慢性肝病中凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-2α、Bax的调节作用

目的 探讨凋亡蛋白Ｂｃｌ－２家族中Ｂａｘ及Ｂａｘ－２两个亚族各在慢性肝炎、肝硬化及肝癌发生、发展中对凋亡的调节作用。方法 １５６例慢性肝病患者中,慢性肝炎７２例,肝硬化２９例,肝癌５５例,采用免疫组化染色检测以上两亚族凋亡蛋白在其肝组织中的表达。结果 慢性肝炎组Ｆａｓ及Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）阳性表达率（８７．５％,９４．４％）明显高于肝癌组（５４．５％,５２．７％）,Ｐ〈０．０１,Ｆａｓ（＋）、（     

Graves病患者甲状腺组织中凋亡蛋白Fas、FasL、Bcl-2和Bax的表达

目的　探讨凋亡调节蛋白Fas、FasL、Bcl 2和Bax与Graves病 (GD)发病机制的关系。方法采用免疫组织化学法检测 5 4例GD和 10例正常甲状腺组织Fas、FasL、Bcl 2、Bax表达 ,应用Mias 99图像分析系统对检测结果进行定量分析。结果　 (1)GD甲状腺细胞Fas、FasL、Bcl 2及Bax表达增高 ,其阳性颗粒面积、平均光密度及积分光密度均明显高于正常甲状腺 (均P <0 .0 1) ;(2 )GD组甲状腺组织Bcl 2阳性颗粒面积、平均光密度及积分光密度均高于Bax(P <0 .0 1) ,而正常甲状腺Bcl 2阳性颗粒面积及积分光密度与Bax比较差异无显著性 ;(3 )Bcl 2阳性颗粒面积及积分光密度与Bax的比值 ,GD组明显高于正常对照组 ;(4 )GD甲状腺浸润淋巴细胞亦表达一定水平的Fas、FasL、Bcl 2、Bax ,但明显低于同组甲状腺细胞(均P <0 .0 1)。结论　Fas、FasL、Bcl 2及Bax表达异常尤其是Bcl 2高表达导致的甲状腺细胞和浸润淋巴细胞凋亡减少可能与GD甲状腺体积增大、功能亢进有关。     

胃腺癌发生过程中Fas、Bcl-2、Bax蛋白表达的变化

近年来的研究显示,胃癌的发生不仅与癌基因的激活和抑癌基因的突变有关,还与细胞凋亡被抑制有关［１］。为了了解凋亡相关基因Ｆａｓ、ｂｃｌ２、Ｂａｘ在胃腺癌发生过程中的变化,本文采用免疫组化方法检测了正常胃粘膜,慢性浅表性胃炎,慢性萎缩性胃炎伴肠化、不典...     

苦参素对小鼠肝细胞Bcl-2,Bax表达的影响

目的　探讨苦参素 (OM )阻断苯巴比妥钠 (PB)诱导的小鼠肝细胞凋亡的机理。方法　 84只小鼠随机分为 4组 :空白对照组 ,阴性对照组 ,阳性对照组和OM治疗组。用免疫组织化学法和末端标记技术 (TUNEL)检测小鼠肝组织Bcl 2 ,Bax表达情况和肝细胞凋亡情况。结果　TUNEL标记显示 :阳性对照组TUNEL标记阳性 ,其它 3组为阴性。Bcl 2蛋白在OM治疗组较阳性对照组表达显著 (P <0 0 5 )。在阳性对照组 ,Bax蛋白表达水平与其他 3组相比显著增强 (P <0 0 5 ) ,其他 3组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　OM可能通过促进Bcl 2表达来阻断苯巴比妥钠诱导的肝细胞凋亡 ,PB可能通过促进Bax表达来诱导肝细胞凋亡     

