CD4+CD25+调节性T细胞对肺结核患者特异细胞免疫的调节作用

目的　探讨调节性T细胞对结核患者特异性细胞免疫的调节作用及其在结核病发生中的意义。方法 采用免疫磁珠从健康对照和结核患者外周血单个核细胞中分离CD4⁺CD25⁺调节性T细胞,观察其对结核患者外周血免疫反应,包括细胞增殖反应和细胞因子IFN-γ及IL-10分泌的影响。结果 体外消除CD4⁺CD25⁺调节性T细胞没有显著影响健康对照PBMC对BCG抗原的增殖反应,但可以显著增强结核患者PBMC对BCG抗原的细胞增殖反应、细胞因子IFN-γ及IL-10的分泌。分离的CD4⁺CD25⁺调节性T细胞能显著抑制结核患者CD4⁺CD25^-T细胞对BCG抗原及抗-CD3的细胞增殖和细胞因子IFN-γ分泌;CD4⁺CD25⁺调节性T细胞也抑制BCG刺激的CD4⁺CD25^-T细胞IL-10的分泌,但不影响抗-CD3刺激的IL-10分泌。结论 CD4⁺CD25⁺调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答促进肺结核病的发生发展。     

不同病因肝衰竭患者外周血单个核细胞HLA-DR基因水平及血Th17和CD4+CD25+Treg细胞百分比的变化

目的探讨不同病因所致肝衰竭患者外周血单个核细胞（PBMCs）HLA-DR mRNA及Th17和CD4⁺CD25⁺Treg细胞水平的变化及其意义。方法本研究纳入肝衰竭患者50例,其中乙型肝炎肝衰竭15例,药物性肝损伤12例,酒精性肝病13例,自身免疫性肝炎10例;慢性乙型肝炎患者17例和正常人10例。采用PCR法检测PBMCs中HLA-DR mRNA水平,使用流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺Treg和Th17细胞百分比。结果乙型肝炎肝衰竭患者HLA-DR mRNA水平为（134.5±15.2）,显著高于药物性肝损伤组的（17.9±1.2）、酒精性肝病组的（19.6±2.0）和自身免疫性肝炎组的[（11.2±1.2）,P<0.05];不同病因肝衰竭患者Th17和CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比[分别为（4.4±0.6）%和（3.9±0.6）%左右]的差异无统计学意义（P>0.05）,但与慢性乙型肝炎[分别为（3.7±0.2）%和（6.1±0.4）%和正常人（2.1±0.7）%和（7.0±0.9）%比,均有显著性差异（P<0.05）;对不同病因肝衰竭患者进行动态观察发现,19例死亡患者CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比呈持续下降,直至死亡,而31例生存患者则逐渐恢复至接近正常水平。结论外周血单个核细胞HLA-DR mRNA水平及Th17和CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比的变化与肝衰竭患者的病情密切相关,可作为判断肝衰竭严重程度及预后的指标。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8+CD28+T淋巴细胞百分比的变化及其临床意义探讨

目的 探讨不同病程阶段的慢性乙型肝炎患者外周血CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比的变化,以及CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比变化与血清HBsAg水平的关系。方法 2018年4月~2018年8月我院诊治的慢性乙型肝炎患者88例,其中免疫耐受期20例,免疫清除期28例,非活动期20例,再活动期20例,另选择健康人20例。使用流式细胞术检测外周血CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比。结果 健康人与免疫耐受期患者外周血CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比分别为（26.1±3.5）%和（26.3±3.4）%,差异无统计学意义（P>0.05）;免疫清除期患者CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比为（40.1±4.7）%,显著高于健康人（P<0.05）;非活动期和再活动期患者外周血CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比分别为（20.3±2.2）%和（26.1±2.2）%,显著低于健康人（P<0.05）;外周血HBsAg低、中、高三组人群外周血CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比分别为（24.0±7.5）%、（28.4±8.9）%和（33.2±8.5）%,各组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论 不同病程阶段的慢性乙型肝炎患者外周血CD8⁺CD28⁺T淋巴细胞百分比存在明显差异,可能与病毒长期刺激机体免疫系统,导致免疫系统功能失调有关,而这种失调可能参与了慢性乙型肝炎的发病过程。     

