系统性红斑狼疮患者CD40-CD40L的检测及临床意义

目的探讨CD40-CD40L在系统性红斑狼疮(SLE)患者淋巴细胞上的表达及意义.方法采用流式细胞术检测SLE患者淋巴细胞CD40及CD40L的表达,并与对照组比较.结果SLE患者淋巴细胞及CD4+T淋巴细胞CD40L的表达显著高于对照组(P＜0.05),而CD40在淋巴细胞及CD3-淋巴细胞上的表达,两组无显著性差异(P＞0.05).结论CD40-CD40L共刺激分子途径在SLE发病机制中起重要作用,以CD40L表达上调为重要特点.     

糖皮质激素对多发性硬化患者外周血淋巴细胞CD40和CD40L表达的影响

目的 探讨多发性硬化(MS)患者外周血淋巴细胞上CD40和CD40配体(CD40L)的表达和糖皮质激素(GC)治疗对CD40和CD40L表达的影响.方法 利用流式细胞仪对MS急性发作患者(Ms组,32例)GC治疗前后及健康对照组(30例)外周血淋巴细胞中CD40和CD40L进行检测.结果 治疗前MS组淋巴细胞中CD40和CD40L的表达较健康对照组显著升高,分别为CD40(29.67±9.95)%vs(26.60±6.28)%(P＜0.05)和CD40L(9.65±3.62%)VS(6.90±1.66)%(P＜0.01);GC治疗后淋巴细胞CD40L表达较治疗前显著降低(8.27±2.28)%vs(10.07±4.00)%(P＜0.05),而CD40表达较治疗前显著增高(34.75±7.86)%VS(29.51±9.95)%(P＜0.05).结论 Ms急性发作时患者外周血淋巴细胞上CD40和CD40L的表迭明显增高,GC对MS患者淋巴细胞CD40L表达有调节作用,对细胞免疫有抑制作用.     

CD40一CD40L在移植免疫中的研究进展

CD40-CD40L交联在体液免疫和细胞免疫中是一条重要的细胞信号传导途径,参与了体液免疫和细胞免疫的调节.近年在骨髓移植和器官移植中应用anti-CD40/CD40L单克隆抗体或基因敲除等手段来干预CD40-CD40L的异常表达,发现阻断CD40-CD40L共刺激信号可诱导免疫耐受和抑制移植物抗宿主反应等,因此阻断CD40-CD40L共刺激途径将成为临床移植领域中防治排斥反应的新途径.本文就CD40/CD40L及其交联作用在移植免疫中的研究进展作一综述.     

CD40-CD40L在移植免疫中的研究进展

CD40-CD40L交联在体液免疫和细胞免疫中是一条重要的细胞信号传导途径,参与了体液免疫和细胞免疫的调节。近年在骨髓移植和器官移植中应用anti-CD40/CD40L单克隆抗体或基因敲除等手段来干预CD40-CD40L的异常表达,发现阻断CD40-CD40L共刺激信号可诱导免疫耐受和抑制移植物抗宿主反应等,因此阻断CD40-CD40L共刺激途径将成为临床移植领域中防治排斥反应的新途径。本文就CD40/CD40L及其交联作用在移植免疫中的研究进展作一综述。     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞CD40表达及临床意义

目的 对SLE患者外周血单核细胞上CD40的表达水平及其与SLEDAI评分有无相关性进行分析.方法 用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测21例SLE患者和18名正常人外周血单核细胞上CD40的表达.结果 SLE患者外周血中CD14＋CD40＋/CD14＋百分率明显高于正常对照组（P〈0.01）.SLE患者外周血CD14＋细胞CD40表达水平和SLEDAI评分呈正相关.结论 SLE患者CD14＋CD40＋/CD14＋高于正常人,认为单核细胞CD40表达增高参与SLE的发病过程.     