慢性肝病肝组织凋亡蛋白TNF-α、TNFR、Bcl-2家族表达的研究

探讨凋亡蛋白TNF -α、TNFR及Bcl- 2家族在慢性肝炎、肝硬化及肝癌发生、发展中对凋亡的调节作用。 94例慢性肝病患者 ,慢性肝炎 2 8例 ,肝硬化 2 2例 ,肝癌 4 4例 ,采用原位杂交法检测TNF -α、TNFR及免疫组化SP法检测Bcl- 2家族凋亡蛋白及Fas、FasL在其肝组织中的表达。肝硬化TNF -α、TNFR表达率为 90 9%、95 5 % ,明显高于慢性肝炎组 (5 3 6 %、4 6 4 % )及肝癌组 (43 2 %、38 6 % ) ,P <0 0 5或 <0 0 1;Fas在慢性肝炎和肝硬化与肝癌组表达分别为 (10 0 0 %、81 8%、5 6 8% ) ;前二者与肝癌相比P <0 0 1表达明显高于肝癌组。HAI记分越高TNF-α、TNFR和Fas表达越明显 ,而Bcl- 2表达越低。说明在慢性肝病时 ,TNF -α、TNFR、Bcl- 2各凋亡蛋白家族参与了肝组织凋亡的调节 ,引起不同程度的肝组织损伤     

桥本甲状腺炎甲状腺组织中Fas、Fas配体、Bcl-2、Bax表达及意义

目的　探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、Fas配体 (FasL)、Bcl 2、Bax表达与桥本甲状腺炎(HT)发病机制的关系。方法　采用免疫组化S P法检测 41例HT和 10例正常甲状腺组织Fas、FasL、Bcl 2、Bax表达及分布 ,应用Mias99图像分析系统进行定量分析。结果　 (1)HT组甲状腺组织中Fas、FasL、Bcl 2、Bax阳性染色面积、平均光密度和积分光密度均显著高于正常组 (P <0 .0 1) ;(2 )HT组中组织结构破坏较重区域中小滤泡及失去正常滤泡结构的腺上皮Fas、FasL、Bax表达高于其它腺上皮 ,滤泡结构较完整的区域Bcl 2表达较高。结论　Fas、FasL、Bcl 2、Bax的过度表达可能参与HT发病过程 ,其导致的细胞凋亡增高可能是HT甲状腺细胞破坏的重要机制之一 ;Bcl 2在维护HT甲状腺滤泡结构的完整性中起着某种重要作用     

糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡与Bax和Bcl-2基因表达

目的　观察糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡、Bax和 Bcl- 2表达及二者的相关性。　方法　单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病 ,采用原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡 ;流式细胞术和免疫组化检测肾皮质 Bax和 Bcl- 2表达水平 ;原位杂交检测 Bax和 Bcl- 2 m RNA表达 ,并观察尿蛋白、BU N、尿肌酐等反映肾功能的有关指标。　结果　在制模后 2、4、8、12周时 ,糖尿病组大鼠较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多 ,Bax、Bcl- 2蛋白和 m RNA的表达显著增强 (P<0 .0 5 )。随着大鼠糖尿病病程延长 ,肾功能恶化 ,肾脏凋亡细胞数逐渐增多 ,Bax表达亦逐渐增强 ,Bax/Bcl- 2比增加 ,且肾脏凋亡细胞数与 Bax及 Bax/Bcl- 2比具有相关性 (P<0 .0 5 )。　结论　肾脏凋亡细胞的不断增加可能是糖尿病肾病发生、发展的原因之一 ,Bax和 Bcl- 2可能参与肾脏细胞凋亡的调控。     

慢性乙型肝炎和肝病中Fas和FasL表达的原位研究

目的了解慢性乙型肝炎和肝病时介导凋亡的Ｆａｓ／ＦａｓＬ表现。方法以免疫组化法原位检查各种慢性肝病４５例的活检肝组织。结果肝内浸润的淋巴细胞中检出ＦａｓＬ，肝细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达与炎症活动性一致，多分布在界面性炎症区。肝细胞表达ＦａｓＬ，可能也发挥细胞毒效应。结论新的发现是ＦａｓＬ可在肝细胞结节和肝癌细胞表达，提示有细胞毒效应的ＦａｓＬ在ＨＢ相关慢性肝病中有发病学意义。肝癌细胞中未检出Ｆａｓ而检出ＦａｓＬ，可能是一种肿瘤逃避免疫攻击的机制     

Fas/FasL、Bcl-2/Bax、Caspase-8在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用机制

