抗胃癌单克隆抗体的吸附内化与液相胞饮之间的关系研究

本文以人胃癌ＳＧＣ－７９０１细胞为实验模型，应用胶体金示踪技术，对鼠抗人胃癌单克隆抗体ＫＧｂ２的吸附内化与液相胞饮之间的关素进行了探讨。电镜观察发现：（１＿液相胞饮的入胞途径有被覆小凹、微胞饮凹陷及大胞饮凹陷３种，抗体的吸附内化入胞途径与之一致；（２）是凡是抑制液相胞饮活动的因素均能抑制ＭＧｂ２抗体的吸附内化。根据本研究结果及对相关文献材料的分析，本文提出抗肿瘤抗体的吸附内化依赖于膜胞饮功能区这一     

抗胃癌单克隆抗体MG7的内化超微形态学研究

应用胶体金技术,对抗人胃癌单克隆抗体MG7在KATOⅢ人胃癌细胞系中的内化途径、过程进行了超微形态学观察。4℃时MG7与靶细胞只有结合但无内化。在37℃条件下,见细胞表面结合的MG7主要以下述几种方式进入细胞内:(1)吸附微胞饮;(2)被覆小凹;(3)吸附大胞饮;(4)吸附吞噬;(5)直接穿膜。入胞后MG7通过管泡结构送入多泡小体及溶酶体。本研究结果表明,MG7是一具有强内化能力的抗体,可作为免疫导向诊治的载体;另一方面则表明,MG7内化后几乎均被溶酶体降解。提示,如能采取某种人为因素干预MG7的细胞内分布过程,将有可能提高MG7的导向诊治效率。     

骨肉瘤与单克隆抗体

近10年来,国内外已有10余株特性各异的骨肉瘤单克隆抗体报道。借助骨肉瘤单克隆抗体已对骨肉瘤抗原有基本的了解;将之应用于骨肉瘤的放免显像诊断已取得令人满意的效果,但仍只能在体外及动物体内进行骨肉瘤的定向免疫治疗。     

6株胃癌单克隆抗体结合释放方式和内化量的研究及其意义

本文应用细胞放免测定技术观察胃癌单抗MGb2,MGc1,MGd1,MG5,MG7及MGg1与靶细胞相应抗原的结合释放特点及内化程度。结果表明6株抗体呈现3种结合方式:(1)结合依赖于温度,高内化型如MGc1;(2)结合依赖于温度,低内化型如MGS;(3)4℃时结合高于37℃时结合,低内化型如MGb2。并且有3种释放方式:(1)37℃减慢性如MGc1;(2)37℃加快型如MGb2;(3)非温度影响型如MGd1。提示抗体的作用方式呈现多样化,临床应用中应根据不同目的选择合适的抗体作为载体。     

液相色谱法分离纯化单克隆抗体的进展

本文介绍了近年来国内外液相色谱法(包括常压液相色谱法和高效液相色谱法)在单克隆抗体分离纯化中的应用。由于单克隆抗体分子的特殊性,其分离纯化的方法也多种多样,各种不同分离原理的液相色谱法:离子交换色谱,凝胶过滤色谱,疏水性相互作用色谱,亲和色谱,羟基磷灰石吸附色谱,以及新近发明的亲硫吸附色谱和混合态色谱都在单克隆抗体分离纯化中有着程度不同的应用。这些液相色谱方法可适用于分离纯化腹水或杂交瘤细胞培养上清液中的小鼠、大鼠和人源的不同类型及亚类的单克隆抗体。本文还就各种不同方法的应用范围,及纯化结果的纯度、活性回收率、纯化周期、每批可纯化样品量、纯化成本等方面作了比较和讨论。     

单克隆抗体在细菌性痢疾研究中的应用

本文综述了利用单免隆抗体(McAb)技术研究细菌性痢疾的现状及进展。着重论述了McAb在福氏痢疾杆菌菌体抗原结构分析中的应用及提出的新观点,从而丰富了福氏菌抗原的理论并论及利用McAb建立的快速诊断方法对细菌性痢疾临床诊治及流行病学监测的重要意义;同时论述了McAb免疫保护机理的研究,在临床治疗中的尝试以及抗独特型McAb细菌性痢疾疫苗的研究进展。     

抗胃癌单克隆抗体识别的噬菌体呈现肽与天然抗原的关系

噬菌体呈现的随机肽库已成功地用于筛选Ｂ细胞或Ｔ细胞表位。为进一步研究胃癌相关抗原与相应单克隆抗体（ｍＡｂ）结合的结构基序及其相互作用,我所通过两株胃癌ｍＡｂＭＧ７和ＭＧｂ２筛选噬菌体呈现的随机九肽库,获得一些可与ｍＡｂ结合的噬菌体呈现肽。我们采用竞争抑制实验,研究了这些肽与天然胃癌相关抗原的关系。１材料和方法１．１材料胃癌ｍＡｂＭＧ７和ＭＧｂ２由本所研制〔１,２〕,通过筛选噬菌体呈现的随机九肽库〔３,４〕,获得可与相应ｍＡｂ结合的噬菌体呈现肽〔５,６〕。１．２方法１．２．１噬菌体呈现肽竞争抑制试验将纯…     

单克隆抗体亲和常数的测定

本文介绍了单克隆抗体亲和常数测定的意义、表达方式以及适合于一般实验室使用的几种测定与分析单克隆抗体亲和常数的方法。     

胃癌单抗检测活检粘膜组织833例结果分析

应用胃癌单抗ID1-2对833例内窥镜活检组织进行了免疫学荧光检查,胃癌阳性检出率为81.6％:胃溃疡为32.7％;肠化生性蒌缩性胃炎为40.0％;食管和结肠腺癌分别为60.0％和62.5％,与单纯性萎缩性胃炎和浅表性胃炎的阳性检出率相比有非常显著的差异(P<0.01)。表明ID1-2单抗可用于检测活检粘膜组织中的癌细胞以及具有癌细胞相关抗原的癌前病变组织,如果与内窥镜及常规病理学检查联合应用,将可进一步提高早癌的阳性检出率。     

