罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的工艺研究

目的 建立罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的方法.方法 通过单罐单因素实验,正交设计分析提取时间、提取温度和料液比对蛹虫草多糖提取的影响;设计罐组式动态逆流提取装置,重点探讨料液比和提取级数对多糖提取得率的影响.结果 罐组式动态逆流提取虫草多糖的条件为:提取时间150 min,温度90℃,料液比1:15和级数为5级,提取率88.8%,显著高于单罐提取率79.5%.结论 蛹虫草多糖的罐组式动态逆流提取工艺节省能源,缩短生产时间,提取率较高.     

工业化培育北虫草生物活性成分含量变化的研究

目的:明确工业化培育北虫草的主要生物活性成分在不同生长时期含量变化的规律.方法:采用HPLC和苯酚硫酸法,分别对不同生长时期的工业化培育的北虫草的虫草素、腺苷和虫草多糖含量的变化进行了跟踪.结果:培养周期内虫草素含量随生长期增长而不断增高,而腺苷和虫草多糖含量均在第40d达到最高值.结论:本研究结果对工业化生产,合理有效地控制北虫草产品生物活性成分的含量,具有一定指导意义.     

工业化培育北虫草生物活性成分含量变化的研究

目的:明确工业化培育北虫草的主要生物活性成分在不同生长时期含量变化的规律.方法:采用HPLC和苯酚硫酸法,分别对不同生长时期的工业化培育的北虫草的虫草素、腺苷和虫草多糖含量的变化进行了跟踪.结果:培养周期内虫草素含量随生长期增长而不断增高,而腺苷和虫草多糖含量均在第40d达到最高值.结论:本研究结果对工业化生产,合理有...     

不同产地北虫草蛋白质提取工艺及含量测定研究

目的:优选北虫草可溶性蛋白质的最佳提取工艺。方法:对北虫草蛋白质提取条件进行单因素考察,并采用L9(34)正交试验设计法及考马斯亮蓝染色法,以北虫草可溶性蛋白质含量为指标,考察p H值、提取温度、料液比、提取时间4个因素对可溶性蛋白质提取率的影响,从而确定北虫草蛋白质的最佳提取工艺。结果:建立了北虫草蛋白质的最佳提取工艺:向北虫草药材粉末中加入60倍量p H为10的蒸馏水,在温度30℃条件下回流提取70 min。结论:优化的提取工艺稳定、合理、可行,能正确反映北虫草药材中的蛋白质含量,为北虫草生物活性物质的进一步研究提供了实验依据。     

正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺

目的:采用正交设计优化蛹草拟青霉菌丝体中虫草素和虫草多糖的提取工艺。方法:建立高效液相色谱测定指标成分虫草素含量的方法,采用正交试验法考察醇浓度、加醇量、提取次数与时间的组合3个因素对虫草素乙醇提取率的影响。醇提后残渣以水提取多糖,采用苯酚-浓硫酸比色法在490 nm处测定虫草多糖的含量,以单因素法筛选多糖提取工艺。结果:HPLC色谱条件下精密度的RSD为0.30%,稳定性的RSD为1.27%,重复性的RSD为2.93%。以乙醇浓度为90%,加醇量为10倍量,提取3次,每次1 h虫草素的提取率最高;而以乙醇浓度为95%,加醇量为6倍量,提取3次,每次1 h提取虫草素后的残渣再以水提取,虫草多糖得率最高。结论:所优化的提取工艺虫草素和虫草多糖提取率均较高,采用的含量测定方法稳定可靠。     

响应面法优化蛹虫草菌丝体多糖超声波提取工艺的研究

目的利用单因素及响应面分析法优化蛹虫草菌丝体多糖超声提取工艺。方法通过单因素实验选取实验因素与水平,在单因素实验的基础上,以液料比、超声功率、提取时间为响应因子,进行3因素3水平的响应面实验,并与传统水提法进行比较分析。结果超声提取蛹虫草菌丝体中多糖的最佳工艺条件为：提取时间504S,提取功率466w,液料比104：1（ml：g）,提取率预测值为7．47％,验证值为7．45％,与预测值的相对误差为0．27％。结论经响应面法优化蛹虫草菌丝体多糖超声波提取工艺后,多糖得率比传统水提法有所提高,且提取时间大大减少。     

正交试验法优选虫草安肺片提取工艺

目的:优选虫草安肺片的提取工艺.方法:以盐酸麻黄碱提取量为评价指标,HPLC测定含量,选择加水量、提取时间、提取次数为考察因素,采用L9(34)正交试验优选虫草安肺片的提取工艺.结果:最佳提取工艺为分别加10,8,8倍量水煎煮2,1,1h.结论:优选出的提取工艺简单、可行,适应大生产需要,可作为该制剂合理开发的依据.     