目的:探讨肝细胞凋亡及其相关因素Fas/FasL、Bcl-2/Bax蛋白及Caspase-8 mRNA的表达在大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用.方法:采用改良高脂饮食建立大鼠NAFLD模型,以正常饮食设立对照组.HE染色观察肝脏脂肪变、炎症活动和纤维化程度,采用流式细胞仪法测肝细胞凋亡百分数;免疫组织化学法检测Fas、FasL、Bcl-2及Bax在肝组织中表达情况;实时荧光定量PCR法检测肝脏Caspase-8 mRNA的表达.结果:NAFLD模型组脂肪变性明显,纤维化和炎症活动度记分均显著高于正常对照组.流式细胞仪检测显示,与对照组比较,实验组大鼠肝细胞凋亡百分数增加,随造模时间延长凋亡率增加更明显(均P<0.01);免疫组织化学染色显示随着肝脏脂肪变加重,Fas、FasL蛋白染色加深,阳性细胞数增加;Bcl-2、Bax在对照组的表达均为散在弱阳性,实验组4、8、12wk阳性细胞数渐增加,并在脂肪变明显的部位着色深且随着脂肪肝的进展,Bcl-2/Bax比率进行性下降.实时荧光定量PCR法显示Caspase-8 mRNA表达量在高脂组中显著高于对照组(均P<0.01),且随肝脏脂肪变及炎症加重呈进行性上升.结论:在NAFLD发生过程中,肝细胞凋亡促进NAFLD大鼠病情进展;Fas、FasL、Caspase-8 mRNA相关调控蛋白的活化是引起NAFLD脂肪变性、炎症及纤维化的重要因素.细胞凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2表达上调,二者表达的相对比例发生异常,这可能是NAFLD中肝细胞发生凋亡的重要原因之一.     

Fas、FasL在慢性乙型肝炎患者肝细胞和外周血淋巴细胞上的表达

探讨慢性乙型肝炎患者肝细胞及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达与乙型肝炎病毒（HBV）复制水平及肝组织炎症程度的关系。对30例慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺肝组织病理检查及免疫组化SP法检测肝细胞中Fas、FasL表达强度。并采用单克隆抗体经流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上Fas、FasL表达阳性百分率;同时,采用荧光实时标记法测定血清中病毒复制指标HBV DNA水平;采用Beckman全自动生化分析仪检测肝功能并研究其相关性。慢性乙型肝炎患者肝细胞中Fas、FasL表达强度随肝组织炎症活动度加重而增强（P均〈0．001）,与白蛋白及丙氨酸转移酶（ALT）呈负相关（P〈0．005,P〈0．001）,与球蛋白、总胆红质无明显相关性（P均〉0．05）。外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达阳性率与血清中肝炎病毒复制指标HBV DNA水平呈正相关;与慢性肝炎分度无明显的相关性。乙型肝炎病毒感染可诱导肝细胞及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达。肝细胞Fas、FasL的表达随炎症活动度加重而表达增强,但其介导的凋亡并不引起肝细胞炎症损伤即ALT活性并不升高,相反减少;同时在某种程度上影响白蛋白的合成。提示Fas—FasL介导的肝细胞凋亡是以非细胞损伤方式参与慢性乙型肝炎的发病过程。同时,随血清HBV DNA水平增高,外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达亦增强,淋巴细胞的凋亡因而增多,是导致乙型肝炎慢性化的原因之一。由此可见,Fas、FasL介导的凋亡参与了慢性乙型肝炎的发病机制,且在慢性乙型肝炎的发生发展中起重要作用。     