COPD患者CD4+/CD8+、CD8+CD28+ T淋巴细胞检测意义

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者CD4⁺/CD8⁺、CD8⁺CD28⁺调节性T淋巴细胞检测意义。 方法收集2018年6月至2019年6月于我院就诊收治的98例COPD患者的临床资料,随访18个月,根据患者生存情况分为存活组85例与死亡组13例,采用流式细胞术检测COPD患者CD4⁺/CD8⁺、CD8⁺CD28⁺调节性T淋巴细胞,应用ROC曲线分析CD4⁺/CD8⁺及CD8⁺CD28⁺调节性T淋巴细胞预测COPD患者死亡的价值。 结果两组患者PaO₂、FEV₁占预测值、有创机械通气例数所占比、CD4⁺/CD8⁺以及CD8⁺CD28⁺ T淋巴细胞占比存在统计学差异(P<0.05);多因素Logistic回归分析,PaO₂、FEV₁占预测值、有创机械通气、CD4⁺/CD8⁺、CD8⁺CD28⁺是COPD预后的独立危险因素(P<0.05);CD4⁺/CD8⁺、CD8⁺CD28⁺ T淋巴细胞水平预测COPD患者死亡的最佳截断值分别为1.76%、7.85%,二者联合预测COPD患者死亡的ROC曲线下面积(AUC)为0.913(95%CI: 0.862~0.947),明显高于单项CD4⁺/CD8⁺的AUC值(0.784, 95%CI: 0.602~0.850)及CD8⁺CD28⁺的AUC值(0.795,95%CI：0.596~0.861)。 结论COPD患者CD4⁺/CD8⁺、CD8⁺CD28⁺ T淋巴细胞与患者预后密切相关,二者联合检测对COPD患者预后有意义。     

2017—2021年白银市新确诊HIV感染者病毒载量及CD4+T淋巴细胞检测结果分析

目的 分析新确诊HIV感染者的首次病毒载量及CD4⁺T淋巴细胞检测结果的相关性及影响因素。方法 选取2017年1月—2021年12月甘肃省白银市补充试验为HIV-1抗体阳性,且在本辖区内管理的接受首次病毒载量和CD4⁺T淋巴细胞检测的感染者;分析其病毒载量值和CD4⁺T淋巴细胞计数之间的相关性及影响因素。结果 共有286例感染者符合筛选要求,按首次病毒载量检测值将其分为4组,36例感染者病毒载量<1 000 cps/ml、占12.6%,首次CD4⁺T淋巴细胞计数均数为410.97个/μl;41例感染者病毒载量为1 000～10 000 cps/ml、占14.3%,CD4⁺T淋巴细胞计数均数为342.12个/μl;142例感染者病毒载量为10 000～100 000 cps/ml、占49.7%,CD4⁺T淋巴细胞计数均数为255.63个/μl;67例感染者病毒载量>100 000 cps/ml、占23.4%,CD4⁺T淋巴计...     

白细胞介素33在肝细胞癌患者中的表达及其对CD8+T淋巴细胞功能的调节作用

目的观察肝细胞癌(HCC)患者外周血白细胞介素33(IL-33)的变化,探讨IL-33对HCC患者CD8⁺T淋巴细胞的调节作用和可能机制。方法选择2019年4月—2020年1月陕西省人民医院收治的44例HCC患者和20例健康对照者为研究对象。采集外周血,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),酶联免疫吸附试验检测血浆IL-33及其受体肿瘤抑制素2(ST2)的水平,实时定量PCR法检测PBMC中IL-33和ST2 mRNA相对表达量。纯化CD8⁺T淋巴细胞,使用重组IL-33刺激培养,CCK-8法检测细胞增殖,酶联斑点吸附试验检测穿孔素和颗粒酶B分泌,流式细胞术检测程序性死亡受体-1(PD-1)、淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)表达,比较IL-33刺激前后细胞增殖、毒性分子分泌、免疫检查点分子的变化。CD8⁺T淋巴细胞与HepG2细胞共培养,通过检测乳酸脱氢酶表达计算CD8⁺T淋巴细胞诱导HepG2细胞死亡比例,比较IL-33刺激前后CD8⁺T淋巴细胞杀伤功能的变化。计量资料两组间比较采用t检验或配对t检验,相关性分析采用Pearson分析法。结果HCC组血浆IL-33水平低于对照组[(269.80±63.08)pg/mL vs(339.50±64.43)pg/mL,t=4.072,P<0.001],HCC组PBMC中IL-33 mRNA相对表达量低于对照组(1.07±0.14 vs 2.45±0.87,t=10.250,P<0.001)。血浆ST2水平和PBMC中ST2 mRNA相对表达量在HCC组和对照组之间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。CD8⁺T淋巴细胞比例与血浆IL-33、ST2水平均无明显相关性(P值均>0.05)。HCC组CD8⁺T淋巴细胞分泌穿孔素、颗粒酶B的水平均低于对照组(P值均<0.05),而HCC组CD8⁺T淋巴细胞中PD-1、LAG-3、CTLA-4阳性细胞比例均高于对照组(P值均<0.05)。重组IL-33刺激对两组CD8⁺T淋巴细胞增殖和免疫检查点分子表达均无显著影响(P值均>0.05),但可促进穿孔素、颗粒酶B的分泌(P值均<0.05)。HCC组CD8⁺T淋巴细胞杀伤活性较对照组降低(P<0.05),重组IL-33刺激可提升CD8⁺T淋巴细胞杀伤功能,主要表现为诱导HepG2细胞死亡比例升高(P<0.05),IFNγ和TNFα分泌水平增加(P值均<0.05)。结论HCC患者血浆IL-33水平降低。IL-33可通过促进穿孔素和颗粒酶B的分泌增强HCC患者CD8⁺T淋巴细胞杀伤活性,为HCC治疗提供新的靶点。     

