干湿化学检测氨基转移酶的方法学探讨与临床应用

目的 由于干湿化学检测结果无可比性,目前国内存在同一实验室同一检测项目有两种不同的检测结果和不同的参考区间.为解决这个问题,以湿化学为标准来校准干化学回归方程的回归参数,使干湿化学检测同一项目的 检测结果无明显差异并使用同一参考值.方法 随机收集60例临床血清标本,分别用日立7170和强生VITROS950同时测定血清ALT和AST的活性,分析参数改变前后两组结果的相关性和检测结果的一致性.结果 参数改变前两个转氨酶两种方法所得结果相关性良好(r=0.986 5和r=0.955 4),但两个转氨酶两种方法检测结果的预期偏差(SE)分别是14.378和20.566 6远大于允许偏差(EA=12).SE不在允许偏差范围内.化学参数改变后两个转氨酶两种方法所得结果相关性良好(r=0.991 9和r=0.998 8),两个转氨酶两种方法检测结果的SE分别是2.428和2.169 3,远小于EA/2.SE在允许偏差范围内.结论 化学参数改变后干化学和湿化学两种检测方法测定血清标本中的ALT和AST的活性,其结果无明显差异,具有良好的相关性,并且干湿化学可使用同一参考值,对临床疾病诊断和治疗有实际的应用价值.     

昆明地区健康成人血清丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间调查

目的建立昆明地区健康成人血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的生物参考区间。方法按照美国临床和实验室标准协会（CLSI）C28-A2文件推荐的间接抽样法,选取昆明市第一人民医院2010年5月至2011年3月的健康体检者共9 890例,用奥林巴斯AU5421全自动生化分析仪对ALT和AST进行检测,用Stata 11对检测结果进行统计分析。结果各项指标的参考区间（≤P95）如下：男性ALT≤51U/L,女性ALT≤34U/L;男性AST≤40U/L,女性AST≤35U/L。ALT和AST水平随年龄增长大体呈升高趋势,在男性组中,30～40岁组的ALT水平最高。结论昆明地区ALT和AST的参考区间明显不同于参考书或其他地区的参考区间,因此建立本实验室ALT和AST的生物参考区间非常必要。     

西双版纳州健康人群血清丙氨酸氨基转移酶参考区间调查

目的建立西双版纳州健康人群血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）丙酮酸氧化酶法参考区间。方法对3167名健康者血清ALT活性在不同性别、不同年龄组间的分布进行统计分析。结果ALT活性男性明显高于女性（P〈0.001）。ALT参考区间上限：男性为42 U/L,女性为37 U/L。男性血清ALT活性在30-59岁组较高（其中40-49岁组最高）,〈20岁组最低;ALT参考区间上限：〈20岁为34 U/L,20-29岁为46 U/L,30-59岁为47 U/L,≥60岁为39 U/L。女性≥40岁者血清ALT活性较高（其中50-59岁组最高）,≤29岁者较低;ALT参考区间上限：≤29岁为34 U/L,30-39岁为35 U/L,≥40岁为40 U/L。结论ALT活性在不同性别、不同年龄组间有明显差异,各实验室应按不同性别、不同年龄建立本地区、本实验室血清ALT参考区间。     

健康人群丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间初步调查

目的建立含5′-磷酸吡哆醛（PLP）的试剂测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）催化活性浓度的参考区间,并与不含PLP试剂方法的参考区间作比较。方法采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐方法测定3 249名健康人血清ALT和AST,试剂采用罗氏公司试剂,分别用罗氏公司cfas定标液中加PLP及不加PLP的标准液进行定标。结果加入PLP的试剂测定健康人血清ALT、AST的结果与不加PLP试剂的测定结果有明显差异（P〈0.000 1）。健康人群血清ALT、AST测定值男、女性之间有明显差异（P〈0.000 1）。如以含PLP试剂检测值的95%分位作为参考值上限时,ALT为男性55 IU/L、女性36 IU/L;AST为男性42 IU/L、女性33 IU/L。如以不含PLP试剂检测值的95%分位作为参考值上限时,ALT为男性50 IU/L、女性32 IU/L;AST为男性35 IU/L、女性28 IU/L。二者均有随年龄升高的趋势。结论含PLP的ALT和AST试剂测定健康人ALT和AST活性升高。PLP能有效地激活ALT和AST活性,用含PLP的试剂测定ALT、AST活性可准确反映患者血液中ALT、AST的实际含量。推荐临床用含PLP的试剂作为测定ALT、AST的常规方法 。     

