外环境中甲型副伤寒沙门菌分离培养方法的比较研究

〔目的〕选择最佳增菌液、增菌时间、分离平板 ,提高外环境甲型副伤寒沙门菌检出率。〔方法〕11种不同种类不同产地沙门菌增菌液用不同来源不同菌量的甲型副伤寒沙门菌作增菌效果比较 ;制备贝壳类海产品、大便、水模拟标本作不同增菌液不同菌量甲型副伤寒沙门菌增菌效果比较 ;不同菌量模拟标本三种平板分离甲型副伤寒沙门菌效果比较 ;模拟标本不同增菌时间甲型副伤寒沙门菌检出率比较。〔结果〕11种增菌液 ,其中一种甲型副伤寒沙门菌菌不生长 ,二种较差 ,八种较好 ;在模拟标本甲型副伤寒沙门菌增菌效果比较中 ,亚硒酸盐增菌液对海产品、大便标本增菌效果较好 ,氯化镁孔雀绿增菌液对水样中甲型副伤寒沙门菌增菌效果较好 ;甲型副伤寒沙门菌在沙门菌显色平板上菌落特征明显 ,分离效果优于SS平板 ;贝壳类海产品甲型副伤寒沙门菌模拟标本 37℃增菌 6h甲型副伤寒沙门菌菌量最多。〔结论〕贝壳类海产品用亚硒酸盐增菌液 37℃增菌 6h ,水样用氯化镁孔雀绿增菌液 4 2℃增菌 12～ 18h,用沙门菌显色平板分离甲型副伤寒沙门菌效果最好。     

改良TT增菌液对沙门菌属和志贺菌属的分离效果研究

目的探讨改良硫代硫酸钠碳酸钙(TT)增菌液对肠道感染菌种沙门菌属和志贺菌属的分离效果。方法收集2015年3月-2016年9月288例因急性腹泻住院患者的粪便作为研究样本,对照组和观察组各144例,采用常规接种法接种于麦康凯琼脂培养基(MAC)和沙门氏菌-志贺氏菌琼脂培养基(SS),另外加种改良TT增菌液进行增菌培养,同时使用改良TT增菌液、革兰阴性(GN)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液分别对外购的沙门菌属和志贺菌属进行培养,比较不同增菌液对肠道感染菌种沙门菌属和志贺菌属的分离效果。结果对照组采用直接接种培养基的方法检测出沙门菌属15株,志贺菌属4株,检出率分别为10.42%和2.78%;观察组采用改良TT增菌液培养后接种方法检测出沙门菌属43株,志贺菌属12株,检出率分别为29.86%和8.33%;观察组沙门菌属与志贺菌属的检出率明显高于对照组(P<0.05);改良TT增菌液对沙门菌属的增菌效力与SC增菌液相当,其中对鼠伤寒沙门菌属增菌效果最高达到10-8,优于SC增菌液10-7,改良TT增菌液对志贺菌属的增菌效力与GN增菌液相似,两种志贺菌属的最大增菌效果均达到10-7。结论改良TT增菌液对沙门菌属和志贺菌属的增菌效果与SC、GN增菌液相当,不仅可以有效促进沙门菌属和志贺菌属的增殖,提高病原菌分离效果,还能简化工作流程,提高实验室工作效率。     

南昌市西湖区从业人员携带的沙门菌血清学分型及药敏试验

〔目的〕探讨饮食、付食及公共场所从业人员携带沙门菌检出状况 ,血清型分布、菌株耐药状况和沙门菌检出率相关的技术因素。〔方法〕按何晓青主编的《卫生防疫细菌检验》相关章节 ;国家标准GB4789.3 1-94肠杆菌科噬菌体检验方法及国家卫生行业标准WS T12 5 -1999纸片法抗菌药物敏感试验标准等方法对 2 0 0 1年度西湖地区预防性健康体检中检出的 2 2 2株沙门菌 ,死亡 2 9株 ,实际 193株沙门菌进行血清学分型和药敏试验。〔结果〕193株沙门菌鉴定为 3 0个血清型 ,分属于B、C1 、C2 、D、E1 、和E4 血清群。最多的为B群中的德尔卑血清型 10 1株 (5 2 .3 % )和阿贡纳血清型 12株(6.2 % )。药敏试验结果表明 :大多数菌株对常用药物较敏感 ,产生耐药主要集中为亚胺培南、氨苄青霉素、复方新诺明等少数几种药物 ;但不同来源的菌株耐药状况不尽相同。沙门菌带菌检出率有明显的季节分布特征 :11月至来年 3月份检出率非常低 ,8月份为检出高峰。沙门菌带菌检出率与增菌液的增菌效果有密切的关系 ,自配的增菌效果好 ,灵敏度可达到 10 - 8。     

