大鼠乳鼠耳蜗基底膜的铺片研究

目的 探讨大鼠生后不同发育阶段耳蜗基底膜的铺片取材方法，为耳蜗发育的研究提供完善的技术手段。方法 将生后第7天和生后第16天的大鼠耳蜗取出后进行剥离铺片，并制成扫描电镜标本。在扫描电镜下观察。结果 基底膜暴露充分，Corti‘s器表面结构清楚完整。结论 结合扫描电镜的大鼠乳鼠耳蜗基底膜的铺片取材方法为耳蜗发育敏感期的研究提供了理想的形态学研究手段。     

耳蜗铺片硝酸银染色法的改进与观察

耳蜗铺片硝酸银染色法的改进与观察第三医院耳鼻喉科韩素秀军事医学科学院卫生学环境医学研究宋学政尹嘉才近年来在研究军事噪声、工业噪声及耳毒性药物的实验研究中。豚鼠耳蜗铺片染色极受重视，主要是该方法操作简便，节省时间和经费。染色后的毛细胞听毛显示清晰，便于...     

胎儿耳蜗"两剪裂开法"基底膜铺片术

目的 将首创的“两剪裂开法”应用于胎儿耳蜗的基底膜铺片,以改进人类耳蜗铺片取材方法。方法 对20例胎龄为25至32周的正常新鲜胎尸40耳应用“两剪裂开法”取材,并进行剥离铺片。结合光镜和扫描电镜进行标本观察。结果 此方法简便、省力,基底膜完整无损伤;镜下毛细胞清晰可见。结论 结合“两剪裂开法”取材的基底膜铺片方法是一种非常适合人类胎儿耳蜗的铺片技术。     

正常家兔耳蜗铺片光镜及扫描电镜观察

随机选健康成年家兔(6月龄)20只,行耳蜗铺片光镜及扫描电镜观察。发现兔耳蜗共2(2/1)回,每一回螺旋器均含有一排内毛细胞及三排外毛细胞;内毛细胞听毛呈“弓形,外毛细胞听毛呈“W”形。“W”形听毛之夹角从底回到顶回渐减小。实验结果表明兔耳蜗毛细胞排列规律,适于进行耳蜗铺片。     

耳蜗硬铺片银浸标本的制备

采用耳蜗硬铺片银浸法,注意银浸、固定既要充分,又要避免人为的损伤。自骨螺旋板与螺旋器连接处轻压,易使基底膜断离取下。用甘油明胶封片,易于保存。本法简便、省时经济、观察范围广泛,毛细胞及听毛清晰易辨,适合大批动物实验。     

大鼠全脑缺血及再灌注对耳蜗SDH组织化学和组织学的影响

本文采用闭塞四动脉全脑缺血大鼠模型，通过耳蜗琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）组化实验、图像分析和耳蜗切片，观察了缺血３０ｍｉｎ及不同再灌注时间对耳蜗ＳＤＨ组织化学和组织学的影响。提示脑缺血及再灌注可致内耳酶活性和组织结构损伤。     

大鼠全脑缺血及再灌注对耳蜗SDH组织化学和组织学的影响

本文采用闭塞四动脉全脑缺血大鼠模型，通过耳蜗琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）组化实验、图象分析和耳蜗切片，观察了缺血３０ｍｉｎ及不同再灌注时间对耳蜗ＳＤＨ组织化学和组织学的影响。结果显示：与对照组相比，缺血３０ｍｉｎ和缺血３０ｍｉｎ后再灌注２４ｈ时外毛细胞ＳＤＨ活性显著升高（Ｐ＜０．０１或０．０５）；而再灌注２ｈ时ＳＤＨ活性则显著降低（Ｐ＜０．０１）。缺血及再灌注各组可见Ｃｏｒｔｉ＇ｓ器变形、螺旋神经节细胞减少和血管纹变薄等病理变化。提示脑缺血及再灌注可致内耳酶活性和组织结构损伤。     

