标记葡萄球菌A蛋白在免疫学中的应用

葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成份。它能与人及多种哺乳动物IgG分子Fc段结合,而不影响该抗体与抗原的反应性。这一特性给免疫学研究提供了新的手段。近年来,将提纯的     

尿IgG固相放免法测定

制葡萄球菌蛋白A(SPA)包被管, 利用其结合IgG特性, 建立了固相尿IgG放射免疫分析法. 在此方法中, 固相SPA既是标记与非标记IgG的特异性竞争结合剂, 同时又作为固相免疫分离剂, 使整个分析过程简单、稳定, 现报道如下: 　　材料和方法 　　1 试剂 　　天然SPA纯品, 上海生物制品研究所产品; IgG标准及标记物, 天津九鼎生物技术公司产品, 用其液相法放免试剂盒作为对照.     

SPA在淋巴瘤及横纹肌肉瘤免疫技术中的应用

葡萄球菌蛋白-A(SPA),是金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白戍份,具有与人及多种哺乳动物血清中IgG类抗体Fc段结合的特性,每个SPA分子可以结合二个免疫球蛋白分子,而且结合后并不影响IgG的Fab段和抗原作用。SPA由于不受第一抗血清动物种属的限制,本文将其应用于淋巴瘤(7例)横纹肌肉病(4例)免疫PAP法中,     

A蛋白酶免疫试验的发展在筛选杂交瘤中的应用

葡萄球菌A(staphylococcal protein A,简称SPA)它具有与人和多种哺乳动物IgG的Fc段结合的特性.许多学者应用SPA,并结合放射,荧光,酶等技术,建立了许多敏感,特异,快速和简便的     

以葡萄球菌A蛋白代替羊抗兔IgG应用于免疫组化显示大白鼠垂体的促黄体生成激素细胞

利用人的绒毛膜促性腺激素(HCG)与大白鼠的促黄体素(LH)有交叉反应,我们曾报道过用辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG抗血清作第二抗体,显示大白鼠垂体的促黄体生成激素细胞。为了探讨与其他动物的IgG分子结合,免去制备特异抗体,因此提取了葡萄球菌A蛋白SPA,利用SPA的广谱的第二抗体的特性,在原有工作的基础上试用酶联葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)和单纯的SPA分别代替免疫酶标组织化学间接法中HRP单抗兔     

用葡萄球菌A蛋白作为表面吸附剂来分离淋巴细胞的方法

用葡萄球菌A蛋白(SPA)分离带有特异表面标记的细胞的方法有多种,主要是根据SPA能与哺乳动物的IgG的Fc段起双价结合反应的原理而设计的。以往多用直接法分离细胞,而本文作者介绍了间接法分离技     

用PPA试纸检测青菜叶片内的有关病毒

<正> 作者曾报道用酶标试纸检测青菜叶片内的RMV,并指出:如果制备了抗抗体的酶标试纸,在一定条件下,则可检测任一抗原。进一步结合过氧化物酶交联金黄色葡萄球菌A蛋白(Peroxidase-Protein A,PPA)的应用,有可能得到更好的结果。金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)具有与多数哺乳动物血清IgG Fc段共价结合的性质,因此,可以用SPA代替抗IgG抗体(即抗抗     

应用FITC-SPA菌体检测人外周血中SmIgG的B淋巴细胞

SPA具有与人IgG的Fc段结合的特性,将荧光素标记在含有SPA的金黄色葡萄球菌菌体上,直接和人的B淋巴细胞混和,FITC-SPA菌体能粘附在SmIgG+的细胞表面,便于计数。我们用该方法共检测正常人、SLE病人、PSS病人等67例的B淋巴细胞标本,同时用FITC-抗IgG作为对照组,两组在统计学上无显著差别(P>0.05)。     

