以血管内皮生长因子及血管内皮生长因子受体为靶点的抗肿瘤血管生成的治疗进展

肿瘤生长、浸润和转移都依赖于肿瘤血管生成,而肿瘤血管生成又受多种因子影响.血管内皮生长因子(VEGF)是最重要的血管生成因子,可特异性作用于血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR),通过促进内皮细胞增殖,增加血管通透性,而诱导肿瘤血管生成.因而以VEGF及VEGFR为靶点抗肿瘤血管生成已越来越成为人们研究的热点.对以VEGF及VEGFR为靶点抗肿瘤血管生成的治疗进展作一综述.     

血管内皮生长因子与胃癌的研究进展

肿瘤的生长、侵袭和转移是受多因素影响的复杂过程，其前提和基础是肿瘤细咆的不断增殖，而肿瘤生长和转移的必备条件是血管生成。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)能特异性地作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞分裂增殖及新生血管的形成，同时还可以增加血管通透性。近年来其在实体瘤侵袭转移中的作用备受关注。现就血管内皮生长因子在胃癌中的研究进展作一综述。     

美托洛尔对大鼠缺血心肌血管新生及血管内皮生长因子表达的影响

目的: 观察美托洛尔对大鼠缺血心肌血管新生和缺血心肌血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法: 运用大鼠心肌缺血模型,随机分为给药组和模型组,并记录心率.用免疫组织化学方法检测缺血心肌中内皮细胞数、毛细血管密度、VEGF蛋白质的表达,用RT-PCR方法检测VEGF mRNA的表达.结果: (1)与模型组比较,给药组大鼠缺血心肌毛细血管密度和内皮细胞数均明显增加(P＜0.01),其心率明显降低(P＜0.01);(2)与模型组比较,给药组大鼠缺血心肌VEGF蛋白质及mRNA的表达均明显增加(P＜0.01).结论: (1)美托洛尔能促进大鼠缺血心肌的血管新生;(2)美托洛尔减慢心肌缺血大鼠的心率和上调VEGF的表达可能是其促大鼠缺血心肌血管新生的机制之一.     

夏枯草抑制肿瘤血管新生的作用

目的 观察夏枯草醇提物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移、血管形成、VEGF、VEGFR的影响,探讨其抑制肿瘤血管新生作用机制. 方法用MTT、划痕损伤实验,观察夏枯草对HUVEC增殖、迁移;用管腔形成实验,检测夏枯草对血管形成的影响;RT-PCR检测夏枯草对HUVEC血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮...     

鼻息肉组织中肝细胞生长因子及血管内皮生长因子的表达

目的:检测鼻息肉组织中肝细胞生长因子(HGF)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法:采用免疫组织化学方法分别检测30例鼻息肉标本和20例正常下鼻甲黏膜标本中HGF与VEGF的表达.结果:鼻息肉组织中可见大量嗜酸性粒细胞浸润.鼻息肉组织中HGF和VEGF蛋白的阳性表达率分别为83.3%和76.7%,均高于正常对照组(30.0%和10.0%,P<0.05),且在鼻息肉血管内皮细胞及间质浸润的炎症细胞中2者的表达呈正相关(r=0.630,P<0.05;r=0.514,P<0.05).结论:鼻息肉组织中HGF和VEGF的表达增强,提示2者可能协同参与鼻息肉的形成.     

血管内皮生长因子受体Flt-1结合小肽抑制肿瘤生长的实验研究

目的：检测从十二肽库中筛选获得的能与血管内皮细胞生长因子（VEGF）受体Flt-1结合的小肽的生物学活性。方法：免疫细胞化学方法检测小肽融合蛋白DHFR-F56/F90与人脐静脉内皮细胞的结合活性;鸡胚尿囊膜血管增生抑制实验检测DHFR-F56/F90能否抑制鸡胚新生血管形成;裸鼠成瘤实验检测DHFR-F56/F90对荷瘤裸鼠中肿瘤的生长抑制;免疫组织化学方法检测DHFR-F56/F90能否定位于肿瘤组织。结果：小肽融合蛋白DHFR-F56/F90能与人脐静脉内皮细胞结合,DHFR-F56能抑制鸡胚尿囊膜新生血管的形成,且DHFR-F56能与肿瘤细胞结合,促进肿瘤组织坏死及显著抑制肿瘤生长。结论：十二肽F56是VEGF结合Flt-1的有效拮抗剂,具有抑制VEGF诱导的新生血管形成而抗肿瘤生长和转移的潜在应用前景。     