沙门菌和志贺菌通用增菌液增菌效果实验观察

在对食品生产经营单位或公共场所从业人员作伤寒、痢疾带菌检查，对各类食品样品作沙门、志贺菌检测时，由于沙门菌和志贺菌检验所用的增菌液不同，即使是对同一份标本也只能分别增菌，分别划线分离，使实验室的工作量成倍增加，同时由于两者增菌时间不相同，（沙门菌18～24h，志贺菌6～8h），给实验测定的工作安排带来一定困难，因此，研究和选择合适的可同时用作沙门、志贺菌增菌的通用增菌液，对提高实验室的工作效率具有重要的现实意义。选择了市售的2个牌号的沙门、志贺菌增菌液与SC增菌液及GN增菌液分别进行了增菌效果的对比观察，现将结果报告如下。     

不同方法分离牦牛粪便中沙门菌的比较

目的比较不同培养条件对牦牛粪便中沙门菌的增菌效果,获得分离效率高的牦牛粪便分离培养方法。方法使用沙门菌标准菌株制备含不同菌浓度的牦牛粪便模拟标本,分别使用SBG和RVS 2种增菌液,在37℃和42℃条件下进行增菌培养,然后分别接种于XLD和沙门显色培养基,观察目标菌生长情况,统计分析沙门菌在不同培养条件下的分离效果。同时使用上述方法对40份牦牛粪便进行沙门菌的分离鉴定。结果当样本中的目标菌浓度低时,RVS的增菌效果优于SBG;对牦牛粪便标本而言,当样本中的目标菌浓度≥103时,目标菌的分离不受温度和增菌液的影响;当温度为42℃,增菌液为RVS时对目标菌的分离不受浓度的影响。结论温度为42℃,增菌液为RVS适合牦牛粪便中沙门菌的分离。     

亚硒酸盐加入方法对沙门菌增菌效果的影响

[目的 ]观察亚硒酸氢钠在亚硒酸盐胱氨酸增菌培养基 (SC)中直接加入SC[1] ,与基础培养基灭菌冷却后再加入SC[2 ] ,对沙门菌的增菌效果。[方法 ]以实验室常用方法测定沙门菌及非沙门菌在两SC增菌培养基中生长的灵敏度及选择性 ,比较两培养基对粪便标本中沙门菌的检出率。[结果 ]SC[2 ]培养沙门菌及非沙门菌 ,出现可见生长的最低接种浓度 ,前者明显小于后者 ,呈现良好的选择性 ;SC[1]对沙门菌和非沙门菌增菌的选择性相对较差。对粪便标本中沙门菌的检出率SC[2 ]明显高于SC[1]。[结论 ]SC[2 ]方法配制培养基对沙门菌的选择性增菌作用明显优于SC[1]方法 ,有利于提高沙门菌的检出率。     

食品中沙门菌检验方法的优化与应用

目的选择最适合食品中沙门菌生长的增菌培养基和分离培养基，促进沙门菌生长，提高沙门菌的检出率。方法在市场上购买一批生的禽、畜类肉制品，分别通过均质器混匀，各分成两份，分别用常规培养基和本实验培养基同时增菌培养，应用改良分子信标荧光PCR检测试剂盒和mini-VIDAS全自动荧光免疫分析仪对两种增菌液进行初筛，对结果阳性者划线分离，阳性菌株经VITEK2 COMPACT生化鉴定仪鉴定。结果样品经本实验增菌液增菌后，分离平板上的可疑菌落明显增多，检出沙门菌的几率也有很大提高。结论改用本实验培养基后，能有效提高沙门菌的检出率。     

