七叶亭对骨关节炎的修复作用

目的 :观察七叶亭对实验性骨关节炎关节液中一氧化氮 (NO)、前列腺素E2 (PGE2 )和软骨中基质金属蛋白酶 1(MMP 1)水平的影响 ,探讨七叶亭对骨关节炎的修复作用。方法 :2 4只日本大耳白兔随机分成对照组A、B和治疗组C、D。对照组A只行单侧膝关节切开术作假手术对照 ,对照组B及治疗组C、D均行单侧前交叉韧带切断术建立骨关节炎模型。治疗组C术后行小剂量 10 0mg·kg-1七叶亭腹腔注射 ,治疗组D术后行大剂量 2 0 0mg·kg-1七叶亭腹腔注射 ,对照组均给予生理盐水 ;8周处死 ,抽取关节液作NO、PGE2 测定 ,以免疫组织化学方法检测软骨中MMP 1的表达 ;对标本均行大体观察及光镜观察。结果 :治疗组软骨退变明显轻于对照组B ,MMP 1、NO、PGE2 含量明显低于对照组B ,治疗组D尤为明显。结论 :七叶亭能明显降低关节炎关节软骨中的MMP 1及关节液中的NO、PGE2 水平 ,减缓骨关节炎的发生。     

骨关节炎基质金属蛋白酶1、2、3及其抑制物的表达与软骨退变的关系

目的　探讨骨关节炎关节软骨中基质金属蛋白酶 (MMPs) 1、2、3及其抑制物 (TIMPs) 1、2的免疫组化表达及与软骨退变的关系。方法　 2 2例因骨关节炎行关节置换的软骨组织常规HE染色观察其组织学变化 ,ABC免疫组化法观察关节软骨MMP 1、2、3和TIMP 1、2的表达 ,经图像分析研究MMP 1、2、3和TIMP 1、2与软骨组织学退变的关系 ,5例因股骨颈骨折行关节置换的软骨标本为正常对照。结果　骨关节炎关节软骨出现纤维化、裂隙、变薄 ,软骨细胞数量减少 ;MMP 1、3和TIMP 1在正常软骨无表达 ,在中度退变软骨中表达明显升高 ,在重度退变软骨中表达降低 ,TIMP 1与MMP 1表达升高不平行 ;MMP 2和TIMP 2在正常软骨低表达 ,在中度退变软骨中表达升高 ,在重度退变软骨表达降低 ,但TIMP 2表达升高。结论　在骨关节炎中MMP 1、2、3和TIMP 1、2表达异常 ,引起细胞外基质异常降解 ,是导致关节软骨发生组织学退变的原因之一     

PDTC关节腔注射对兔创伤性OA软骨MMP-1、MMP-9 mRNA表达的影响

目的:观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)关节腔注射对兔创伤性骨关节炎(os-teoarthritis,OA)软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达及NF-κBp65活性的影响,探讨PDTC对兔创伤性OA软骨退变进程的影响。方法:取20只新西兰兔行右膝横断前交叉韧带术(ACLT),术后1周随机分为对照组和PDTC组,每组10只。PDTC组关节腔注射PDTC2mg(/只.次),每周2次,连续8周,对照组同一时间点关节腔注射等容量生理盐水。末次用药3天后处死白兔,解剖显微镜下观察股骨内髁软骨的形态学变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测股骨内髁软骨中MMP-1、MMP-9mRNA表达量,免疫组化检测股骨内髁软骨中NF-κBp65蛋白表达。结果:形态学示PDTC组软骨退变明显轻于对照组(P<0.05),RT-PCR示PDTC组MMP-1、MMP-9mRNA表达量均低于对照组(P<0.01),免疫组化示PDTC组NF-κBp65活性系数明显低于对照组(P<0.01)。结论:PDTC关节腔注射可能通过阻断创伤性OA软骨中NF-κB激活,进而抑制MMP-1、MMP-9mRNA表达,发挥软骨保护作用。     