抗人肺癌单克隆抗体(3D3)的研制及其特性鉴定

本文用人肺腺癌组织免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,获得1株单克隆抗体(McAb 3D3)。Ig类测定为IgG_1型。杂交瘤培养上清液和腹水的效价分别为1∶10~3～10~4和1∶10~6。采用间接免疫荧光法(IFA)观察到McAb3D3主要与肺腺癌细胞株A549和L342反应,与其它组织肿瘤细胞株没有反应。ABC免疫酶染色试验显示McAb3D3主要与肺腺癌组织反应,与正常肺组织没有反应。     

载脂蛋白B单克隆抗体透射免疫比浊测定法的探讨

本文应用本空制备的载脂蛋白（ａｐｏ）Ｂ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）纯化后建立了透射免疫比浊法，并对实验中的各项条件和影响因素进行了探讨，经与多克隆抗体（ＰｃＡｂ）透射免疫比浊法比较，相关系数ｒ＝０．９１１。     

肝癌单抗JH11－ADM交联物的制备及其细胞毒作用

以葡聚糖（Ｄｅｘ）为中间载体，通过碘酸氧化法制备阿霉素（ＡＤＭ）与肝癌单抗ＪＨ１１的交联物ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＪＨ１１，交联物中ＡＤＭ与ＪＨ１１的克分子比为７１：１．经ＩＦＡ测定交联物的抗体活性大部分保持。体外细胞毒试验显示，ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＪＨ１１对ＢＥＬ－７４０２细胞的杀伤作用比游离的ＡＤＭ强．其ＩＣ５０分别为０．９６μｇ／ｍｌ和１．５２μｇ／ｍｌ，对非靶细胞ＭＧｃ－８０３和Ｌ３４２的毒性很弱，它们的ＩＣ５０＞１０μｇ／ｍｌ．集落形成抑制试验表明，ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＪＨ１１在低浓度时即对ＢＥＬ－７４０２集落形成有显著抑制作用，ＩＣ５０为０．０６３μｇ／ｍｌ，结果提示，ＡＤＭ－Ｄｅｘ－ＪＨ１１具有选择性细胞杀伤作用．     

抗人大肠癌单克隆抗体的制备及应用

目的制备和纯化抗人大肠癌单克隆抗体(ND-1),分析其在大肠癌诊断中的应用价值。方法常规免疫小鼠制备腹水,腹水经离心和过滤后,应用G蛋白亲和层析法进行纯化。采用SDS-PAGE、间接免疫荧光(IFA)、间接ELISA检测纯化后抗体的纯度、活性、效价和特异性。并用免疫组织化学SP法检测在大肠癌组织中的表达。结果经SDS-PAGE分离可见两条相对分子质量(Mr)分别为55 000和25 000明显的两条蛋白条带。间接ELISA检测抗体效价为1∶1 000 000,ND-1抗体对表达相应抗原的大肠癌细胞株具有特异结合活性。人大肠癌组织切片经ND-1抗体免疫组织化学染色阳性率为82.9%,其中高分化腺癌阳性率为100%。结论应用G蛋白亲和层析法可以很好分离纯化鼠腹水中的IgG1亚型的单克隆抗体,抗体的纯度高,特异性强,生物学活性好,可望成为有效的肿瘤诊断和治疗的手段。     

一种简便快速筛选双位点单克隆抗体方法的建立

本文建立了一种无需对单克隆抗体(McAb)进行纯化和酶标记,利用市售酶标记抗体既可筛选双位点McAb的简易方法。其基本原理是,首先将待筛选McAb与酶标抗体制成McAb-酶标抗体复合物,再以此复合物作示踪剂进行夹心ELISA。若夹心孔OD492值高于第一、二阴性对照孔之和者, 提示所筛选McAb可能为双位点抗体。文中还对应用该方法时的注意事项进行了讨论。     

抗纤维蛋白和抗尿激酶双特异单克隆抗体的研制

利用分泌抗纤维蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，经在８－氨鸟杂嘌呤内诱导突变，使其成为对ＨＡＴ敏感细胞株．以此突变株与用尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，经筛选获得一株分泌双特异单克隆抗体的杂交瘤细胞９Ｅｌｌ，在体外有明显的溶栓效果。经二年来检测证明，该细胞株是稳定的。     

抗人肺癌单克隆抗体WL3C9的制备鉴定及血清学诊断意义

本文报道了应用杂交瘤枝术建立的一株新的抗肺癌单克隆抗体(WL3C9)细胞系,并对其分泌的McAb WL3C9及抗体识别的抗原Ag3C9进行了初步鉴定和分析。免疫组化显示,WL3C9与绝大多数肺癌组织(32/40),部分肺外肿瘤(7/18)呈中等或强阳性反应,与绝大多数正常组织不反应,个别呈弱阳性反应。血清ELISA结合抑制试验显示,WL3C9抗体与正常人血清结合抑制率为12％±17％,Ag3C9均为阴性;非肿瘤组血清Ag3C9阳性率为14％(5/35);肺外肿瘤组阳性率为39％(5/13);肺癌组阳性率达80％(36/40);同时测定血清CEA可使肺癌总阳性率提高到90％。研究结果表明,McAb3C9识别的Ag3C9抗原与肺癌密切相关,且具有较高的敏感性和特异性,是一种新的、有希望的肺癌血清学肿瘤标志物,它与CEA有一定互补性,二者联合检测可提高肺癌的检出率。