卵巢上皮性癌组织中KiSS-1基因及其受体GPR54 mRNA的表达及其意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1及其受体GPR54mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR技术检测37例卵巢上皮性癌、15例卵巢交界性上皮性肿瘤、15例卵巢良性上皮性肿瘤及11例正常卵巢组织中KiSS-1基因及其受体GPR54mRNA的表达,并分析其与各临床病理指标的相关性。结果KiSS-1mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为68%、60%)及表达水平(分别为0·82±0·09、0·80±0·10)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为20%、18%和0·65±0·10、0·66±0·06;P均<0·05);且KiSS-1mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平均与手术病理分期和淋巴结转移有明显相关性(P<0·05)。GPR54mRNA在卵巢上皮性癌、卵巢交界性上皮性肿瘤、卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织中的阳性表达率(分别为70%、67%、60%和45%)及表达水平(分别为0·79±0·07、0·76±0·10、0·73±0·07和0·78±0·08)分别比较,差异均无统计学意义(P>0·05);GPR54mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与手术病理分期、病理分级、病理类型、淋巴结转移及腹水生成均无相关性(P>0·05)。结论KiSS-1基因及其受体GPR54可能在抑制卵巢上皮性癌浸润和转移的过程中起重要作用。     

多囊卵巢与神经内分泌及卵巢局部致病因素关系的研究

目的:探讨多囊卵巢(PCO)与神经内分泌及卵巢局部致病因素的关系。方法:收集典型多囊卵巢综合征(PCOS)患者8例、16个卵巢,单侧PCO12例(PCO12个,正常卵巢8个),非内分泌性原发或继发不孕患者15例、19个卵巢。测定其血循环和卵泡液中睾酮(T)、硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、雄烯二酮(A2)和胰岛素(INS)水平;用Elivi-sionIM二步免疫组化法检测卵巢不同细胞上雄激素受体(AR)和β-胰岛素受体(β-INSR)的表达。结果:PCO组血清T、INS显著高于正常组(P<0·05)。PCO组卵泡液中T和INS的水平显著高于正常组(P<0·01)。在卵巢间质细胞,PCO组AR表达明显低于非PCO组(P<0·01);β-INSR表达明显高于非PCO组(P<0·01)。在卵泡内膜细胞上,PCO组AR表达明显高于非PCO组(P<0·01);β-INSR表达明显低于非PCO组(P<0·01)。卵巢局部T和INS的水平与间质细胞AR表达负相关,与β-INSR表达正相关(P<0·01,P<0·05)。结论:PCO的发生既有INS等神经内分泌因素参与,也有卵巢局部AR和INSR介导的雄激素旁分泌/自分泌分子调控机制失调。     

免疫抑制剂FK506对雌性大鼠性腺轴的影响

目的:探讨免疫抑制剂FK506对雌性大鼠生殖内分泌功能的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为4组:对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别每日给予生理盐水以及不同剂量FK506灌胃(0.2mg/kg、1mg/kg、2mg/kg)×42d。用药前2周及用药期间每日行阴道涂片检查,观察大鼠动情周期变化;停药后于动情间期处死大鼠,放免法检测血清E2、P、LH水平,免疫组化法检测卵巢、垂体、下丘脑雌激素受体(ER)表达水平。结果:①连续给药42d后,中、高剂量组大鼠动情周期平均天数(5.0d、5.5d)均较对照组(4.1d)显著延长(P<0.05,P<0.01)。②中、高剂量组大鼠平均血清孕酮(P)水平(42.5ng/ml、32.8ng/ml)与对照组(78.9ng/m)相比较明显降低(P均<0.01)。低、中、高剂量组大鼠平均血清雌二醇(E2)水平(9.4pg/ml,7.7pg/ml,8.3pg/ml)也明显低于对照组(14.3pg/ml)(P均<0.05)。各组间黄体生成素(LH)水平无显著差异。③大鼠卵巢、垂体以及下丘脑组织中雌激素受体表达与FK506剂量呈负相关。结论:大鼠用药后血清P及E2水平明显下降,性腺轴各组织器官ER表达也发生不同程度下调,上述作用呈一定的量-效关系。提示FK506长期用药对大鼠生殖内分泌功能可造成一定程度的影响。     

