PCR－RFLP用于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒野毒株与疫苗相关株的鉴别

利用互补于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒ＶＰ１区的一对引物，扩增病毒核酸中约２６８ｂｐ的片段。产物经ＨａｅⅢ、ＲｓａⅠ、ＸｂａⅠ三种限制性内切酶切割后，用２％琼脂糖凝胶电泳检测，观察各分离株与ＳａｂｉｎⅠ型株酶切图谱的异同。在所检测的１３株病毒分离株中，只有１株的酶切图谱与ＳａｂｉｎⅠ型株的相同，为疫苗相关株，其它的１２株均为野毒株。本实验的结果表明从不同地区、不同年份所得的Ⅰ型脊髓灰质炎病毒分离株的碱基组成是有差异的。     

牵张延长下颌骨对二腹肌纤维型构成影响的研究

目的 :研究牵张延长下颌骨前后二腹肌的组织化学特征。方法 :应用肌球蛋白ATP酶 (pH9.4)染色法 ,观测了牵张前后 8只狗的二腹肌肌纤维类型 ,并用VIDAS图像分析仪测量其横截面积。结果 :ATP酶染色 ,二腹肌肌纤维分为Ⅰ型和Ⅱ型 ,Ⅰ型纤维数量较Ⅱ型纤维少。牵张延长下颌骨后 ,Ⅰ型纤维数量显著性增多 ,Ⅱ型纤维数量显著性减少。牵张成骨后 ,Ⅰ型纤维、、Ⅱ型纤维的横截面积与术前比较没有显著性差异。结论 :牵张延长下颌骨后 ,与牵张方向平行的二腹肌肌纤维型分布发生了与功能变化相适应的改变     

我国辽宁地区粘多糖贮积症Ⅰ型患者α-L-艾杜糖醛酸酶基因的一种常见突变

目的:探讨我国辽宁地区粘多糖贮积症Ⅰ型患者α-L-艾杜糖醛酸酶基因的突变类型。方法:用PCR、RFLP、SSCP和DNA测序的方法检测我国辽宁地区10个粘多糖贮积症Ⅰ型家系α-L-艾杜糖醛酸酶基因的突变情况。结果:①发现我国辽宁地区粘多糖贮积症Ⅰ型患者α-L-艾杜糖醛酸酶基因存在1种新的突变类型1278-g-a。②在10个家系中未发现欧裔患者中最常见的突变W402X和Q70X及日本患者中最常见的突变R89Q。结论:我国辽宁地区粘多糖贮积症Ⅰ型患者α-L-艾杜糖醛酸酶基因的突变情况不同于其他国家和地区。     

PCR—RFLP用于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒野毒株与疫苗相关株…

利用互补于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒ＶＰ１区的一对引物，扩增病毒核酸中的２６８ｂｐ的片段。产物经ＨａｅⅢ，Ｒｓａ，Ⅰ，ＸｂａⅠ三种限制性内切酶切割后，用２％琼脂糖凝胶电泳检测，观察各分离株与ＳａｂｉｎⅠ型株酶切图谱的异同。在所检测的１３株病毒分离株中，只有１株的酶切图谱与ＳａｂｉｎⅠ型株的相同，为疫苗相关株，其它的１２侏均为野毒株。     

肌球蛋白ATP酶组化染色法及其应用

近年来,肌肉组织化学技术已成为诊断肌病的主要工具之一。肌球蛋白的ATP酶染色是鉴别Ⅰ型和Ⅱ型肌纤维最理想的反应酶,肌肉收缩     

汉族人群4q亚端粒区等位片段4qA和4qB的结构特征

目的研究中国人4q35亚端粒区等位片段4qA和4qB的结构特征,探讨其与面肩肱型肌营养不良症（facioscapulohumeral muscular dystrophy,FSHD）的内在联系。方法研究对象包括80名无血缘关系的健康成年人。低熔点胶包埋法抽提基因组DNA。同一样品分别进行EcoRⅠ酶切、EcoRⅠ/BlnⅠ双酶切和HindⅢ酶切,脉冲电场电泳分离,p13E-11、4qA和4qB探针Southern印迹,计算4qA/4qB的频率、基因型频率及各型EcoRⅠ片段的长度,SPSS13.0统计软件分析数据。结果4q亚端粒区4qA的频率（46.9%）与4qB（53.1%）基本相等（χ2=1.250,P〉0.05）,4qA/4qB杂合型频率明显高于纯合型频率（P〈0.05）,4qA型和4qB型EcoRⅠ片段长度分别为（115.8±11.9）kb和（98.3±8.6）kb,两者差异有统计学意义（t=23.04,P〈0.001）。8.8%（7/80）的个体检测到易位构型。2名个体出现4qB型短EcoRⅠ片段。结论正常中国人4q亚端粒区4qA和4qB的频率基本相等,杂合型频率明显高于纯合型频率。4qB型D4Z4缺失不致病。4qA和4qB型EcoRⅠ片段具有动态性变化特征。     

1型和2型糖尿病视网膜病与血管紧张素Ⅰ转换酶基因多态性关联研究

目的探讨血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)基因多态性与糖尿病视网膜病之间关联.方法应用PCR技术,对Ⅰ型糖尿病33名视网膜病患者、36名非视网膜病患者和2型糖尿病57名视网膜病患者、190名非视网膜病患者的ACE基因插入/缺失(Ⅰ/D)型多态性进行了检测.结果与结论未证明1型和2型糖尿病时ACE基因和视网膜病之间关联.     

