正常妊娠

080776孕早期经宫颈获取胎儿滋养细胞方法的研究/张莉…∥中国优生与遗传杂志.—2008,16(4).—27~29,39采用实时定量PCR方法对经宫颈冲洗和粘液抽吸获取的胎儿细胞进行定性定量分析,比较两种取材方法的优越性。方法:分别收集孕5~9周人工流产妇女的经宫颈冲洗液和抽吸粘液各60例     

母体血浆中胎儿DNA分析在性连锁遗传病产前诊断中的应用

目的 建立一种准确、快速、简便的无创性胎儿性别鉴定技术.方法 应用实时定量PCR技术(Taqman探针法)检测35例孕妇血浆中胎儿DNA的Y染色体特异序列SRY基因,每例血浆样本DNA均用3个PCR管同时进行检测.结果 利用母体血浆中SRY基因定量PCR分析的灵敏度为94.7%,特异性为100%.结论 母亲血浆DNA中SRY基因定量检测是一种高度敏感性和比较可靠的胎儿性别鉴定技术,为性连锁遗传病提供一种无创性产前诊断方法.     

孕妇外周血中胎儿SRY基因的检测及其意义

目的:建立一种检测孕妇外周血中胎儿细胞DNA的方法。方法:采用套式PCR技术,对51例孕妇外周血中SRY基因进行检测。结果:51例中,怀男胎的妇女25例,其中早孕17例,中孕8例,分别对其外周血进行SRY检测,早孕妇女阳性者占8例,中孕阳性者占7例,另对26例怀女胎的孕妇外周血行SRY检测,均阴性,与胎儿实际性别比较,本方法对胎儿性别鉴定的准确率分别为71.9％(23/32),94.7％(18/19)。结论:套式PCR方法,直接从母血中检测SRY基因,这对于无损伤性产前性别鉴定及性连锁遗传病的检出具有重要意义。     

孕妇血清中DAZ基因含量在21三体产前筛查中的应用

目的：探讨检测孕妇血清中胎儿DNA含量在临床产前诊断21三体综合征的可行性.方法：采用70例孕早期（8～12wk）的妇女作为研究对象,其中10例为孕21三体男胎的妇女,30例为孕正常男胎的妇女,30例为孕正常女胎的妇女,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMAN探针实时定量PCR技术检测Y染色体上无精症基因DAZ和代表母体及胎儿总游离DNA的β-actin基因的含量.结果：定量PCR检出孕21三体组血清中的胎儿游离DNA含量是正常男胎组的2.2倍.孕正常女胎组血清中未检测到DAZ基因.结论：定量PCR技术检测胎儿游离DNA可以作为产前筛查男胎21三体的重要指标.     

应用巢式PCR扩增孕妇血浆中胎儿SRY基因

目的:利用孕妇血浆中胎儿DNA进行无创产前诊断.方法:对包括10例X连锁隐性遗传病携带者的60例14～22孕周孕妇的血浆DNA进行巢式PCR,扩增胎儿来源的Y染色体特异性SRY基因.结果:38例妊娠男胎的孕妇中32例出现SRY基因扩增带,灵敏度为84.2%.22例妊娠女胎的孕妇中4例出现SRY扩增带,特异性为81.8%,总符合率为83.3%(50/60).10例X连锁隐性遗传病携带者中7例妊娠男胎的孕妇中6例检出SRY基因,3例妊娠女胎的孕妇均未检出SRY基因.结论:采用巢式PCR技术检测母体血浆中的胎儿DNA进行产前性别鉴定具有较高的灵敏度和特异性,在遗传病的产前诊断中具有很大的应用前景.     

孕妇血浆DYS19位点巢式PCR法检测

目的：探讨使用巢式PCR检测孕妇外刷血浆中男性胎儿DNA的可能性并评估其在早期判定胎儿性别方面的准确性。方法：采取20例正常孕妇外周血（孕10～38周）各2mL，枸橼酸钠抗凝后提取血浆，经蛋白酶K及十二烷基磺酸钠消化后直接作为模板，以巢式PCR对其中的胎儿DyS19基因位点进行检测，并将实验结果与娩出后的新生儿实际性别比较。结果：20例孕妇中有8例经2轮PCR后扩增出DYS19基因，后均证实为男胎；未扩增出DYS19基因的12例中有10例证实为女性，2例证实为男性。男胎性别预测符合率为80．0％（8／10）。结论：应用巢式PCR能够直接从母体外周血中检测到男性胎儿基因，且预测胎儿性别有较高的准确度。     