卵巢切除和雌激素补充治疗对大鼠膀胱功能及结构的影响

目的通过对不同雌激素水平大鼠进行膀胱功能、组织形态和超微结构的比较,探讨雌激素对膀胱功能的影响及其作用机制。方法30只雌性成年SD大鼠均分为3组:OVX+E组(切除双侧卵巢后补充戊酸雌二醇0·8mg·kg-1·d-1,溶于0·5%羧甲基纤维素钠,每日灌胃1次)、OVX组(切除双侧卵巢)、正常对照组(未切除卵巢),后两组大鼠每日给予0·5%羧甲基纤维素钠灌胃1次。3组大鼠用药12周后行膀胱压力容积测定,并用切除膀胱的石蜡切片分析胶原纤维和平滑肌的面密度及两者比值,透射电镜下观察逼尿肌的超微结构。结果(1)OVX组膀胱最大容量(0·32±0·20)ml、顺应性(0·012±0·006)ml/cmH2O(1cmH2O=0·098kPa)和最大收缩力(1·4±0·4)cmH2O,相对于正常对照组[分别为(1·11±0·09)ml、(0·026±0·003)ml/cmH2O和(4·4±0·3)cmH2O]明显减少,差异均有统计学意义(P<0·05)。OVX+E组膀胱最大容量为(0·83±0·10)ml,相对于正常对照组减少(P<0·05),而膀胱顺应性(0·029±0·003)ml/cmH2O、最大收缩力(4·8±1·4)cmH2O与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0·05)。(2)胶原纤维面密度、胶原纤维面密度/平滑肌面密度比值,OVX组分别为0·218±0·041和0·54±0·08,相对于正常对照组(0·160±0·039、0·32±0·09)明显增加,差异有统计学意义(P<0·05);而OVX+E组(0·178±0·027、0·38±0·06)与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0·05)。(3)电镜观察OVX组逼尿肌超微结构出现退行性改变,其他两组无类似变化。结论大鼠切除双侧卵巢后膀胱功能明显降低,补充雌激素有利于改善膀胱功能,这一作用可能是通过抑制胶原增生,保护细胞器来实现的。     

促性腺激素释放激素激动剂对化疗损伤卵巢功能保护作用的实验研究

目的研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对注射环磷酰胺(CTX)大鼠的卵巢功能的保护作用。方法80只Fischer344大鼠分为4组,即空白对照组、GnRHa组、CTX组及联合治疗组,每组20只,分别接受生理盐水、CTX、GnRHa和CTX+GnRHα注射,采用酶联免疫吸附实验和化学发光法测定各组大鼠卵泡刺激素(FSH)和雌二醇浓度的变化,在实验开始后第60、90天,各组分别处死一半大鼠,观察卵巢重量、卵泡数量及卵泡直径的变化。结果实验第90天,CTX组大鼠血清雌二醇和FSH浓度分别为(148·3±16·5)pmol/L和(16·90±1·90)U/L,明显高于联合治疗组的(91·8±9·9)pmol/L和(7·60±0·30)U/L,两组分别比较,差异有统计学意义(P<0·05);CTX组大鼠卵巢重量为(37·0±3·0)mg,低于联合治疗组的(71·0±5·0)mg,两组比较,差异有统计学意义(P<0·05);CTX组大鼠卵泡总数为(550±50)个,而联合治疗组为(1250±160)个,两组比较,差异有统计学意义(P<0·05)。结论GnRHa能够降低CTX对大鼠卵巢功能的损伤,从而保护大鼠卵巢储备功能。     

PCOS大鼠下丘脑中瘦素受体的表达及意义

目的:探讨下丘脑瘦素受体(leptin receptor,Ob-R)改变与多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)发病机制的关系。方法:将45只雌性SD大鼠分为正常对照组、溶剂对照组和实验组。溶剂对照组用1%羟甲基纤维素水溶液(CMC)灌胃,实验组用来曲唑制造PCOS大鼠模型,比较各组大鼠体重、动情周期、卵巢重量及卵巢形态学的改变,测定血清黄体生成素(LH)、睾酮(T)、胰岛素(INS)、空腹血糖(FG)、瘦素(LEP)水平,用免疫组织化学和Real-TimeRT-PCR方法检测大鼠下丘脑Ob-R及mRNA的相对表达。结果:PCOS大鼠血清T、LH、INS、LEP水平明显高于正常对照组和溶剂对照组(P<0.05),PCOS大鼠下丘脑瘦素受体表达较正常对照组和溶剂对照组明显减弱(P<0.05)。结论:瘦素受体参与PCOS大鼠内分泌紊乱的发生,下丘脑瘦素受体表达的下调可能是PCOS大鼠瘦素抵抗的原因之一。     