血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原合成及其mRNA表达的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原合成及其mRNA表达的影响。方法:血管紧张素Ⅱ作用于培养的大鼠血管外膜成纤维细胞,采取酶联免疫吸附法(ELISA)、竞争性逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测Ⅰ型胶原蛋白合成及Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果:在血管紧张素Ⅱ作用下,血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成及Ⅰ型胶原mRNA的表达均增加,且有一定的剂量依赖性。结论:血管紧张素Ⅱ可刺激血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成及Ⅰ型胶原mRNA的表达,提示血管紧张素Ⅱ是调节血管外膜成纤维细胞胶原代谢的重要因子,血管外膜成纤维细胞可能参与高血压血管重塑过程。     

糖原累积病IB型:微粒体膜葡萄糖-6-磷酸转运系统的缺陷

众所周知糖原累积病(GSD)Ⅰ型(von Gierke病)是一种先天性代谢病,该病酶的缺陷在1952年由Cori和Cori首先证实。可是,随着病例数的积累,已有一些报告表明,在某些von Gierke病的病人肝脏中,葡萄糖-6-磷酸酶(G6P酶)具有正常活性。现在的GSDⅠ型已经分为两种亚型。Ia型是由于G6P酶的缺陷,Ib型在临床上难以与Ia型相鉴别,但肝G6P酶显示出正常活性。直到证实了微粒体膜G6P转运系统的缺陷,Ib型的缺陷才被阐明。本文报告作者关于GSD Ib型的一系列     

血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原合成及其mRNA表达的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原合成及其mRNA表达的影响.方法:血管紧张素Ⅱ作用于培养的大鼠血管外膜成纤维细胞,采取酶联免疫吸附法(ELISA)、竞争性逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测Ⅰ型胶原蛋白合成及Ⅰ型胶原mRNA的表达.结果:在血管紧张素Ⅱ作用下,血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成及Ⅰ型胶原mRNA的表达均增加,且有一定的剂量依赖性.结论:血管紧张素Ⅱ可刺激血管外膜成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成及Ⅰ型胶原mRNA的表达,提示血管紧张素Ⅱ是调节血管外膜成纤维细胞胶原代谢的重要因子,血管外膜成纤维细胞可能参与高血压血管重塑过程.     

微量酶联免疫吸附试验——定量测定胶原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型特异性抗体

本文介绍用辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体作微量酶联免疫吸附试验(ELlSA),定量测定胶原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体。探讨影响试验敏感性的因素,并与被动血凝进行比较。     

介绍一种新型多功能电子酶联检测分析仪

免疫酶技术的深入、广泛开展,急需一种性能好,效率高的标准化国产酶联仪。为此,薛采芳,陈白虹(第四军医大学403室)袁晓光、汪高远、戚恒、马金柱(华东电子管厂)在研制生产DG-Ⅰ型、DG-3021型的基础上,研制成功一种新型、多功能,由微电脑控制的DG-3022型酶联检测、分析仪。该仪器经测试与应用,证明性能稳定,重复性及线性关系都     

PCR结合单酶切对戊型肝炎病毒进行基因分型的研究

目的　建立PCR结合单酶切对戊型肝炎病毒(HEV)进行基因分型的方法,并将其应用于HEV基因型分布的研究。方法　采用简并引物扩增1～4型HEVORF1片段,1、2型HEVPCR产物为2 75、2 6 9bp ,3、4型PCR产物为317、314bp ,分别应用NaeⅠ、NotⅠ消化两种长度的PCR产物,根据酶切结果区分4种基因型。结果　采用此方法对4种基因型的HEV标准株分型,结果与预期一致;4 3份HEVIgM阳性的临床标本中,19份PCR阳性,分型结果均为4型HEV。结论　此方法可以快速简便地区分HEV 4种基因型。南京地区散发戊型肝炎大多由4型HEV所致。     

粘多糖贮积症Ⅰ型分子生物学及产前诊断研究进展

粘多糖贮积症为糖胺聚糖降解代谢障碍所引起的一组遗传代谢病。根据不同的酶缺陷，可分为8型，鉴于我国Ⅰ型最常见，本文就MPS-I的临床特征、a-L-艾杜糖苷酸酶基因结构、突变类型、特点及检测方法加以综述。     