急性期骨关节型布鲁菌病患者外周血 CD4+T淋巴细胞亚群的表达水平及意义分析

目的 探讨急性期骨关节型布鲁菌病患者外周血CD4⁺T淋巴细胞亚群的表达水平及意义。方法 选取2014年1月至2021年5月期间本院收治的98例布鲁菌病患者为研究对象,分为骨关节型组(n=41)和非骨关节型组(n=57),并选取同期来本院体检的80例健康成人作为对照组。比较三组的外周血CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、Th1、Th2等T淋巴细胞的各亚群水平,计算CD4⁺/CD8⁺、Th1/Th2比值。采用Pearson相关分析来探讨骨关节型组患者WOMAC评分与外周血T淋巴细胞亚群水平的相关性。结果 骨关节型组外周血CD4⁺T淋巴细胞、Th1细胞的比例、CD4⁺/CD8⁺比值、Th1/Th2比值显著高于非骨关节型组,骨关节型组外周血CD4⁺T淋巴细胞、Th1细胞的比例、CD4⁺/CD8⁺比值、Th1/Th2比值显著高于对照组,非骨关节型组外周血...     

CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞对新型冠状病毒肺炎的临床分型及其预后的价值

目的探讨CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床分型及其预后的价值。方法纳入2020年1月至3月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的95例COVID-19患者,比较普通型、重型、危重型患者及临床转归为治愈、好转、未愈、死亡患者的CD4⁺T淋巴细胞计数和CD8⁺T淋巴细胞计数。采用受试者操作特征曲线下面积评估CD4⁺T淋巴细胞计数和CD8⁺T淋巴细胞计数对COVID-19临床分型及预后的价值。组间比较采用曼-惠特尼U检验。结果95例COVID-19患者中,普通型68例,重型11例,危重型16例。治疗前普通型、重型和危重型患者的CD4⁺T淋巴细胞计数分别为419(309,612)、267(212,540)和141(77,201)/μL,CD8⁺T淋巴细胞计数分别为238(153,375)、128(96,172)和92(51,144)/μL,差异均有统计学意义(Z=24.322、15.956,均P<0.01)。死亡、未愈、好转和治愈病例的CD4⁺T淋巴细胞计数分别为149(143,349)、315(116,414)、344(294,426)和745(611,966)/μL,CD8⁺T淋巴细胞计数分别为106(43,501)、176(67,279)、194(188,432)和429(276,564)/μL,差异均有统计学意义(Z=36.083、16.658,均P<0.01)。评估危重型患者的CD4⁺T淋巴细胞计数最佳临界值为237/μL,曲线下面积为0.911[95%可信区间(confidence interval, CI) 0.833~0.989,P<0.01],灵敏度和特异度分别为86.1%和87.5%;评估(危)重型患者治疗有效性的CD4⁺T淋巴细胞计数最佳临界值为405/μL,曲线下面积为0.863(95%CI 0.727~0.999,P=0.001),灵敏度和特异度分别为78.6%和74.6%。结论COVID-19的病情可能随CD4⁺T淋巴细胞计数和CD8⁺T淋巴细胞计数减少呈加重趋势,CD4⁺T淋巴细胞计数可用作COVID-19临床分型诊断和评估(危)重型病例预后的指标。     

