B7—CD28共刺激途径的研究进展

B7－CD28介导的共刺激是T淋巴细胞活化的重要辅助信号。共刺激家族成员在精确调节T细胞活化中起不同的作用。干预共刺激途径可能为临床治疗自身免疫疾病和肿瘤、器官移植等提供某些可能的策略。     

CD28单克隆抗体共刺激检测T细胞功能

目的 为深入研究了Ｔ细胞功能,探讨一种更为实用可靠的实验方法。方法 应用白细胞表面分化抗原２８（ＣＤ２８）单克隆抗体（单抗）共刺激检测Ｔ细胞功能,并观察其影响因素。ＣＤ２８单抗协同ＣＤ３单抗或植物血凝素（ＰＨＡ）诱导外周血淋巴细胞增殖转化及细胞因子（白细胞介素２、４及γ干扰素）产生,分别用氚胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和酶联免疫法检测。结果 单独ＣＤ２８单抗几乎不能诱导外周血淋巴细胞活化及细胞     

多发性硬化患者外周血CD4及共刺激分子CD28表达变化

目的 探讨CD4和CD28在多发性硬化患者中的表达变化.方法 采用流式细胞术检测29例多发性硬化患者外周血CD4＋、CD28＋、CD4＋ CD28＋的表达变化,采用EDSS量表对MS患者进行神经功能损伤评分.结果 复发期MS患者CD4＋表达明显高于缓解期MS和对照组,缓解期MS患者外周CD4＋细胞明显表达高于对照组;复发期MS患者CD28＋表达明显低于缓解期,缓解期明显低于对照组;CD4＋ CD28＋三组比较无统计学差异;重度MS患者外周血CD4＋表达高于中度,重度MS患者外周血CD28＋表达低于中度,而CD4＋ CD28＋表达二组比较无统计学差异.结论 多发性硬化患者CD4＋表达水平升高,CD28＋表达水平降低,CD28＋可能促进CD4＋T淋巴细胞活化.     

CD80/CD86-CD28/CTLA-4共刺激信号在移植耐受中的作用

Ｂ7/ＣＤ2 8是一个重要的共刺激配体 /受体家族 ,体内外实验均证明它在Ｔ细胞激活过程中具有重要作用。该家族包括至少两个配体和两个受体 :两个配体为ＣＤ80 (Ｂ7 1)和ＣＤ86(Ｂ7 2 ) ,它们的结构、表达及与受体的亲和力均有所不同 ;两个受体是ＣＤ2 8和细胞毒性Ｔ细胞相关抗原 4 (ＣＴＬＡ 4 ) ,其中ＣＤ2 8受体传导的为阳性信号而ＣＴＬＡ 4受体传导的为阴性信号。现简要介绍ＣＤ80 /ＣＤ86 ＣＤ2 8/ＣＴＬＡ 4通路及其在移植耐受中的作用。1　ＣＤ80 /ＣＤ86 ＣＤ2 8/ＣＴＬＡ 4家族成员1.1　ＣＤ80 和ＣＤ86:ＣＤ80 和ＣＤ86均为免疫…     

CD28/B7共刺激信号及其临床意义

T细胞活化需要两个信号，一个是抗原特异的，由T细胞受体识别并结合抗原呈递细胞表面的MHC－抗原肽的第一信号；第二信号是由T细胞上的CD28与抗原呈递细胞上的B7分子的结合而提供的，只有两个信号都存在时，T细胞开始增殖并分泌细胞因子，CTLA4是B7的另一个受体，它在T细胞活化时上调表达，其功能为抑制T细胞增殖，阻断或给予第二信号，可以人为调节免疫应答使之增强或抑制，对免疫治疗提供了新的手段。阻断CD28／B7途径导致免疫耐受，降低机体的免疫应答，可应用于自身免疫性疾病，器官移植及移植物抗宿主病的治疗，激活CD28／B7途径太应用于免疫系统识别并清除侵犯系统的肿瘤。     

