促凋亡蛋白Smac和Caspase9在内毒素诱导体外肝细胞凋亡中的作用

目的 探讨内毒素致肝细胞凋亡和内毒素血症在重症肝炎发病中的作用机制.方法 培养L02肝细胞并进行传代,采用内毒素10 mg/ml分别在4小时、8小时、16小时和24小时进行刺激,并将其分为4小时、8小时、16小时和24小时组和对照组5组,采用流式细胞术和荧光染色检测肝细胞凋亡以及免疫组化法检测Smac和Caspase9的表达.结果 内毒素直接作用的L02细胞在形态学上表现出胞浆浓缩核凝聚成团块、形成凋亡小体,应用Hcechst对内毒素刺激的L02细胞进行染色并在荧光显微镜下观察,Hcechst染色显示凋亡细胞呈蓝色荧光.流式细胞仪分析内毒素刺激4小时、8小时、16小时和24小时后晚期凋亡率分别为2.3%、4.0%、6.2%和18.2%,呈进行性增高(P<0.01),与对照组晚期凋亡率(0.3%)比较有显著性差异(P<0.05),Smac和Caspase9蛋白随着刺激时间的增长表达率逐渐增高(P<0.01),与对照组比较,各刺激组Smac和Caspase9蛋白表达显著增高(P<0.05).各组Smac与Caspase9蛋白表达呈正相关关系(r=0.527,P<0.001).且Smac和Caspase9蛋白在胞浆中呈棕黄色表达.结论 内毒素在体外可以通过促凋亡蛋白Smac及增强下游通路Caspase9的活性直接诱导正常肝细胞凋亡.     

D-半乳糖氨大鼠肝衰竭模型并发内毒素血症对Smac凋亡通路的影响

近年研究表明,细胞凋亡是导致肝损伤的重要机制之一,内毒素血症作为肝功能衰竭的第二次打击,在肝功能衰竭病理过程的发生、发展过程中发挥重要作用.线粒体释放的第二种Caspase激活物Smac是2000年发现的促凋亡分子.     

CasPase蛋白酶活化在牛磺酸脱氧胆酸诱导 HepG2细胞凋亡中的作用

目的　探讨Caspase蛋白酶活化在牛磺酸脱氧胆酸 (TDCA)诱导HepG2细胞凋亡中的作用。 方法　应用苏木精 伊红染色、Hoechst 3 3 2 5 8染色、电镜和DNA电泳对细胞凋亡定性 ;应用流式细胞仪对细胞凋亡定量 ;检测TDCA诱导HepG2细胞凋亡过程中 ,凋亡特异性蛋白酶Caspase 3、8、9活性的变化。 结果　TDCA 40 0 μmol/L孵育 12h可诱导显著HepG2细胞凋亡 ,凋亡率为 (5 0 .3 5± 2 .2 0 ) % ;在TDCA诱导HepG2细胞凋亡过程中 ,Caspase 9、3蛋白酶活性显著提高 ,Caspase 8活性仅轻度增高。 结论　TDCA可能主要是通过激活Caspase 9活化途径 ,启动Caspase级联反应介导细胞凋亡 ,Caspase 8活化在TDCA诱导的细胞凋亡中可能不起主要作用。     

近3年线粒体介导细胞凋亡的研究进展

线粒体是细胞活动的"动力工厂",在调节细胞生存凋亡过程中发挥关键性的作用。在细胞凋亡过程中,线粒体膜通透性转换孔过度的开放会促使线粒体跨膜电位降低,导致一些相关的促凋亡因子,如细胞色素C凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)家族以及膜间隙中的Caspase前体蛋白(procaspase)等从线粒体中释放进入胞质,共同参与对细胞的调节。研究线粒体对细胞凋亡的机制,对于研究调控细胞凋亡具有极其重要的理论意义。本研究以线粒体对细胞凋亡作用近3年研究为基础,对线粒体介导细胞凋亡中的作用机制进行综述。     