冠心病患者CD40、CD40L、sCD40L的水平及其意义

目的:探讨单核细胞上CD40和其配体CD40L及血浆中游离型的配体sCD40L在冠心病(coronary heart disease,CHD)患者中的水平及其临床意义。方法:将36例CHD病例分为两组,稳定型心绞痛(stable angina,SA)组和急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)组,分别检测外周血单核细胞上CD40、CD40L表达水平及血浆中sCD40L浓度,并与19例对照组相比较。结果:ACS组患者外周血单核细胞上CD40的表达水平明显高于SA组、对照组;ACS组、SA组患者血浆sCD40L浓度明显高于对照组(P<0.05);外周血单核细胞CD40与CD40L表达水平呈正相关(r=0.41,P=0.002);外周血单核细胞CD40表达水平与血浆sCD40L浓度呈正相关(r=0.367,P=0.006)。结论:CD40-CD40L通路可能与ACS的形成有关,阻断CD40-CD40L信号途径可能成为防治动脉粥样硬化的一个重要靶点。     

急性冠脉综合征患者外周血CD40L表达增高

目的检测急性冠脉综合征(ACS)患者CD4 T细胞CD40L的表达率、血清可溶性CD40配体(sCD40L)的水平,探讨CD40/CD40L在ACS发病中的作用及可能途径。方法ACS患者42例,包括稳定型心绞痛(SAP)12例、不稳定型心绞痛(UAP)14例、急性心肌梗死(AMI)16例;健康对照者13例。流式细胞分析术检测CD4 T细胞表达CD40L的阳性细胞率,ELISA法检测血清sCD40L水平。结果AMI、UAP、SAP、对照组CD4 T细胞中表达CD40L的阳性细胞率分别为(8.67±3.31)%、(3.24±1.13)%、(2.29±1.93)%、(0.57±0.19)%,AMI组显著高于其他三组(P均<0.05),UAP组亦显著高于对照组(P<0.05);四组血清sCD40L水平分别为(14.53±8.08)ng/mL、(8.06±6.96)ng/mL、(7.37±3.59)ng/mL、(4.45±1.48)ng/mL,AMI组显著高于其他三组(P均<0.05)。结论ACS患者CD4 T细胞CD40L的表达率和血清sCD40L水平增高,在ACS发病过程中起重要作用;CD40L和sCD40L有望作为冠心病危险性的预测因子。     

SLE患者外周血淋巴细胞的CD40-CD40L表达及意义

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus SLE）是自身免疫介导的、以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病。SLE的发病机制复杂，至今仍未完全阐明，目前普遍认为免疫调节异常在其发病中起到了主导作用，其中包括一对共刺激信号CD40-CD40L的调节异常，淋巴细胞的功能失调、异常活化等。     

血液透析患者血浆中可溶性CD40及CD4+T细胞上CD154水平的变化

目的 探讨CD40-CD40配体(CD154)相互作用在血液透析患者免疫异常及肾脏损伤中的可能作用。方法 慢性肾功能衰竭进行血液透析患者22名,透析前采静脉血,正常对照10名,非空腹采静脉血;sCD40的测定采用ELISA法,CD4+T细胞上CD154的测定采用双色流式细胞仪。结果 sCD40在正常对照血浆中水平为(30.28±11.09)pg/ml,而血液透析患者为(781.22±203.03)pg/ml,显著高于正常对照(P<0.01)。外周血CD4+T细胞上CD154在正常对照的水平为(29.24±3.99)％,而血液透析患者为(41.41±5.54)％,也明显高于正常对照(P<0.05);说明在血液透析患者,其CD40-CD154相互作用处于过度活跃状态。结论 CD40-CD154可能通过影响免疫功能及加速肾脏损伤参与了尿毒症的发生发展,阻断CD40-CD154相互作用可能有助于延缓疾病进程。     

Daudi细胞CD40和CD40配体的共表达及其生物学意义

CD40抗原是属于TNFR超家族的细胞表面分子，广泛表达于B淋巴细胞的所有发育和分化阶段和一些其它特定细胞类型上。B细胞表达的CD40分子主要通过与表达在活化CD4T细胞上的CD40配体（CD40L）相互作用传递信号，从而调控B细胞的分化，特别是免疫球蛋白（Ig）的同型转换和生发中心（GC）的形成。我们首先检测CD40抗原和CD40L在细胞表面的表达和分布情况，然后分别用CD40和CD40L的阻断性抗体阻断这对信号，观察对细胞生长、增殖和凋亡的影响。     