雷洛昔芬和依普黄酮对去卵巢大鼠骨干力学的影响

目的:研究雷洛昔芬和依普黄酮对切除成熟卵巢大鼠骨干生物力学性能的影响,探讨此两种药物治疗绝经后骨质疏松症的疗效。方法:选用6月龄未交配健康雌性Sprague-Dawley大鼠50只,随机分为5组,每组10只:(1)假手术组(sham);(2)骨质疏松组(OVX);(3)OVX加戊酸雌二醇组(Valerate Estriol,E_2;0．8mg·kg~(-1)·d~(-1));(4)OVX加雷洛昔芬组(Raloxifene,RLX;5mg·kg~(-1)·d~(-1));(5)OVX加依普黄酮组(Ipriflavone,IPR; 100mg·kg~(-1)·d~(-1));于去势手术3周后开始按分组设计喂药(灌胃),治疗3个月后处死。取大鼠右股骨及第三腰椎测定骨密度;然后对右股骨中段进行三点弯曲试验,测定多个股骨干生物力学指标。结果:(1)骨密度:OVX组椎骨及股骨干骺端密度明显下降,使用E_2和RLX能够显著提升骨密度;但股骨干密度各组间差异无统计学意义;(2)骨干生物力学性能:三点弯曲实验结果显示,OVX组股骨干生物力学指标较sham组明显下降,用RLX和IPR治疗与E_2一样可阻止这种变化(P＜0．05)。结论:雷洛昔芬和依普黄酮能阻止卵巢切除所致的成熟雌性大鼠股骨干(皮质骨)生物力学性能受损。     

雄激素致不孕大鼠胰腺、下丘脑及卵巢雄激素受体mRNA表达

目的:研究雄激素致不孕大鼠(ASR)胰腺、下丘脑及卵巢组织中雄激素受体(AR)mRNA的含量变化。方法:9日龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮制备ASR模型,于106日龄左右(动情前期)处死,取血放免法测定△4-雄烯二酮(△4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),提取胰腺、下丘脑及卵巢总RNA,以单碱基突变模板为内对照的RT-PCR方法对ARmRNA进行定量分析。结果:ASR模型血△4-A、TT、FT、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、下丘脑及卵巢的AR mRNA表达水平明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、下丘脑及卵巢AR mRNA的表达,引起该模型的高胰岛素血症和无排卵。     

雌激素受体β与子宫内膜息肉发病关系的研究

目的探讨雌激素受体β(ERβ)与子宫内膜息肉(EP)发病的关系。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶链接(SP)法,检测72例EP患者[其中36例合并不孕(不孕组),36例为带宫内节育器后发生EP(置器组)]的EP和正常子宫内膜组织ERβ、ERα含量[用吸光度(A)值表示],同时采用放射免疫法检测EP患者外周血中雌二醇浓度。结果(1)不孕组和置器组患者EP间质细胞中ERβ含量分别为2·1±0·9和1·9±0·5,明显高于两组同时期子宫内膜间质细胞中的含量(1·7±0·3,1·3±1·1),分别比较,差异均有统计学意义(P<0·05);(2)不孕组患者外周血和EP组织中雌二醇浓度分别为(66·4±12·8)pmol/L和(3·0±0·7)pmol/L,二者呈正相关关系(r=0·789,P<0·01);置器组患者外周血和EP组织中雌二醇浓度分别为(67·4±13·4)pmol/L和(2·8±0·7)pmol/L,二者也呈正相关关系(r=0·792,P<0·01)(3)EP中ERβ的含量与EP中雌二醇浓度呈正相关,且与外周血雌二醇浓度呈正相关;(4)两组ERα在EP间质细胞中的表达较其在相同时期的子宫内膜间质中的表达明显下降(P<0·05);且ERα含量与EP中雌二醇浓度无明显相关性,与外周血雌二醇浓度也无明显相关性。结论ERβ在子宫内膜间质细胞中的过度表达,可能是导致EP发病的原因之一。     