慢性乙型肝炎患者HBVDNA载量与肝组织炎症及纤维化程度的相关性分析

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症及纤维化程度间的相关性。方法将169例CHB患者根据血清HBeAg分为HBeAg阳性组(110例)和HBeAg阴性组(59例),回顾性分析血清HBV DNA载量与肝组织病理炎症分级、纤维化分期之间关系。结果 HBeAg阳性组与HBeAg阴性组血清HBV DNA载量分别为(6.9±1.3)log10拷贝/ml和(4.7±1.8)log10拷贝/ml,两组比较差异有统计学意义(P=0.024)。HBeAg阳性组患者肝组织炎症活动度G1组为9例、G2组为80例、G3~4组为21例,其血清HBV DNA载量分别为(5.7±1.4)log10拷贝/ml、(6.4±1.8)log10拷贝/ml、(7.2±1.1)log10拷贝/ml,3组患者血清HBV DNA载量比较,差异无统计学意义(P=0.069)。肝组织纤维化程度S1组为28例、S2组为50例、S3~4组为32例,其血清HBV DNA载量分别为(6.9±1.1)log10拷贝/ml、(6.9±1.4)log10拷贝/ml、(6.8±4.2)log10拷贝/ml,3组患者血清HBV DNA载量比较,差异无统计学意义(P=0.079)。HBeAg阴性组患者肝组织炎症活动度G1组为6例、G2组为19例、G3~4组为34例,其血清HBV DNA载量分别为(2.2±1.9)log10拷贝/ml、(4.9±1.5)log10拷贝/ml、(5.4±1.8)log10拷贝/ml,3组患者血清HBV DNA载量比较,差异有统计学意义(P=0.014);肝组织纤维化程度S1组为12例、S2组为30例、S3~4组为17例,其血清HBV DNA载量分别为(2.6±4.1)log10拷贝/ml、(5.3±1.3)log10拷贝/ml、(5.6±1.7)log10拷贝/ml,3组血清HBV DNA载量比较,差异有统计学意义(P=0.026)。结论 HBeAg阳性CHB患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症及纤维化程度无显著相关。HBeAg阴性CHB患者血清HBV DNA载量较高者,其肝组织炎症及纤维化程度较高。     

超声定量诊断慢性乙型肝炎肝纤维化的临床价值探讨

目的 探讨超声定量诊断慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化的临床价值.方法 采集186例有肝活组织病理检查结果的CHB患者的超声标准声像图,观测肝包膜厚度,并提取声像图纹理的14个灰度共生矩阵参数,与肝纤维化病理诊断进行比较.各定量指标在纤维化病理分期间的差异及与其相关性分别采用方差分析和Spearman相关分析,由定量指标分别建立对纤维化分期和分组的判别分析模型.结果 14个灰度共生矩阵参数和肝包膜厚度共15个指标中,仅方差(F=0.55,r=0.06;均P＞0.05)、均值和(F=0.61,r=0.05;均P＞0.05)、和熵(F=1.68,r=0.09;均P≥0.05)及熵(F=1.39,r=0.12,P＞0.05)在病理分期间的差异无统计学意义且与其不相关.交互检验表明,建立的判别分析模型对肝纤维化按S0至S4分期正确率分别为80.0%、64.9%、61.3%、74.1%和80.6%,73.1%的病例能被准确分期,诊断不同程度纤维化的敏感度、特异度、准确度,≥S1为97.6%、80.0%、91.9%,≥S2为92.1%、89.7%、90.9%,≥S3为94.8%、96.1%、95.7%,S4为80.6%、97.4%、94.6%.按S0无纤维化、S1轻度纤维化、S2和S3中重度纤维化、S4早期肝硬化分组,正确率分别为81.7%、78.4%、56.9%和90.3%,74.7%的病例能被准确分组,诊断不同程度纤维化的敏感度、特异度、准确度,≥轻度纤维化为97.6%、81.7%、92.5%,≥中重度纤维化为83.1%、94.8%、89.2%,早期肝硬化为90.3%、93.5%、93.0%.结论 无创的超声检查结合声像图纹理分析对定量诊断CHB肝纤维化具有一定参考价值.