尿毒症患者T细胞亚群共刺激分子CD28和CD152的表达分析

目的探讨尿毒症患者T细胞亚群表面共刺激分子CD28和CD152(CTLA4)的表达与细胞免疫功能紊乱的关系。方法采用流式细胞术测定尿毒症患者外周血T淋巴细胞上共刺激分子对CD28和CD152(CTLA4)的表达。结果尿毒症患者与健康对照组相比,CD4+T细胞相对计数和CD4/CD8比值均明显增加,共刺激分子CD28和CD152(CTLA4)在CD4+和CD8+T细胞上表达均明显增加,P值均<0.05。尿毒症患者CD4+T细胞表达的CD28明显高于CD8+T细胞,两组间T细胞亚群上共刺激分子CD28表达率差值间比较有显著性差异,P<0.05;患者的CD152分子在CD4+T细胞上的表达较CD8+T细胞上明显减少(P=0.027)。结论尿毒症患者的细胞免疫功能紊乱,T细胞亚群比例失衡,共刺激分子对CD28、CD152(CTLA4)在CD4+和CD8+T细胞上表达均增加,提示可能存在T细胞活化或抑制信号调节失衡。     

抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β的表达

为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8^＋CD25^＋细胞比例和肿瘤生长因子β（TGF-β）表达等相关免疫学指标.结果表明,在抗CD28抗体的协同作用下,抗CD3抗体的刺激活性明显提高,CD8^＋CD25^＋细胞比例明显增加,TGF-β的表达下调.结论：抗CD28抗体协同刺激可以提供第二信号,使T淋巴细胞充分活化,TGF-β表达水平明显下降.     

共刺激分子CD28和B7在胃肠道肿瘤的表达

目的 检测胃肠道肿瘤患者外周血中CD28^＋T细胞数量及原代细胞表面B7表达水平,以探讨胃肠道肿瘤患者共刺激通路是否异常。方法 采用流式细胞术检测胃肠道肿瘤患者外周血中CD28^＋T细胞与胃肠道肿瘤患者原代细胞B7分子表达,并与胃肠道良性疾病进行比较。结果 胃肠道肿瘤患者CD28^＋T细胞数明显低于对照组（P〈O．01）;其原代细胞表面B7-1、B7-2表达水平低于对照组（P〈O．01）。结论胃肠道肿瘤患者外周血T细胞低表达CD28分子,胃肠道肿瘤细胞低表达B7分子,从而影响B7-CD28共刺激通路,使T细胞不能有效地清除肿瘤。     

慢性重度乙型肝炎患者外周血CD28、CD152与血清HBV-DNA的相关性探讨

乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）感染患者表现出的严重的炎症坏死性肝脏疾病，主要是由细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxicTlymphocyte，erE）应答的质量和数量所决定的。但仅靠CD4和CD8两种分子并不能反映正常或病理情况下机体T细胞变化规律，也无法探讨机体的抗病毒机制，其中还存在共刺激分子产生的第二信号的作用，后者会直接导致细胞的活化和无能。     

颅脑损伤开颅手术患者颅内压变化与CD8+CD28-调节性T细胞的关系

目的 探讨颅脑损伤开颅手术患者颅内压变化与CD8+CD28-调节性T细胞（Treg）的关系。 方法 以56例颅脑损伤开颅手术患者作为观察组（A组）,以38例急性大面积脑梗死进行开颅去骨瓣减压的患者作为阳性对照（B组）,并以40例健康志愿者作为阴性对照（C组）;比较以上3组外周血及脑脊液内CD8+CD28-Treg及其细胞因子白介素10（IL-10）及转化生长因子β1（TGF-β1）的百分含量,并监测A组在不同时间点颅内压、CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1的变化,并分析其相关性。 结果 A组术前CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均不同程度低于B及C组（P<0.05）,但B组与C组差异无统计学意义（P>0.05）。随着病情的推演,A组患者颅内压逐渐降至正常,而外周血及脑脊液内CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均逐渐回升。相关性分析显示颅内压与CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均呈显著负相关。 结论 CD8+CD28-Treg及其细胞因子降低是颅脑损伤的重要免疫学现象,且与颅内压升高存在密切关系。       

