细胞，其中骨髓基质细胞具有多分化潜能，在适当的条件下可以诱导分化出神经干细胞，目前备受关注。     

神经干细胞的定向分化调控及移植治疗颞叶癫痫

一、神经干细胞的来源和分裂 神经干细胞是指具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的能力，能自我更新并足以提供大量脑组织细胞的细胞。     

SH-SY5Y细胞的神经分化与神经退行性疾病

SH-SY5Y细胞来源于人骨髓，是神经母细胞瘤细胞系的亚克隆，其形态、生理、生化功能与人体细胞相似，可转化为神经元样细胞，表现出一系列具有高度指导意义的神经生物学特性，且具有可简单快速地大规模扩增、可重复性、低成本维持、与原代神经元的培养相比没有伦理问题等优势，被广泛运用于神经系统疾病的体外实验研究中。SH-SY5Y细胞可以制备成未分化和分化两种形式，通过多种分化方案可使细胞分化为更接近于人体内成熟的神经元样细胞。不同的分化方案可使SH-SY5Y细胞表达不同的神经元表型，且表现出应用于不同疾病病理生理机制研究的优点和局限性，使其更适合研究神经退行性疾病，例如帕金森病、阿尔茨海默病等。该文就SH-SY5Y细胞的神经分化方法及其在神经退行性疾病实验研究中的应用进行综述。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2022, 49(3): 88-92.]     

大鼠骨髓间充质干细胞体外培养及分化为神经干细胞的实验研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,MSCs)体外分化为神经干细胞(neural stemcells,NSCs)的可能性。方法取4～6周SD大鼠双侧股骨和胫骨骨髓细胞进行体外培养,通过传代得到纯化的MSCs后换用分化液诱导,通过形态学观察诱导后细胞形态变化,并用免疫荧光检测不同天数细胞nestin的表达率;NSCs分化实验对所诱导的NSC的分化潜能进行检测。结果MSCs诱导后的细胞nestin表达率随天数增加逐渐升高,1周后形成高表达nestin的神经干细胞球形细胞团;在含血清培养基中可自然分化为神经元和神经胶质样细胞。结论MSCs能于体外分化出神经干细胞,且具有进一步的分化能力,骨髓来源的神经干细胞将可能作为种子细胞用于神经系统疾病的治疗。     

猫骨髓基质细胞诱导为神经干细胞的实验研究

目的观察猫骨髓基质细胞体外培养及诱导分化情况。方法从猫的骨髓中分离得到骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal cells．BMSC），在体外给予神经干细胞培养基培养，增殖后用分化诱导因子(维甲酸，Retinoic acid，RA)进行诱导分化．倒置相差显微镜下观察活细胞及免疫细胞化学染色情况。结果猫骨髓基质细胞在体外培养中胞体增大，镜下可见丰富的胞浆颗粒，继之出芽，贴壁生长，可形成克隆团，同时可传代培养。这些具有克隆能力的骨髓基质细胞能表达神经干细胞特异性抗原nestin，而且能分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞。结论猫骨髓基质细胞具有干细胞特征，在合适的条件下可扩增、形成克隆并诱导分化出神经胶质细胞和神经元特征细胞，它们可考虑作为神经系统功能缺失细胞移植治疗的种子细胞来源。     

小鼠胚胎干细胞诱导的神经前体细胞纹状体移植对PD大鼠的治疗作用

目的 观察来源于小鼠胚胎干细胞的神经前体细胞移植PD大鼠纹状体后的存活、分化以及细胞移植对PD大鼠的治疗作用。方法 采用无血清方法将小鼠胚胎干细胞定向诱导为神经前体细胞，免疫组化技术观察移植细胞的存活、分化。结果 胚胎体在N2选择性培养基选择生长5d后，85％以上的小鼠胚胎干细胞分化为nestin阳性的神经前体细胞。移植到PD大鼠纹状体后大部分神经前体细胞存活良好，移植细胞分别保持为未分化的nestin阳性的神经前体细胞和TH阳性的神经元。移植后3周，PD大鼠的旋转次数明显减少。结论 胚胎干细胞来源的神经前体细胞移植PD大鼠纹状体后能分化为TH阳性的神经细胞，对PD有治疗作用。     

皮肤源性前体细胞的生物学特性与临床应用前景

背景：皮肤源性前体细胞(skin-derived precursor cells, SKPs)是一种神经嵴来源的前体细胞，其具有多向分化潜能。 目的：对SKPs的培养分离、生物学特性以及临床应用前景作一综述。 方法：应用计算机检索Pubmed数据库(2001-01/2011-01)，以“Skin-derived precursor cells;SKPs” 为检索词； 结果与结论：共收集137篇关于皮肤源性前体细胞分离、培养、鉴定和分化的文献。排除观点陈旧、重复及类似研究，纳入38 篇符合标准的文献。发现皮肤源性前体细胞具有来源丰富、易于获取和具有多向分化的潜能等优点，能够分化为在体内外都有功能的Schwann细胞、骨样细胞和胰岛素样细胞等多种细胞类型。其在多种组织修复和疾病治疗，特别是神经损伤再修复中显示了良好的应用前景。但其研究仍存在一些问题，需要进一步深入研究。     