血清血管内皮生长因子检测在大肠癌患者中应用

肿瘤血管生成是恶性肿瘤生长、浸润和转移的重要病理过程,肿瘤组织的血管形成由多种血管生长因子调控,其中血管内皮生长因子(VEGF)是目前所知的直接作用于血管内皮细胞的生长因子,可特异性地促进内皮细胞分裂、增值和移动,增加血管通透性,在血管形成中起重要作用,是近期受研究重视的血管因子之一[1].经初步实验发现血清VEGF对直/结肠癌的诊断、分级、疗效评估等有重要意义,可为直/结肠癌患者的诊治提供参考性指标.     

血管内皮生长因子家族及其受体与肿瘤血管新生

血管新生在肿瘤的生长及转移过程中发挥着极为重要的作用,而血管内皮生长因子(VEGF)是肿瘤血管新生过程中重要的促进因子,其能够与血管内皮细胞上相应的受体结合刺激内皮细胞增殖、迁移,进而促进肿瘤血管新生。阻断VEGF与其相应的受体结合可以抑制肿瘤的生长。目前研究以VEGF及其受体为靶点的血管新生抑制剂如单克隆抗体、多靶点酪氨酸激酶抑制剂以及小干扰RNA等给肿瘤的治疗带来了新希望。     

人血管内皮细胞生长因子165基因转染大鼠内皮祖细胞的实验研究

目的探讨人血管内皮细胞生长因子165（hVEGF165）基因转染骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）及对其影响。方法体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓EPCs,ELISA检测转基因EPCs表达VEGF蛋白,MTT法检测对其增殖的影响。结果FITC-UEA-I和DiI-ac-LDL荧光双染证实分化的EPCs,脂质体介导pcDNA3-hVEGF165质粒转染组EPCs培养基上清中表达VEGF,hVEGF165基因转染促进EPCs增殖,注射转基因EPCs的大鼠皮下局部血管增加。结论hVEGF165基因可成功转染EPCs,并且具有血管内皮增殖刺激活性,为进一步研究hVEGF165基因修饰EPCs治疗血管内膜损伤性疾病提供实验依据。     

乳腺癌血管内皮生长因子检测及其临床意义

血管生成是实体肿瘤生长的必要条件 ,理论上如果没有血管生成 ,实体瘤生长直径不会超过 2 m m,只有血管化的肿瘤才能生长到具有临床意义的大小。新生的血管为肿瘤提供营养 ,带走代谢产物 ,为肿瘤生长创造有利条件。在肿瘤生长过程中会产生一些血管因子 ,如血管内皮生长因子 (VEGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF)、转移生长因子 (TGF)、血小板衍生生长因子 (PDGF)等 ,刺激肿瘤周围血管的生长 ,其中VEGF是刺激血管内皮细胞增殖中最重要、最直接的因子 ,VEGF通过与其相应的受体结合发挥其促血管内皮增殖作用 ,它在肿瘤的生长和转移中起重…     

Angiogenesis and developmental expression of vascular endothelial growth factor in rat lingual papillae

We used an embryological approach to investigate development and microvasculature of lingual papillae, and expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the rat tongue. Temporal changes in the rat tongue at each developmental stage from embryonic day 13 (E13) to postnatal day 7 (P7) were observed by intravascular injection of India ink and immunohistochemistry using a VEGF antibody. At E13, the primordium of circumvallate papilla was observed among various lingual papillae. VEGF was widely expressed at E16 on the proliferated epithelium and the connective tissue core of circumvallate papilla. Invasion by capillary sprouts forming the lingual papillae was observed at E17. The primordium of fungiform papillae was observed at E14. VEGF was strongly expressed around the basal cells of proliferated epithelial tissues of fungiform papillae at E17. At E18, blind-ended capillary sprouts invaded into connective tissue cores from subepithelial sinusoidal capillaries by sprout angiogenesis. At P1, the invading capillary sprouts formed loops by vascular remodeling. The primordium of foliate papillae was observed at E16. VEGF was slightly expressed, but uniformly at E17 on the epithelium, muscle cells, and fibroblasts of foliate papillae. At E18, vascular density was increased by angiogenesis. The primordium of filiform papillae was observed at E17. It was the last to develop among the lingual papillae. VEGF was expressed in the cytoplasm of grown epithelial cells of filiform papillae at E19, and in blind-ended capillary sprouts formed by angiogenesis in the connective tissue cores at E20. The capillary sprouts formed loops by vascular remodeling at P1. Consequently, VEGF was expressed on the papillary epithelium and connective tissue cores of papillae during development of the papillary epithelium, and invasion by capillary sprouts into each papillae was observed thereafter. These results suggest a close relationship between expression of VEGF and angiogenesis of lingual papillae in the rat.     