产科 产科特殊检查

070141应用TaqMan探针定量检测孕妇血清胎儿游离DNA/迟洪滨…∥实用妇产科杂志·—2006,2(5)·—311~313探讨应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测孕妇血清中胎儿游离DNA含量变化的可行性。方法:选择孕21三体男胎的妇女5例为实验组,对照组为孕正常男胎的妇女18例,孕正常女胎的妇女17例,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术检测Y染色体上的DYS14基因,以此确定母体血清中的胎儿游离DNA含量,并同时检测代表母体与胎儿总游离DNA的B-actin基因作为对照。结果:孕21三体男胎组血清胎儿游离D…     

孕妇血清中胎儿游离DNA产前筛查Down's综合征初探

目的应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative PCR)技术检测孕妇血清中胎儿游离DNA含量,探讨以其含量变化作为Down's综合征产前筛查新指标的可行性.方法选择42例孕中期(16～19周)的妇女作为研究对象,其中7例为孕21三体男胎的妇女,18例为孕正常男胎的妇女,17例为孕正常女胎的妇女,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术检测Y染色体上的DYS14基因,以此确定母体血清中的胎儿游离DNA含量,并同时检测代表母体与胎儿总游离DNA的β-actin基因作为对照.结果孕21三体男胎组血清胎儿游离DNA含量明显高于孕正常男胎组,它们分别为94.5基因当量(genome equivalents,GE)/ml及42.8GE/ml(P《0.01),孕21三体男胎组血清中的胎儿游离DNA含量为孕正常男胎组的2.2倍.孕正常女胎组血清中未检测到Y-染色体上的DYS14基因.结论胎儿游离DNA可能成为产前筛查Down's综合征的候选指标.     

孕妇外周血血浆胎儿DNA的检测

目的：建立可靠有效的检测孕妇血浆胎儿DNA的方法,探讨其在非创伤性产前诊断中的价值。方法：采用引物引伸预扩增（PEP）法及巢式PCR技术对65例孕妇外周血血浆DNA进行正常男性SRY基因检测。结果：单用巢式PCR技术和联合应用PEP,PCR技术对怀男胎的孕妇血中SRY基因检出率分别为65．2％（30／46）和89．1％（41／46）,两组差异有极显著性,对怀女胎孕妇血中SRY基因的未检出率为78．9％（15／19）和94．7％（18／19）,两组差异无显著性。结论：应用PEP法可对胎儿DNA进行全基因组扩增使DNA模板量增加,并使继后的PCR技术检测SRY基因的敏感性明显提高,PEP法是解决母血中胎儿细胞数量太少的途径之一,孕妇血浆中胎儿DNA可成为非创伤性产前诊断的胎儿物质来源。     

孕妇血浆胎儿DNA定量分析在产前性别诊断中的应用

目的 探索一种早期、快速、非创伤性的围生期胎儿性别的诊断方法。方法 应用即时定量TagMan探针DNA扩增技术，检测6l例妊娠8～39周的正常孕妇游离在血浆内的无细胞胎儿DNA的SRY基因，并有针对性的对部分孕妇检测妊娠过程中及产后母体血浆中代表母体与胎儿DNA总和的β-珠蛋白基因和代表胎儿DNA的SRY基因的变化关系。结果 妊娠第8周可在母体外周血浆中检测出胎儿游离DNA，其数量随妊娠时间增加而增高；30例孕妇血浆中游离DNA检则SRY基因阳性，经证实均为男性胎儿，31例SRY基因阴性，经证实均为女性胎儿，符合率为100％，分娩6个月后，SRY基因基本从母体血浆中消失。结论即时定量TagMan探针DNA扩增技术，检测游离在孕妇血浆内的无细胞胎儿DNA，能早期鉴别胎儿性别，为早期诊断某些选择性遗传性疾病开拓了一条新的途径。     

绒毛活检应用于产前诊断36例临床分析

目的 探讨早孕期经宫颈吸取绒毛术的安全性及临床价值。方法 对36例有产前诊断指征的孕妇采用超声引导下经宫颈吸取绒毛术,取得绒毛标本送实验室进行相关检测。结果 1次取材成功为27例,2次取材成功为7例,总成功率94.4%。主要不良反应有腹痛,阴道少量流血。无1例早期发生流产。选择继续妊娠的22例孕妇中有21例足月产出正常活婴,1例于妊娠25周因胎膜早破而流产。结论 早期产前诊断手段,能避免孕中期的引产手术,减少缺陷儿的出生,有助于优生优育。     