西双版纳州健康人群血清丙氨酸氨基转移酶参考区间调查

目的建立西双版纳州健康人群血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)丙酮酸氧化酶法参考区间。方法对3167名健康者血清ALT活性在不同性别、不同年龄组间的分布进行统计分析。结果ALT活性男性明显高于女性(P<0.001)。ALT参考区间上限:男性为42 U/L,女性为37 U/L。男性血清ALT活性在30~59岁组较高(其中40~49岁组最高),<20岁组最低;ALT参考区间上限:<20岁为34 U/L,20~29岁为46 U/L,30~59岁为47 U/L,≥60岁为39 U/L。女性≥40岁者血清ALT活性较高(其中50~59岁组最高),≤29岁者较低;ALT参考区间上限:≤29岁为34 U/L,30~39岁为35 U/L,≥40岁为40 U/L。结论ALT活性在不同性别、不同年龄组间有明显差异,各实验室应按不同性别、不同年龄建立本地区、本实验室血清ALT参考区间。     

天门冬氨酸氨基转移酶37℃参考方法的建立及其应用研究

目的通过建立37℃天门冬氨酸氨基转移酶（AST）参考方法,对酶校准品定值,探讨血清AST测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立AST酶催化活性参考方法,并对其精密度、线性范围和干扰因素进行方法学评价,用参考方法测定c．f．a．s多项校准液,并建立本室的参考范围。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLSEP9-A方案比较40份人血清用酶校准品校准的常规方法和参考方法AST结果。结果我室初步建立的37℃ AST参考方法相应方法学参数,如下：总CV0．89％-1．12％、线性范围1．3—300U／L。AST测定结果在48U／L左右偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素256．5μmol／L、结合胆红素205．2μmol／L;AST在165U／L左右测定结果偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素307．8μmol／L、结合胆红素342μmol／L。血红蛋白在1g／L时对两种浓度的AST干扰均大于5％。而甘油三酯在10mmoL／L以下对两种浓度的AST的干扰仍然小于5％。用参考方法测定c．f．a．s多项校准液AST结果128．5U／L,比靶值高0．5U／L。本室参考范围AST：男性10—40U／L;女性7—40U／L。健康男女AST有显著差别（P〈0．05）。用制备的酶校准品校准的常规方法和参考方法进行比较,相关良好（r^w=0．9992）。前者结果与后者相对偏倚在±10％之内。结论我室的参考方法基本建立,采用参考方法为酶校准品定值,可以提高血清AST测定结果的准确性和可比性。     

丙氨酸氨基转移酶检测方法确认

目的对献血者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)采用速率法进行检测,并对这种方法进行性能验证,证明其满足ISO15189的要求。方法按照CNSA-CL02:2012《医学实验室质量和能力认可准则》及《血站技术操作规程》(2012版)的要求对检测系统的精密度、正确度、灵敏度、可报告范围、生物学参考区间以及测量不确定度进行验证。结果 ALT质控血清和两个浓度献血者标本检测20次和20d的批内不精密度5.0%,批间不精密度6.7%;正确度估计通过2014年的原卫生部室间质评结果分析和校准品结果分析,相对偏倚均小于1/2CLIA′88允许总误差;可报告范围用直线回归得到回归方程Y=0.995 1 X-5.618 4,r=0.999 7(R2=0.999 4),该检测范围内结果准确;生物学参考区间为0.0~32.7U/L;测量不确定度为(74.90±3.32)U/L。结论 ALT检测方法的性能指标均符合ISO15189的预期要求,该方法可以作为实验室的血液筛查检测方法。     

南宁市无偿献血者丙氨酸氨基转移酶速率法参考区间的调查

目的探讨南宁市无偿献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)速率法的参考区间。方法收集1 003名表面健康的献血者血液标本,用日本日立7080全自动生化分析仪进行ALT检测并对结果进行统计学析。结果1 003例健康献血者ALT活性速率法测定值在第95百分位值为51U/L,男性与女性之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论南宁市献血者ALT活性速率法的参考上限均高于40U/L,并且测值存在性别上的差异,与国内其他地区的研究报告基本一致。     