塞来昔布诱导大肠癌细胞凋亡与细胞色素C依赖性信号途径活化相关

目的　观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT 2 9的凋亡诱导作用 ,并通过分析塞来昔布作用后的HT 2 9细胞的细胞色素C、Caspase 9和多聚ADP核糖多聚酶 (PARP)蛋白表达的变化 ,探讨其诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制。方法　大肠癌细胞凋亡用吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜、流式细胞仪 (FCM )技术测定 ,细胞色素C、Caspase 9和PARP蛋白表达用Western印迹技术检测。 结果　荧光染色法显示塞来昔布在 0～ 12 0 μmol/L呈浓度和时间依赖性诱导HT 2 9结肠癌细胞凋亡。FCM结果显示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率分别为 (7.31± 2 .37) %～ (4 8.30± 2 .86 ) %。塞来昔布诱导线粒体释放细胞色素C入胞质 ,激活Caspase 9,继而裂解活化PARP。结论　塞来昔布可诱导大肠癌细胞株HT 2 9细胞凋亡 ,其机制涉及细胞色素C依赖性凋亡调节信号通路。     

间隙连接蛋白43对胰腺癌细胞株BxPC3凋亡的作用及其机制研究

目的 研究间隙连接蛋白43(Cx43)在胰腺癌细胞凋亡中的作用,并探讨其机制.方法 采用脂质体2000法将pcDNA-Cx43、pcDNA-Cx43N、空质粒peDNA3.0、siRNA-Cx43和对照siRNA-NC分别转染BxPC3细胞.Western blotting检测细胞Cx43蛋白表达、细胞色素C(Cyt C)含量;流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位;荧光分光光度计检测细胞Caspase-9和Caspase-3活性;染料传递法测定细胞间间隙连接(GJ).结果 Cx43转染BxPC3细胞后,Cx43蛋白表达明显上调,细胞凋亡从空质粒转染组的(6.35±0.43)%增加到(14.29±1.24)%,经H_2O_2处理后,从(20.34 ±2.47)%增加到(31.27±2.56)%(P<0.05),同时线粒体膜电位下降,Cyt C从线粒体释放增多,Caspase蛋白酶活性增加;而siRNA43干扰细胞后,细胞凋亡从(7.42±0.47)%减少到(5.19±1.37)%,经H_2O_2处理后,从(19.43±1.71)%减少到(11.67±1.97)%(P<0.05),线粒体膜电位去极化,Cyt C从线粒体释放减少,Caspase 酶活性下调.细胞间间隙连接指数在无GJ抑制剂B-GA情况下从对照组的14.52±0.57增加到peDNA-Cx 43转染组的23.05±3.84,在存在β-GA情况下从1.70±0.24增加到3.84±0.45(P<0.05),但细胞凋亡率改变无显著差异.结论 Cx43可通过线粒体凋亡途径促进BxPC3细胞凋亡,Cx43调节细胞凋亡存在间隙连接以外的机制.     

Smac／DIABLO与消化系统肿瘤关系的研究进展

Smac/DIABLO （the second mitochondrial activator of caspase/direct IAP binding protein with low pI）是一种新发现的线粒体蛋白,在细胞发生凋亡时,与细胞色素c一起被线粒体释放到胞质中,与IAPs结合,解除IAPs对caspase的抑制,从而诱导细胞凋亡。Smac这种促凋亡作用对消化系统肿瘤的发生、发展以及肿瘤的治疗具有重要意义。     

线粒体DNA与细胞凋亡相关性研究进展

细胞凋亡亦称程序性细胞死亡是一种重要的生命现象,不仅出现在生理情况下,更与肿瘤、自身免疫性疾病及退行性神经病变等多种疾病密切相关。细胞凋亡过程中许多重要事件与线粒体有关,例如半胱氨酸蛋白酶家族激活剂的释放(如细胞色素C)、电子传递链的变化、线粒体跨膜电位的消失、异常的细胞氧化-还原反应及促进凋亡或抑制凋亡的bcl- 2家族的参与等。而线粒体又受核DNA( n DNA)和线粒体DNA( mt DNA)的双重控制,其中mt DNA控制线粒体的呼吸作用等基本特征。因此,近年来mt DNA与细胞凋亡之间的相关性研究日益受到重视,现将其研究进展综…     

