结直肠腺瘤—腺癌组织微阵列制作及上皮钙黏附素和β—链接素的检测

目的 建立结直肠癌组织微阵列,探讨上皮钙黏附素和β－链接素的表达在结直肠癌发生、发展过程中的作用。方法 应用微阵列制作机制作结直肠正常黏膜－腺瘤－腺癌微阵列,用免疫组织化学法检测组织微阵列22例结直肠腺瘤和结直肠癌63例中上皮钙黏附素和β－链接素的表达。结果 制作了85例患的结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列;原发各层腺癌组织及其转移灶中出现不同程度的β－链接素核阳性表达,与正常黏膜相比（远处转移灶除外）,β－链接素细胞核内表达增加,差异有显性意义（P＜0．01）;上皮钙黏附素和β－链接素膜表达在结直肠癌的发生、发展过程中呈下降趋势,肌层内癌、浆膜层内癌和淋巴结转移癌灶与正常黏膜、腺瘤及黏膜、黏膜下癌相比,β－链接素膜表达减少（P＜0．01）,差异有显性意义;正常黏膜与各癌灶,淋巴结转移灶与原发各层癌组织之间上皮钙黏附素的膜表达差异有显性意义（P＜0．05）。结论 结直肠腺瘤－腺癌组织微阵列的建立使得结直肠癌相关基因或蛋白的筛选工作快捷、简便,黏附分子上皮钙黏附素和β－链接素的表达水平及表达部位异常与结直肠癌的发生、浸润转移有密切的关系。     

结直肠癌组织CDK8及TGF-β1 mRNA和蛋白表达及与其临床病理因素相关性分析

目的研究细胞周期素依赖性激酶8(CDK8)及转化生长因子-β1(TGF-β1)在结直肠癌组织中的表达及与其临床病理因素的相关性。方法采用荧光定量PCR及免疫组化方法检测40例结直肠癌组织及其癌旁组织中CDK8和TGF-β1的mRNA及蛋白表达,以及它们在结直肠癌组织中表达的相关性。结果结直肠癌组织中CDK8和TGF-β1的mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P0.05);CDK8 mRNA的表达水平与结直肠癌淋巴结转移以及分期和肿瘤浸润有关(P0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小及分化程度无关(P0.05)。TGF-β1的mRNA的表达水平与结直肠癌淋巴结转移以及分期、浸润程度和肿瘤大小相关(P0.05),与患者年龄、性别和肿瘤分化程度无关(P0.05)。结直肠癌组织中CDK8 mRNA及TGF-β1 mRNA表达呈正相关关系(r=0.387,P=0.048)。结论CDK8和TGF-β1表达上调可能与结直肠癌的发生发展相关,且二者存在协同作用,可能与结直肠癌生物学行为及预后有关。     

TGF-β1在结直肠腺瘤与非肿瘤性息肉中的表达差异及其与细胞增殖的关系

目的:探讨结直肠腺瘤与非肿瘤性息肉中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达差异及其与细胞增殖的关系.方法:采用免疫组化S-P法检测36例结直肠腺瘤、36例非肿瘤性息肉、13例腺癌和11例正常黏膜组织中TGF-β1和Ki-67的表达;采用原位杂交技术检测TGF-β1mRNA.结果:TGF-β1蛋白及其mRNA和Ki-67在结直肠腺瘤组的表达均高于非肿瘤性息肉组(P＜0.05);结直肠腺瘤组PI值与TGF-β1的表达强度呈显著正相关(rs = 0.557, P＜0.01).结论:腺瘤组织中TGF-β1与细胞增殖活性密切相关,TGF-β1在腺瘤的高表达和非肿瘤性息肉的低表达可能是二者恶变趋势差异的重要分子机理之一.     