链球菌G蛋白的特性及应用前景

链球菌G蛋白（Streptococcal Protein G,SPG）是一种能与抗体IgG的Fc片段结合的蛋白质。它可与人IgG4种亚类.以及许多哺乳动物的单克隆、多克隆IgG有较强的结合力,具有与SPA显著不同的特性和更强的IgG亲和力,更广的结合谱,在免疫学上具有广泛的应用价值。本文对SPG的特性及应用前景进行简述。     

蛋白G和蛋白A亲和层析技术在提纯大鼠IgG方面的效果比较

应用蛋白G-Sepharose CL-4B和蛋白A-Sepharose CL-4B亲和层析技术,在不同的实验条件下比较提纯大鼠IgG的效果,结果表明:蛋白G在大鼠IgG提纯方面明显优于蛋白A。在4℃条件下,效果更好,在提纯的IgG中主要是IgG2a和IgG2b。     

着色SPA的制备及在免疫斑点试验中的应用

<正> 金葡菌A蛋白(SPA)能与人或某些动物的IgGFc段结合,故己广泛用于协同凝集试验和替代第二抗体作ELISA等免疫分析。Shoham首先报道用苏木素染色的 SPA在Sepharose柱上检测HCG,敏感性达0.9IU/ml(Clin Chem 1987;33(6),800)。我们在该法启示下,试制了着色SPA菌体试剂(SSPA),并用于免疫斑点试验测定人IgG,初步结果满意。     

人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究

目的:检测正常人和SLE患者血清中可溶型FcγRIIb(husFcγRIIb)含量,诱导表达并纯化人可溶性FcγRIIb,检测其与血清中免疫复合物结合力及对B细胞抗体分泌功能的影响。方法:ELISA法检测人血清中可溶型FcγRIIb含量,IPTG诱导含有pET-sFcγRIIb的大肠杆菌BL21,镍琼脂糖磁珠纯化目的蛋白,可溶型FcγRIIb包被ELISA板,ELISA方法检测其与血清中免疫复合物结合能力,免疫磁珠法分选B细胞,分组刺激培养,ELISA检测培养物上清中IgM含量。结果:SLE患者血清中可溶型FcγRIIb浓度低于正常人(P<0.05);诱导表达并纯化获得相对分子质量(Mr)为41 500的重组蛋白;重组可溶型FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,二者孵育后吸光度(A)值随血清中免疫复合物浓度逐渐增高,至受体结合度饱和时达最大;不同刺激条件下B细胞培养10 d,各实验组抗体浓度均高于细胞对照组(P<0.01),SPA组、SPA+husFcγRIIb组抗体浓度无显著差异(P﹥0.05),SPA+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显高于SPA组(P<0.01),SPA+husFcγRIIb+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显低于SPA+IgG型抗人IgM组(P<0.01)、SPA组(P<0.01)和SPA+husFcγRIIb组(P<0.01)。结论:SLE患者血清中可溶性FcγRIIb含量低于正常人,重组人可溶性FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,抑制免疫复合物对B淋巴细胞的激活,减少IgM型抗体的分泌。     

抗体—SPA—PAP法在免疫病理检测中的应用

利用葡萄球菌蛋白A(SPA)和许多哺乳动物IgG分子具有亲合性,可以与任何片段IgG分子结合,不受一抗种属特异性限制,只需一套PAP试剂盒就可以对不同种属来源的一抗进行检测,敏感性明显高于SPA-PAP法及PAP法。     

金黄色葡萄球菌及SPA快速分离检验新技术的研究

免疫磁珠是一项免疫学技术 ,一般由载体磁珠和免疫配基结合而成。迄今 ,我国尚没有批量生产成为商品的高质量免疫磁珠。金黄色葡萄球菌A蛋白 (SPA)是致病性金黄色葡萄球菌细胞表面一种特有的蛋白质 ,它具有与人IgG的Fc片段特异性结合的能力 ,每个SPA分子可以同时结合 2个人IgG分子 ,因此 ,可用来建立一种致病性金黄色葡萄球菌快速分离检验的体系。本研究采用乳液聚合法 ,合成一系列不同粒径的Fe3 O4磁核 ,再经苯乙烯 丙烯醛共聚物为高分子壳层合成了带醛基的高分子磁珠。利用扫描电镜对磁珠的粒径和表面进行表征 ,并用红外光谱仪和电…     

