组织工程支架材料聚乙醇酸的体外细胞贴壁性和降解性能研究

目的:选择可降解材料PGA作为研究对象,对其细胞贴壁性和体外及体内降解性能进行研究。方法:通过将L929细胞与支架材料共培养的方法对PGA支架材料的细胞贴壁性进行研究。设计试验计算出细胞在材料上的粘附率,并且通过扫描电子显微镜观察了细胞在材料表面的贴壁形态。在体外降解试验中,分别在去离子水和磷酸盐缓冲液中,在37℃和70℃的条件下对材料的降解性能进行观察。用大鼠皮下包埋试验对PGA在大鼠皮下包埋后1周、4周、8周、12周这4个时间点的降解表现进行了观察。结果:试验结果表明,共培养72 h后,扫描电镜观察到L929细胞在PGA材料上良好贴壁,细胞粘附率大于80%;降解试验表明PGA组织工程支架在动物体内12周内基本降解。结论:体外细胞贴壁性和降解试验的数据表明PGA组织工程支架符合组织工程产品支架材料的需求,是一种较好的组织工程支架材料。     

黄芩苷对脂多糖刺激下人牙周膜细胞IKKα表达影响的初步研究

目的观察黄芩苷对脂多糖(LPS)刺激下人牙周膜细胞NF-κB非经典途径IKKα表达的影响。方法酶消化法体外分离、培养、鉴定人牙周膜细胞(h PDLCs);CCK-8检测黄芩苷对h PDLCs增殖的影响;实验分空白对照组(NC)、LPS组、LPS+黄芩苷1~4组;酶联免疫吸附试验检测炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的分泌,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检查IKKα蛋白及m RNA的表达。结果 0.001~50 mg/L黄芩苷对h PDLCs增殖起促进作用;ELISA结果显示,LPS组与NC组相比,IL-1β、TNF-α分泌量增加,LPS+黄芩苷1~4组随着黄芩苷浓度的增加炎症因子分泌量减少;Western Blot结果显示IKKα蛋白的表达在LPS组较NC组高,LPS+黄芩苷1~4组较LPS组低,且RT-PCR结果与Western Blot结果相一致。结论黄芩苷介导了LPS刺激下人牙周膜细胞中NF-κB非经典途径IKKα表达下调,对牙周膜细胞的炎症损伤起保护作用。     

2型糖尿病胫前黑斑患者T淋巴细胞亚群变化的探讨

目的:了解2型糖尿病(T2DM)胫前黑斑患者的T淋巴细胞亚群变化以及微血管病变情况.方法:根据有无胫前黑斑将64例糖尿病患者分为有斑组34例及无斑组30例,并与48例健康体检者对照(对照组),自动分析仪测定血糖、血脂代谢指标,流式细胞计数法测定外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞,并比较T2DM有斑组与无斑组微血管病发生率.结果:3组间TC、HDL-C、LDL-C差异无统计学意义(均P＞0.05),无斑组及有斑组TG、FG、HbAlc明显高于对照组(P＜0.05),无斑组及有斑组TG、FG、HbAlc差异无统计学意义(均P＞0.05).3组间CD3+差异无统计学意义,无斑组与对照组CD4+、CD4+/CD8+、CD8+差异无统计学意义(P＞0.05),有斑组CD4+、CD4+/CD8+较对照组及无斑组升高,CD8+较对照组及无斑组降低(P＜0.01或P＜0.05).有斑组微血管病变发生率高于无斑组(64.7%vs 36.7%,P＜0.05).结论:胫前黑斑可能是T2DM患者免疫异常及微血管病变在皮肤的表现,皮肤黑斑及其他微血管并发症的发生可能与体内细胞免疫异常有关.     