转化生长因子β信号转导与结直肠癌

转化生长因子β(TGF-β)是一类多功能的细胞因子,参与调节细胞的增殖、分化、发育和凋亡等多种生命活动，笔者综述了近年来有关TGF-β信号传导途径的研究进展，阐述了该信号传导途径中的各组成部分，包括配体、受体及Smads蛋白等的异常与结直肠癌的发生、发展及其生物学特征的关系。     

直肠癌P27基因表达及血清转化生长因子β1水平的变化

目的 探讨直肠癌中p27的表达和血清转化生长因子β1(TGF-β1)的水平。以及TGF-β1对p27的调控关系。方法 对37例直肠癌、22例直肠腺瘤和19例正常对照者用免疫组化二步法检测其p27的表达情况。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TGF-β1水平。结果 p27在正常直肠组织和直肠腺瘤组织中呈高表达。其表达阳性率分别为89．47％和90．91％，阳性表达定位于细胞核；直肠癌组织中p27表达阳性率降为64．87％，与前两者比较，差异有统计学意义(P=0．025)，且伴有p27细胞浆表达者占45．83％。血清TGF-β1在正常对照组的表达阳性率为21．05％，直肠腺瘤组为27．27％，而直肠癌组则升至51．35％(P=0．045)。p27的表达与直肠癌的分化程度、淋巴结转移和浸润深度有关；血清TGF-β1表达水平与直肠癌的淋巴结转移、浸润深度和CEA水平有关。血清TGF-β1阴性组中p27表达阳性率为88．89％，血清TGF-β1阳性组中p27表达阳性率降为42．11％。差异有显著性意义(Mantel-Haenszel χ^2=6．755，P=0．009)。结论 p27对于判断直肠癌的恶性程度和预后有指导作用，血清TGF-β1可作为直肠癌的辅助诊断指标，TGF-β1可下调直肠癌中p27的蛋白表达。     

转化生长因子-β通路在早期创伤性骨性关节炎软骨下骨的动态变化

目的 探讨转化生长因子-β(TGF-β)信号通路在早期创伤性骨性关节炎软骨下骨的动态改变情况,以揭示其在骨性关节炎致病中所起的作用. 方法 取30只雄性SD大鼠,随机分为实验组(n=15)和对照组(n=15).实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带,对照组仅切开关节囊.于术后l、2、4周取右膝关节标本,采用全基因表达谱芯片技术研究软骨下骨的全基因表达,利用信号通路分析、差异基因分析的方法分析TGF-β信号通路的动态改变情况.结果 术后1、2周实验组与对照组TGF-β信号通路比较差异均有统计学意义(P＜0.05),术后4周两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).与TGF-β信号通路相关的差异表达基因包括:激活素A受体-1、激活素A受体-2b、抗苗勒管激素、骨形态发生蛋白4、骨形态发生蛋白-5、骨形态发生蛋白受体-la、软骨低聚物基质蛋白、核心蛋白多糖、干扰素γ、抑制素β-a、头蛋白、SMAD特异性雌三醇泛素蛋白连接酶2、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β1受体、凝血酶敏感素-2、凝血酶敏感素4前体、DNA结合抑制物4,FYVE区包含锌指类似物-16前体. 结论 TGF-β信号通路在早期创伤性骨性关节炎的软骨下骨改变中起重要作用,其作用具有时间特殊性.     

结直肠癌组织中Twist和E-钙黏蛋白的表达及其相关性

目的观察Twist和E-钙黏蛋白（E-cadherin）在结直肠癌中的表达,分析两者与患者临床病理指标的关系,并探讨其在结直肠癌发生、发展中的作用以及与患者预后的关系.方法采用免疫组化EliVisionTM Plus法检测60例结直肠癌、20例结直肠腺瘤和20例癌旁正常肠黏膜中Twist蛋白的表达情况.结果 （1）Twist在结直肠癌组织中的阳性率（56.7%）显著高于腺瘤组织（10%）和癌旁正常黏膜组织（0%）;E-cadherin在结直肠癌组织中的阳性率（35%）显著低于结直肠腺瘤（70%）和癌旁正常黏膜组织（100%）;（2）Twist和E-cadherin在结直肠癌异常表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关,与年龄、性别及肿瘤大小无关.结论 Twist是结直肠癌浸润和早期转移的重要生物学指标,联合检测Twist和E-cadherin有助于判断结直肠癌的转移和预后;Twist将来可能成为结直肠癌靶向治疗的一个新靶点.     