IFN-γ对溴隐亭诱导的流产大鼠下丘脑-垂体-卵巢中TGF-β1表达的影响

目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)对流产大鼠下丘脑-垂体-卵巢中转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将40只孕1 d SD大鼠随机分为4组,分别为正常组(A组)、流产模型组(B组)、流产模型+IFN-γ组(C组)和流产模型+IFN-γ抗体组(D组),每组10只。B～D组于孕6～8 d每日皮下注射溴隐亭0.3 mg/kg,建立流产模型;C组于孕9～11 d每日肌注IFN-γ(100 IU/kg);D组于于孕9～11 d每日肌注IFN-γ抗体(100μg/kg)。妊娠12 d灌注多聚甲醛固定后取材,采用免疫组织化学SP法对每组下丘脑、垂体和卵巢中TGF-β1的表达进行检测。结果:B、C组下丘脑、垂体和卵巢中TGF-β1阳性细胞数和OD值均较A组低,D组下丘脑和垂体中TGF-β1阳性细胞数和OD值较A组低;C组下丘脑、垂体和卵巢中TGF-β1阳性细胞数、下丘脑和卵巢中OD值均低于B组;D组下丘脑、垂体和卵巢中TGF-β1阳性细胞数和OD值均较B、C组低。结论:IFN-γ对流产大鼠下丘脑-垂体-卵巢中TGF-β1的表达具有下调作用。     

Effects of gonadotropin and LHRH on the cAMP levels, adenylate cyclase and cyclic nucleotide phosphodiesterase activities in the endocrine organs of the female pubertal rabbits (author's transl)

Effects of gonadotropin and LHRH on the cAMP levels, adenylate cyclase and cyclic nucleotide phosphodiesterase activities of the pineal, hypothalamus, pituitary, adrenal and ovary of the female pubertal rabbits were examined, and serum FSH, LH, estradiol and progesterone were measured. Gonadotropin and LHRH were injected intravenously five days, and 16 hours after the last administration, experiments were performed. The cAMP levels in the endocrine organs of the female pubertal rabbits were higher than adults. Gonadotropin and LHRH administration decreased the cAMP levels, i.e. draw to the levels of adults, in almost all endocrine organs. In pre-pubertal period (5-7 weeks of age), cAMP responses of hypothalamus and pituitary to gonadotropin or LHRH were significant, whereas responses of adrenal and ovary were slight and not significant. In early and mid-pubertal period (9-14 weeks of age), changes of the cAMP levels in the hypothalamus and pituitary were slight than pre-pubertal period, but in ovary, remarkable change of the cAMP levels were observed. The adenylate cyclase activities of all endocrine organs were not changed and the phosphodiesterase activities were increased by gonadotropin or LHRH administration. Serum FSH, LH estradiol and progesterone were increased with age. The most remarkable increases were occurred to the serum FSH level of pre-pubertal rabbits (7 weeks of age) after gonadotropin or LHRH administration, and serum progesterone of mid-pubertal rabbits (14 weeks of age) after gonadotropin administration.     

Endocrine evaluation in a patient with MURCS association and ovarian agenesis

A new case of Mullerian duct aplasia, renal aplasia, and cervicothoracic somite dysplasia (MURCS association) in a 16-yr-old female patient is reported. In addition, agenesis of the right ovary plus hypoplasia of the right craniofacial bones were also present. Dynamic tests of anterior pituitary reserve (LH-RH, TRH and hypoglycemia) showed normal responsiveness of this gland in terms of LH, FSH, TSH, prolactin and growth hormone secretion, whilst a subnormal plasma cortisol response to hypoglycemia and exogenous ACTH (in the presence of unilateral adrenal agenesis) was found. Functional integrity of the hypothalamic-pituitary-ovarian axis was also documented. The presence of two additional and previously unreported congenital anomalies in this patient with MURCS association underlines the wide spectrum of the syndrome.     

绝经前全子宫切除保留卵巢对妇女骨代谢及骨密度的影响

目的 :追踪观察绝经前妇女全子宫切除保留卵巢对远期骨代谢及骨密度的影响。方法 :对比观察绝经前行全子宫切除保留单侧卵巢 4 8例、全子宫切除保留双侧卵巢 15例和正常妇女 30例的血清钙 (Ca)、血清磷 (P)、血清碱性磷酸酶 (AKP)、血清骨钙素(BGP)、空腹尿Ca Cr及尿HYP Cr值、骨密度值的变化和差异。结果 :全子宫切除保留单侧卵巢组血AKP值、BGP值、空腹尿Ca Cr和尿HYP Cr均显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,而骨密度值则显著低于对照组 (P <0 0 5 )。保留双侧卵巢组尿HYP Cr显著高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :子宫全切除保留单侧卵巢者远期骨转换加快 ,导致骨丢失及骨密度下降 ,双侧卵巢保留者骨吸收亦加快 ,但骨密度无下降     