紫杉醇对胶质瘤细胞系C6增殖抑制的影响

目的通过体外实验探讨紫杉醇对胶质瘤细胞系C6的抗增殖作用及其作用机制。方法应用形态学、四甲基偶氮唑蓝实验(MTT)、流式细胞术对紫杉醇诱导的胶质瘤细胞系C6进行检测和观察。结果①紫杉醇1nmol／L剂量组镜下观察细胞形态无明显变化,贴壁状况良好;紫杉醇10、100nmol／L剂量组可见细胞密度减小,少许贴壁生长,偶见坏死细胞;紫杉醇1 000nmol／L剂量组细胞贴壁状况不好, 大部分细胞漂浮于培养液中,部分细胞已坏死;②通过MTT观察到紫杉醇各剂量组与对照组相比抑制率均增高(P<0．05),随着时间的延长,各剂量组不同时间段之间的抑制率增高(P<0．05);紫杉醇对C6的抑制率有剂量和时间的依赖关系;③流式细胞仪分析结果显示细胞有G2-M期阻滞,1 000nmol／L紫杉醇分别作用24、48h后,G2-M期细胞比例分别为63．75％、37．20％(同对照组比较P<0．01)。紫杉醇作用48h时出现凋亡峰,细胞凋亡率为14．31％。结论紫杉醇对胶质瘤细胞系C6具有明显的生长抑制作用,呈时间-剂量依赖性;紫杉醇可以诱导胶质瘤细胞系C6细胞发生凋亡,凋亡与G2-M期阻滞密切相关,G2-M 期阻滞达到一段时间后才诱导细胞凋亡。     

银杏叶总黄酮对哮喘小鼠模型支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞凋亡的影响

本研究考察了银杏叶总黄酮(FG)对哮喘小鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡的影响。采用卵白蛋白致敏的方法建立小鼠的哮喘模型，雾化给药2周后处死小鼠，收集BALF，白细胞分类计数，纯化细胞后进行AO/EB荧光染色考察FG对EOS凋亡形态的影响，细胞分离后进行流式细胞检测考察FG对EOS凋亡比例的影响。FG可明显减少哮喘小鼠的白细胞总数和EOS数目；FG治疗组EOS凋亡形态的细胞明显增多，凋亡细胞的比例明显增加，与模型组比较有显著性差异。FG能通过诱导EOS的凋亡来减少BALF的EOS数目，可能是FG拮抗哮喘炎症的一个重要机制。     

兔骨髓基质细胞体外培养的生物学特性

目的 研究兔骨髓基质细胞(MSC)体外培养状态下的生物学生长特性,为骨/软骨组织工程提供实验理论和技术支持。方法 抽取兔骨髓分离MSC,连续培养5代。描绘1～5代MSC生长曲线、计算倍增时间,测定细胞贴壁率和细胞活性。结果 第1～3代传代细胞生长曲线基本相同,倍增时间20h,贴壁率无明显差异,接种后12h贴壁率为96％,成活率大致相等,为95％;第4、5代细胞倍增时间延长,贴壁能力及细胞活力下降。结论 原代及第1～3代MSC体外培养生长稳定,增殖迅速,贴壁率高,活力良好,是骨／软骨组织工程良好的种子细胞来源。     

不同孕期妊娠妇女凝血四项指标变化及意义

目的 探讨妊娠妇女不同孕期凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FG)和凝血酶时间(TT)四项反映凝血功能指标的变化及其临床意义.方法 采用法国STAGO-ArT4血凝仪检测86例正常中孕、晚孕、临产妇女和37例正常非孕妇女的PT、APTT、FG和TT,并对检测结果进行比较.结果:晚孕组和临产组与健康对照组比较,PT、FG和TT差异有统计学意义(P＜0.05).结论 不同孕期妊娠妇女凝血功能发生改变,及时了解这些变化具有重要临床意义.     

脂联素对高糖环境下RPE细胞氧化应激及凋亡的影响

目的 通过高糖环境下培养人RPE细胞建立RPE细胞的氧化应激模型,观察脂联素对RPE细胞各氧化应激指标及凋亡的影响,从而揭示脂联素对RPE细胞可能的保护机制.方法 将体外培养的人RPE细胞分为3组:正常对照组、高糖组、高糖+脂联素组,分别干预24、48、72 h.在倒置显微镜下观察RPE细胞形态变化,采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量,用黄嘌呤氧化酶法检测SOD含量和活性,用荧光定量RT-PCR法测定p66Shc、Ho-1在各个时间点上的表达,通过流式细胞术检测RPE细胞的凋亡率.结果 与正常对照组相比,高糖组MDA含量显著上升,SOD含量显著下降(P<0.05),与高糖组相比,脂联素组MDA含量显著下降,SOD含量显著上升(P<0.05),并且呈时间依赖性.与正常对照组相比,高糖组Ho-1 mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达亦增高(P<0.05).与正常对照组相比,高糖组p66Shc mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达降低(P<0.05),呈时间依赖性.流式细胞术RPE细胞凋亡高糖组细胞凋亡率较正常对照组明显增加,而脂联素组细胞凋亡率较高糖组显著下降.结论 脂联素可通过减少p66Shc表达,从而减少线粒体ROS产生、增加Ho-1表达,增加抗氧化能力,减少氧化应激反应,减少细胞凋亡,对糖尿病RPE细胞起保护作用.     