正交实验优化超声辅助提取虫草花多糖工艺

目的 采用超声波辅助提取虫草花多糖工艺研究.方法 分别考察超声波处理时间,超声波处理功率,超声波处理温度对提取率的影响.结果 最佳提取工艺为:超声波浸提温度为80℃,超声波处理功率140 W,超声波处理时间为40min.结论 超声波处理可有效的提高虫草花多糖的提取率.     

人工培育北冬虫夏草主要有效成分分布特点的研究

目的:研究人工培育北冬虫夏草主要有效成分的分布特点。方法:以虫草素、腺苷和虫草多糖的含量为主要评价指标,采用HPLC和苯酚-硫酸法,分别研究了这三种活性物质在人工北冬虫夏草子实体上部、中部、下部和培养基中的分布情况。结果:人工北冬虫夏草整个生长过程中,腺苷、虫草素和虫草多糖在培养基中的含量都远远低于其他三个部分。结论:人工北冬虫夏草子实体的活性物质主要分布在子实体中,在培养基中的含量极少。     

RP-HPLC法测定不同北虫草子实体和培养基中腺苷和虫草素含量的比较

目的:比较九种北虫草子实体以及3种培养基中腺苷和虫草素的含量。方法:超声水提法提取样品中腺苷和虫草素,用RP-HPLC法测定其含量。结果:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量都存在差异,腺苷含量为(1.054±0.259)-(2.931±0.356)mg·g-1;虫草素含量差异较大,为(0.435±0.016)-(4.981±0.212)mg·g-1。3种不同培养基中虫草素和腺苷也存在差异,其中3号培养基虫草素含量最高,达1.046 mg·g-1,1号培养基腺苷最高,为0.612 mg·g-1。结论:九种北虫草子实体腺苷和虫草素含量差异较大;三种培养基中腺苷和虫草素含量也存在差异。     

活体柞蚕蛹复壮北虫草菌种初探

目的：对北虫草菌株进行复壮处理以提高菌种活力。方法：用一株人工培育的北虫草菌株P感染刚化蛹的活体柞蚕蛹,蛹体近头部长出子实体后,待子实体近成熟期时采集孢子进行有性繁殖对原菌株进行复壮。结果：复壮后菌株10-2的子实体产量和生物转化率分别是原来菌株P的1.2倍和1.5倍。结论：在表面消毒过的活体柞蚕蛹上接种液体菌株活化复壮菌种的方法是可行的。     

三种虫草抗氧化活性的化学发光法研究

为研究冬虫夏草、蛹虫草、蒙山虫草3种虫草的抗氧化活性，考察实验条件对结果的影响，采用化学发光法测定3种虫草清除超氧阴离子自由基的活性。结果显示，3种虫草的水提液中蛹虫草样品的抗氧化活性较高，蒙山虫草和冬虫夏草的抗氧化活性比较接近。提示：蛹虫草和蒙山虫草有着良好的应用前景，有望替代冬虫夏草应用于临床。     

北虫草对正己烷所致大鼠损伤的保护作用

采用正己烷急性吸入模型研究北虫草的药效和正己烷的损伤作用。结果表明：北虫草具有抗脂质过氧化作用;正己烷的急性吸入可引起或增强机体活性氧自由基的损伤反应,导致脂质过氧化损伤,这可能是正己烷对机体毒性作用的机制之一。     

人工蛹虫草中核苷类化学成分的研究

目的：研究人工蛹虫草Cordyceps militaris中核苷类化学成分。方法：建立人工蛹虫草中核苷类化合物的提取方法并用色谱水法分离各个核苷类化合物。结果：分离鉴定了4个化合物，分别是尿嘧啶核苷（1）、腺嘌呤核苷（2）、鸟嘌呤核苷（3）和酪氨酸（4）。结论：从核苷类物质分析来看，该人工蛹虫草菌丝体中核苷类物质含量丰富，主要为化合物1、2、3，三者总和约占菌丝体干重的1．3％。     