两种丙氨酸氨基转移酶试剂的评价

目的探讨使用非配套试剂替代配套试剂检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）的可行性。方法按照CLS-IEP9-A2文件提供的方法,每天选取临床标本8份,分别用两种试剂测定样本ALT,共测定5d,记录检测结果,并进行偏差评估。结果采用两种试剂测定的ALT结果的相关系数为1．000,截距a=0．53,斜率b=1．009,无方法内、间的离群点,测定结果的偏差在允许误差范围内。结论经过方法对比及偏差评估确定在本实验室使用非配套试剂替代配套试剂是可行的。     

献血前丙氨酸氨基转移酶初筛的效果评价

目的探讨进行丙氨酸氨基转移酶(ALT)初筛对减少无偿献血血液报废的作用。方法对荆门地区自愿无偿献血者41 223例次进行ALT初筛前后的统计学分析。结果干预组和对照组的ALT不合格率分别为1.8%和3.74%,明显有所降低。结论献血前的ALT初筛,可以降低血液检测不合格率,提高血液质量,保证血液安全。     

丙氨酸氨基转移酶活性临界值的研究

目的初步探讨建立宁夏血液中心实验室血液筛查丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性的临界值。方法使用自动生化分析仪对241名符合《献血者健康检查要求-GB 18467》要求的无偿献血者的血浆ALT活性进行检测,其中男性121名,女性120名,依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)C28-A2文件要求进行分析。结果血浆ALT活性在男性、女性2组间差异具统计学意义(P<0.01),男性高于女性;本实验室的血浆ALT活性的临界值,男性为57 U/L,女性为40 U/L。结论血站实验室应使用自己的检测系统按照性别分组建立ALT活性临界值标准,科学地判定血液的"合格"与"报废"。     

上海地区丙氨酸氨基转移酶测定标准化探讨

目的通过使用统一校准品的可比性调查实验,评价丙氨酸氨基转移酶（ALT）标准化工作在上海市二级甲等以上医院实施的可行性。方法上海地区72家二级甲等以上医院检验科参加ALT检测结果可比性调查实验（共3次）。方法一：采用日立-罗氏检测系统,将具有溯源性的国际临床化学协会（IFCC）推荐方法的ALT定值传递的混合人血清样本作为实验用临时校准品校准各实验室检测系统后,测定发放的血清调查品。方法二：与临时校准品同时发放1份非人血清基质的冻干品,由实验室用各自的检测仪器、试剂和发放的已定值的血清临时校准品为冻干品定值。用该冻干品作为校准品（各实验室的定值会不同）,并与各自的检测仪器和试剂组成自建检测系统测定发放的血清调查品。同时,在本实验室选择4家试剂（分别为CZ、FH、KH、WK）,在日立自动生化分析仪上用2种方法校准后,分别选择40份患者样本与罗氏试剂进行实验室内部比对实验。结果对参加调查医院的全部检测系统第3次实验结果统计,用统一校准品校准前,血清调查品均值为42．3、63．3和137．8U／L,其变异系数（CV）分别为14．9％、12．5％和10．4％;血清临时校准品校准后,血清调查品均值为44．5、67．1和146．8U／L,其CV分别为4．9％、2．6％和3．3％;自建检测系统实验的血清调查品均值分别为44．3、67．2和146．3U／L,其CV分别为5．3％、5．2％和4．3％。结论血清临时校准品实验基本达到设定的实验目标,即美国临床实验室修正法规（CLIA＇88）允许范围的1／5～1／4（CV在4％～5％）,自建检测系统实验结果比用统一校准品校准前的离散度减小约1／2。通过加强人员培训、控制实验环节等一系列方法,进一步缩小ALT检测结果的差异,实现ALT检测结果在上海地区的一致和可比是可行的。     

提高无偿献血者丙氨酸氨基转移酶合格标准的可行性探讨

目的探讨将我国无偿献血者采用速率法测定的丙氨酸氨基转移酶（ALT）的合格标准从小于或等于40U／L提高到小于或等于50U／L的可行性,希望由此提高可无偿献血者的比例,缓解我国血液紧张的局面。方法2011年1～12月上海市集中检测的无偿献血者体检标本32280例,采用速率法进行ALT测定,按ALT≤40u／L、40u／L〈ALT≤50u／L ALT〉50u／L进行统计分析,同时对相应检测的乙型肝炎病毒表面抗原（HB—sAg）和丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）阳性概率进行统计分析。结果（1）AI。T≤50U／L和ALT〉50U／L的标本中HBsAg与抗-HCV阳性的概率方面差异有统计学意义（x2=62．677,P〈0．05）;（2）ALT≤50U／L较ALT〉50U／L的标本中HBsAg与抗：HCV阳性的概率差异有统计学意义（u=-8．11027,P〈o．05）;（3）将采用速率法进行测定的ALT的合格标准从≤40UjI．提高到ALT≤50U／L不会提高ALT合格的标本中HBsAg和抗-HCV阳性的概率（u=0．79978,P〉0．05）。结论将ALT的合格标准从小于或等于40U／L提高到小于或等于50U／L是可行的。     

