RNA干扰与肿瘤治疗的研究进展

RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)指与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA(double -strandedRNA ,dsRNA)导入细胞时 ,该序列mRNA发生特异性的降解 ,并导致基因表达的沉默。小干扰RNA(small-interferingRNA ,siRNA)是RNAi作用的主要介质。其可经体外合成再转入细胞 ,也可通过各种载体内源性表达。RNAi在基因功能研究选择上具有独特的价值 ,在疾病的治疗上也有良好的应用前景。     

RNAi在膀胱癌研究中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,即当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时,该mRNA发生降解而导致基因表达沉默.近来随着RNAi的机制不断被阐明,其作为一种工具在肿瘤的发病机制及治疗方面的应用也日益广泛,本文就RNAi在膀胱癌研究中的进展作一综述.     

RNA干扰对兔血管平滑肌细胞bcl-2基因表达的影响

目的研究RNA干扰(RNAi)对兔血管平滑肌细胞(VSMCs)bcl-2基因表达的干扰效应。方法用脂质体法将构建的装载靶向bcl-2基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体(pshRNA-bcl-2质粒)转染VSMCs(基因组),以转染空载体的细胞和加DMEM的空白细胞作为对照,采用半定量RT-PCR和Westernblot法检测bcl-2基因的表达,用MTT法检测VSMCs生长情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源性bcl-2基因在转录和转译水平上的表达,基因组bcl-2的mRNA和蛋白表达较空载体组和空白对照组明显减少(P<0.01);基因组的VSMCs生长也较空载体组和空白对照组明显受到抑制(P<0.01)。结论载体介导的RNAi技术可明显抑制内源性bcl-2基因的表达和VSMCs生长。     

RNA干扰技术及其在泌尿外科研究中的应用

RNA干扰(RNA interfcrence，RNAi)，是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程。近年来，随着对RNAi研究的不断深入，其作用机制正在逐步被阐明；同时作为阻断基因表达的新手段，RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性和特异性，RNAi为泌尿外科研究提供了有力的工具。本文就RNAi技术的有关历史、作用机理及其在泌尿外科研究中的应用作一概述。     

RNA干扰技术在以VEGF/VEGFR为靶点的膀胱癌治疗研究中的应用前景

RNA干扰（RNAi）是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象，它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA（dsRNA），该mRNA发生降解而导致基因沉默的现象。利用RNAi技术干涉VEGF表达，达到抑制肿瘤发展和转移的研究已较为广泛。膀胱癌生长、转移不仅有VEGF表达增多，同时发现VEGFR表达亦增高，成为RNAi的新靶点。现主要综述以VEGF/VEGFR为靶点的RNAi技术在膀胱癌治疗研究中的优势、发展前景以及存在问题与对策。     

RNAi在大肠癌微转移中的研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象是指内源性或外源性双链RNA(dsRNA)介导细胞内的mRNA发生特异性降解,导致靶基因的表达沉默,产生相应的功能表型缺失。它能够高度特异性、高效性地抑制基因的表达,被广泛运用于肿瘤研究。检测大肠癌微转移的基因标记物也越来越多,RNAi能够在肿瘤浸润和转移的多个步骤中抑制其表达,从而影响大肠癌微转移。     

RNA干扰在肝病治疗中的研究进展

RNA干扰（RNAi）是双链RNA（dsRNA）分子在mRNA水平关闭相应序列及基因的表达使其沉默的过程^[1]。RNAi最主要的功能特色在于它可调节和关闭基因的表达，促使mRNA降解或阻止蛋白产物合成，进而调控细胞的各种高级生命活动。其抑制基因表达作用具有高效性和特异性嘲。RNAi作为一种快捷方便的工具广泛用于高通量的研究基因功能、基因敲除、基因治疗和基因表达调控领域的研究。现对RNAi在肝病治疗中的最新进展作一综述。     