SPA花环试验检测人B淋巴细胞的SIg及其初步临床观察

本文介绍用普通SPA菌体试剂检测人B淋巴细胞SIgM和SIgG的方法(简称SPA花环试验)。对SPA花环形成的最适条件、重复性、特异性进行探讨,并用此法检测正常的人外周血、某些淋巴组织和淋巴细胞增殖性疾病患者的外周血及病变淋巴结中的B淋巴细胞,并将SPA花环试验与常规的免疫荧光法进行了比较。 用兔抗人IgM和IgG抗血清标记10％SPA菌体使成兔抗人IgM或IgG-SPA菌体试剂。取该试剂与外周血和淋巴组织中分离的淋巴细胞结合、洗涤后作湿片在油镜下观察,凡淋巴细胞外周有满圈或20个以上菌体吸附者为阳性,至少计数200     

171例正常人PAIgG的RIA结果分析

目前认为用放射性或酶标记的抗体技术、SPA技术直接测定计算完整的血小板表面IgG具有较高的准确性和临床价值。近十几年我室采用~(125)I—SPA直接测定血小板表面的IgG上千例,每次实验都带部分正常人标本作为试剂盒的质控,目前总结发现171例正常人中可见阳性结果20例,阳性率占11.7％,根据这种现象本人查阅了部分有关方面的报道资料后进行如下分析。 正常献血者171例(男67,女104),年龄18～63     

人体组织血管舒缓素单克隆抗体的鉴定

单克隆抗体已开始用于提纯人体组织血管舒缓素(EC3、4、21、8)。筛选特异性抗体产生克隆是用杂交瘤与提纯的血管舒缓素在放射免疫测定(RIA)和酶联免疫吸附测定(ELISA)中的结合为基础的。将三个选出的克隆(2个IgG1,1个IgG2b)进行再克隆化,并加以鉴定。RIA中呈现对[~(125)I]标记血管舒缓素50％结合的腹水稀释度为:1:1.2×     

用SPA间接花环试验检测人外周血B淋巴细胞

本文介绍一项检测B淋巴细胞的SPA间接花环试验,其原理是以包被有SPA的牛红细胞作为指示红细胞(ES),使ES同抗人Ig的IgG型抗体(A)结合形成ESA复合物,当SmIg 的B淋巴细胞与ESA反应后,就可以形成SPA间接玫瑰花环。文中对其影响因素作了探讨。此外,将本法与直接免疫荧光(DIF)法同时作平行试验,结果表明本法的敏感性和特异性超过了DIF(P<0.001)。本方法具有许多优点,可替代DIF以检测人外周血B淋巴细胞。     

链球菌G蛋白——一种新型、广谱的免疫检测剂

<正> 某些链球菌菌株的细胞壁中含有一种能与免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)结合的蛋白质成分,称为IgGFc段受体或链球菌G蛋白(streptococcal protein G)。近年来此种蛋白质已被成功分离、纯化并应用于免疫学研究。与经典的葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)相比,链球菌G蛋自(以下简称SPG)更易与IgG发生反应,亲和力强,结合谱广,已受到密切     

酶联SPA-斑点-ELISA检测体液(痕)ABO血型抗原

金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与人和多种哺乳动物IgG的Fc段非特异性结合,稳定性好,易于长期保存等特点,是一种很好的免疫学试剂。本研究是将SPA用于斑点-ELISA的一种检测技术。基本原理与间接斑点-ELISA相同,只是以酶标记的SPA代替间接法中的酶标记第二抗体。直接、间接斑点-ELISA对20份唾液标本的研究结果表明,三种方法的灵敏度经统计学处理无显著差异,均能检出0.0001μl分泌型唾液的血型抗原。