献血前丙氨酸氨基转移酶初筛意义的探讨

目的探讨在献血者献血前使用干式自动生化仪快速初筛丙氨酸氨基转移酶（ALT）的意义。方法使用Reflotron干式生化仪及其配套测试条在采血前初筛献血者ALT。献血后应用全自动生化仪采用速率法对献血者血液进行ALT检测。同时,比较施行ALT初筛前后因单项ALT不合格的报废率。结果使用干式化学法在献血前对献血者进行ALT初筛后,血液的报废率显著降低。结论献血前对献血者初筛ALT是一种筛除ALT异常的有效方法,能够最大限度地保留献血者和减少宝贵血源的浪费。     

丙氨酸氨基转移酶异常血液报废原因分析

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是血站行业作为预防输血后肝炎而长期使用的一项检测项目,我国血站基本标准中明确规定对献血者ALT的初筛采用酮体酚法,复检采用赖氏法。随着血液检测自动化的应用和无偿献血法规的全面实施,许多血站已将ALT检测改为酶动力学方法,即使用大型全自动生化仪或全自动酶标仪进行ALT的自动定量试验。采血方式较以往也有所变化,并且产生了较高的ALT血液报废率。ALT异常血液报废率升高是否与以上改变因素有关。对此,笔者从方法相关性、人群差异、血液采集方法等方面对报废的原因进行分析。     

献血前丙氨酸氨基转移酶初筛效果分析

目的减少献血后血液报废率。方法献血前常规抽取静脉血2mL,用上海科华丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒(速率法)在半自动生化仪比色测定ALT数值。结果不同性别献血者之间ALT不合格率有明显差异。男性较女性淘汰率高,体质量重者较轻者淘汰率高,而女性体质量在45～70kg者淘汰率仅为0.3%可忽略不计。结论献血前可进行ALT选择性筛查。     

血清丙氨酸氨基转移酶、总蛋白定量分析方法的评价

目的　对现行使用的BeckmanDeltaCX7全自动生化仪的性能和试剂进行定量试验方法的评估。方法　采用美国标准化委员会的标准化文件EP10 T2 ,选择具有代表性的丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、血清总蛋白 (TP) ,采用酶法测定ALT ,双缩脲法测定TP。结果　测定高、中、低不同浓度质控液 ,计算批内偏差、允许误差以及总不精密度和允许不精密度 ,符合仪器检测准确度和精密度要求。结论　对该仪器整体性能进行的论证结果表明 ,BeckmanDeltaCX7全自动生化分析仪目前的各项性能良好 ,用该仪器分析ALT和TP ,其结果是可靠的。     

台州市健康成人血清丙氨酸氨基转移酶参考值调查

目的调查台州市健康成人血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的参考值。方法采用速率法测定3672例(男2088例,女1628例)健康成人ALT的血清水平。结果血清ALT水平为对数正态分布,男女间有显著性差异(P<0.01)。参考值为:男性10～56U/L,女性8～46U/L,男性高于女性。结论该参考值基本反映了台州市健康成人血清ALT的水平,可供临床医师参考。     

血清丙氨酸氨基转移酶检测标准化实验调查小结

血清丙氨酸氨基转移酶 ( ALT)是临床了解肝脏功能的最常用的检测项目之一。七十年代以前 ,因当时检验科多以手工操作为主 ,为配合肝炎防治 ,卫生部确定将赖氏 ( Reitman’s)比色测定改良法列为全国的统一方法。并以上海 1 975年调查的 99%上限 40赖氏单位定为全国参考限值 ,并沿用相当长的一段时间。八十年代起 ,自动生化分析仪逐渐进入各级医院检验部门 ,采用速率法检测各种酶 (包括ALT)的试剂也逐渐随之得到应用。自动生化分析仪以及相应的分析试剂和检测方法在医院检验部门的广泛应用 ,使临床生化检测水平有了很大的提高 ,同时也带来…