CD28/CTLA-4与CD4+CD25+Treg相关研究进展

调节性T细胞是一类表型和功能特异的T细胞亚群,其中CD4 CD25 调节性T细胞是近年来被研究得较为深入的一个亚类,也最值得引起人们的关注。虽然有研究已经证实CD4 CD25 调节性T细胞能够抑制CD4 CD25-T细胞和CD8 T细胞的活化和增殖,但其具体的作用机制还不清楚,有研究表明CD28/CTLA-4对CD4 CD25 调节性T细胞的产生,维持和免疫抑制作用的发挥起重要作用,因此进一步明确CD28/CTLA-4与CD4 CD25 T细胞的关系有助于人们在临床免疫治疗中更好地了解和应用CD4 CD25 调节性T细胞。     

Graves病患者外周血共刺激分子CD28的表达及意义

目的观察Graves病患者治疗前后外周血CD28-T、CD4+CD28-T、CD8+CD28-T细胞亚群和可溶性CD28(sCD28)含量的表达变化,以分析其作为预后判断和病情监测生物学指标的临床意义。方法采用双单抗夹心ELISA法测定Graves病患者外周血中sCD28的含量;流式细胞术分析其外周血中CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD28-T、CD4+CD28-T、CD8+CD28-T细胞亚群的表达百分率,并进行统计学分析。结果与健康人对照组相比,Graves病患者CD3+T、CD4+T细胞亚群表达百分率显著减少(P均0.01),而CD28-T、CD4+CD28-T、CD8+CD28-T细胞亚群的表达百分率和sCD28含量均显著升高(P均0.01);与治疗前比较,Graves病患者治疗后外周血CD28-T、CD4+CD28-T、CD8+CD28-T细胞亚群和sCD28浓度均显著下降,并呈恢复性改变(P均0.01);且上述4种指标的表达水平与Graves病患者临床体征(甲状腺肿大程度、GO眶病)呈正相关关系(P均0.01)。结论 Graves病患者外周血CD28-T、CD4+CD28-T、CD8+CD28-T细胞亚群和sCD28含量的表达水平与Graves病患者的病情密切有关,可能为Graves病的预后判断和病情监测提供依据。     

协同刺激分子CD28/CTLA-4:B7在胃癌患者中的表达及临床意义

目的研究胃癌患者外周血共刺激分子CD28和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4,CD152）及B7分子的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常以及在胃癌发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测56例胃癌患者外周血淋巴细胞表面的CD28、CD152、CD3、CD4、CD8及B7分子的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较。结果胃癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋、CD3^＋CD28^＋、B7-1（CD80）、B7～2（CD86）的表达水平及CD4^＋／CD8^＋低于健康对照组及良性肿瘤组,CD3^＋、CD152^＋和CD8^＋水平显著增高。结论胃癌患者外周血淋巴细胞低表达CD28和B7分子,高表达CTLA-4分子,导致了胃癌患者B7：CD28／CTLA-4共刺激通路异常,影响了T细胞彻底清除肿瘤细胞,从而使肿瘤逃避机体的免疫监视、免疫抑制,发生转移。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28的表达