脱氢表雄酮对兔骨关节炎软骨和滑膜中MMP-3、TIMP-1和IL-1βmRNA表达的影响

目的观察关节腔内注射脱氢表雄酮(DHEA)对兔骨关节炎软骨和滑膜中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达的影响。方法20只新西兰大白兔行单侧前交叉韧带切除术,术后4周后分为实验组和对照组。实验组关节腔内注射100μmolLDHEA(溶于二甲基亚砜),每周1次,连续5周,对照组注射同剂量的二甲基亚砜。术后9周处死兔子,取膝关节行大体观察,用逆转录聚合酶链反应方法检测关节软骨和滑膜中MMP-3、TIMP-1和IL-1βmRNA的表达。结果大体观察显示实验组软骨和滑膜病变程度轻于对照组。实验组软骨和滑膜中MMP-3mRNA的表达水平显著低于对照组(均P<0.05),而TIMP-1mRNA的表达显著高于对照组(均P<0.05)。实验组软骨中IL-1βmRNA的表达与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),而滑膜中IL-1βmRNA的表达显著低于对照组(P<0.01)。结论DHEA能有效延缓兔骨关节炎的进展。下调软骨、滑膜中MMP-3和上调软骨、滑膜中TIMP-1的表达及下调滑膜中IL-1β的表达可能是DHEA对骨关节炎的作用机制。     

兔膝关节骨性关节炎中基质金属蛋白酶-3及金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的研究

目的通过动物模型研究膝关节骨性关节炎软骨中基质金属蛋白酶（MMP）-3及金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1的表达及其与膝关节骨性关节炎之间关系。方法雌性中国家兔制作软骨损伤模型,术后2周、4周、6周处死动物,分为实验组（E组）、实验对照组（c组）和正常对照组（N组）。对膝关节软骨进行大体形态观察并行HE组织切片、免疫组化染色观察。结果实验组膝关节呈进行性骨性关节炎改变,组织学观察显示透明软骨进行性退变,胶原破坏、蛋白聚糖降解、软骨细胞变性坏死。免疫组化染色显示透明软骨内MMP-3、TIMP-1表达均明显升高。结论膝关节骨性关节炎造成软骨所处生物力学和生化环境紊乱,软骨组织结构退变、功能丧失而进一步加重骨性关节炎病变。     

p38阻断剂对鼠关节炎软骨细胞金属蛋白酶表达的作用

目的观察p38信号转导途径阻断剂SB203580经关节腔注射对实验性鼠膝骨关节炎基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13表达的影响,探讨MMP-3、MMP-13表达与创伤性软骨退变之间的关系。方法40只SD大鼠随机分为A～D组,每组10只。各组均行单侧膝关节前交叉韧带切除术。A、B组分别于术后立即行关节腔内注射0.1ml高、低浓度的p38阻断剂SB203580(100、10μmol/L),每周1次,连续6周。C组注射等量生理盐水,D组不做任何处理。术后7周处死动物。于解剖显微镜下行股骨关节面软骨退变大体观察,免疫组织化学的方法检测MMP-3、MMP-13在软骨中的表达及分布,Westernblot方法检测软骨中MMP-3、MMP-13蛋白表达水平。结果大体观察显示高、低浓度组软骨退变显著轻于生理盐水组和关节炎组(P<0.05);免疫组织化学显示高、低浓度组软骨MMP-3、MMP-13表达降低(P<0.05);Westernblot显示注射抑制剂后MMP-3、MMP-13的蛋白表达降低(P<0.01)。结论p38阻断剂SB203580能抑制MMP-3、MMP-13的表达,对软骨有一定的保护作用。     

壳寡糖对兔骨关节炎的治疗效果

目的 探讨关节腔内注射壳寡糖对兔骨关节炎的治疗效果及其作用机制.方法 新西兰兔12只,于右膝关节腔内各注射4 g/L的木瓜酶溶液0.3 mL,随机分为生理盐水对照组及20 g/L的壳寡糖实验组.自造模7 d后右膝关节开始给药,每周1次,共5周.于末次给药后7 d以空气栓塞法处死动物,关节软骨及滑膜组织以苏木精-伊红(HE)染色,光镜下观察其病理变化,免疫组织化学染色法检测膝关节软骨及滑膜组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达.结果 HE染色表明,实验组退变软骨及滑膜的病理变化轻于对照组,免疫组织化学染色法显示,实验组TNF-α的表达明显低于对照组.结论 壳寡糖能够明显降低骨关节炎滑膜、软骨组织中TNF-α的表达水平,延缓软骨的退变程度,可能成为一种新的骨关节炎治疗药物,值得进一步研究、开发和利用.     