RNA干扰技术及其在泌尿外科研究中的应用

RNA干扰 (RNAinterfcrence ,RNAi) ,是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程。近年来 ,随着对RNAi研究的不断深入 ,其作用机制正在逐步被阐明 ;同时作为阻断基因表达的新手段 ,RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性和特异性 ,RNAi为泌尿外科研究提供了有力的工具。本文就RNAi技术的有关历史、作用机理及其在泌尿外科研究中的应用作一概述     

RNA干扰在器官移植中的基因治疗靶位点

RNA干扰（RNAi）是指双链RNA（dsRNA）分子在mRNA水平关闭相应序列基因的表达或使其沉默的过程，是一种序列特异性的转录后基因沉默。RNAi广泛存在于生物界中，从低等原核生物到植物、真菌、无脊椎动物，甚至近来在哺乳动物中也发现了此种现象。鉴于RNAi技术的高效性和特异性，目前RNAi技术已广泛应用于基因组学、     

利用RNA聚合酶Ⅲ依赖的启动子实现条件性RNA干扰

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指由双链RNA引发的同源mRNA特异性降解过程，目前已成为功能基因组学研究的有力工具，并广泛应用于肿瘤基因治疗研究领域。载体介导的RNAi是向细胞内引入小干扰RNA(small interference RNA)的经济、有效的方法，然而由于用来引导siRNA表达的U6、H1等RNA聚合酶Ⅲ依赖的启动子均没有可诱导性或组织特异性，所以在研究特定基因功能和在基因治疗中的应用均受到一定限制。最近研究表明使用顺页式／反式转录调控元件对PolⅢ启动子进行修饰或通过Cre—LoxP系统控制PolⅢ启动子或shRNA的结构可实现可诱导性、组织特异性等条件性RNAi。这些方法的建立不仅拓宽了RNAi技术的应用范围，而且大大提高了基于RNAi技术的肿瘤基因治疗的安全性，具有良好的临床应用前景。     

RNA干扰技术及其在肾癌基因治疗中的进展

RNA干扰（RNAi）是指生物体内由双链RNA（dsRNA）介导同源序列mRNA的特异性降解，从而导致基因沉默的现象。近年来，随着对RNAi研究的不断深入，其作用机制逐步阐明；同时作为阻断基因表达的新手段，RNAi技术也日趋成熟。它具有高效性和特异性，为RNAi在肿瘤基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文对RNAi技术及其在肾癌基因治疗研究中的进展作一综述。     

RNA干扰技术在肿瘤基因治疗方面的研究进展

RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)在哺乳动物细胞中是利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)诱导特异性基因表达抑制。其具有基因抑制效果确切、抑制具有严格的序列特异性、作用迅速等特点,故与基因替代、反义寡核苷酸治疗、细胞因子基因治疗等传统的肿瘤基因治疗方法相比,RNAi技术有着无可比拟的优势。本文对RNAi技术的作用机制及在肿瘤基因治疗方面的实验研究进展作一综述。     

慢病毒介导的RNA干扰沉默Wip1基因对人脑胶质母细胞瘤细胞生长的影响

目的 构建人Wip1基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默人胶质瘤U251细胞的Wip1基因并观察其对细胞生长的影响.方法 设计并合成3条Wip1基因特异性RNAi靶序列,构建到慢病毒pFU-GW-iRNA载体中.慢病毒包装转染HEK293T细胞,获得病毒上清并测定其滴度;感染U251细胞,实时定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot鉴定RNA干扰效率;筛选出基因沉默效率最高的慢病毒感染U251细胞,CCK-8法检测细胞的增殖,Western blot检测RNA干扰后的bcl-2蛋白表达.结果 PCR扩增和测序表明成功构建Wip1慢病毒干扰载体,病毒载体包装获得的病毒上清滴度在3×10~8～8×10~8 TU/ml.可以有效地沉默U251细胞中Wip1基因的表达,构建的RNAi慢病毒载体感染U251细胞后Wip1基因的mRNA表达量同对照组比较分别为36.3%、32.9%、23.8%.稳定Wip1 RNA干扰后的U251细胞4 d后细胞增殖能力下降35.1%.结论 慢病毒介导的RNA干扰可以高效稳定地沉默基因表达,Wip1基因促进了U251细胞的增殖.     