对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的研究

目的:建立胚泡着床障碍小鼠模型,并研究其子宫内膜容受性。方法:于妊娠d4上午利用米非司酮诱导昆明小鼠胚泡着床障碍,12h后处死小鼠,观察小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,利用光镜观察小鼠子宫内膜形态结构,采用免疫组化SP法检测子宫雌、孕激素受体(ER、PR)表达,采用RT-PCR检测子宫ER、PR基因表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数明显降低,子宫内膜发育明显受抑制;子宫内膜腺体、间质ER、PR表达范围和强度均显著降低。结论:米非司酮能成功诱导建立胚泡着床障碍模型,其着床期子宫内膜发育受抑制,子宫内膜容受性降低,胚泡着床失败。     

高浓度雄激素诱导KNDy神经内分泌紊乱在多囊卵巢综合征发病机制中的研究进展

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是全世界女性最常见的生殖障碍性疾病之一,其症状主要表现为排卵、内分泌和代谢异常。尽管PCOS发病机制尚未明确,但是目前越来越多的研究证明高浓度雄激素诱导的神经内分泌紊乱在PCOS的发病中发挥作用,而下丘脑区域的KNDy神经元对女性的生殖功能有着重要的调控作用。近年研究发现,高浓度雄激素可能改变下丘脑区域KNDy神经元网络对促性腺激素释放激素的调节,从而干扰下丘脑-垂体-卵巢/肾上腺/脂肪细胞轴,使下游靶器官生成更多的雄激素即雄激素的恶性循环,加重PCOS的症状。因此,或许可通过在关键发育窗口期降低雄激素对神经内分泌的影响、恢复类固醇反馈的敏感性以及调整促性腺激素释放激素的分泌,进而使黄体生成素/卵泡刺激素（luteinizing hormone/follicle-stimulating hormone,LH/FSH）脉冲正常化来治疗PCOS。     

达英-35预防环磷酰胺对大鼠卵巢功能损伤的实验研究

目的:研究口服避孕药达英-35在雌性大鼠中减轻环磷酰胺(CTX)诱导的性腺毒性的效果。方法:随机将75只雌性Wistar大鼠分为5组:空白对照组、CTX组、达英-35组、联合治疗Ⅰ组和联合治疗Ⅱ组。用放射免疫法测定各组雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)水平,并于停药当天、第15天、30天,处死各组1/3的大鼠,比较卵巢重量、卵泡数量变化。结果:停药第30天,CTX组大鼠E2为(21.88±2.10)pg/ml,明显低于两个联合治疗组,FSH为(7.05±0.18)mIU/ml,明显高于两个联合治疗组,差异均有统计学意义(P0.05);CTX组卵巢重量和卵泡总数分别为(32.40±5.55)mg和308±32个,明显低于两个联合治疗组,差异有统计学意义(P0.05);联合治疗Ⅰ、Ⅱ组的E2、FSH、卵巢重量、卵泡数量分别比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:达英-35降低了CTX对大鼠卵巢功能的损伤,对卵巢功能的保护和恢复起到了一定的作用。     

Pharmacological investigations of the unique herbal formula Menoprogen in rats: estrogenic activity and mechanism.

The present study aimed to evaluate the pharmacological effects of Menoprogen in the management of menopausal symptoms for aged female rats. Menoprogen was supplemented to a group of elderly female rats for 8 weeks. Subsequently, histopathological examinations were conducted in the isolated uterine and ovary tissues and pituitary glands of the rats. Serum levels of estradiol (E(2)), progesterone (P), follicle-stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) were determined. The ultrastructure of the rat ovarian granulocytes was analyzed. The histopathological examinations revealed no statistical difference in the quantity of follicles in the ovary and of acidophil and basophil cells in the anterior pituitary gland of the Menoprogen-fed rats versus healthy normal rats. Moreover, the cellular morphogenesis was in a healthy state for the Menoprogen-fed rats. Menoprogen significantly increased the levels of serum E(2) and P but reduced FSH and LH levels. The electron microscopic analysis showed that Menoprogen significantly retarded apoptosis of the ovarian granulocytes of the rats. Further investigation of Menoprogen for the alternative treatment of menopausal symptoms is warranted.