沙门-志贺菌增菌培养基的研究

目的采用分值计算法研制沙门、志贺菌增菌培养基和制订质量标准。方法分值计算法。结果大肠埃希菌菌落平均菌落直径为0.99 mm,S=0.17;生长率为15.7%,δρ=3.12;痢疾志贺菌菌落平均菌落直径为1.48mm,S=0.29;生长率为70.2%,δρ=8.98;鼠伤寒沙门菌菌落平均菌落直径为1.65 mm,生长率为99.2%δρ=3.41。三株指示菌菌悬液浓度用沙门-志贺增菌培养基稀释10-8~10-12,培养6 h后计数结果:大肠埃希菌10-10稀释度为1.0cfu/ml;痢疾志贺菌10-11稀释度为1.0 cfu/ml;鼠伤寒沙门菌10-11稀释度为3.0 cfu/ml。质量分值结果表明:大肠埃希菌质量分值≥29.9(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥14.90;生长率分值≥5.00)。痢疾志贺菌质量分值≥13.05(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-1.95;生长率分值≥5.00)。鼠伤寒沙门菌质量分值≥11.65(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-3.35;生长率分值≥5.00)。结论沙门、志贺菌增菌培养基对大肠埃希菌具有较好的抑制作用;对痢疾志贺菌达到促生长的作用;对鼠伤寒沙门菌的生长未受到不良的影响。     

沙门菌、志贺菌和金葡菌复合增菌培养基研制

目的 研制用于沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌同时增菌的培养基.方法 根据微生物营养素需求,筛选可添加成分进行单因素比较试验,确定出培养基合适的组分,采用平板菌落计数法和多重PCR法验证培养基增菌效果.结果 成功研制出能够用于沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌复合增菌的培养基(3S),当接种量约为1 CFU/mL,37 ℃培养12 h后,3种目标菌以相对一致的速度增殖,可达到107～108CFU/mL;应用多重PCR可同时扩增出目的 条带.结论 3S可用于沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌复合增殖培养,配制方便、增菌快速、节约成本和时间,具有良好的市场前景.     

双温分段增菌法检测沙门菌初步观察

目的 探讨沙门菌检测的更佳效果,提高阳性检出率.方法 选择孔雀绿氯化镁肉汤(MM)为增菌液,采用双温分段增菌(36±1℃培养6～8h再转42±1℃培养12～14h)法,对肛拭子标本作增菌后进行沙门菌分离培养检测,并与以往常规法(单纯36℃或42℃培养18～24h)做比较.结果 双温分段增菌法阳性检出率1.46%,较之单纯36℃(0.95%)、42℃(0.75%)增菌有较高的检出率(X2=7.48、X2=6.72,P<0.01).结论 本方法简便可行,不需增加太多实验步骤及成本,可取得更好的效果.     

两种检测方法在沙门菌初筛中的应用比较

[目的]比较常规检测方法和新方法在沙门菌初筛中的阳性检出率。[方法]将健康体检人员的肛拭样品用SF增菌液增菌后转种WS平板、用SBG增菌液增菌后转种CHROMagar沙门菌显色平板,之后各挑取相应可疑菌落进行生化反应和血清凝集试验进行鉴定。[结果]6676件体检肛拭标本用两种方法分离后,SBG-CAS分离和SF-WS分离阳性检出率分别是1.03%和0.24%,用SBG-CAS分离的方法优于SF-WS分离的方法。[结论]用SBG增菌液增菌后转种CHROMagar沙门菌显色平板的方法,其阳性检出率明显高于SF增菌液增菌后转种WS平板,并且在平板上的菌落特征明显,极易辨认,方法也较易掌握。     

一种用于食源性空肠弯曲菌阻抗法检测的培养基及其应用

目的:利用空肠弯曲菌生长时对培养基中添加物质氧化还原电位的改变,建立空肠弯曲菌阻抗检测法。方法:利用电阻抗法检测食品中空肠弯曲菌方法,通过对空肠弯曲菌选择性增菌培养基布氏肉汤的改进,加入硫酸亚铁、丙酮酸、偏亚硫酸钠等还原剂降低培养基中氧化还原电势Eh,及多种抗生素,TMP为抗菌增效剂,多粘菌素B对革兰阴性菌有效,万古霉素对革兰阳性菌抗菌效果较强。检测时在培养基表面覆盖石蜡油以获得更好的微需氧条件,连续检测空肠弯曲菌代谢所引起培养基的电阻抗变化值,通过培养基电阻抗变化判定空肠弯曲菌的存在。结果:经与常规培养法进行比较,阻抗法可最低检出添加量为102/m l的阳性样品,检测结果与常规培养法一致性较高,对于阴性结果能在48 h内出具结果,大大提高了检测速度。结论:空肠弯曲菌阻抗检测法相比于传统的培养法,能够有效缩短检测时间,提高检测效率。     

Protective efficacy of heat-inactivated B. thailandensis, B. mallei or B. pseudomallei against experimental melioidosis and glanders

Burkholderia pseudomallei and Burkholderia mallei are gram-negative bacilli that are the causative agents of melioidosis and glanders, respectively. Both humans and animals are susceptible to both diseases. There is currently no vaccine available for the prevention of disease. We report the protective efficacy of heat-inactivated Burkholderia thailandensis, B. mallei or B. pseudomallei cells as vaccines against murine melioidosis and glanders. Immunisation with heat-inactivated B. pseudomallei cells provided the highest levels of protection against either melioidosis or glanders. These studies indicate the longer term potential for heat-inactivated bacteria to be developed as vaccines against melioidosis and glanders.     