AECOPD合并肺炎患者外周血CD16+/56+NK细胞及IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ表达水平及意义分析

目的 探究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并肺炎患者外周血CD16⁺/56⁺自然杀伤(NK)细胞、白介素-12p70(IL-12p70)、白介素-10(IL-10)、白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)表达及临床意义。方法 选取274例AECOPD患者，根据是否合并肺炎分为单纯AECOPD组89例、AECOPD合并肺炎组185例(根据肺炎严重程度分为重症组85例、非重症组100例),检测患者入院时外周血CD16⁺/56⁺NK细胞及IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ表达水平。结果 AECOPD合并肺炎组血清IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ水平均高于单纯AECOPD组，且重症组均高于非重症组(P<0.05),但不同组外周血CD16⁺/56⁺NK细胞比较均差异无统计学意义(P>0.05);Spearman秩相关显示，AECOPD患者血清IL-12p70与IL-10、IL-4、IFN-γ表达呈正...     

调节性T细胞在肝细胞癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 探讨在不同病理分期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者外周血中CD4⁺CD25⁺CD127^LOW Treg的含量变化及临床意义。方法 收集60例HCC患者的外周抗凝血作为HCC试验组并进行Edmondson-steiner病理分期,20名健康体检者的外周抗凝血作为健康对照组,检测两组CD4⁺CD25⁺CD127^LOW Treg水平。结果 HCC患者外周血中Treg占CD4⁺T细胞的百分率显著高于健康对照组(P<0.01);且在HCC不同分期中,Ⅲ、Ⅳ期患者外周血中Treg占CD4⁺T细胞的百分率显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05)。结论 在HCC患者外周血中,Treg随着疾病的发生发展而逐渐增多,且在Ⅲ、Ⅳ期快速增殖,其可能与肿瘤细胞免疫逃逸密切相关。     

原发性肝癌患者外周血CD4+T、CD8+T、Tc17、Th17和Treg淋巴细胞的变化及其意义

目的 了解原发性肝癌(PLC)患者外周血CD4+T、CD8+T、Tc17、Th17和Treg淋巴细胞的变化.方法 2018年6月～2019年12月我院诊治的PLC患者83例(巴塞罗那临床肝癌分期A期25例,B期23例,C期18例,D期17例)和健康人35例,采用流式细胞技术检测外周血CD4+T、CD8+T及Tc17(C...     

余甘子提取物对非酒精性脂肪性肝病大鼠外周血Treg细胞及肝组织LXRα/FAS通路表达的影响*

目的 探讨余甘子提取物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠外周血Treg细胞及肝组织LXRα/FAS通路表达的影响。方法 将48只SD大鼠随机分对照组、模型组、多烯磷脂酰胆碱及小剂量、中剂量和大剂量余甘子处理组,在造模成功后,给予对照组生理盐水灌胃,给予模型组多烯磷脂酰胆碱处理,另给予不同剂量的余甘子灌胃处理,连续给药6周。采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-17和IL-10水平,使用流式细胞术检测血CD4⁺IL-17⁺和CD4⁺CD25⁺Treg细胞百分比,采用WB法检测肝组织LXRα和FAS蛋白表达。结果 与模型组比,大剂量余甘子提取物处理组肝组织病理学损伤显著改善,血清ALT、AST、TC、TG水平显著降低(P<0.05);血清TNF-α和IL-17水平显著降低,分别为(34.7±0.9)pg/ml和(3.2±0.2)pg/mL,而IL-10水平显著升高,为(4.8±0.2)pg/mL(P<0.05);大剂量余甘子处理组CD4⁺IL-17⁺百分比为(1.1±0.6)%,显著低于模型组[(1.9±0.4)%,P<0.05],CD4⁺CD25⁺Treg百分比为(1.5±0.6)%,显著高于模型组[(0.9±0.2)%,P<0.05];小、中、大剂量余甘子提取物处理组肝组织LXRα和FAS蛋白表达显著减弱[分别为(1.8±0.1)和(2.0±0.2),P<0.05]。结论 余甘子提取物可改善NAFLD大鼠肝组织病理学损伤,可能与其对炎性细胞因子、Th17/Treg细胞和LXRα/FAS通路因子的表达产生了某种影响有关。     

Colgalt2敲除对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠CD4T细胞记忆和归巢的影响

目的 初步探索糖基转移酶Colgalt2基因敲除对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠模型中CD4 T细胞记忆和归巢的影响.方法 随机抽取无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级6～8周的基因敲除...     