RNA干扰技术简介

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double—stranded RNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。近几年来RNAi研究取得了突破性进展，被((Science))杂志评为2001年的十大科学进展之。一，并名列2002年十人科学进展之首。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。     

RNA干扰在间充质干细胞及骨系细胞分化中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在细胞中引入外源双链RNA使相应序列的mRNA特异性降解,从而导致某一功能基因沉默的方法.Fire等[1]首次在秀丽阴杆线虫中发现了转录后水平的基因沉默机制,从而刷新了对基因调控机制的认识.后来有学者[2]发现在哺乳动物体内也广泛存在RNAi现象.RNAi的作用是在转录水平、转录后水平及翻译水平等多个不同水平上实现的.由于其高效性、特异性而被广泛应用于基因功能分析及基因治疗研究等很多领域.本文着重探讨近年来RNAi在间充质干细胞及骨系细胞生长、分化调控相关因子[包括PPARγ、Runx2、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、细胞凋亡、TonEBP等]作用机制方面的研究现状及其所取得的成果.     

RNAi与肿瘤相关基因及在肿瘤治疗中的研究

RNA干扰（RNA interfcrence,RNAi）,是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程,随着对RNAi研究的不断深入,其作用机制正在逐步被阐明;同时作为阻断基因表达的新手段,RNAi技术也日趋完善和成熟。而恶性肿瘤基因学说也越来越得到重视,肿瘤相关基因的研究更加细致深入。本文就RNAi技术的基本原理、肿瘤相关基因的概念以及RNAi技术在肿瘤尤其是泌尿系肿瘤相关基因研究中的应用作一综述。     

双链小片段干扰RNA抑制缺氧条件下乳鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α表达

目的　构建含缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)小片段干扰RNA(siRNA)靶序列的U6启动子表达框结构 ,观察其对缺氧条件下乳鼠心肌细胞HIF 1α表达的影响。　方法　分离培养乳鼠心肌细胞 ,分为常规培养液对照组、RNA干扰 (RNAi)组 (转染无效干扰序列Ⅳ )、RNAi抑制组 (转染有效干扰序列并按下游引物不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 )。设计、合成 3对 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )含HIF 1α编码基因片段(正、反义 )和 1对 (Ⅳ )随机序列 (正、反义 )的PCR下游引物。PCR法构建U6启动子表达框及相应正、反序列表达框 ,同时转染心肌细胞。每组每时相点 5皿细胞。于缺氧 1h后 ,用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定其蛋白水平表达 ,免疫组织化学法检验干扰效果。缺氧 6h后采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达。　 结果　筛选出的最佳抑制片段为Ⅱ组序列。缺氧 1h,对照组、RNAi组心肌细胞HIF 1α蛋白水平显著增高 ,Ⅰ、Ⅱ、ⅢRNAi抑制组HIF 1α蛋白水平较对照组明显降低 ,其中Ⅱ组降低最为显著 (P <0.0 1);缺氧 6h,RNAi组心肌细胞HIF 1αmRNA水平较常氧条件下明显增高 (P <0.0 1);RNAi抑制Ⅱ组未见明显增高 (P >0.0 5 )。　 结论　构建的HIF 1αⅡ组表达框能有效地抑制缺氧乳鼠心肌细胞HIF 1α表达     

RNAa与肿瘤

小分子RNA在基因表达调控方面起着至关重要的作用.10年前研究发现小分子双链RNA(dsRNA)进入细胞后能导致同源性基因表达沉寂,即RNA干扰现象(RNAi).RNAi是由与靶基因具有同源性的dsRNA诱发的,这些dsRNA可产生于细胞内,由RNA酶Dicer将长的双链RNA分子切割成21个碱基对片断而生成;也可以在细胞外人工合成,然后引入细胞.