线粒体与细胞凋亡的研究进展

线粒体在细胞凋亡和肿瘤的发生及耐药中有重要作用,线粒体信号转导通路在细胞能量代谢、细胞凋亡启动中的特殊地位,及线粒体DNA(mtDNA)突变与肿瘤耐药的密切关系,使探讨线粒体与肿瘤细胞凋亡的相关性研究具有重要的理论和临床意义。     

线粒体凋亡通路在肝细胞癌发生、发展中作用的研究进展

线粒体介导的凋亡通路,主要是由于其上游信号分子作用于线粒体膜,导致线粒体膜的通透性改变,从而使线粒体内的Cyt C、AIF、Smac等凋亡相关因子释放到线粒体外,引起下游caspase家族蛋白活化或者直接作用于相应底物,启动细胞凋亡程序。在正常肝细胞的发育和再生过程中,细胞凋亡可清除异常的肝细胞。若异常的肝细胞凋亡不足,可导致肝癌的发生;而肝癌细胞凋亡不足,会诱导癌细胞的恶性化演进。线粒体凋亡通路可诱导肝癌细胞凋亡,而线粒体膜的通透性改变在线粒体凋亡通路中起枢纽作用,外源性或内源性的应力刺激激活Bcl-2家族或caspase家族,启动线粒体膜的通透性改变并诱导肝癌细胞的凋亡。通过靶向干预该通路中的相关分子,可为肝癌的临床治疗提供新策略。     

青少年高血压的研究进展

随着人们生活和行为方式的改变,高血压发病明显呈年轻化趋势。在青少年时期识别高血压病高危人群有助于早期进行有效干预和治疗,降低未来高血压的发生率及其严重性。现试从青少年高血压的诊断、发病因素、特点、治疗策略等方面的研究进展作一综述。     

Morbidity in cardiovascular diseases in immigrants in Sweden

INTRODUCTION: Although immigration to Sweden has increased in the last few decades, the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease in immigrants are unknown. The aim of the present study is to estimate whether place of birth affects the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease. MATERIAL AND METHODS: The study was designed as a follow-up study on morbidity in cardiovascular disease and coronary heart disease between 1 January 1997 and 31 December 1998, including three and a half million persons with age range 35-64 years, of whom 550 000 were born abroad, from the database MigMed consisting of the whole Swedish population. Incidence rates and relative risks were estimated by indirect standardization and a proportional hazard model. RESULTS: The age-adjusted risk of coronary heart disease was higher in most foreign-born groups than in Swedes. For example, in nine of 12 male groups, the relative risks varied between 1.1 and 2.2, and in seven of 12 female groups, the relative risks varied between 1.4 and 2.5. When also adjusting for level of education and employment status, the risks were still high, but on a lower level. CONCLUSIONS: Foreign-born people possess an over-risk of cardiovascular or coronary heart disease(CVD/CHD) compared with Swedish-born persons, also when level of education and employment status are taken into account.     

C·肉毒杀鼠素(冻干剂)应用研究

目的为研究C·肉毒杀鼠索对杀灭达乌尔黄鼠(简称黄鼠)的大面积应用情况和对家畜、家禽的毒害作用,进行了C·肉毒杀鼠素的应用研究.方法大面积投毒采用ES-2药饵撒播机[1],间隔约80m进行条投.羊、鸡采用直接灌胃.结果大面积应用的灭鼠率为83.72%.对羊、鸡最高剂量分别为500万MLD、150万MLD,均未出现中毒现象.结论 C·肉毒杀鼠素是较为理想的草原大面积杀灭黄鼠的理想、首选药物.     