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28与其病情状态、乙型肝炎病毒复制的关系。方法用流式细胞术检测了24名健康体检者和92例慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86、CD28的表达和CD8^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^-亚群淋巴细胞,并与病毒载量和乙型肝炎e抗原（HBeAg）进行相关分析。结果慢性乙型肝炎CD80和CD86表达明显高于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组（P〈0．01）;肝炎后肝硬化组明显高于慢性乙型肝炎组（P〈0．05）;慢性乙型肝炎轻、中、重度3组间差异也有统计学意义。慢性乙型肝炎组CD28的表达明显低于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组（P〈0．05）。病毒载量高低和HBeAg是否阳性与外周血CD80、CD86、CD28及CD8^＋CD28^＋和CD8^＋CD28^-亚群淋巴细胞差异无统计学意义。结论CD80、CD86及受体CD28可能在慢性乙型肝炎免疫损伤过程中起重要作用,但与血清中病毒载量的变化和HBeAg阳性与否无关。     

哮喘患儿CD8+CD28+、CD8+CD28-T淋巴细胞检测及其临床意义

目的通过对哮喘患儿CD4、CD8和CD28的联合检测,探讨哮喘患儿淋巴细胞免疫功能状态及其临床意义.方法采用流式细胞术检测哮喘患儿外周血的总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD8+)、细胞毒T细胞(CD8+CD28+)、抑制T细胞(CD8+CD28-).结果哮喘患儿组与对照组比较;CD3+、CD4+、CD8+CD28-细胞均低于对照组(P＜0.01,P＜0.05),CD8+CD28+细胞增高(P＜0.05),CD4+/CD8+比值、CD8+与对照组比较均无显著性差异(P＞0.05).结论哮喘患儿存在T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,而CD8+CD28+、CD8+CD28-T细胞失衡可能是导致机体免疫功能紊乱的主要因素.     

阻断B7／CD28及CD40／CD154共刺激信号对致敏小鼠免疫功能的影响

本研究旨在通过阻断致敏小鼠的B7／CD28及CIM0／CD154共刺激信号途径,探讨其免疫功能的变化,为应用于异基因骨髓移植的免疫耐受提供实验依据。将致敏的BALB／c小鼠分成4组：①CTLA4Ig＋anti—CD154鼠源性同型对照抗体;②anti—CD154单克隆抗体＋CTLA4Ig鼠源性同型对照抗体;③CTLA4Ig＋anti—CD154单克隆抗体;④CTLA4Ig及anti—CD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体。正常BALB／c小鼠应用CTLA4Ig及anti—CD154单克隆抗体的鼠源性同型对照抗体。给予每只小鼠CTLA4Ig和anti—CD154单克隆抗体或相对应的同型对照抗体各500μg,于移植前7天尾静脉输注,每组小鼠各5只。移植当天处死各组小鼠,应用流式细胞仪检测脾细胞中CD19＋CD69＋B细胞数量、CD44high／CD62Lhigh／及CD44high／CD62Llow-T细胞数量。用流式细胞仪或ELISA法检测血清中抗体及细胞因子的变化。结果表明：小鼠致敏后CD19＋CD69＋B细胞数量与正常小鼠相比明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）,阻断B7／CD28或／和CIM0／CD154共刺激信号通路后可见抑制效应（P〈0．01）,两者同时阻断具有协同作用（P〈0．01）。小鼠致敏后记忆性T细胞CD44high／CD62Lhigh及效应性T细胞CD44high／CD62Llow/-与正常相比亦明显增多（P〈0．01）。阻断共刺激信号通路后可使其明显抑制,CTLA4Ig和anti-CD154单克隆抗体联合应用具有协同效应（P〈0．01）。各组小鼠细胞因子及IgG、IgM抗体均无明显差异（P〉0．05）,但血清中致敏抗体检测显示致敏后特异性抗体升高,阻断共刺激信号通路后其明显被抑制（P〈0．01）。结论：阻断B7／CD28或CD40／CD154共刺激信号途径均能抑制致敏小鼠的细胞免疫功能及体液免疫功能;同时阻断有协同作用。     