2005年中国食源性单核细胞增生李斯特菌耐药性趋势分析

目的研究中国食源性单核细胞增生李斯特菌的药物敏感和耐药性。方法采用微量肉汤稀释法测定了467株食源性单核细胞增生李斯特菌对庆大霉素、氨苄西林、青霉素、四环素、强力霉素、亚胺培南、红霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、头孢噻吩、利福平、万古霉素、氯霉素、氨苄西林/舒巴坦酸、复方新诺明15种抗生素的药敏结果。结果467株单核细胞增生李斯特菌耐药率为4.5%,主要耐受四环素和环丙沙星,四环素耐受最严重,耐药率达4.07%。在7类食品中,分离自蔬菜的单核细胞增生李斯特菌的耐药率最高,为10%。在14个省市中,吉林、湖北、河北的耐药率居前3位,分别为19.6%,9.1%,8%。结论中国食源性单核细胞增生李斯特菌存在耐药株,分离自不同食品、不同省份的单核细胞增生李斯特菌耐药性存在差异,应加强对预防用药和临床用药的重视,以减少单核细胞增生李斯特菌耐药性的增加。     

发酵法L-丙氨酸对小鼠的急性毒性和遗传毒性研究

目的评价发酵法L-丙氨酸的急性毒性与遗传毒性。方法选择健康成年清洁级ICR雌雄小鼠各10只,以最大耐受量(MTD,15.0 g/kg)经口灌胃进行急性经口毒性试验。分别设8、40、200、1 000、5 000μg/皿发酵法L-丙氨酸染毒组,同时设空白对照组(自发回变)、溶剂对照组(纯净水)和阳性对照组(TA97a-S9、TA98-S9、TA102-S9均采用50.0μg/皿敌克松,TA97a+S9、TA98+S9、TA100+S9均采用10.0μg/皿的2-氨基芴,TA100-S9采用1.5μg/皿叠氮钠,TA102+S9采用50.0μg/皿的1,8-二羟蒽醌),采用平板掺入法进行Ames试验。将50只健康成年清洁级小鼠随机分为5组,分别为阴性对照组(0.5%羧甲基纤维素钠水溶液)和1.25、2.50、5.00 g/kg发酵法L-丙氨酸染毒组及阳性对照组(0.04 g/kg环磷酰胺),每组10只,雌雄各半;采用间隔24 h两次经口灌胃法进行小鼠骨髓细胞微核试验。将25只健康成年清洁级雄性小鼠随机分为5组,分别为阴性对照组(0.5%羧甲基纤维素钠水溶液)和1.25、2.50、5.00 g/kg发酵法L-丙氨酸染毒组及阳性对照组(2 mg/kg丝裂霉素C),每组5只。采用连续5 d灌胃方式进行小鼠睾丸染色体畸变试验。结果发酵法L-丙氨酸对雌、雄性小鼠的MTD均大于15.0 g/kg。在加或不加S9的情况下,各剂量发酵法L-丙氨酸对TA97a、TA98、TA100、TA102菌株均无致突变作用。各剂量发酵法L-丙氨酸染毒组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05);PCE/NCE值均在正常范围内。各剂量发酵法L-丙氨酸染毒组小鼠睾丸初级精母细胞常染色体单价体率、性染色体单价体率及畸变细胞率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论发酵法L-丙氨酸急性毒性属无毒级,未见其明显致突变作用或遗传毒性。     