不同浓度利多卡因对SH-SY5Y细胞乳酸脱氢酶及Caspase-3表达的影响

目的:在离体细胞培养条件下,通过观察利多卡因对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率、细胞凋亡率及Caspase-3表达水平的影响,探讨不同浓度利多卡因对SH-SY5Y细胞的神经毒性损伤作用。方法:神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)离体培养,分为4组,即:正常培养组(Con组,即对照组,未经药物处理);0.5%,1%,2%利多卡因组(L1,L2,L3组):分别用相应浓度的利多卡因处理SH-SY5Y细胞10 min。分别检测LDH释放率、细胞凋亡率及Caspase-3表达水平。结果:正常对照组细胞LDH释放率为11.7%,1%和2%利多卡因处理10 min后,LDH释放率明显增加,分别为18.8%和28.5%。Con组细胞凋亡率为6.1%,L1组、L2组、L3组细胞凋亡率分别为14.9%,19.2%和23.0%。正常对照组Capase-3表达相对较低,0.5%利多卡因处理10 min后Caspase-3表达即有增加,1%和2%利多卡因组Caspase-3表达明显增加。结论:3种浓度利多卡因均可致SH-SY5Y细胞损伤,且随浓度的增加,损伤作用明显。     

重组大鼠血小板衍生生长因子（rR-PDGF-AA）对体外培养大鼠椎间盘细胞促增殖的影响作用

目的 了解重组大鼠血小板衍生生长因子(rR-PDGF-AA)在大鼠椎间盘细胞培养过程中的促增殖作用.方法 对大鼠椎间盘细胞单层培养并于传代后建立对照组与实验组,定时于倒置显微镜下观察细胞形态、增殖的变化,行HE、甲苯胺蓝及免疫组化染色;对传代细胞于固定时间测定细胞吸光度值(OD),并描绘细胞生长曲线;经流式细胞仪检测处于S(DNA合成)期的细胞百分比值.结果 ①在倒置相差显微镜下连续观察,7 d后原代细胞逐渐贴壁,多为梭形,有伪足伸出;经胰酶消化传代后,细胞贴壁生长速度加快约需4-5 d,而加入血小板衍生生长因子组椎间盘细胞汇合时间缩短,生长加速.HE染色可见细胞形态及胞内变化,甲苯胺蓝及免疫组化染色分别可见细胞外蛋白多糖及Ⅱ型胶原合成增加;②MTT法测定OD值经过方差分析检验可知,F值为20.276,P=0.000,说明五组之间比较差异具有显著性.五组之间两两比较得出对照组、1 μg/L组和10 μg/L组之间比较无差异,1000 μg/L组和100 μg/L组之间比较无差异,对照组、1 μg/L组、10 μg/L组分别与1000 μg/L组、100 μg/L组比较差异具有统计学意义;③经流式细胞仪检测可见血小板衍生生长因子在有效浓度内与处于S期的细胞百分比呈正相关.结论 血小板衍生生长因子对体外培养的椎间盘细胞的分裂增殖、基质中胶原及蛋白多糖的合成具有促进作用;并且在有效剂量范围内呈现正相关.     

两种组织粘合剂对胃底静脉曲张出血疗效的比较

目的观察国产组织粘合剂D-TH液与进口Histoacry(?)液对胃底静脉曲张出血的疗效。方法将重度胃底静脉曲张的172例分为D-TH液组96例,Histoacry(?)液组76例;两组患者均采用三明治夹心法曲张静脉内推注粘合剂治疗1～3次,并随访1年。结果D-TH液组急症止血率100%(41/41),胃底静脉曲张完全消失78例(81．2%),明显减轻18例(18．8%),术后再出血6例(6．3%),消失的曲张静脉再出现7例(7．3%);Histoacry(?)液组分别为100%(33/33)、65例(85．5%)、11例(14．5%)、4例(5．3%)、2例(2．6%),两组间比较无显著性差异(P＞0．05),且两组患者肝肾功能术前后无显著变化,未发生脑、肺栓塞等严重并发症。结论国产组织粘合剂D-TH液对胃底静脉曲张出血疗效可靠、并发症少,与进口的组织粘合剂Histoacry(?)液疗效相接近,且价钱低廉,药源方便。     

Antitumor effect of an injectable in-situ forming drug delivery system composed of a novel tissue adhesive containing doxorubicin hydrochloride.