Abstract：

Objective To evaluate the value of ultrasonic quantitative method in the diagnosis of liver fibrosis in chronic hepatitis B (CHB) patients. Methods Ultrasonography was performed in 186 CHB patients who underwent liver biopsies. Fifteen indices including liver capsule thickness and fourteen texture parameters of gray level co-occurrence matrix were extracted from standard sonograms and compared with fibrosis stages by histopathology. The status of liver fibrosis was divided into five stages from S0 to S4 by histopathology based on the disease severity. ANOVA and Spearman correlation analysis were applied to analyze the differences and relationships between these indices and pathological stage, respectively. Then discriminant analysis models were established based on the indices for quantitative diagnosis of liver fibrosis. Results Among the fifteen indices, including liver capsule thickness, only the variance (F=0. 55, r=0. 06; both P＞0. 05), sum average (F=0.61, both r=0.05 ; P＞0.05), sum entropy (F=1.68, r=0.09; both P≥0.05) and entropy (F=1.39,r=0.12; both P＞0.05) were not significantly associated with the stages and not manifested linear correlation. Using biopsy results as gold standard, the correct rank rate of discriminant analysis model analysis in the patients staged from S0 to S4 were 80. 0%, 64. 9%, 61.3%, 74. 1% and 80.6 %, respectively. There were 73.1% of cross-validated cases who were accurately classified by the model analysis. The sensitivity, specificity and accuracy in patients with stage ≥ 1 were 97. 6%,80.0% and 91.9%, respectively; those in patients with stage≥2 were 92.1%, 89.7% and 90.9%,respectively; those in patients with stage≥3 were 94.8%, 96.1% and 95.7%; and those in patients with stage 4 were 80. 6%, 97.4 % and 94.6%, respectively. When considered S0 as no fibrosis, S1 as mild fibrosis, S2 and S3 as moderate to severe fibrosis and S4 as early cirrhosis, the consistence rates between discriminant analysis model and biopsy result were 81.7%, 78. 4%, 56. 9% and 90.3%,respectively. There were 74.7% of cross-validated cases who were correctly classified. The sensitivity, specificity and accuracy of the models for determining the fibrosis severity in patients≥mild fibrosis were 97.6%, 81.7% and 92.5%, respectively; those in patients ≥ moderate to severe fibrosis were 83. 1%, 94.8% and 89.2%, respectively; those in patients with early cirrhosis were 90.3%, 93.5% and 93.0%, respectively. Conclusion As a novel and noninvasive method, ultrasonic texture analysis could quantitatively determine liver fibrosis in CHB patients and is worthy of further investigation.     

二甲双胍对非酒精性脂肪性肝病细胞模型线粒体途径凋亡及氧化应激的影响

目的探讨二甲双胍对非酒精性脂肪性肝病细胞模型线粒体途径凋亡及氧化应激的影响。方法体外用0.6 mmol/L油酸诱导HepG2细胞脂质沉积建立非酒精性脂肪性肝病细胞模型,将HepG2细胞分为对照(Con)组、油酸(OA)组、二甲双胍低剂量组(1 mmol/L)、二甲双胍高剂量组(10 mmol/L)。用油红O染色检测细胞内脂滴分布,试剂盒检测培养上清液丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶的水平。用DCFH-DA法检测HepG2细胞活性氧的生成量;用双染流式细胞技术检测HepG2细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、B淋巴细胞淋巴瘤相关蛋白、B淋巴细胞淋巴瘤2、细胞质细胞色素C蛋白的表达。数据组间比较采用单因素方差分析。结果油酸可诱导HepG2细胞内脂滴明显增加,低、高剂量二甲双胍均可减少细胞内脂滴堆积,二甲双胍高剂量组比二甲双胍低剂量组作用更加明显;OA组HepG2细胞内天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶明显升高,分别为(43.41±7.11)U/L、(29.56±4.11)U/L;二甲双胍低、高剂量处理后细胞内天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶明显降低,分别为(32.44±4.08)U/L、(19.31±3.03)U/L和(26.00±3.11)U/L、(15.11±4.11)U/L,差异均有统计学意义(P值均<0.05);DCFH-DA法检测结果提示油酸组细胞活性氧荧光强度为41.21%±4.23%,二甲双胍低、高剂量组细胞活性氧荧光强度均降低,分别为27.44%±3.91%和17.55%±5.11%,组间差异均有统计学意义(P值均<0.05);流式细胞术检测分析结果显示,OA组细胞凋亡率明显高于Con组(12.12%±0.72%比3.04%±0.57%,P<0.05),二甲双胍低、高剂量处理HepG2细胞后凋亡均明显降低(8.71%±0.71%,5.71%±0.61%,P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果提示与Con组相比,OA组B淋巴细胞淋巴瘤相关蛋白、细胞色素C、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达均增加,而B淋巴细胞淋巴瘤2降低(P值均<0.05),低、高剂量二甲双胍处理HepG2细胞后B淋巴细胞淋巴瘤相关蛋白、细胞质细胞色素C、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达均降低,而B淋巴细胞淋巴瘤2增加(P值均<0.05)。结论二甲双胍可有效缓解非酒精性脂肪性肝病细胞模型脂肪变性,改善HepG2功能,其作用机制可能与减轻氧化应激损伤、调节线粒体凋亡途径相关蛋白表达而抑制细胞凋亡有关。     