Skp2、p27kip1蛋白在结直肠癌中的表达及其意义

目的 探讨Skp2蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用及其与p27kip1蛋白表达的关系.方法 应用免疫组织化学法结合计算机图像分析检测结直肠癌(80例)、腺瘤(20例)、正常组织(20例)中Skp2蛋白和p27kip1蛋白的表达.结果 由正常结直肠黏膜、腺瘤到癌,Skp2阳性表达率为0%、55%、93.8%,呈上升趋势(P＜0.01);p27kip1阳性表达率为100%、95%、87.5%,呈下降趋势(P＜0.05).结直肠癌中Skp2表达与p27kip1表达呈负相关(r=-0.311,P＜0.01).Skp2蛋白在癌组织中的表达与结直肠癌的分化程度、淋巴转移有关(P＜0.05).结论 结直肠癌skp2蛋白过表达与p27kip1蛋白降解有关,Skp2蛋白过表达可能是结直肠癌发生、发展的原因之一.     

miR-150 和miR-134 在结直肠癌及腺瘤中的表达

目的：探讨miR-150和miR-134在结直肠癌与结直肠腺瘤中的表达及意义。 方法：采用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）检测40例结直肠癌组织及其癌旁正常组织与29例结直肠腺瘤组织中miR-150和miR-134表达,并分析两者与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果：与癌旁正常组织比较,miR-150在腺瘤组织中表达明显升高,而在癌组织中表达明显降低（均P<0.05）;miR-134在腺瘤组织中表达明显降低（P<0.05）,但在癌组织中表达差异无统计学意义（P>0.05）;miR-150表达水平与结直肠癌的组织学类型及分化程度有关（P=0.033,P=0.041）;miR-134表达水平与结直肠癌的各项临床病理因素均无明显关系（均P>0.05）。 结论：miR-150在结直肠癌中表达下调,提示其可能有潜在的抑癌作用,miR-150和miR-134在结直肠腺瘤中的表达均发生异常,提示两者均可能与结直肠腺瘤的发生密切相关。     

Smad蛋白家族与TGF—β信号转导

转化生长因子 β(transform ing growth factor- β,TGF-β)是一个对多种细胞具有刺激或抑制作用的多功能分子。活性 TGF-β是调节细胞分化的 TGF-β超家族成员之一 ,在调节细胞增殖、分化、迁移、粘附 ,细胞外基质形成 ,胚胎发育 ,创伤修复、骨的重建等方面发挥重要作用。TGF- β及其主要受体的结构、功能目前已基本阐明。近几年来 ,TGF-β的信号转导机制研究由于 Smad蛋白家族的发现而获得了迅速进展。本文主要对 SMAD及 TGF- β/ SMAD信号转导研究进展作一简介。1　 TGF- β的结构TGF-β亚家族至少由 6个结构相关的分子 (T…     

WISP-1在结直肠良恶性病变中的表达

目的观察Wnt1导分泌蛋白-1的表达,探讨其在结直肠腺瘤形成及癌变过程中的作用。方法用免疫组织化学LSAB法分别检测100例结直肠癌、58例结直肠腺瘤、40例正常结直肠黏膜中WISP-1蛋白的表达。结果结直肠癌、结直肠腺瘤、正常结直肠黏膜WISP-1表达阳性率分别是69．0％（69／100）、39．7％（23／58）和20．0％（8／40）,组间差异有统计学意义（P〈0．01）,即在癌前病变开始逐渐出现高表达趋势。WISP-1的表达在结直肠癌中与分化程度、Dukes分期和淋巴结转移均密切相关（P〈0．05）;WISP-1的表达在结直肠腺瘤中与腺瘤大小,不典型增生程度、数目及组织学类型有关（P〈0．05）。结论WISP．1可能是结直肠肿瘤发生发展中的重要促进因子,参与了腺瘤早期形成以及癌变过程,其可以作为结直肠癌早期诊断的标志和治疗的新靶点。     