RhoA在缺氧诱导的乳腺癌细胞VEGF分泌和血管内皮细胞增殖、迁移及管腔形成中的作用

目的观察RhoA在缺氧诱导下对乳腺癌细胞MCF-7分泌VEGF水平的影响,以及对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖、迁移和管腔形成的作用。方法 ELISA检测缺氧条件下MCF-7细胞中RhoA的活化与失活对VEGF分泌水平的影响;建立MCF-7/HUVEC共培养模型,观察在缺氧刺激下MCF-7细胞中RhoA活性的变化对HUVEC增殖、迁移和管腔形成的影响。结果缺氧条件下,活性RhoA可以促进MCF-7细胞VEGF分泌,沉默RhoA可以抑制VEGF分泌;在共培养模型中,当MCF-7细胞中RhoA活化时,可以促进HUVEC增殖、迁移和管腔形成,而MCF-7细胞中RhoA沉默时,则HUVEC的上述生物学行为受到抑制。结论在缺氧刺激下,RhoA可能通过调控肿瘤细胞VEGF的表达水平,间接影响HUVEC的增殖、迁移和管腔形成能力,从而参与肿瘤新生血管的形成过程。     

MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF自分泌及体外成管作用的影响

 目的 研究人乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及体外成管作用的影响,探讨肿瘤细胞源exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用。方法 低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF的变化水平;Western blot技术检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF、VEGFR2及p VEGFR2的蛋白表达情况;RT PCR法检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达情况;观察HUVEC与exosome共培养24 h后的体外成管能力。 结果 HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF为(110.851±18.404)pg/mL,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);Western blot结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF和p VEGFR2的蛋白表达水平均增加(P＜0.05);RT PCR结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达水平增加(P＜0.05);体外成管实验显示,exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力(P<0.05)。结论 乳腺癌MDA MB 231细胞源exosome促进了血管内皮细胞VEGF的表达及分泌,激活了血管内皮细胞VEGF/VEGFR2自分泌环并提高了血管内皮细胞的体外成管能力,对促肿瘤血管生成有一定的调控作用。     

环氧化酶-2对肺癌血管内皮生长因子及血管形成的影响

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）对非小细胞肺癌（NSCLC）血管内皮生长因子（VEGF）的表达及血管生成的影响。方法应用免疫组化技术检测NSCLC中COX-2、VEGF的表达和微血管密度（MVD）,采用噻唑蓝（MTT）法观察阿司匹林对肺腺癌A549细胞增殖的影响,采用免疫细胞化学法观察阿司匹林对A549细胞VEGF表达的影响。结果（1）COX-2在NSCLC组织中的阳性表达率为62.5%,COX-2表达与VEGF表达显著相关（r=0.62,P〈0.05）,COX-2阳性组MVD（49.55&#177;17.18）高于COX-2阴性组（34.65&#177;22.25）,COX-2和VEGF均阳性组MVD（51.71&#177;15.42）明显高于两者均阴性组（28.70&#177;18.94）,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。（2）阿司匹林呈剂量依赖方式抑制A549细胞增殖,48h细胞最大抑制率达65.49%,10mmol/L阿司匹林作用A549细胞48h后,A549细胞VEGF表达明显降低（作用前后分别为0.109&#177;0.012与0.517&#177;0.034）,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论NSCLC组织中存在COX-2的高表达,其通过增加VEGF表达促进肺癌血管的形成,进而促进肺癌的进展;阿司匹林可抑制A549细胞增殖,其作用可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