阿奇霉素对支气管肺炎患儿CD8+CD28-抑制性抑制性T细胞的影响

目的探索阿奇霉素对支气管肺炎患儿CD8+CD28-抑制性T细胞的影响。方法收集66例支气管肺炎患儿作为观察对象,以同龄急性上呼吸道感染及健康儿童各66例作为对照,采集外周血运用流式细胞术检测以上3组CD8+CD28-抑制性T细胞及其细胞因子转化生长因子β1（TGF-β1）及白介素10（IL-10）的含量,并检测降钙素原(PCT)及MP免疫球蛋白M（MP-IgM）含量;将支气管肺炎患儿分为A组及B组各33例,分别使用阿奇霉素及红霉素进行治疗,比较两药对上述5项指标的差异,并分析其相关性。结果支气管肺炎患儿CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10显著低于急性上感患儿及健康儿童组（P < 0.05）,而PCT及MP-IgM显著高于另外两组（P < 0.05）。治疗后A组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10均显著高于B组（P < 0.05）,且PCT及MP-IgM显著低于B组（P < 0.05）。相关性分析结果提示CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10三者均与PCT及MP-IgM呈显著负相关性,其中CD8+CD28-T细胞及TGF-β1与MP-IgM的相关性最强。结论CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10降低是MP阳性支气管肺炎患儿的重要免疫学特征,且与感染指标呈显著相关性;阿奇霉素对提高CD8+CD28-T细胞含量及下调感染指标的效果均优于红霉素。     

CD28/CTLA-4共刺激分子在再生障碍性贫血免疫发病机制中的作用

目的 研究CD28、CTLA-4在再生障碍性贫血（AA）免疫发病机制中的可能作用。方法 以流式细胞术分别分析23例发病期AA、10例恢复期AA患者和15名正常人骨髓细胞中CD3^＋CD4^＋T细胞上CD28、CTLA-4表达率，Th1、Th2细胞比例，评价CD28、CTLA4表达与Th1／Th2、中性粒细胞绝对值（ANC）之间的关系。结果 ①正常对照组CD3^＋CD4^＋T细胞上CD28、cTLA4表达率及CD28^＋／CTLA-4^＋比值分别为（31．40±10．83）％、（2．45±1．30）％、17．02±13．44，AA患者发病期分别为（39．84±10．89）％、（1．43±0．67）％、43．04±37．61，AA患者恢复期分别为（22．00±9．08）％、（3．46±2．26）％、10．49±7．80；与正常对照组比较，AA患者发病期CD28显著升高（P〈0．05），CTLA-4显著下降（P=〈0．01），CD28^＋／CTLA4^＋比值相应地亦显著升高（P〈0．05），而恢复期上述数值与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。②正常对照组Th1、Th2细胞、Th1／Th2比值分别为（4．21±2．11）％、（1．99±1．27）％、2．46±1．28，AA发病期为（11．13±4．96）％、（2．46±1．65）％、5．20±1．98，恢复期分别为（5．39±4．29）％、（2．53±2．41）％、2．87±1．43；与正常对照组比较，AA发病期Th1增高，Th1、Th2平衡向Thl偏移（P值均〈0．01），恢复期与正常对照组比较，差异无统计学意义。③AA患者CD28^＋／cTLA4^＋比值与Thl／Th2比值呈正相关（P〈0．05），ANC与CD3^＋CD4^＋CD28^＋T细胞数呈负相关（P〈0．01），与CD3^＋CD4^＋CTLA-4^＋T细胞数呈正相关（P〈0．01）。结论 ①AA发病期患者骨髓CD4^＋T细胞表面共刺激分子表达异常，CD28升高，而CTLA-4下降，AA患者骨髓T细胞处于“预激活”状态；②CD28／CTLA-4比值与Th1／T12．比值呈正相关提示：CD28、CTLA-4表达失衡可引起Th细胞格局偏移，Th1型细胞增多。③ANC和CD28、CTLA-4间相关分析进一步说明CD28、CTLA-4与AA的发生、发展有关。