CD40/CD40L在MM患者中的表达及其对预后的意义

目的:探讨CD40/CD40L在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其对预后的影响.方法:选取2016年5月-2017年6月于沧州市人民医院接受治疗的MM患者30例,作为MM组,同期选取在本院体检的健康人30例为正常组,采用流式细胞术检测两组人员血清中化疗前后CD40/CD40L的水平,分析其与MM患者淋巴细胞群、病理分...     

流式细胞术检测狼疮患者白细胞分化抗原40配体

目的　了解在系统性红斑狼疮（ Ｓ Ｌ Ｅ） 患者血液中辅助性 Ｔ细胞（ Ｔｈ） 与 Ｂ 细胞间的白细胞分化抗原（ Ｃ Ｄ）４０ Ｃ Ｄ４０ 配体（ Ｌ） 的共刺激作用。方法　用抗 Ｃ Ｄ３ 单克隆抗体（ 单抗） 刺激 Ｓ Ｌ Ｅ 活动期和缓解期各１０ 例患者外周血单个核细胞（ Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ） ,采用流式细胞术检测不同时段 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 的表达水平,并与正常对照组比较。结果　活动期 Ｓ Ｌ Ｅ 组 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 的表达在抗 Ｃ Ｄ３ 单抗刺激前后均显著高于正常对照组,差异均有非常显著意义;而缓解期 Ｓ Ｌ Ｅ 组 Ｔ 细胞在抗 Ｃ Ｄ３ 单抗刺激前的 Ｃ Ｄ４０ Ｌ 表达在正常范围内,在刺激后显著高于正常对照组,差异有非常显著意义。结论　 Ｃ Ｄ４０ Ｌ Ｃ Ｄ４０ 共刺激作用在 Ｓ Ｌ Ｅ发病机制和病程中起着重要作用。     

系统性红斑狼疮患者CD4+T淋巴细胞CD45RO/CD45RA的表达

目的：检测系统性红斑狼疮患者CD4^ T辅助淋巴细胞CD45RO和CD45RA亚群的变化及临床意义。方法：用流式细胞术检测了8例活动期SLE患者CD4^ T辅助细胞CD45RO、CD45RA的表达率，并与对照组进行了比较。结果：SLE患者CD4^ T辅助淋巴细胞CD45RO的表达率与对照组无显著性差异（59．30％vs.59.74%),CD45RA下降（21．40％vs.31.64%),CD45RD、CD45RA双阳性T辅助淋巴细胞显著增高（18．57％vs.7.92%)。结论：SLE患者体内CD45RA^ T辅助淋巴细胞被激活，向CD45RO^ 细胞转化。CD45RA^ T辅助细胞的减少是导致机体免疫功能失去平衡的重要原因。     