galectin-3和CD105蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨galectin-3和CD105在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用微波-EliVisionTM免疫组织化学染色技术检测60例结直肠癌、30例结直肠腺瘤及30例结直肠正常黏膜组织(远离癌组织4 cm以上)中galectin-3蛋白和CD105蛋白的表达〔以微血管密度(MVD)反映CD105蛋白的表达〕,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果 galectin-3蛋白表达阳性率和MVD在结直肠正常黏膜、腺瘤至癌组织中逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。两者均与结直肠癌的TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05,P<0.01),且galectin-3蛋白表达还与肿瘤的分化程度有关(P<0.05)。结直肠癌组织中galectin-3蛋白的表达与MVD呈正相关(r=0.420,P<0.01)。结论 galectin-3和CD105蛋白的表达与结直肠癌高侵袭能力和淋巴结转移有一定关系,可作为预测结直肠癌浸润、转移的潜在敏感指标。     

β转化生长因子与骨改建

β转化生长因子(TGF-β)对骨形成有重要作用。有关TGF-β生物学的研究将有助于了解TGF-β及有关分子对骨形成的影响。在活体内及活体外开展研究可以得到有关有效剂量、适当的治疗时期、组织特异性、受体结合、细胞内信号发放,以及调节其活性的局部和全身因素方面的资料,这样,TGF-β所以能增进骨的生长,帮助骨折愈合的机理得以明确。     

激活素与骨形成

激活素属TGF-β超家族成员,参与多种生理过程的调节。本文对激活素在骨形成中的信号传导、体外研究、体内研究、受体作用及结合蛋白卵泡抑素作用进行了总结,为生长因子促进骨形成研究提供新的思路。     

肺癌组织分型与转化生长因子-βⅡ型受体和肿瘤相关性巨噬细胞计数的关系

目的 检测肺腺癌和肺鳞状细胞癌中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)和肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)计数,探讨两者与肺腺癌和肺鳞状细胞癌的关系.方法 应用免疫组织化学法检测TGF-βRⅡ蛋白和TAMs在肺腺癌和肺鳞状细胞癌组织中的表达,并与癌旁正常肺组织中的表达进行比较.结果 (1)TGF-βRⅡ蛋白的表达在肿瘤组织中明显降低(P＜0.01),其表达下调与肺癌的组织学类型、淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05).(2)TAMs在肿瘤间质内浸润数量明显增多(P＜0.01),并与肺癌的组织学类型、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05).结论 TGF-βRⅡ蛋白表达水平降低可促进肺癌的发生、浸润和转移,对肺腺癌发生或进展影响很大,并可能通过下调TGF-βRⅡ的表达、诱导TAMs至肿瘤间质,从而促进肿瘤的发生、发展,且这种作用在非小细胞肺癌中具有较普遍的意义.     

Menin蛋白和TGF-β在甲状旁腺肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨Menin蛋白与转化生长因子-β(transforming growth factorβ,TGF-β)在甲状旁腺肿瘤发生中的作用及相互关系。方法62例标本包括正常甲状旁腺组织7例,甲状旁腺增生组织12例,甲状旁腺腺瘤组织43例。通过免疫组化法检测它们中Menin蛋白和TGF-β的表达,并进行分组比较。结果Menin蛋白的表达,正常组、增生组同腺瘤组比较差异均有统计学意义(P<0.05),正常组同增生组比较差异无统计学意义(P>0.05)。TGF-β的表达,正常组、增生组和腺瘤组三者之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。但Menin蛋白和TGF-β在腺瘤中的表达存在显著相关(P<0.05)。结论Menin蛋白的失活在甲状旁腺肿瘤的发生中起重要作用;Menin是TGF-β信号传递途径中的一种关键蛋白。     