疏松结缔组织铺片制作方法的改进

制作疏松结缔组织铺片主要用动物的肠系膜或皮下组织 ,在制作过程中 ,按书本中的方法去做 ,在实际工作用中常常并不能获得理想的结果 ,原因是多方面的。书中只告诉了一些方法 ,而没有提示使用具体条件、经验、教训和制作成败的关键。而我们经过反复的实践 ,掌握了一套切实可行的制作方法 ,对疏松结缔组织铺片的制作加以改进 ,取得良好的效果。1　材料与方法取 1 5ｋｇ左右家兔 1只 ,按 3ｍｌ/ｋｇ/次从耳静脉注射 1 %台盼蓝水溶液 ,隔日 1次 ,可注射 5次。在注射期间 ,家兔除一般喂养外 ,应给予较多的蔬菜。取材前 2ｈ再给家兔皮下注射 2 0…     

国产丁胺卡那霉素对耳蜗影响的组织化学研究

用组织化学方法观察丁胺卡那霉素对耳蜗Ｃｏｒｔｉｓ器毛细胞及血管纹细胞琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）的影响，并以对照组生理盐水及卡那霉素与之对比。结果表明耳蜗毛细胞及血管纹细胞的ＳＤＨ活性下降。部分全耳蜗铺片以锇酸染色后进行坏死毛细胞计数，证明丁胺卡那霉素对耳蜗有损害作用，但小于卡那霉素。     

尾部悬吊对大鼠比目鱼肌梭内外肌纤维SDH活性的影响

:【目的】研究尾部悬吊对大鼠比目鱼肌梭内、外肌纤维琥珀酸脱氢酶 (succinicdehydrogenase,SDH)活性的影响 ,旨在探讨失重或模拟失重状态下肌梭的代谢和功能变化。【方法】用尾部悬吊法模拟失重 ,雌性Sprague Dawley大鼠按体质量配对原则 ,随机分为尾部悬吊 3、7、14、30d组及同步饲养的对照组。以氯化硝基四氮唑蓝盐 (nitrobluetetrazolium ,Nitro BT)法检测比目鱼肌梭内、外肌纤维SDH的活性。【结果】尾部悬吊导致Ⅰ型肌纤维的构成比减少 ,Ⅱ型肌纤维各亚型的构成比增加 ,以Ⅱb型增加最显著。尾部悬吊 3、7、14、30d组的Ⅰ型肌纤维构成比分别为 87.92 % ,84.0 0 % (P <0 .0 5 ) ,6 9.90 %(P <0 .0 1) ,6 7.90 % (P <0 .0 1) ;Ⅱb型肌纤维的构成比分别是 3 .75 % ,5 .6 3% (P <0 .0 5 ) ,15 .35 % (P <0 .0 1) ,18.33%(P <0 .0 1)。梭内肌纤维SDH活性增强 ,核袋 1纤维SDH染色由阳性转变为强阳性 ,核袋 2纤维由阴性转变为中等以上阳性 ,核链纤维由仅有一条呈弱阳性转变为均呈强阳性。【结论】模拟失重导致梭内、外肌纤维代谢改变 ,骨骼肌发生肌纤维类型转换 ,肌梭的功能活动可能受影响。     

缺血心肌切片琥珀酸脱氢酶组织化学染色的光密度定量研究

用分光光度计对缺血心肌切片琥珀酸脱氢酶组织化学反应强度进行光密度定量观察。结果显示，缺血１５ｍｉｎ后，酶活性即明显降低，提高了单纯形态学诊断的敏感性。     

卡那霉素对体外培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤作用

目的建立新生昆明小鼠耳蜗Corti器体外培养模型,研究卡那霉素（kanamycin,KM）对体外培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤作用。方法分离生后3d的小鼠耳蜗基底膜,平铺在胶原凝胶表面,然后在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度（0.05、0.1、0.2、0.3mmol/L）KM对小鼠耳蜗毛细胞的影响,耳蜗毛细胞计数检测毛细胞缺失情况。结果不同浓度KM均可使小鼠耳蜗外毛细胞出现纤毛倒伏、排列紊乱等形态变化。KM浓度为0.05mmol/L时,耳蜗外毛细胞缺失率明显增大,与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）,而耳蜗内毛细胞缺失率无明显变化（P〉0.05）。随着KM浓度的逐渐增高（0.1～0.3mmol/L）,耳蜗内、外毛细胞缺失率亦显著增大,呈现明显的量效关系（P〈0.05或P〈0.01）。结论KM可对体外培养的小鼠耳蜗毛细胞产生损伤作用,内耳器官培养是研究药物耳毒性的有效方法。     