抗VEGF抗体对骨肉瘤OS-732细胞血管生成及其肿瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的：探讨阻断血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF)的血管生成作用对骨肉瘤OS-732细胞及血管内皮细胞增殖、凋亡的影响。方法：应用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型,通过解剖显微镜血管计数,光镜HE染色,原位末端标记及PC-NA免疫组化检测观察VEGF抗体对骨肉瘤血管生成及肿瘤增殖,凋亡状态的影响。结果：VEGF抗体组肿瘤区血管数目及瘤细胞数显著低于PBS对照组,肿瘤细胞凋亡指数显著高于PBS对照组,增殖指数两组差异不明显,同时VEGF抗体组凋亡的微血管内皮细胞增多,增殖期微血管内皮细胞少见。结论：VEGF抗体能显著抑制骨肉瘤OS-732血管生成,抑制内皮细胞增殖,促进内皮细胞凋亡,可能是VEGF抗体发挥抗血管生成作用的途径之一,并可能通过抑制血管形成而促进肿瘤细胞凋亡,最终达到抑制瘤细胞生长的作用。     

姜黄素抑制血管生成作用的实验研究

目的研究姜黄素对血管生成和内皮细胞生长的影响。方法利用生长因子(VEGF和bFGF)诱导的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管增生模型观察姜黄素对血管生成的影响；利用培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，采用MTT法观察不同时间、不同浓度姜黄素对内皮细胞增殖的抑制作用。结果姜黄素能明显抑制VEGF和bFGF诱导的CAM小血管生成，对内皮细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素具有显著的抗血管生成作用。     

骨髓单个核细胞培养上清促进内皮细胞增殖作用

目的：探讨体外培养骨髓细胞分泌促血管生长因子的能力及培养上清对内皮细胞增殖的影响。方法：采用密度梯度离心法分离出大鼠骨髓单个核细胞进行体外培养,并连续收集4周培养上清。酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定上清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）;以含有不同浓度上清的培养液培养人脐静脉内皮细胞,分析单个核细胞培养上清对内皮细胞增殖的影响。结果：加入单个核细胞培养上清各组MTT比色光密度值较对照组明显增加（P<0.05）。第1,2,3,4周骨髓单个核细胞体外培养上清中VEGF分别为（24.40±7.99,89.28±5.13,115.24±10.08,157.00±15.64）pg/ml。结论： 骨髓单个核细胞培养上清可促进体外培养的人脐静脉内皮细胞增殖,体外培养的骨髓单个核细胞可持续分泌VEGF。     

VEGF、OPN在胰腺癌中的研究进展

胰腺癌为临床较常见的恶性肿瘤,早期难以发现,晚期常有周围组织、血管神经的浸润和淋巴结转移。肿瘤的发生、发展和转移与肿瘤组织内血管壁的通透性增加以及新生血管生成密切相关。血管内皮生长因子是最主要的血管生成因子,可直接作用于血管内皮细胞而增加血管通透性、促进血管内皮细胞增殖。骨桥蛋白是近年来发现的一种糖磷酸化蛋白,是一种转移相关蛋白,能够促进肿瘤组织细胞的生存、增殖和迁移,参与肿瘤组织中毛细血管床的形成,在肿瘤的发展及转移过程中发挥着重要作用。     

VEGF基因在兔骨髓基质细胞中的表达及活性测定

目的 探讨人血管内皮细胞生长因子(VECF)基因修饰的免骨髓基质细胞对VEGF基因的表达及表达产物的生物学活性。方法 制备真核表达质粒pAdCMV-VEGF165,以Superfect转染试剂介导VFGF基因转染兔骨髓基质细胞,收获转染后24h至6d的转染上清和细胞,采用RT-PCR技术、免疫组化SABC法检测转染细胞中外源性VECF165基因的转录及表达,用血管内皮细胞增殖试验测定转染细胞培养上清中VEGF的生物活性。结果 VEGF基因转染的兔骨髓基质细胞可有效转录VEGF165,其分泌于培养上清中的表达产物可促进血管内皮细胞增殖,具有很强的生物活性。结论 VEGF基因转染的兔骨髓基质细胞可有效表达具有生物活性的VEGF。     

重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子体外抗血管内皮细胞增殖的活性

目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子（VEGI）体外抗血管内皮细胞增殖的活性。方法：MTT法检测重组人可溶性VEGI对血管内皮细胞及肿瘤细胞增殖的抑制活性。结果：在体外,重组人可溶性BEGI可强烈抑制人脐静脉内皮细胞ECV304、大鼠肺源毛细血管内皮细胞（MPCEC）及新生牛主动脉内皮细胞（BAEC）的增殖,不能报制黑色素瘤细胞B－16和小鼠成纤维细胞L－929的增殖。结论：重组人可溶性VEGI能作用于不同来源的血管内皮细胞,而对肿瘤细胞增殖无抑制作用,提示其可能通过抗肿瘤新生血管生成而发挥抗肿瘤作用。