急性冠脉综合征患者高表达的CD40L和炎症因子相关性

目的 检测急性冠脉综合征(ACS)患者CD4+T细胞CINOL的表达率、其血清可溶性CD40配体(sCD40L)和高敏C反应蛋白(hsCRP)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的浓度,分析CD40L(sCD40L)与炎症因子的相关性,探讨CD40/CD40L在ACS发病中的作用及可能途径.方法 采用前瞻性研究方法,选取2006.10-2007.4中山大学附属第一医院急诊科、心血管医学部冠心病患者32例,包括稳定性心绞痛(SAP)7例、不稳定性心绞痛(UAP)14例、急性心肌梗死(AMI)11例.正常对照组(CON)为与患者年龄、性别相匹配的健康志愿者8例.所有受试者均排除感染、肿瘤、风湿、肝肾功能不全,未使用类固醇和免疫抑制剂等.流式细胞分析术(FCM)检测CD4+T细胞表达CD40L的阳性细胞率,ELISA法检测血清sCD40L、ICAM-1和VCAM-1浓度,免疫比浊法检测血清hsCRP浓度.所有资料使用SPSS 11.0进行统计学分析.结果 ANI、UAP、SAP、CON组CD4+T细胞中表达CD40L的阳性细胞率(%)分别为8.60±3.02、3.24±1.13、2.18±1.80、0.59±0.18,AMI组显著高于其他3组(P＜0.05),UAP组亦显著高于CON组(P＜0.05);4组血清sCD40L浓度分别为14.47±8.00、8.06±6.96、7.32±3.58、4.48±1.49(ng/mL),ANI组明显高于其他3组(P＜0.05);4组血清:hsCRP浓度分别为20.30±7.57、14.04±8.03、3.78±4.99、O.93±0.77(mg/L),AMI组显著高于其他3组(P＜0.05),UAP组亦显著高于SAP组与CON组(P＜0.05);4组血清ICAM-1浓度分别为418.09±222.19、212.86±128.43、165.04±32.12、108.62±62.27(ng/mL),AMI组显著高于其他3组(均P＜O.05),UAP组亦高于CON组(P＜0.05);4组血清VCAM-1浓度分别为5540.02±2614.65、3760.95±1915.01、4167.27±2084.48、2405.65±870.45(ng/mL),AMI组显著高于CON组(P＜0.01);AMI组CD4+T细胞中表达CD40L的阳性细胞率与VCAM-1呈明显正相关性(r=0.730,P=0.011),其血清sCD40L与hsCRP、ICAM-1、VCAN-1呈明显正相关性(r=0.677,P=0.011;r:0.901,P=0.000;r=0.714,P=0.014).结论 急性冠脉综合征患者CD4+T细胞CINOL的表达率和血清sCINOL浓度升高,且与血清hsCRP、ICAN-1、VCAM-1呈明显正相关;在ACS发生中起作用,此和hsCRP、ICAM-1、VCAN-1等有关,而CD40L/sCD40L可望作为冠心病危险性的预测因子.     

Hyperexpression of CD40 ligand by B and T cells in human lupus and its role in pathogenic autoantibody production.

We investigated the role of the costimulatory molecules, CD40 and its ligand CD40L, in the pathogenesis of human SLE. In comparison to normal subjects or patients in remission, PBMC from active lupus patients had a 21-fold increase in the frequency of CD40L-expressing, CD4+T cells. However, the expression of CD40L induced in either lupus or normal T cells by mitogenic stimulation could be down-regulated equally well by CD40 molecules on autologous B cells. Active lupus patients also had a 22-fold increase in percentage of CD8+ T cells expressing CD40L, consistent with their unusual helper activity in SLE. Surprisingly, patients with active lupus had a 20.5-fold increase in B cells that spontaneously expressed high levels of CD40L, as strongly as their T cells. Although lupus patients in remission had low levels of CD40L+ cells in the range of normal subjects, mitogen-induced upregulation of CD40L expression in the T and B cells was markedly greater than normal, suggesting an intrinsic defect. A mAb to CD40L blocked significantly the ability of lymphocytes from lupus patients with active and established disease to produce the pathogenic variety of antinuclear autoantibodies in vitro, bolstering the possibility of anti-CD40L immunotherapy for lupus. Future studies on the hyperexpression of CD40L could elucidate a regulatory defect in the pathogenic T and B cells of lupus.     

黄芪对红斑狼疮细胞凋亡和T淋巴细胞亚群的影响

目的:研究黄芪对系统性红斑狼疮(SLE)细胞凋亡和T淋巴细胞亚群的影响,探讨其对SLE的治疗作用。方法:将80例初发SLE患者随机分为常规治疗组和黄芪治疗组(常规治疗的基础上加用黄芪注射液)。观察两组患者治疗前后外周血淋巴细胞上Fas、Bcl-2抗原的表达和T淋巴细胞亚群的变化。结果:两组患者治疗后外周血淋巴细胞上Fas抗原的表达下调(P<0.01),Bcl-2抗原的表达以及CD4+亚群、CD4+/CD8+比值上升(P<0.01);其中,治疗后Fas抗原表达的下调、CD4+亚群及CD4+/CD8+比值的上升在黄芪治疗组更显著(P<0.05)。结论:黄芪在一定程度上增加了激素/免疫抑制剂对细胞凋亡的抑制作用,调节T淋巴细胞亚群比例和功能趋于正常,可以作为提高SLE疗效的重要治疗措施。     