绒毛活检应用于产前诊断36例临床分析

目的 探讨早孕期经宫颈吸取绒毛术的安全性及临床价值。方法 对36例有产前诊断指征的孕妇采用超声引导下经宫颈吸取绒毛术，取得绒毛标本送实验室进行相关检测。结果 1次取材成功为27例，2次取材成功为7例。总成功率94.4％。主要不良反应有腹痛，阴道少量流血。无1例早期发生流产。选择继续妊娠的22例孕妇中有21例足月产出正常活婴，1例于妊娠25周因胎膜早破而流产。结论 早期产前诊断手段，能避免孕中期的引产手术，减少缺陷儿的出生，有助于优生优育．     

无创胚胎染色体筛查在染色体非整倍体检测中的应用效果

目的探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)在染色体非整倍体检测中的应用效果。方法收集2017年5月至2019年5月在安徽省妇幼保健院生殖中心拟行体外受精-胚胎移植的364例患者的囊胚培养液,并行NICS筛查。对单囊胚移植且临床确认妊娠的46例患者,根据其妊娠结局不同行不同染色体检查方法:对12例流产的患者行流产组织染色体检查,并以该检查结果为金标准,计算NICS的灵敏度和特异度;对继续妊娠的34例患者行外周血无创产前遗传学筛查(NIPS),比较NICS结果与NIPS筛查结果的差异。结果 12例流产的患者样本中,流产组织染色体检查与NICS检查为染色体非整倍体者均为3例,NICS筛查的灵敏度为100%;在流产组织染色体检查为整倍体的9例样本中,对应的NICS检出2例为非整倍体,其特异度为77.78%,两种筛查方法的一致性分析Kappa值为0.64。继续妊娠的34例患者样本中,NIPS筛查均未检出13、18、21号染色体为非整倍体胚胎,NICS对这3条染色体的筛查结果与NIPS一致。结论 NICS筛查染色体非整倍体有较好的灵敏度,但假阳性率偏高,需进一步技术优化以提高特异性。     

用母体外周血中胎儿游离DNA检测胎儿SRY基因的研究

目的探索从孕妇外周血浆中检测胎儿躲y基因的高灵敏性及高准确性方法。方法应用PcR、实时荧光定量PcR、PEP—PcR技术,检测33例妊娠8～14周的正常孕妇血浆中游离胎儿DNA的脓y基因。组织标本躲y基因检测结果作为性别判定的标准。结果33例孕妇血浆标本检测职y基因,普通PcR检出的灵敏性为58．82％,特异性100％。PEP—PCR的灵敏性为88．24％,特异性100％。荧光定量PCR的灵敏性为88．24％,特异性100％。结论PEP—PCR技术和荧光定量PcR技术均可以提高胎儿游离DNA检测的灵敏度及准确性．可用于进一步染色体疾病的无创性产前筛查研究。     

Noninvasive Prenatal Diagnosis of Fetal Sex by Single-cell PEP-PCR Method

A new method for noninvasive prenatal diagnosis of fetal sex was developed by using single-cell PEP-PCR techniques. Micromamipulation techniques were used to obtain single fetal cells from 273 maternal blood samples. The genome of single cells was preamplified by PEP and SRYgenes were analyzed by PCR method. The SRY genes of 149 samples were detected by the new method among 153 samples carrying male fetus, while 119 out of 120 samples carrying female fetuswere proved negative for SRY genes. The sensitivity and specificity of the new method were 97.39% and 99.17% respectively and the correct rate was 98.17%. The new method has the advantage of high sensitivity and specificity in noninvasive prenatal diagnosis of fetal sex and provides the basis of other researches such as sex-linked inherited diseases.     