血清差异蛋白在慢性乙型肝炎肝纤维化中的诊断价值

目的 探讨慢性乙型肝炎肝纤维化患者血清差异蛋白质表达的临床意义,为肝纤维化的无创诊断提供依据.方法 经肝活体组织检查证实为慢性乙型肝炎患者110例,建模组83例,验证组27例.肝纤维化按Ishak分期F≥3期为明显肝纤维化,建模组明显肝纤维化(F≥3)55例,无-轻度肝纤维化(F0～F2)28例,验证组明显肝纤维化15例,无-轻度肝纤维化12例.用基质辅助激光解析电离高分辨飞行时间串联质谱检测标本的血清蛋白质,得到每个样品的质谱图,应用FlexAnalsis3.0分析软件得到差异蛋白质图谱,并与临床病理诊断进行比较,建立遗传算法的诊断模型,并对模型的诊断效能进行验证.结果 明显肝纤维化组(F≥3)与无-轻度肝纤维化组(F0～F2)患者蛋白质图谱比较,得到差异有统计学意义(P＜0.01)的差异蛋白质15个,其中最显著的蛋白质为2081.73 m/z和1944.41 m/z,以这两个差异最显著的蛋白峰建立坐标系的样品分布,建立6个特征蛋白峰组成的遗传算法模型,采用该模型对12例无-轻度肝纤维化组患者、15例明显肝纤维化组患者进行验证,结果识别率为100%,预测能力为94.14%,准确率为100%.结论 检测血清差异蛋白质表达可早期判断患者肝纤维化的程度.     

肝组织学检查在慢性乙型肝炎患者病情评估中的价值

目的 进一步研究肝组织学检查在慢性乙型肝炎(CHB)患者病情评估中的价值.方法 对176例入院诊断为CHB的患者进行肝组织活检,同时进行实验室及影像学检查,对临床及病理诊断进行对比分析,以组织学炎症活动度＜G2和≥G2、纤维化程度＜S2和≥S2分组,分别比较肝功能生物化学指标.单因素分析采用秩和检验和x2检验,多因素分析采用双变量Logistic回归分析方法.结果 176例患者临床诊断CHB 171例、肝硬化5例.171例CHB患者中,病理与临床诊断总体符合102例,占59.6%,临床诊断重于病理诊断60例,占35.1%,临床诊断轻于病理诊断9例,占5.3%.44例G2患者中,ALT≥2×正常值上限(ULN)的为41例,占93.2%.多因素Logistic回归分析显示,年龄、明显的症状、ALT、胆碱酯酶(CHE)、Alb、总胆汁酸(TBA)水平及肝脏彩色超声提示肝表面不光滑是肝纤维化分期≥S2相关的独立影响因素.结论 CHB程度分级的临床与病理诊断符合率不高.G2作为CHB中度、S2作为CHB重度的病理学界定标准似乎更符合临床实际.

Abstract：

Objective To explore the value of liver biopsy in diagnosis of the severity of chronic hepatitis B (CHB).Methods The liver biopsy, laboratory examination and imaging were performed in 176 CHB patients. The clinical and histological diagnoses were compared. Biochemical indexes of liver function were also compared between patients with histological inflammation activity ＜G2 and≥G2 or the patients with fibrosis score ＜S2 and ≥S2. Rank sum test and χ2 test were used in univariate analysis. Binary Logistic regression was used in multivariate analysis. Results Among 176patients, the clinical diagnosis of CHB and cirrhosis were established in 171 patients and five patients,respectively. Among 171 CHB patients, the clinical diagnosis was consistent with histological diagnosis in 102 (59.6%) patients. The clinical diagnosis was more severe than histological diagnosis in 60 (35.1%) patients and the clinical diagnosis was less severe than histological diagnosis in nine (5.3%) patients. Among 44 patients with histological grade G2, 41 (93.2 %) patients had alanine aminotransferase (ALT)≥2 × upper limits of normal (ULN). According multiple Logistic regression analysis, age, overt symptom, ALT level, cholinesterase (CHE), albumin (Alb), total bile acid (TBA) and ultrasonic appearance of non-smooth liver surface were independent risk factors for the diagnosis of fibrosis score ≥S2. Conclusions The CHB diagnosis based on clinical evidences doesn't show acceptable consistency with the diagnosis based on histological evidences. G2 and S2 may be more reliable criteria for diagnosing moderate and severe CHB.     