高血压大鼠视网膜脱氢酶组织化学的研究

目的 探讨糖代谢异常在高血压视网病变发生过程中的作用，为临床预防和治疗高血压视网病变提供理论依据。方法 应用酶组织化学方法对正常京都种大鼠和自发性高血压大鼠视网膜组织的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶、琥珀酸氢酶和乳酸脱氢酶的活性变化进行观察比较。结果 在正常大鼠视网膜组织中，葡萄糖－６－磷酸氢酶以杆锥层活性最强，其他各层活性基本一致，琥珀酸脱氢酶主要分布在杆锥层内节，乳酸脱氢酶主要分布在内网层、节细胞层和     

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用

目的建立新生昆明小鼠离体顺铂耳毒性模型,研究顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用。方法分离生后3d的昆明小鼠耳蜗基底膜,在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度顺铂对小鼠耳蜗毛细胞的损伤,同时应用Hoechst 33258染色技术检测耳蜗毛细胞的凋亡。结果不同浓度顺铂均可使小鼠耳蜗毛细胞发生凋亡的形态学变化。顺铂浓度为4mg·L-1时,耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着顺铂浓度的增高(8～64mg·L-1),耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.01)。结论应用新生昆明小鼠能建立可靠的离体顺铂耳毒性模型;顺铂可导致耳蜗毛细胞凋亡,提示凋亡可能是顺铂耳毒性机制之一。     

脉冲噪声暴露后大鼠耳蜗外毛细胞死亡的启动方式

目的:观察强脉冲噪声暴露后大鼠耳蜗毛细胞死亡的启动方式。方法:将大鼠暴露于平均压力峰值级为154 dB SPL的脉冲噪声100发,分别于噪声暴露后10 m in,3 h,6 h解剖取耳蜗,应用细胞核DNA染料碘化丙锭(prop id ium lod ide,PI)标记耳蜗基底膜细胞,荧光显微镜下观察毛细胞核形态学变化。结果:强脉冲噪声暴露后10 m in可见到核固缩的外毛细胞,3 h出现少量核肿胀和核缺失外毛细胞,6 h可见到外毛细胞核大片段缺失。结论:毛细胞凋亡发生于脉冲噪声暴露后即刻,坏死出现于凋亡之后。细胞凋亡过程迅速,噪声暴露后6 h耳蜗基底膜外毛细胞核的缺失主要源于凋亡细胞。     

乳鼠肝细胞的体外培养及组织化学观察

本文用等量混合低浓度胶原酶、胰蛋白酶,直接消化乳鼠肝组织小块的方法,获得了存活率较高的大量肝细胞。培养的乳鼠肝细胞呈上皮状,形态多样,可分为大形细胞和小形细胞,胞质内充满颗粒。在培养的肝细胞内糖原丰富,琥珀酸脱氢酶活性强,乳酸脱氢酶活性阳性。培养的乳鼠肝细胞具有整体肝中细胞的特殊功能,可做为研究肝细胞的实验模型。     

条件声暴露后豚鼠耳埚外毛细胞F-激动蛋白的表达（英）

It has been found that in many mammalian animals,including mankind, non-traumatic"conditioning"noiseexposures can make the inner ear more resistant to trau-matic noise exposure. The possible mechanism underlyingthis phenomenon which is now known as"toughening",has been extensively studied . All the explanations aboutthis mechanism, however, have not been acceptable. Asa primary component of the structural filaments of the haircells and some supporting cells, filamentous actin (F-actin) are believed to be the basic unit in hair cell reac-tion. Furthermore, recent studies have shown that F-actinis involved in actin-mediated motile processes of the outerhair cells. Thus, F-actin may play an important role inthe process of"toughening". The present study is ①toobtain more information on the distribution of F-actin inthe guinea pig cochlea, ②to observe the effects of condi-tioning noise exposure on the expression of F-actin, and③to determine the relationship between the changes of F-actin expression in the outer hair cells (OHC) and the"toughening" phenomenon.