饰胶蛋白聚糖基因转染对大鼠肾系膜细胞转化生长因子βⅠ、βⅡ型受体表达的影响

目的探讨饰胶蛋白聚糖(DCN)拮抗肾小球硬化进展的作用是否与其抑制系膜细胞(MsC)转化生长因子βⅠ、βⅡ型受体(TGF-βRⅠ、TGF—βRⅡ)表达有关。方法经外源性TGF-βⅠ刺激培养的大鼠肾MsC，采用RT—PCR、Western印迹法检测其TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ的表达。用脂质体介导法将DCN基因转染MsC，经筛选和鉴定，用RT—PCR、Western印迹法和免疫荧光法分别观察DCN基因转染对TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ表达的影响。结果经外源性TGF-βⅠ刺激的正常MsC，其TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ基因转录及蛋白表达均明显升高，且呈时间依赖性，于作用24h达高峰。与转染空载体的MsC(1P-1)相比，转染。DCN基因的MsC克隆(3D-5，7D-1)的TGF-βRⅠmRNA表达分别为对照组的20％和32％，TGF-βRⅡmRNA表达分别为对照组的64％和59％；TGF-βRⅠ蛋白表达分别为对照组的34％和25％，TGF-βRⅡ蛋白表达分别为对照组的49％和57％。同时转染DCN基因也能阻止MsC对外源性TGF-βⅠ刺激所致的两种受体表达升高作用。结论过表达DCN基因的MsC，其TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ和蛋白表达水平均明显降低，这可能是DCN拮抗由TGF-β介导的肾小球硬化发生的重要机制之一。     

TGF-beta及其受体在泌尿系肿瘤治疗中的研究进展

TGF-β(transforming growth factorbeta, 转化生长因子β)是一种多功能的多肽类细胞因子,在调节细胞的生长和分化中起着重要作用.TGF-β主要通过与TGF-β受体(TβR属丝氨酸和苏氨酸激酶受体家族)结合并通过Smad蛋白介导的信号通路发挥生物学功能.在动物细胞内目前已鉴定并命名了三种TGF-β受体(TβR)的亚型:TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、TβR-Ⅲ.近年来的研究方法 表明TGF-β及其受体与泌尿系肿瘤的发生、发展密切相关,目前以TGF-β信号通路为靶点的泌尿系肿瘤治疗方法 的研究已取得了许多新的进展.     

二甲基肼诱发小鼠结直肠癌形成过程中增殖与凋亡的研究

目的:研究增殖-凋亡失衡在结直肠癌发生过程中的作用，并探讨其动态变化的分子机制。方法:以二甲基肼诱发昆明小鼠结直肠癌。分别于给药后第12，18，24周处死动物，观察各时点模型组及对照组小鼠结直肠黏膜的病理变化。多阶段动态观察增殖细胞和凋亡细胞的分布和程度；并分别应用RT-PCR, 免疫组化和Western blot检测小鼠结直肠黏膜组织中p21waf1，GADD45和Bax的表达。结果:诱癌过程中，模型组小鼠结直肠黏膜上皮依次出现轻、中、重度不典型增生、腺瘤和腺癌。模型组结直肠非癌黏膜各时点的PCNA表达明显高于对照组（P<0.01）；从正常黏膜→不典型增生→腺瘤→癌，PCNA表达逐渐增高，至癌阶段PCNA表达明显增强，各组间比较差异均有显著性（P<0.01）。模型组结直肠在从正常黏膜至癌的演变过程中，增殖与凋亡的比值逐渐增高，差异有显著性（P<0.01）；模型组结直肠黏膜在从正常黏膜至腺瘤的过程中，p21waf1，GADD45和Bax mRNA表达和蛋白表达均逐渐增强；而癌组织中，3种基因的表达水平明显减弱。结论:在二甲基肼诱发的昆明小鼠结直肠癌的发生过程中，结直肠黏膜存在着增殖与凋亡的失衡；p21waf1，GADD45和Bax 3种抑癌基因与结直肠癌的发生有关。     

Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用快捷免疫组化MaxVi-sionTM法对50例正常结肠黏膜组织、60例结肠腺瘤性息肉组织、152例结直肠癌中Galectin-3蛋白进行检测。结果 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌中的阳性率与正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤性息肉组织相比,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。在结直肠癌中,Galectin-3蛋白的表达与肿瘤的临床分期、组织的分化程度及有无淋巴结转移有关,临床分期越晚、组织分化越差,Galectin-3蛋白表达越高,有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌的发生发展中起着重要作用。