高龄老年高血压的临床研究进展

随着社会老龄化进程的加快,80岁以上高龄老人的绝对数量以及占总人口的比例均在增加,如何提高高龄老年高血压的防治水平备受关注。现试从高龄老年高血压的临床特点、治疗策略等方面的临床研究进展作一综述。     

中国老年性耳聋的研究与干预进展

老年性耳聋已成为影响我国老年人生活质量的最主要的慢性病之一。助听器是目前帮助听力损失的老年人克服交流障碍的主要手段。在我国,数字助听器已逐渐取代模拟助听器并且体现出了更好的效果。但是老年听力损失患者中使用助听器的比例仍然很小。人工耳蜗植入也已被应用在老年患者中。我国针对老年人的听力康复服务还有较长的路要走。     

Sex Differences in Ethanol-induced Dopamine Release in Nucleus Accumbens and in Ethanol Consumption in Rats

In vivo microdialysis was used to examine changes in nucleus accumbens and striatal dopamine, dihydrophenylacetic acid (DO-PAC), and homovanillic acid (HVA) following acute administration of ethanol (0.0, 0.25, 0.5, 1.0, or 2.0 g/kg) in male and female Long-Evans rats. Following dialysis, rats were trained to bar-press for oral ethanol reinforcement. In nucleus accumbens, females showed significant increases in extracellular dopamine following 0.25 or 0.5 g/ kg ethanol, but did not show significant increases over baseline at the higher doses. Males showed slight increases in dopamine at the lower doses and decreased dopamine at 2.0 g/kg. In striatum, both sexes showed increased dopamine at the lower doses and decreased dopamine at 2.0 g/kg. There were slight increases in nucleus accumbens DOPAC and HVA at some doses in both sexes, but no changes in striatal metabolite levels. In addition to showing increased responsiveness to ethanol-induced mesolimbic dopamine stimulation, females consumed more ethanol than males during behavioral testing. The pattern of both greater ethanol-induced nucleus accumbens dopamine release and greater ethanol consumption in females supports the hypothesis that ethanol reward is mediated, at least in part, by the mesolimbic dopamine system.     

Epstein-Barr virus in malignancies in renal transplant recipients in Japan

A role for Epstein-Barr virus (EBV) in the development of malignancies including lymphomas, and carcinoma of the stomach, nasopharynx, thymus and salivary gland is suggested. It is indicated that EBV evokes polyclonal-B-cell-proliferative diseases in immunocompromised hosts, such as transplant patients, which results in monoclonal malignant lymphomas. The suppression of immune functions in these patients is thought to lead to incomplete elimination of the cells expressing EBV latent infection genes. To examine the etiological role of EBV in the development of malignancies following renal transplant in Japan, 42 malignancies in 1744 cases of renal transplant were studied for the presence and type of EBV. The polymerase chain reaction revealed that 5 malignancies were positive for EBV, all type A: 2 of 2 cases of non-Hodgkin's lymphoma (NHL), 2 of 8 cases of gastric adenocarcinoma of the common type, and 1 of 2 cases of gastric plasmacytoma. In situ hybridization revealed positive signals in the nucleus of tumor cells in 2 cases of NHL and 1 of plasmacytoma. Positive signals were found in the small lymphoid cells but not in the tumor cells in 2 cases of gastric carcinoma. On the basis of these findings, a role for EBV in the development of malignancies in renal transplant patients is unlikely except for lymphoid neoplasias.Abbreviations PCB polymerase chain reaction - EBV Epstein-Barr virus - NHL non-Hodgkin's lymphoma     

糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道的改变

目的研究糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道的改变及增加葡萄糖代谢对其的作用。方法取体重150～200g的雄性SpragueDawley大鼠,腹腔注射链脲菌素(STZ)建立糖尿病模型,采用酶解法获得单个心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术记录钾电流。结果糖尿病大鼠心室肌细胞瞬间外向性钾流(Ito)密度较对照组显著降低[ 60mV时,分别为(15.90±1.19)pA/pF(n=25)和(28.55±0.97)pA/pF(n=12),P<0.001];分别用100nmol/L胰岛素及1.5mmol/L二氯乙酸在体外预处理心室肌细胞4～5h和3～4h使Ito密度恢复至对照组水平[ 60mV时,分别为(29.40±0.38)pA/pF(n=20)和(27.35±0.97)pA/pF(n=12)]。结论糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道功能发生改变,增加葡萄糖代谢可逆转这一改变,提示葡萄糖代谢与Ito功能间存在一定关系。