人脐带来源间充质干细胞分离培养方法的优化

背景：关于人脐带间充质干细胞的分离培养方法不一,如何提高人脐带来源间充质干细胞获得效率的问题尚未解决。 目的：优选人脐带来源间充质干细胞制备的消化酶组分。 方法：无菌条件下取正常足月剖腹产的脐带近胎儿段,按不同混合酶浓度比值划分为3组,混合酶Ⅰ组成分为0.4%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA和0.1%透明质酸酶;混合酶Ⅱ组成分为0.1%Ⅱ型胶原酶、0.4%胰酶、0.02%EDTA和0.1%透明质酸酶;混合酶Ⅲ组成分为0.3%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA、0.1%透明质酸酶和0.1%DNA酶。每组再按消化时间分为1,2,3 h 3个亚组。最后重悬细胞终体积均定位4 mL并计数,采用含血清的DMEM培养液体外培养细胞。 结果与结论：采用3种不同混合酶浓度进行消化,发现相同消化时间内,混合酶Ⅲ组消化细胞最多(P < 0.05)。在作用3 h时,混合酶Ⅲ组获取的细胞中活细胞比值显著低于混合酶Ⅰ组和混合酶Ⅱ组(P < 0.01)。提示0.3%Ⅱ型胶原酶、0.1%胰酶、0.02%EDTA、0.1%透明质酸酶和0.1%DNA酶混合液消化脐带组织块2 h为获取脐带间充质干细胞的最佳条件。     

藻酸双酯钠对蛋白激酶A活性的影响

本研究由大鼠肝脏制备部分纯化的蛋白激酶AⅠ型与Ⅱ型,观察藻酸酯钠(PSS)对这种酶活性的影响。部分纯化的蛋白激酶AⅠ型的基础活性为8.74±0.11nmol/min/mg蛋白(n=4,下同)。该酶与PSS在     

骨质疏松大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白的含量变化

背景：目前研究认为胶原蛋白在骨细胞的增殖与分化、骨质的形成和吸收、骨基质矿化等过程中起着非常重要的作用。 目的：观察骨质疏松模型大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量变化。 方法：SD雌性大鼠40只随机分为实验组和对照组,实验组大鼠行双侧卵巢切除16周后,取膝关节软骨和交叉韧带,采用微量羟脯氨酸测定法及酶联免疫吸附法测定大鼠膝关节软骨及前交叉韧带组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量。 结果与结论：骨质疏松膝关节模型大鼠膝关节软骨、前交叉韧带总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量明显下降(P < 0.05),Ⅰ型/Ⅱ型胶原比值也显著降低(P < 0.05),提示骨质疏松可引起膝关节内组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原含量及其比值改变,与膝关节骨性关节炎的发生密切相关。     

黄韧带退变与腰椎管狭窄症椎管形态的变化

背景：目前研究发现Ⅰ型及Ⅱ型胶原在结缔组织的增殖与分化、软骨的形成和吸收等过程中起十分重要的作用。 目的：探讨腰椎黄韧带退变与腰椎管狭窄症椎管形态变化的相关性。 方法：收集中央型腰椎管狭窄症36例和外伤性腰椎骨折20例患者的黄韧带标本分别为实验组和对照组,采用酶联免疫吸附法测定Ⅰ型和Ⅱ型胶原;CT测量腰椎硬膜横截面积;黄韧带行苏木精-伊红和Masson染色,观察组织病理学变化。 结果与结论：实验组黄韧带厚度、Ⅰ型及Ⅱ型胶原含量高于对照组,腰椎硬膜横截面积和Ⅰ型/Ⅱ型比值低于对照组(P <　0.05);病理学显示实验组黄韧带弹性纤维排列紊乱,数量减少,胶原纤维增生。提示腰椎黄韧带Ⅰ型、Ⅱ型胶原含量及Ⅰ型/Ⅱ型比值发生改变,可能引起黄韧带厚度增加,导致椎管横截面积减小,参与腰椎管狭窄症的发生。关键词：黄韧带;腰椎管狭窄症;Ⅰ型胶原;Ⅱ型胶原;病理学 型/II型比值 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.17.001     

转化生长因子βⅠ型受体与糖尿病发病有关

上海医科大学附属华山医院肾内科吴永贵进行的一项研究表明,糖尿病大鼠肾皮质中转化生长因子βⅠ型受体,表达上与糖尿病肾病发病有一定联系,苯那普利对转化生长因子βⅠ型受体有抑制作用。为探讨转化生长因子βⅠ受体在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及血管紧张素转换酶抑制...     

羊髋部和大腿肌组织的肌纤维类型分布

<正> 组成肌肉内肌纤维类型与其运动和姿势的功能有关。作者在本文检测了组成羊的髋部和大腿肌肉的肌纤维类型和不同的分布。分别以肌球蛋白ATP酶和NADH四唑鎓还原酶(NADH——TR)活动把肌纤维分为Ⅰ型,ⅡA和ⅡB型。股中间肌只由Ⅰ型肌纤维组成,这些纤维显示出弱硷稳定肌球蛋白ATP酶和强NADH——TR活性。臀辅