荧光原位杂交技术在稽留流产和死胎组织染色体检测中的应用

目的：采用荧光原位杂交(FISH)技术检测稽留流产和死胎组织中的染色体,探讨染色体数目异常与稽留流产、死胎的关系。方法：收集107例稽留流产及死胎组织,应用FISH技术检测13、16、18、21、22、X及Y染色体数目异常。结果:107例样本中有效样本99例,结果异常样本21例,异常比例为21.2%。常染色体数目异常以16、21号染色体三体的发生率最高(8/21),其次为18(7/21)、22(7/21)、13(6/21)号染色体三体。在性染色体中,XXY发生率最高(6/21)。染色体异常在不同性别组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：染色体异常在孕早期、中期即可引起胚胎组织发育异常,导致胚胎停止发育或引起胎儿死亡,发生率与胚胎性别无关;应用FISH技术对早期妊娠及中期妊娠孕妇行染色体检
查,对有不良孕产史、高危产妇有临床指导意义。     

母体血浆游离DNA分子浓度和片段完整性分析

目的应用荧光定量PCR技术研究母体血浆游离DNA分子的浓度和片段的完整性的分子生物学特性。方法提取本院2011年8月42例门诊16～20周妊娠女性和40例进行体检的非妊娠女性的血浆游离DNA,靶基因为lep-tin基因和SRY基因,用荧光定量PCR技术分别对其不同片段进行特异性扩增。leptin基因的扩增片段长度为80、202 bp,SRY基因为83、206 bp,观察其片段完整性和DNA浓度的变化。结果妊娠组和对照组leptin基因80 bp片段长度的DNA浓度平均值分别为681、439拷贝/ml(P<0.01);在片段长度为202 bp的DNA浓度平均值分别为157、91拷贝/ml,中位数为134、85拷贝/ml,表明均有显著性差异(P<0.01)。妊娠组胎儿SRY基因83 bp和206 bp的DNA浓度的平均值为94(38～369)拷贝/ml、80(71～88)拷贝/ml,与妊娠组leptin基因比较,有显著性差异。结论妊娠女性血浆DNA分子浓度明显高于非妊娠正常女性和胎儿游离DNA分子浓度。     

早孕期经宫颈细胞中寻找胎儿细胞及免疫细胞化学研究

目的研究早孕妇女生殖道中胎儿细胞的存在情况,用免疫细胞化学法确证胎儿细胞来源,寻找无创或微创的产前诊断取材方法及时机。方法将健康早孕妇女宫颈取材标本分为两组:HE染色组(Ⅰ)和免疫细胞化学组(Ⅱ);选择通水术中输卵管通畅的健康妇女为对照,分为两组:HE染色组(Ⅲ)和免疫细胞化学组(Ⅳ)。无菌棉拭子术、宫颈粘液吸引术、宫颈管灌洗术和宫腔内灌洗术采集标本,HE染色和免疫细胞化学染色后观察滋养细胞存在情况。结果(1)早孕妇女经宫颈细胞中存在可代表胎儿细胞的滋养细胞;(2)宫颈管灌洗术和宫腔内灌洗术取材方法较好,获得胎儿细胞较多;(3)取材时机为妊娠50～79d。结论早孕妇女生殖道中存在胎儿细胞,在妊娠50～79d用宫颈灌洗术或宫腔内灌洗术取材,是一种较为安全有效的产前诊断技术。     

Outcome of 1500 consecutive chorionic villus samplings

OBJECTIVE: To evaluate the clinical complications and diagnostic problems of chorionic villus sampling. DESIGN: A pragmatic retrospective analysis. SETTING: Tertiary obstetric referrals mostly to private practice; sampling carried out at Royal Prince Alfred Hospital; diagnostic analysis usually at Oliver Latham Laboratory, or the Clinical Immunology Research Centre, Royal Prince Alfred Hospital, New South Wales. PATIENTS: 1500 women in the first trimester of pregnancy requesting prenatal diagnosis because of a risk of chromosomal or inherited genetic disorder in the fetus. INTERVENTIONS: Ultrasound-guided passage of a catheter into the chorion through the cervix. MAIN OUTCOME MEASURES: Incidence of unintended abortion, preterm births, low weight infants and discrepant karyotypes. RESULTS: There were 42 unintended abortions (3.0%), about 0.4% higher than the background abortion rate in women of similar age. Abortion did not occur more frequently in women with vaginal bleeding earlier in that pregnancy. Rates of preterm births and birth of low birthweight infants did not differ from the general population. A second diagnostic test was required in 68 women (4.5%). Mosaicism and tetraploidy were usually confined to the chorion. CONCLUSION: Chorionic villus sampling is an acceptable diagnostic test. Amniocentesis should be offered to patients who show mosaicism or tetraploidy.