黄芪多糖对大鼠骨关节炎的影响

目的：探讨黄芪多糖对大鼠骨关节炎（OA）的影响。方法：4%木瓜蛋白酶关节腔注射建立大鼠OA模型,1周后50只大鼠分成5组：正常组、模型组、0.10,0.25,0.50 g/L的黄芪多糖治疗组,分组后即开始用不同浓度的黄芪多糖关节腔注射治疗,每3 d 1次,每次双膝各注射0.2 ml,对照组注射生理盐水。6周后处死动物,抽取血液、取关节滑膜检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）,切取关节,进行大体及组织学观察,用免疫组织化学方法检测基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在关节软骨中的表达。结果：黄芪多糖在高浓度可明显修复关节软骨的退变（P〈0.01）,降低关节滑膜、血清的MDA水平（均P〈0.01）,增加SOD活性（P〈0.01）;在低浓度时对关节软骨的修复作用并不明显（P〉0.05）,也不能显著降低关节滑膜、血清的MDA水平（均P〉0.05）和增加SOD活性（P〉0.05）。黄芪多糖可以抑制MMP-3在关节软骨中的表达（P〈0.01）,黄芪多糖在高浓度时可明显增加关节软骨中葡糖氨基聚糖（GAG）含量（P〈0.01）。结论：黄芪多糖关节腔注射治疗大鼠OA可促进退变软骨的修复。     

黄芪多糖对大鼠骨关节炎的影响

目的:探讨黄芪多糖对大鼠骨关节炎(OA)的影响。方法:4%木瓜蛋白酶关节腔注射建立大鼠OA模型,1周后50只大鼠分成5组:正常组、模型组、0.10,0.25,0.50 g/L的黄芪多糖治疗组,分组后即开始用不同浓度的黄芪多糖关节腔注射治疗,每3 d 1次,每次双膝各注射0.2 ml,对照组注射生理盐水。6周后处死动物,抽取血液、取关节滑膜检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),切取关节,进行大体及组织学观察,用免疫组织化学方法检测基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在关节软骨中的表达。结果:黄芪多糖在高浓度可明显修复关节软骨的退变(P<0.01),降低关节滑膜、血清的MDA水平(均P<0.01),增加SOD活性(P<0.01);在低浓度时对关节软骨的修复作用并不明显(P>0.05),也不能显著降低关节滑膜、血清的MDA水平(均P>0.05)和增加SOD活性(P>0.05)。黄芪多糖可以抑制MMP-3在关节软骨中的表达(P<0.01),黄芪多糖在高浓度时可明显增加关节软骨中葡糖氨基聚糖(GAG)含量(P<0.01)。结论:黄芪多糖关节腔注射治疗大鼠OA可促进退变软骨的修复。     

透明质酸钠对兔骨关节炎软骨VEGF及其受体-2mRNA表达的影响

目的:观察透明质酸钠(HA)关节腔注射对创伤性骨关节炎(OA)模型关节软骨VEGF及受体-2(VEGFR-2)mRNA表达的影响。方法:24只大耳白兔随机分为A、B、C 3组,A组为正常对照组,B、C两组行单膝前交叉韧带切断术,4周后B组关节腔内注射0.3ml生理盐水药物;C组关节腔注射等量的高分子量1%透明质酸钠(HA),每周1次,连续5周。术后11周处死动物,比较各组股骨内髁关节软骨的大体变化,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)方法检测软骨VEGF及受体-2mRNA的表达水平。结果:大体评分显示生理盐水注射组软骨退变明显重于HA注射组;VEGF及VEGFR-2mRNA的表达量较正常对照组明显升高(P<0.05),B、C两组VEGF mRNA的表达没有差别,C组VEGFR-2mRNA水平较B组显著下降(P<0.05)。结论:VEGF及VEGFR-2mRNA表达在OA软骨中表达明显升高,关节腔注射HA对软骨VEGFmRNA表达没有抑制作用,但可以通过抑制VEGFR-2mRNA表达来减轻软骨退变的程度。     

Effects of intra-articular injection of p38 mitogen-activated protein kinase inhibitor on matrix metalloproteinase in articular cartilage of a rat model of osteoarthritis

OBJECTIVE: To observe the effect of intra-articular injection of SB203580, a selective p38 mitogen-activated protein kinase inhibitor, on the expression of matrix metalloproteinase (MMP)-3, MMP-13 in a rat model of osteoarthritis (OA) and to explore the relationship between the MMP-3/MMP-13 expressions and the severity of OA. METHODS: Fourty SD rats underwent unilateral anterior cruciate ligament transection (ACLT) and then randomly divided into four groups, with 10 rats in each group. Group A received 0.1 ml intra-articular injection of SB203580 at a high concentration of 100 micromol/L (once a week) immediately after surgery, and group B were treated under the same condition using SB203580 with a low concentration of 10 micromol/ L Group C received 0.1 ml intra-articular normal saline, and group D were not injected as controls after ACLT. All rats were sacrificed seven weeks after the surgery. Macroscopic and immunohistochemical studies were performed on the cartilage. Protein expressions of MMP-3 and MMP-13 were determined by Western blot. RESULTS Cartilage degradation was significantly milder in group A and group B than in the control groups, as shown by morphological studies (P < 0. 05) and immunohistochemical studies (P < 0. 05). The protein expressions of MMP-3 and MMP-13 in cartilage were significantly lower in groups A and B than in groups C and D (P < 0.01). CONCLUSION: SB203580 can inhibit the expressions of MMP-3 and MMP-13 and thus protect the cartilage.     