Our group has developed a novel tissue adhesive composed of biomacromolecules and organic acid derivatives which have good biocompatibility and exhibit high bonding strength to living tissues. We propose to use this tissue adhesive for in-situ forming drug delivery system (DDS) for cancer chemotherapy. In a previous work, we had prepared a novel in-situ forming DDS composed of human serum albumin (HSA) and tartaric acid derivative (TAD) containing doxorubicin hydrochloride (DOX), and we had demonstrated an in vitro release profile of DOX from HSA-TAD gel for approximately up to 100h. Here, we report on antitumor effect of this injectable in-situ forming DDS. Local injection of DOX by the HSA-TAD was administered to human colon carcinoma (WiDr) implanted subcutaneously onto the immunodeficient mouse. The results of the in vivo experiments showed that the presence of DOX in blood of mice was detectable for up to 3days, and that the tumor volume was effectively minimized with injection of HSA-TAD containing DOX. The in-situ forming DDS with the novel tissue adhesive containing DOX, therefore, is a useful technique for cancer chemotherapy.     

无缝线医用OB胶粘合法吻合小肠的实验研究

目的探讨无缝线医用胶粘合法吻合小肠的可行性,为临床应用提供实验依据。方法20只犬随机配对分为2组,实验组采用医用OB胶粘合法吻合肠管;对照组采用传统手术方法吻合肠管。将分别测定两种吻合方法的操作时间、吻合口通畅程度、吻合口爆裂压、吻合口羟脯氨酸含量及标本组织病理学比较。结果实验组与对照组吻合口操作时间分别为（8.8±1.8）min和（18.7±3.2）min（P〈0.05）;术后相同时间内2组吻合口直径变化率及吻合口爆裂压测定差异无统计学意义（P〉0.05）;2组吻合口羟脯氨酸含量差异有统计学意义（P〈0.05）;实验组光镜下愈合优于对照组（P〈0.05）。结论动物实验表明,结合内支架单纯应用医用胶粘合法吻合肠管,操作简便,省时,吻合口闭合严密,愈合良好,是一种切实可行的消化道吻合新方法。     

高强度黏合剂治疗骨折的实验研究

研究一种高强度黏合剂(highstrength adhesive,HSA)治疗骨折的方法,方法有:注入骨折区骨膜下骨的周围在骨折断端的背侧和两侧形成有弹性的内固定夹板固定骨折;直接注入骨折断端髓腔粘固骨折片的内侧面及骨间隙固定骨折;在骨折断端区填充骨缺损、骨间隙,并以生物电解溶合,迅速形成类似骨折原位相矿物质材料,可治疗多种类型的骨折,如创伤性骨折、骨质疏松性骨折、脊柱压缩性骨折、关节内骨折、病理性骨折等,进行骨折内固定和重建骨缺损的治疗。动物实验结果表明:骨折固定的刚度及在骨折愈合过程中刚度的变化经超声波检查显示其刚度与钢板内固定的刚度相似,10～13个月后才显示逐渐降低,具有缩短骨折愈合时间、增强抗折强度的作用,能够较好地促进骨折愈合,能极大增加抗折强度。而对照组骨折抗强度明显低于实验组(P<0.01)。骨修复材料生物相容性和骨传导性能好,又能以可注射方式进行骨折内固定和重建骨缺损治疗。证明HSA生物材料作为弹性内固定夹板的生物学、生物力学、可降解程度和可吸收生物材料,适合骨的愈合环境,是一种可靠的骨折内固定生物材料。     

影响卡波姆-羟丙基甲基纤维素粘附片粘附性质的因素考察

目的：研究影响卡波姆（Carbopol)-羟丙基甲基纤维素（HPMC）粘附片粘附性质的各种因素。方法：测定Carbopol,HPMC及其不同比例混合物制备粘附片的粘附力，溶胀速率和粘附时间。结果：Carbopol与HPMC以一定比例混合后制成粘附片的粘附力和溶胀速率随HPMC含量增加而下降，而粘附时间与二者比例有关。结论：当Carbopol与HPMC的比例为1：1或1：2时，制备的粘附片具有较大的粘附力，适宜的溶胀速率和较长的粘附时间。     

组织胶栓塞对胃静脉曲张出血的疗效分析

目的探讨人体组织胶镜下栓塞在胃静脉曲张出血的治疗和预防中的应用价值。方法回顾性分析肝硬化胃静脉曲张病例72例,分药物组（44例）和药物加栓塞组（28例）,统计分析其止血率、2周出血率、复发出血时间、出血相关死亡率及不良反应。结果平均随访23月,栓塞组较药物组止血率高,复发出血时间长,不良反应多;2周内出血率和复发出血相关死亡率无统计学差异。结论胃静脉曲张出血的治疗,药物联合镜下组织胶栓塞效果更优。     

Injectable in situ forming drug delivery system for cancer chemotherapy using a novel tissue adhesive: characterization and in vitro evaluation.