囊性包虫病患者外周血PD-1在Treg细胞上的表达与Foxp3、TGF-β和IL-10的相关性研究

目的 通过检测囊性包虫病(cystic echinococcosis,CE)患者外周血中Treg细胞表面PD-1的表达与Treg细胞相关因子Foxp3、TGF-β和IL-10的表达情况,探讨负性共刺激分子PD-1与Treg细胞在CE患者中的关系及其对该疾病发生发展的作用。方法 选取30例CE患者和30例健康对照人群,用流式细胞术检测CE患者和健康对照人群外周血中PD-1⁺CD4⁺CD25⁺Treg细胞的比例;实时荧光定量PCR法分别检测CE患者和对照人群外周血单个核细胞中PD-1和Foxp3 mRNA的表达;ELISA法检测CE患者和对照人群血清中TGF-β和IL-10的水平;Pearson相关法分析CE患者外周血中PD-1的表达与Foxp3、TGF-β和IL-10的相关性。结果 与对照人群相比,CE患者外周血中PD-1⁺CD4⁺CD25⁺Treg细胞的比例均显著升高;外周血单个核细胞中PD-1和Foxp3 mRNA水平显著升高;血清中TGF-β和IL-10水平显著升高;CE患者外周血PD-1mRNA与Foxp3 mRNA表达水平正相关;PD-1⁺CD4⁺CD25⁺Treg细胞与TGF-β和 IL-10的水平均正相关。结论 负性共刺激分子PD-1在Treg细胞上高表达与Treg细胞及其因子TGF-β和 IL-10的产生和功能发挥相关,可能促进细粒棘球蚴的生长发展。     

CD3−CD4−CD8−CD56−CD19−CD14− cells and CD3+CD8 dull-positive cells produce IL-4 in AIDS patients

We used flow cytometry to identify the presence of intracellular cytokines (cytoflow) and analyse the production of IL-4 in peripheral blood from AIDS patients who have practically no CD4⁺ T cells. We found that IL-4 was produced by CD3⁻CD4⁻CD8⁻CD56⁻CD19⁻CD14⁻ cells and CD3⁺CD8 dull-positive cells in AIDS patients. Moreover, CD3⁻CD4⁻ CD8⁻CD56⁻CD19⁻CD14⁻ cells had helper activity for immunoglobulin synthesis. These findings indicate that instead of CD4⁺ T helper cells, C3⁻CD4⁻CD8⁻CD56⁻ CD19⁻CD14⁻ cells and CD3⁺CD8 dull-positive cells may be an important source of IL-4 in a variety of immune responses for AIDS patients.     

In pregnant mice, the infection of Toxoplasma gondii causes the decrease of CD4+CD25+ -regulatory T cells

Acute maternal infection with Toxoplasma gondii during pregnancy is associated with adverse pregnancy outcomes. Although previous reports have indicated that T. gondii may result in abortion without direct transmission of the parasite to the foetus, the molecular mechanism remains unclear. CD4⁺CD25⁺-regulatory T cells are known to be involved in maternal tolerance toward the foetus-bearing alloantigens. With a model of pregnant mice infected with T. gondii , we found that Foxp3 mRNA expression levels in both splenocytes and placenta were reduced markedly during the process of infection. Furthermore, the numbers of splenic CD4⁺CD25⁺-regulatory T cells and placental Foxp3⁺ cells decreased synchronously in the infected mice, and the reduction of splenic CD4⁺CD25⁺-regulatory T cells were associated with apoptosis induced by the infection. Additionally, injection of pregnant mice with excretory–secretory antigens (ESA) of T. gondii also resulted in foetal loss, which could be partly prevented by adoptive transfer of CD4⁺CD25⁺-regulatory T cells from normal pregnant mice. These data suggest that foetal loss caused by T. gondii can be independent of vertical infection and that the decrease of CD4⁺CD25⁺-regulatory T cells during infection may represent a previously unrecognized mechanism for the pathogenesis of abortion caused by this parasite.