兔骨关节炎模型的建立以及关节炎软骨组织中MMP-1/-13的表达

目的评价家兔膝关节前交叉韧带切断（ACLT）及内侧半月板前1/3切除制作骨关节炎（OA）模型方法的可行性,同时探索关节炎发病的不同时期,关节软骨中基质金属蛋白酶（MMP）-1,MMP-13的基因表达、蛋白表达水平的变化情况。方法实验组家兔30只行ACLT及内侧半月板前1/3切除术造模,分别于术后4周、8周、12周处死10只,假手术对照组家兔10只于术后12周处死。进行股骨髁关节软骨退变的大体评分;取退变的软骨组织,用实时定量PCR（Real-time PCR）及Western blot印记杂交方法测定软骨组织中MMP-1和MMP-13的mRNA和蛋白表达水平。结果ACLT及内侧半月板前1/3切除术后4周即可见软骨退变,8周和12周时退变进一步加重,对照组无明显软骨退变,不同组动物关节软骨评分有统计学差异。MMP-1的mRNA表达和蛋白表达在正常对照组水平均较低,造模4周开始升高,到第8周及第12周持续升高,且mRNA表达和蛋白表达升高的趋势相同;MMP-13在造模4周时表达开始升高,mRNA表达和蛋白表达趋势相同,造模第8周时持续升高,但在造模第12周时MMP-13mRNA表达和蛋白表达下降。结论家兔膝关节ACLT及内侧半月板前1/3切除制作OA模型的方法简便可行,MMP-1和MMP-13在骨关节炎的发病过程中有不同程度的升高,可以作为OA研究的评价指标。本实验结果提示,在OA发展的过程中,MMP-1和MMP-13的表达不平行,二者调控通路可能存在差异。MMP-13的mRNA表达的变化趋势与其蛋白水平的变化趋势相符合,说明引起MMP-13在OA病程中晚期下降的调控发生在翻译前水平。     

超声波治疗兔膝骨关节炎对MMP-1和MMP-13表达的影响

目的探讨兔膝骨关节炎模型软骨基质金属蛋白酶(MMP)-1、-13超声波治疗前后在软骨组织中的表达及其作用机制。方法 30只新西兰大白兔随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)和超声波治疗组(C组),每组10只。B、C组骨关节炎造模后6周,C组实施超声波治疗,8周后取各组软骨予HE染色,免疫组化行MMP-1和MMP-13分析,观察软骨HE改变、MMP-1和MMP-13表达的变化。结果 HE染色结果采用Mankin′s评分比较,A组与B组、B组与C组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。软骨免疫组化MMP-1、-13测定,A组与B组、B组与C组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论超声波能有效治疗膝OA,其作用机制可能是减少软骨MMP-1、-13的含量,降低Ⅱ型胶原的降解、促进新的Ⅱ型胶原的生成,从而有利于软骨细胞外基质的合成,有利于软骨细胞的修复。     

富血小板血浆对兔骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨富血小板血浆(platelet-rich plasm,PRP)抑制兔骨关节炎软骨表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达而发挥软骨保护作用。方法 选取30只成年清洁级新西兰大白兔,采用数字表法随机分为对照组、关节炎组、PRP组,每组各10只。关节炎组和PRP组按Hulth法制备后肢左膝关节炎模型,对照组行假手术。造模后第1周开始,各组抽取耳缘静脉血制备PRP 0.2 mL,仅PRP组给予关节腔注射。至第6周处死实验动物,获取各组左膝关节,分别行软骨组织HE染色测量软骨厚度,免疫组织化学染色计数MMP-13阳性细胞数,免疫荧光及Western blotting法检测MMP-13表达量。结果 对照组显示关节软骨形态接近正常,关节炎组软骨破坏明显,而PRP干预组较关节炎组,关节厚度得以保留,MMP-13阳性细胞及其表达量明显受到抑制。结论 PRP可减少MMP-13软骨细胞的数量和抑制MMP-13表达而发挥软骨保护作用。     