扶正化瘀胶囊序贯联合核苷(酸)类似物对慢性乙型肝炎肝纤维化指标的影响

目的 观察扶正化瘀胶囊序贯联合核苷(酸)类似物(NAs)对NA单药治疗后获得完全病毒学应答,但肝纤维化指标仍然改善不佳的慢性乙型肝炎(CHB)的疗效. 方法 收集2008年1月至2010年12月的CHB合并肝纤维化的患者资料.患者均接受NAs初始治疗至少2年,病毒学指标均达到完全应答6个月以上,但肝纤维化指标仍然改善不佳.以1:1比例将患者随机分为两组,试验组继续口服NAs(拉米夫定、阿德福韦酯、替比夫定或恩替卡韦),同时加用扶正化瘀胶囊1.5g/次,3次/d,共48周,对照组继续单用NAs 1片/次,1次/d,共48周,观察治疗前后血清肝纤维化指标、肝纤维化分期、肝脾B超和肝功能指标改变.试验前两组数据的可比性分析,计量资料应用t检验,计数资料使用四格表x2检验、Fisher精确概率法和薛氏x 2检验.各组治疗前后的自身比较采用配对t检验.治疗后两组疗效的比较计量资料采用两组均数差别的t检验,计数资料采用薛氏x2检验,肝纤维化分期比较采用Ridit分析、U检验及其校正法.结果 共收集到110例患者资料,试验组肝纤维化血清学指标改善的显效率、有效率及无效率分别为69.8％、18.9％和11.3％,对照组分别为17.8％、20.0％和62.2％,两组相比,x2=32.899,P＜0.01,差异有统计学意义.治疗前相比,两组肝纤维化分期均在1～4期,均值分别为2.39和2.13,差异无统计学意义(P＞ 0.05).治疗后相比,两组肝纤维化分期均在0～4期,试验组和对照组均值分别为1.79和2.12,P＜0.01,差异有统计学意义.试验组显效、有效和无效率分别为11.3％、43.4％和45.3％,对照组分别为1.0％、22.2％和75.6％,两组比较,x2=9.408,P＜0.01,差异有统计学意义.试验组ALT活性改善显效、有效和无效率分别为24.4％、57.8％和17.8％,对照组分别为12.5％、25.0％和62.5％,两组比较,x2=18.09,P＜0.01,差异有统计学意义;试验组血清胆红素定量改善显效、有效和无效率分别为30.0％、55.0％和15.0％,对照组分别为12.5％、37.5％和50.0％,两组比较,x 2=5.348,P＞0.05,差异无统计学意义.治疗前相比,两组门静脉直径、脾脏厚度和脾静脉直径指标差异均无统计学意义(P值均＞0.05).治疗后相比,试验组门静脉直径、脾脏厚度均小于对照组,t值分别3.938和2.763,P值均＜ 0.01,差异均有统计学意义,但脾静脉直径比较,t=1.582,P＞0.05,差异无统计学意义.两组治疗前后血尿常规、肾功能、心电图均无明显变化.试验过程中两组均未出现明显不良反应.结论 NAs抗病毒治疗后,HBV即使获得完全病毒学应答,仍然有部分患者肝纤维化持续存在,在此基础上,序贯联合扶正化瘀胶囊,可以使肝纤维化指标得到明显的改善.     