Injectable polymers that are biocompatible and biodegradable are important biomaterials for drug delivery system (DDS) and tissue engineering. We have already developed novel tissue adhesives consisting of biomacromolecules and organic acid derivatives with active ester groups. The resulting tissue adhesive forms in situ as a gel and has high bonding strength for living tissue as well as it has good biocompatibility and biodegradability. Here, we report on the physicochemical properties and in vitro evaluation of this novel tissue adhesive consisting of human serum albumin (HSA) and tartaric acid derivative (TAD) containing doxorubicin hydrochloride (DOX). The results of the measurement of physicochemical characteristics indicate that the gelation time and gel strength of HSA-TAD gels can be controlled according to the material composition. The bonding strength of HSA-TAD adhesives was found to be sufficient to adhere at focus and to correspond with the cross-linking density of HSA-TAD gels. Furthermore, the release of DOX from HSA-TAD gels was sustained for approximately 100 h in an in vitro evaluation. The novel tissue adhesive, therefore, is expected to be applicable for use as an injectable in situ forming DDS.     

新型创面胶对小鼠感染创面治疗效果的研究

目的 探讨含5%三氯生的新型创面胶对小鼠细菌感染创面的治疗作用.方法 检测金黄色葡萄球菌发光强度与细菌菌落数.将18只小鼠制备金黄色葡萄球菌感染创面模型后随机分为创面胶组、新型创面胶组和对照组,每组6只.观察3组金黄色葡萄球菌感染后不同时间细菌发光强度的变化、愈合创面组织学、计算皮肤全层薄/厚比,并记录创面愈合时间.结果 细菌发光强度与菌落数呈高度正相关(r=0.995,P<0.001).新型创面胶组处理3 h后不同时间细菌发光强度低于创面胶组(P<0.05).创面胶组和新型创面胶组皮下炎性细胞明显较对照组密度高.新型创面胶组创面愈合后皮肤薄/厚比与创面胶组比较差异无统计学意义(P>0.05),但两组均大于对照组(P<0.05);新型创面胶组创面愈合时间短于创面胶组(P<0.05).结论 新型创面胶能明显抑制金黄色葡萄球菌感染创面细菌繁殖、减少瘢痕形成,促进创面愈合,但可增加机体局部炎性反应.     

高渗糖胰岛素配合蝶形胶布在腹部切口愈合不良中的应用

目的探讨高渗糖胰岛素配合蝶形胶布治疗腹部切口愈合不良的效果。方法实验组（蝶形胶布组）37例，为妇科手术后腹部切口愈合不良，采用局部清创，切口周围注射高渗糖胰岛素，并用蝶形胶布闭合切口。对照组（清创缝合组）为同期腹部切口愈合不良者23例，采用常规清创换药和／或二次缝合术。结果蝶形胶布组伤口愈合率97．3％，1例（2．7％）未愈合，清创缝合组伤口愈合率91．3％，2例（8．7％）未愈合，两组差异无统计学意义，P〉0．05；蝶形胶布组平均住院（10．4±1．2）d。清创缝合组平均住院（17．4±2．2）d，两组差异有统计学意义，P〈0．01；蝶形胶布组处理伤口的费用平均（108．3±27．1）元，清创缝合组平均（607．9±57．4）元，两组差异有统计学意义，P〈0．01。结论高渗糖胰岛素配合蝶形胶布对治疗腹部切口愈合不良有良好的效果，且方法简单易行，已被患者接受，值得临床推广应用。     

甲状腺功能亢进手术中纤维蛋白胶的应用与观察

目的 总结甲状腺功能亢进(甲亢)手术使用纤维蛋白胶不放置引流的临床经验.方法 对392例甲状腺Ⅲ度及以下肿大的甲亢手术创面喷洒纤维蛋白胶不放置引流(下称蛋白胶组)与386例甲亢手术切口放置胶管引流(下称引流组)进行比较.结果 蛋白胶组切口术后无出血,无切口积液,无切口感染,切口甲级愈合,无不良反应,术后平均住院(4.6...