白藜芦醇对骨关节炎模型兔关节液中一氧化氮水平的影响

目的探讨白藜芦醇对骨关节炎(OA)模型兔关节液中一氧化氮(NO)水平的影响。方法36只健康新西兰兔随机分为正常组、模型组、阳性组和白藜芦醇高、中、低剂量组。模型组、阳性组和白藜芦醇组用Hu lth法复制实验性骨关节炎模型。术后8周造模成功,阳性组用硫酸氨基葡萄糖35 mg.kg-1灌胃,白藜芦醇高、中、低剂量组分别给予白藜芦醇120 mg.kg-1、60 mg.kg-1、30 mg.kg-1灌胃,灌胃6周后处死兔并切取股骨内髁软骨作光镜观察,测定骨关节液中NO含量并作统计学处理。结果模型组兔关节软骨呈明显退行性变,模型组关节液NO含量显著高于白藜芦醇组(P<0.05),灌胃后阳性组和白藜芦醇组关节液NO含量无显著性差异(P>0.05)。结论白藜芦醇能防止并延缓关节软骨的退行性改变。     

关节腔内注射贝伐单抗治疗兔膝骨性关节炎

目的：评估关节腔内注射贝伐单抗治疗兔膝骨性关节炎的效果。方法： 24只新西兰兔制造原发性骨关节炎模型后随机分入贝伐单抗组、透明质酸钠(sodium hyaluronate, SH)组和对照组,每组8只。贝伐单抗组和对照组关节腔各自注射4.0 mg贝伐单抗和生理盐水,每3周1次,连续实验6周,各组分别注射2次;SH组进行SH关节腔内注射,每周1次,连续实验6周,共6次。6周后观察各组软骨和滑膜组织病理切片,滑膜电子显微镜及血管免疫组织化学SP法染色,软骨大体观察评分,MMP-1的免疫组织化学表达,以及Mankin’s评分。结果：病理切片显示贝伐单抗组较SH组和对照组血管生成明显减少,抑制滑膜增生,改善了软骨结构及基质成分;滑膜血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)阳性细胞百分数、平均光密度值、软骨MMP-1细胞百分数、Mankin’s评分及软骨大体评分均显示贝伐单抗组小于SH组和对照组（P<0.05）,SH组小于对照组（P<0.05）。结论：贝伐单抗能减少血管生成,抑制滑膜增殖,减少MMP-1的生成,对软骨有保护作用,并且优于SH,对兔膝原发性骨性关节炎有治疗作用,这为临床膝原发性骨性关节炎关节腔内药物治疗提供了一种可能的方案。     

HSV-1型载体介导IL-1Rα关节腔内注射治疗兔膝关节炎

目的: 探讨单纯疱疹病毒1(HSV-1)型载体介导白细胞介素1受体拮抗基因(IL-1Rα)局部治疗兔膝关节炎的作用。方法: 采用改良Hulth法构建兔负重膝关节炎模型;造模成功后利用基因重组技术构建IL-1Rα基因单纯疱疹病毒1型表达载体(pHSV-IL-1Rα-LacZ),行兔膝关节腔内注射4周;手术造模和基因治疗后,抽取关节腔灌注液,采用ELISA分析IL-1Rα和IL-1的表达;采用HE染色和甲苯胺蓝染色方法观察局部治疗效果,pHSV-LacZ空白载体设为对照组。结果: 手术造模治疗组注射pHSV-IL-1Rα-LacZ后能明显持续抑制IL-1表达水平,且对膝关节软骨炎进展显著性抑制,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论: pHSV-LacZ是关节腔内局部基因治疗兔膝关节炎模型的理想基因运输体。关节腔内持续表达的IL-1Rα可能通过拮抗IL-1的作用治疗兔膝关节炎。     

仙仲注射液对兔早期膝骨性关节炎血清及软骨中SOD，NO含量的影响

目的：评价仙仲注射液对兔早期膝骨性关节炎（OA）血清及软骨中超氧化物岐化酶（SOD）、一氧化氮（NO）含量的影响．方法：120只日本大耳白兔随机分为空白组、模型组（生理盐水每1wk0．5mL,1次）、海诺特组（海诺特每1wk0．5mL,1次）、仙仲Ⅰ,Ⅱ组（仙仲注射液每次0．5mL,每1wk1次和2次）,均为关节腔给药．给药8wk后检测血清及关节软骨中SOD,NO含量．结果：仙仲Ⅰ,Ⅱ组及海诺特组与模型组相比,血清及关节软骨中SOD含量均升高（P〈0．01）、NO含量均降低（P〈0．01）．结论：仙仲注射液对早期膝OA关节退变具有一定修护作用．