丙肝核心抗原-CD40L胞外段真核表达载体的构建及其免疫原性分析

目的构建丙肝核心抗原-CD40L胞外段融合蛋白真核表达载体,并探讨其免疫原性。方法应用基因重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L并加以鉴定。该表达质粒肌肉内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体,流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚型,real time PCR法检测外周血单个核细胞内细胞因子,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果构建了真核表达载体pcD-NA3.1-core-CD40L,该载体能诱发小鼠产生高滴度的抗丙肝核心抗原的抗体,流式和real time结果证实该质粒能诱使小鼠T淋巴细胞由T0期向Th1和Th2转换,并以Th1为主,CTL杀伤结果显示该表达质粒能诱使小鼠产生高水平的细胞杀伤能力。结论成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-core-CD40L,该质粒能够在小鼠体内正确表达,并能诱发高水平的细胞杀伤活性。     

A critical role for CD40-CD40 ligand interactions in amplification of the mucosal CD8 T cell response.

The role of CD40 ligand (CD40L) in CD8 T cell activation was assessed by tracking antigen-specific T cells in vivo using both adoptive transfer of T cell receptor transgenic T cells and major histocompatibility complex (MHC) class I tetramers. Soluble antigen immunization induced entry of CD8 cells into the intestinal mucosa and cytotoxic T lymphocyte (CTL) differentiation, whereas CD8 cells in secondary lymphoid tissue proliferated but were not cytolytic. Immunization concurrent with CD40L blockade or in the absence of CD40 demonstrated that accumulation of CD8 T cells in the mucosa was CD40L dependent. Furthermore, activation was mediated through CD40L expressed by the CD8 cells, since inhibition by anti-CD40L monoclonal antibodies occurred after adoptive transfer to CD40L-deficient mice. However, mucosal CD8 T cells in normal and CD40(-/-) mice were equivalent killers, indicating that CD40L was not required for CTL differentiation. Appearance of virus-specific mucosal, but not splenic, CD8 cells also relied heavily on CD40-CD40L interactions. The mucosal CTL response of transferred CD8 T cells was MHC class II and interleukin 12 independent. The results established a novel pathway of direct CD40L-mediated CD8 T cell activation.     

CD40-1C/T基因多态性与急性冠脉综合征易感性的研究

目的 探讨CD40基因-1C/T单核苷酸多态性位点(SNP)与急性冠脉综合征(ACS)易感相关性及血小板表达CD40的关系.方法 研究对象来自江苏大学附属医院心内科2007年7月至2008年11月住院患者.ACS患者210例,SA患者189例,对照组163例.ACS的诊断:(1)心绞痛或胸闷或心电图改变;(2)肌钙蛋白I升高;(3)冠脉造影至少一支冠脉血管直径狭窄≥50%.稳定型心绞痛:心绞痛稳定发作3个月以上.所有入选者均行冠脉造影.排除患有感染、肿瘤及肝肾疾病.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)检测CD40基因多态性并测序鉴定,流式细胞术检测血小板表达CD40水平.等位基因频率及遗传平衡采用x~2检验.结果 ACS组CC基因型频率(31%)及C等位基因频率(57.9%)明显高于SA组(15.9%,43.1%)及对照组(16.0%,42.6%),在SA组与对照组差异无统计学意义(X~2=0.053,P=0.974;X~2=0.017,P=0.897).各组C等位基因携带者血小板表达CD40水平明显增高(P<0.0001).结论 CD40基因-1C/T SNP与ACS相关,C等位基因增加ACS患病风险.