慢性乙型肝炎患者肝组织学纤维化分期与血清肝纤维化相关指标的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)肝组织学纤维化程度与临床血清肝纤维化相关指标之间的关系.方法 对189例人院诊断为CHB的患者行肝穿刺.同时检测血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC、肝功能和血常规,并按组织学的不同纤维化分期(S)进行比较和相关性回归分析.结果 从肝纤维化So至S4期,PC Ⅲ、γ-GT、TBil、γ-球蛋白和PT渐增,差异有统计学意义(F值分别为3.325、6.218、2.958、10.160和7.028,P＜0.05);胆碱酯酶(CHE)、总蛋白(TP)、Alb、PLT值渐减,差异有统计学意义(F值分别为15.984、3.786、14.919和4.737,P＜0.01);LN、ⅣC、ALT和AST值在S各期比较差异有统计学意义(F值分别为4.618、2.795、2.649和3.199,P＜0.05).S分期与LN、PCⅢ、ALT、AST、TBil、γ-GT、γ-球蛋白、PT呈正相关(rs值为0.200、0.306、0.1 72、0.273、0.153、0.402、0.415、0.269),与CHE、TP、Alb、PLT呈负相关(rs值为-0.502、-0.208、-0.413、-0.390);LN、ALT、CHE、PLT、γ-球蛋白为肝纤维化分期的独立影响因素(P＜0.05).结论 肝组织学纤维化分期与血清肝纤维化、肝功能、血常规指标有不同程度相关.综合多项临床资料可早期无创性诊断肝纤维化.     

不同肝纤维化程度慢性乙型肝炎患者的血浆蛋白质组学分析

目的 探索与肝纤维化程度相关的新血浆标志物,为开发有临床应用价值的肝纤维化无创诊断提供新型检测分子. 方法 收集慢性乙型肝炎患者血浆,并根据肝活组织病理学诊断肝纤维化的分期进行分组,包括S0～1组40例,S2 ～3组20例和S4组20例.血浆样品去除血浆中的白蛋白和免疫球蛋白G后,通过二维凝胶电泳进行分离,采用ImageMaster软件分析获得的电泳图谱,找到与疗效相关的差异蛋白质.差异蛋白质点经过胰酶酶切后,通过在线纳升级反向液相色谱串联电喷雾离子阱质谱分析进行鉴定.结果 通过比较不同组血浆蛋白质的二维凝胶电泳图谱,共发现了14个在S0～1组、S2～3组和S4组血浆样品中表达差异的蛋白质点.液相色谱串联质谱分析鉴定差异蛋白质点,包括人纤维蛋白原Y链、接联球蛋白、补体蛋白C3、免疫球蛋白κ链C区和载脂蛋白A-I.结论 通过对不同肝纤维化程度的慢性乙型肝炎患者血浆进行蛋白质组学分析,发现和鉴定了5种在乙型肝炎患者血浆中表达水平与肝纤维化进程相关的差异蛋白质,这些蛋白质可能是评价患者肝纤维化程度的潜在生物标志物.     

临床诊断的慢性乙型肝炎病毒携带者肝纤维化程度的非创伤性评价

目的 评价常规实验室检测指标在判断慢性HBV携带者肝纤维化程度中的作用.方法 选择196例临床诊断的慢性HBV携带者行肝组织活检及常规实验室检查.观察血常规、AST/ALT、AST与PLT比值指数(APRI),年龄-PLT指数(API);以S0(112例)及S1～S3(84例)分组比较,计量资料采用Wilcoxon秩和检验,计数资料采用x2检验.结果 196例慢性HBV携带者HBV DNA均阳性,HBeAg阳性156例,占79.6％;S1～S3组与S0组比较,年龄偏大、ALT、AST、AST/ALT、APRI及API增高,而PLT和HBV DNA下降(统计值=7.705、6.33、7.095、4.977、11.059、8.936、10.196,均P＜0.05);APRI和API的曲线下面积＞0.70,分别为0.827和0.829.API灵敏度最高为70.46％,其阴性预测值为71.43％;APRI特异度最高为92.94％,阳性预测值为92.86％;以APRI≥0.30作为有肝纤维化的诊断,119例中包括了97.62％肝纤维化患者;以API≥4.0作为有肝纤维化的诊断,112例中包括了96.43％肝纤维化患者.结论 常规实验室检测可用于慢性HBV携带者的肝纤维化程度判断,APRI和API是具有简便、易得且较有价值的临床指标.