微孔板阿尔玛蓝显色法检测速生长分枝杆菌药物敏感性

目的建立微孔板阿尔玛蓝显色法检测速分枝杆菌药物敏感性的方法,评价其临床检测效能。方法用GenoType Mycobacterium CM分枝杆菌菌种鉴定系统和测序法筛选20株龟分枝杆菌临床株、16株脓肿分枝杆菌临床株作为实验株,阿尔玛显色法检测龟、脓肿分枝杆菌对阿米卡星、头孢西丁、环丙沙星、克拉霉素、多西环素、亚胺培南、利奈唑胺、磺胺甲恶唑和妥布霉素9种抗生素的最低抑菌浓度,以微量肉汤稀释法为标准评价符合率和MIC结果解释的一致率。结果微孔板阿尔玛蓝显色法检测9种抗生素的MIC值分布与微量肉汤稀释法MIC值符合率分别为100%（阿米卡星、环丙沙星、利奈唑胺）、97.2%（头孢西丁、克拉霉素、多西环素、妥布霉素）、94.4%（亚胺培南）和88.9%（磺胺甲恶唑）（±1log2范围内）;MIC结果解释一致率头孢西丁和利奈唑胺为94.4%,妥布霉素和磺胺甲恶唑为97.2%,其余5种药物药敏结果解释均完全一致。结论微孔板阿尔玛蓝显色法是一种简便、易于判读、准确的MIC测定方法,可用于速生长分枝杆菌临床分离株的快速药敏测试。     

大型活动饮食服务人员肠道致病菌检查结果分析

目的 探讨在大型活动时对饮食服务人员使用现场肛拭法采集粪便标本并以SN增菌液增菌检查肠道致病菌的检出效果.方法 于2012年夏季天津举办一次大型国际论坛前夕对饮食服务人员采集的现场肛拭标本置入SN增菌液中培养18 ～24 h,再接种SS琼脂平板上,挑选可疑菌落送病原生物实验室进行生化、血清鉴定.结果 从674份肛拭标本中检出沙门菌4株,其中C群沙门菌3株,B群1株;未检出志贺菌,总检出率为0.59％.4份阳性标本均出于男性外来务工人员.结论 该方法可有效提高粪便致病菌的检出率.     

Nutritional Intervention with Dried Bonito Broth for the Amelioration of Aggressive Behaviors in Children with Prenatal Exposure to Dioxins in Vietnam: A Pilot Study

Dioxins have been suggested to induce inflammation in the intestine and brain and to induce neurodevelopmental disorders such as autism spectrum disorder (ASD) and attention deficit hyperactivity disorder (ADHD), partly due to deficits in parvalbumin-positive neurons in the brain that are sensitive to inflammatory stress. Previously, we reported ADHD traits with increased aggressiveness in children with prenatal exposure to dioxins in Vietnam, whereas dried bonito broth (DBB) has been reported to suppress inflammation and inhibit aggressive behavior in animal and human studies. In the present study, we investigated the association between dioxin exposure and the prevalence of children with highly aggressive behaviors (Study 1), as well as the effects of DBB on the prevalence of children with highly aggressive behaviors (Study 2). Methods: In Study 1, we investigated the effects of dioxin exposure on the prevalence of children with high aggression scores, which were assessed using the Children’s Scale of Hostility and Aggression: Reactive/Proactive (C-SHARP) in dioxin-contaminated areas. The data were analyzed using a logistic regression model after adjusting for confounding factors. In Study 2, we performed nutritional intervention by administering DBB for 60 days to ameliorate the aggressiveness of children with high scores on the C-SHARP aggression scale. The effects of DBB were assessed by comparing the prevalence of children with high C-SHARP scores between the pre- and post-intervention examinations. Results: In Study 1, only the prevalence of children with high covert aggression was significantly increased with an increase in dioxin exposure. In Study 2, in the full ingestion (>80% of goal ingestion volume) group, the prevalence of children with high covert aggression associated with dioxin exposure was significantly lower in the post-ingestion examination compared with in the pre-ingestion examination. However, in other ingestion (<20% and 20–79%) groups and a reference (no intervention) group, no difference in the prevalence of children with high covert aggression was found between the examinations before and after the same experimental period. Conclusions: The findings suggest that DBB ingestion may ameliorate children’s aggressive behavior, which is associated with perinatal dioxin exposure.     

不同方法对食源性致病菌耐药性监测研究

目的了解江苏地区食源性致病菌的常用抗菌药耐药谱,评价不同药敏方法在致病菌耐药性监测中的适用性。方法用Etest和微量肉汤稀释法,对江苏省2012-2014年食源性疾病常规监测检出的金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、沙门菌菌株进行药敏鉴定。结果金黄色葡萄球菌对红霉素的耐药率最高,其次为复方磺胺甲噁唑和四环素,且有多重耐药;副溶血性弧菌除对四环素和复方磺胺甲噁唑有一定的耐药,对其他6种革兰氏阴性菌抗生素均敏感。沙门菌对萘啶酸的耐药率超过50.0%。两种方法药敏检测结果对不同抗生素符合率有差异,但符合率均80%。结论 Etest和微量肉汤稀释法有较好的一致性,但所需时间及操作要求有差异,可根据实际需要进行选择。