诱导骨髓间质干细胞分化为神经样细胞的体内外调控机制

近年来研究表明骨髓间质干细胞是一种具有多向分化潜能的种子细胞。它不仅可以向中胚层来源的细胞分化,还能打破胚层起源的局限性向外胚层的神经细胞转分化(transdifferentiation)。本文主要综述了骨髓间质干细胞分化为神经样细胞可能的体内、体外调控机制。骨髓间质干细胞在体内受其所处微环境的变化、相邻或相近或相接触的细胞可能的诱导趋化作用,可能还与细胞融合有关;骨髓间质干细胞在体外分化为神经样细胞主要是在抗氧化剂、钙离子通道阻断剂、细胞因子等的作用下进行诱导分化的,而且可能还与PKA或p38、ERK1/2等信号途径的激活、RNAi的作用有关。     

细胞外信号调节激酶在中枢神经系统中的研究进展

细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulatedkinase．ERK）是丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated proteinkinase,MAPK）的家族成员之一,也是迄今为止哺乳动物细胞中研究最深入的MAPK成员。它在介导细胞增殖、分化及存活中发挥重要作用,可被神经递质、神经营养因子、生长因子等多种信号激活。在中枢神经系统中目前研究发现ERK可通过基因表达、蛋白合成等影响神经细胞增殖分化、突触可塑性、轴突生长等,并且参与多种神经系统疾病的病理生理过程。     

成鼠骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化的实验研究

目的研究成鼠骨髓基质细胞体外培养的生长行为和分化情况。方法利用EGF、FGF-b等增殖及分化诱导因子和神经干细胞培养液进行培养,分化诱导,用细胞免疫组化染色进行细胞鉴定。结果成鼠骨髓基质细胞在体外培养中能形成细胞克隆团,具有增殖能力,并可分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞。结论骨髓基质细胞具有较强的自我更新及多向分化能力,在适宜的诱导分化条件下,可诱导为神经干细胞,分化出神经元和胶质细胞。     

脐血源性神经球分化为类雪旺细胞的研究

目的 研究脐血间充质干细胞(CB-MSC)向雪旺细胞谱系分化的生物表型和特征.方法诱导CB-MSC为悬浮的神经球,然后用胶质生长因子诱导分化为类雪旺细胞.分化的CB-MSC表现出和雪旺细胞类似的形态学的改变.通过免疫化学染色和Western blotting鉴定这些细胞雪旺细胞标志的表达情况;通过分化的CB-MSC与背根神经节神经元共培养观察其促进其轴突生长的作用.结果 未分化的CB-MSC很少表达nestin、GFAP和S-100.在CB-MSC诱导成神经球以后,82.38%±3.70%的细胞表达nestin,而GFAP和S-100仍然阴性.接种于分化液36 h后细胞表达nestin、GFAP、S-100,阳性率分别为43.78%±3.21%、35.42%±1.82%和29.49%±2.54%.相比未分化CB-MSC,分化的CB-MSC中神经轴突的形成率和轴突的长度明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论CB-MSC可以通过诱导转变为神经球,神经球可以诱导成雪旺细胞的形态,表型和功能类似雪旺细胞,可做为一种替代骨髓间充质干细胞的细胞来源,对于治疗神经系统疾病具有潜在的应用价值.     

骨髓基质细胞在中枢神经系统疾病中的应用

骨髓基质细胞具有多潜能性,可作为多种疾病细胞替代治疗和基因治疗的载体。最近研究发现,通过多种途径包括静脉注射、脑内不同部位行大鼠骨髓基质细胞移植,骨髓基质细胞均可在中枢神经系统内成活并可分化成为神经样细胞,提示骨髓基质细胞有可能取代神经干细胞用于中枢神经系统疾病的细胞治疗和损伤的修复。由于骨髓基质细胞取材容易,且能迅速培养扩增,通过自体移植又可避免免疫排斥反应,具有更广阔的应用前景。     

成年小鼠嗅球神经干细胞的培养和鉴定

目的 建立完善的成年小鼠嗅球神经千细胞分离培养和鉴定方法,探索新的成年神经干细胞种子来源. 方法 用无血清方法 分离培养成年小鼠嗅球来源的神经干细胞;用克隆培养、5-溴2-脱氧尿嘧啶核昔(BrdU)整合的方法 检验培养细胞的干细胞特性;用免疫荧光细胞化学的方法 检测BrdU、神经干细胞标记物巢蛋白(nestin)和SOX2、分化的细胞标记物Tuj1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、04的表达. 结果 从成年小鼠嗅球能够分离、培养出具有自我更新、增殖能力的神经球.构成神经球的细胞呈nestin和SOX2阳性,它们分化后产生TuJ1阳性的神经元、GFAP阳性的星形胶质细胞、04阳性的少突胶质细胞. 结论 成年小鼠嗅球存在神经干细胞,其能够在体外进行培养、增殖、分化.是神经干细胞的新的种子来源.     

神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究进展

神经干细胞(neuralstemsells,NSCs)具有多向分化潜能和自我更新能力及低免疫源性,从人和动物的胚胎和成体神经组织均可获得神经干细胞,体外培养或定向诱导分化后可做为移植治疗神经系统疾病的理想细胞来源。通过各种手段使内源性神经干细胞与移植的神经干细胞分化为适当的神经细胞来重建受损的神经结构,从而促进丧失的神经功能恢复。神经干细胞向病变部位的趋向迁徙性使其成为理想的药物与基因载体用于治疗恶性肿瘤和一些遗传性疾病。神经干细胞移植治疗神经系统疾病具有广阔的应用前景。