Effects of Cordyceps sinensis, Cordyceps militaris and their isolated compounds on ion transport in Calu-3 human airway epithelial cells

AIM OF THE STUDY: The traditional Chinese medicine Cordyceps sinensis (CS) (Clavicipitaceae) improves pulmonary function and is used to treat respiratory disease. Here, we compare the efficacy and mechanisms of action of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris (CM) (Clavicipitaceae) in Calu-3 human airway epithelial monolayer model. MATERIAL AND METHODS: The extracts of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris, as well as their isolated compounds, cordycepin and adenosine, stimulated ion transport in a dose-dependent manner in Calu-3 monolayers. In subsequent experiments, transport inhibitor bumetanide and carbonic anhydrase inhibitor acetazolamide were added after Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris extracts to determine their effects on Cl- and HCO3- movement. RESULTS: The results suggested that Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris extracts may affect the anion movement from the basolateral to apical compartments in the airway epithelia. CONCLUSIONS: Basolateral Na+-K+-2Cl- cotransporter and apical cAMP-dependent cystic fibrosis transmembrane conductance regulator Cl- channel are involved in the process. The results provide the first evidence for the pharmacological mechanism of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris on respiratory tract.     

Anti-inflammatory and related pharmacological activities of cultured mycelia and fruiting bodies of Cordyceps militaris

This study aimed to elucidate pharmacological activities of Cordyceps militaris. The 70% ethanolic extracts of cultured mycelia (CME) and fruiting bodies (FBE) of Cordyceps militaris were prepared. CME was able to directly scavenge the stable free radical diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), indicating its antioxidant activity. Both CME and FBE showed topical anti-inflammatory activity in the croton oil-induced ear edema in mice. CME was found to contain acute anti-inflammatory activity, which was evaluated using the carrageenin-induced edema, and also strong antinociceptive activity in writhing test. CME and FBE contain potent inhibitory activity on the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) angiogenesis in a dose-dependent manner. Cordycepin, a metabolite of Cordyceps militaris, appeared to be at least partly responsible for its anti-inflammatory and anti-angiogenic activities. CME concentration-dependently inhibited the NO production and iNOS expression upon stimulation by lipoposaccharide in RAW 264.7, a murine macrophage cell line. In brief, we demontrate that Cordyceps militaris possesses anti-inflammatory and antinociceptive activites, and related antioxidant, anti-angiogenic, and NO production-inhibitory activities.     

紫外诱变选育北虫草新菌种的研究

针对野生菌种在人工培养基上容易丢失产生子实体的能力,稳定性差,且野生型菌种虫草菌素等生理活性物质含量较低等影响北虫草规模化人工栽培的问题,本文探索利用紫外线对出发菌株P进行诱变处理,以生物转化率、虫草素、腺苷含量为指标,筛选出高产菌株89,其有性子实体中虫草素含量和腺苷含量分别是出发菌株的2.5倍和3.6倍.进一步对其...     

人工蛹虫草药材高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:利用高效毛细管电泳(HPCE)技术建立人工蛹虫草药材的指纹图谱。方法:采用50 cm×75μm毛细管柱,以0.5 mmol/L硼砂溶液为缓冲液,运行电压为20 kv,检测波长为254 nm,柱温25℃。结果:建立的指纹图谱中共有11个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论:该法准确简便,可作为控制人工蛹虫草中药材内在质量的有效手段。     

用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究

目的：研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的最佳方法。方法：通过对不同菌株在固体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法，对影响虫草素产量和含量的各影响因子(包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等)进行系统优化。结果：JF-1是虫草素生产的最佳菌株，现蕾期是收获提取虫草素的最佳时期；最佳的培养基配方为水料比1.1∶1(mL·g^-1)，营养水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为22.6，6.0，25.4 g·L^-1，营养水pH 6.6；最佳的环境条件为：光照强度4 400 lx，每日光照时间18 h，温度18～22 ℃。结论：用以上方法固体发酵生产虫草素，经过约13 d的培养，培养基中虫草素达到0.60%，比传统液体发酵方法的最高产量高近2倍，并且培养时间缩短2 d。